一種測定血清淀粉樣蛋白a的試劑盒及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒及其制備方法，包括彼此獨(dú)立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，包括的成分及相應(yīng)含量為：試劑R1：緩沖液、無機(jī)鹽離子、促凝劑、防腐劑、穩(wěn)定劑，試劑R2：緩沖液、穩(wěn)定劑、防腐劑、膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體，制備方法為：按照組分含量配制好試劑；將待測樣本與試劑R1和試劑R2混合；用全自動生化分析儀測定反應(yīng)后的吸光度差值；根據(jù)吸光度變化值計(jì)算出樣本中的血清淀粉樣蛋白A的濃度。本發(fā)明具有測定準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)。
【專利說明】
一種測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)及生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體來說是一種測定血清淀粉樣蛋白A的 試劑盒及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid A，SAA)是一種急性時相反應(yīng)蛋白，屬于載脂蛋 白家族中的異質(zhì)類蛋白質(zhì)，相對分子量約12000,在急性時相反應(yīng)中，經(jīng)IL-l、IL-6和TNF刺 激，SAA在肝臟中由被激活的巨噬細(xì)胞和纖維母細(xì)胞合成，可升高到最初濃度的100-1000 倍，但半衰期極短，只有50分鐘左右，血清淀粉樣蛋白A與高密度脂蛋白（HDL)有關(guān)，它能 在炎癥期間調(diào)節(jié)高密度脂蛋白的代謝，血清淀粉樣蛋白A -個特別重要的特性是其降解 產(chǎn)物能以淀粉樣蛋白A (AA)原纖維的方式沉積在不同的器官中，在慢性炎癥疾病中這是 一種嚴(yán)重的并發(fā)癥。與C反應(yīng)蛋白（CRP)類似，血清淀粉樣蛋白A的含量濃度是反映感 染性疾病早期炎癥的敏感指標(biāo)，有助于診斷炎癥、評估其活性、監(jiān)控其活動及治療，但是，血 清淀粉樣蛋白A檢測在診斷發(fā)生病毒感染、腎移植排斥反應(yīng)的患者，特別是進(jìn)行免疫抑制 治療的患者以及用腎上腺皮質(zhì)激素治療的囊性纖維化患者方面，比C反應(yīng)蛋白更確鑿， 研究發(fā)現(xiàn)，在患炎性關(guān)節(jié)炎的案例中，血清淀粉樣蛋白A與疾病活動性的關(guān)系最密切，同 時檢測C反應(yīng)蛋白和血清淀粉樣蛋白A能提高對感染的診斷靈敏度，對于淀粉樣蛋白A 淀粉樣變性患者，以將血清淀粉樣蛋白A水平恢復(fù)至正常為宗旨的治療，能改善病情。
[0003] 目前檢測血清淀粉樣蛋白A的主要方法為酶聯(lián)免疫吸附法，但該法操作復(fù)雜，耗時 長，且不易于大規(guī)模的快速檢測，而且測定的準(zhǔn)確度低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是為了克服現(xiàn)有技術(shù)操作復(fù)雜、測定準(zhǔn)確度低的缺 陷，而提供一種測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒及其制備方法。
[0005] 本發(fā)明解決上述技術(shù)問題提供的技術(shù)方案是:本發(fā)明公開了一種測定血清淀粉樣 蛋白A的試劑盒，包括彼此獨(dú)立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，包括的成分及相應(yīng)含量為： 試劑R1: 緩沖液 15~185 mmol/L 無機(jī)鹽離子 15CK350 mmol/L 促凝劑 10~35 g/L 防腐劑 0.1~0.9 g/L 穩(wěn)定劑 24~56 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 15~185 mmol/L 穩(wěn)定劑 4~18 g/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體 1~8 g/L 其溶劑為純化水。
[0006] 作為優(yōu)選，本發(fā)明公開了一種測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒，包括彼此獨(dú)立的試 劑R1和試劑R2雙液體組分，包括的成分及相應(yīng)含量為： 試劑R1: 緩沖液 100 mmol/L 無機(jī)鹽離子 180 mmol/L 促凝劑 20 g/L 防腐劑 0.7 g/L 穩(wěn)定劑 30 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 125 mmol/L 穩(wěn)定劑 11 g/L 防腐劑 〇.7g/L 膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體 4g/L 其溶劑為純化水。
[0007] 作為優(yōu)選，所述的試劑R1中，所述的緩沖液采用Tris緩沖液、PBS緩沖液、MES緩沖 液、甘氨酸緩沖液中的一種或多種的組合，所述的無機(jī)鹽離子采用氯化鈉、氯化鉀、氯化銨 中的一種或多種的組合，所述的促凝劑采用聚乙二醇-2000、聚乙二醇-8000、聚乙烯吡咯烷 酮中的一種或多種的組合，所述的防腐劑為疊氮鈉，所述的穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白。
[0008] 作為優(yōu)選，所述的試劑R2中，所述的緩沖液采用Tr i S緩沖液、PBS緩沖液、MES緩沖 液、甘氨酸緩沖液中的一種或多種的組合，所述的穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白，所述的防腐劑為 疊氮鈉。
[0009] 作為優(yōu)選，所述的試劑R2中，所述的膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體的制備方法 為： 先用50 mmol/L的MES緩沖液將粒徑為80-500nm的聚苯乙烯微球稀釋成為所含的聚苯 乙烯微球的質(zhì)量濃度為1%_5%的溶液，然后每毫升溶液中加入0.5 mg的1-乙基-3-(3-二甲 基胺丙基）碳化二亞胺鹽酸鹽，在20°C_37°C的條件下反應(yīng)1小時，使用離心機(jī)，在20000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，棄上清，用50mmol/L的MES緩沖液對沉淀進(jìn)行稀釋，再使用離 心機(jī)，在20000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，棄上清，用50mmol/L的MES緩沖液繼續(xù)對沉淀 進(jìn)行稀釋，使得聚苯乙稀微球的質(zhì)量濃度為〇.5%-2.0%，再使用離心機(jī)，在20000 rpm/min的 轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，棄上清，保留沉淀，再用50mmol/L的MES緩沖液對沉淀進(jìn)行稀釋，并加入 等體積的含8mg/ml抗血清淀粉樣蛋白A抗體的MES緩沖液，攪拌均勻，使得最終聚苯乙烯微 球的質(zhì)量濃度為1%，在20 °C_37 °C的條件下反應(yīng)2小時，加入牛血清白蛋白使得牛血清白蛋 白的最終濃度為20 g/L，4°C條件下封閉24小時即可制備得到膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A 抗體。
[0010] 作為優(yōu)選，本發(fā)明還公開了上述測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒的制備方法和使 用方法，包括以下步驟： (a) 按照下列組分含量配制好試劑： 試劑R1: 緩沖液 15~185 mmol/L 無機(jī)鹽離子 150~350 mmol/L 促凝劑 10~35 g/L 防腐劑 0.1~0.9 g/L 穩(wěn)定劑 24~56 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 15~185 mmol/L 穩(wěn)定劑 4~18 g/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體 1~8 g/L 其溶劑為純化水； (b) 將待測樣本與試劑R1和試劑R2混合，使其充分反應(yīng)； (c) 用全自動生化分析儀測定反應(yīng)后的吸光度差值； (d) 根據(jù)吸光度變化值計(jì)算出樣本中的血清淀粉樣蛋白A的濃度。
[0011]作為優(yōu)選，步驟(b)中，所述的試劑R1和試劑R2的體積比為5:1; 作為優(yōu)選，步驟(b)中，所述的待測樣本與試劑R1和試劑R2的總體積的體積比在1:5到 1:150之間。
[0012]本發(fā)明的檢測原理是:本發(fā)明利用的是抗原抗體反應(yīng)的原理，膠乳包被抗血清淀 粉樣蛋白A抗體，當(dāng)與含有SAA抗原的樣品混合時，會發(fā)生凝集反應(yīng)，從而引起吸光度的變 化，其大小與樣品中SAA抗原含量成比例，將吸光度變化與已知濃度的校準(zhǔn)品比較，可以定 量得出樣品中血清淀粉樣蛋白A的含量。
[0013] 樣本中血清淀粉樣蛋白A(SAA)的活性
式中：△ At以空白管吸光度作對照的樣品管吸光度值 ΔAs以空白管吸光度作對照的校準(zhǔn)管吸光度值 Cs校準(zhǔn)液中SAA的濃度。
[0014] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明主要采用了膠乳增強(qiáng)免疫比 濁法，比傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫法準(zhǔn)確度更高，實(shí)現(xiàn)了定量檢測，試劑R1中添加了加速劑，反應(yīng)更 迅速，易于檢測，檢測準(zhǔn)確度更高，而且不含有任何放射性污染物質(zhì)，而且操作比較方便。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 以下結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步說明，但本發(fā)明并不僅限于這些實(shí)施例。
[0016] 實(shí)施例1 本發(fā)明的試劑盒包括彼此獨(dú)立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，其中 試劑R1: Tris緩沖液 100 mmol/L 氯化鉀 180 mmol/L 聚乙二醇-2000 20 g/L 疊氮鈉 0.7 g/L 牛血清白蛋白 30 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: Tris緩沖液 125 mmol/L 牛血清白蛋白 11 g/L 疊氮鈉 〇.7g/L 膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體 4g/L 其溶劑為純化水。
[0017] 實(shí)施例2 本發(fā)明的試劑盒包括彼此獨(dú)立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，其中 試劑R1: PBS緩沖液 185 mmol/L 氯化鈉 350 mmol/L 聚乙二醇-8000 10 g/L 疊氮鈉 0.9 g/L 牛血清白蛋白 56 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: PBS緩沖液 15 mmol/L 牛血清白蛋白 4 g/L 疊氮鈉 0.6 g/L 膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體 3 g/L 其溶劑為純化水。 實(shí)施例3 試劑盒的制備和使用方法 1、膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體的制備：先用50 mmol/L的MES緩沖液將粒徑為 120nm的聚苯乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為5%的溶液，然后每毫升 溶液中加入0.5 mg的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽，在25°C的條件下反 應(yīng)1小時，使用離心機(jī)，在20000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，棄上清，用50mmol/L的MES緩 沖液對沉淀進(jìn)行稀釋，再使用離心機(jī)，在20000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，棄上清，用 50mmol/L的MES緩沖液繼續(xù)對沉淀進(jìn)行稀釋，使得聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為2.0%，再使用 離心機(jī)，在20000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，棄上清，保留沉淀，再用50mmol/L的MES緩 沖液對沉淀進(jìn)行稀釋，并加入等體積的含8mg/ml抗血清淀粉樣蛋白A抗體的MES緩沖液，攪 拌均勻，使得最終聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為1%，在25°C的條件下反應(yīng)2小時，加入牛血清 白蛋白，使得牛血清白蛋白的最終濃度為20 g/L，4°C條件下封閉24小時即可制備得到膠乳 包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體； 2、 按照下列組分含量配制好試劑： 試劑R1: Tris緩沖液 100 mmol/L 氯化鉀 180 mmol/L 聚乙二醇-2000 20 g/L 疊氮鈉 0.7 g/L 牛血清白蛋白 30 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: Tris緩沖液 125 mmol/L 牛血清白蛋白 11 g/L 疊氮鈉 〇.7g/L 膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體 4g/L 其溶劑為純化水； 3、 全自動生化分析儀參數(shù)設(shè)置 (a) 檢測溫度:37°C; (b) 檢測波長：主波長546nm、副波長800nm; (c) 反應(yīng)時間：10min，其中，孵育時間5min，加入試劑R2后立即測定讀取吸光度 Al，5min后讀取吸光度A2,計(jì)算吸光度變化ΔΑ = A2-A1 ; (d) 反應(yīng)方向：正反應(yīng)； 4、 檢測步驟 (a) 取200μ1試劑R1與2.4μ1待測樣本混勻； (b) 將混勻后的溶液在37°C的條件下孵育5min; (c) 加入40μ1試劑R2,立即測定讀取吸光度Al，5min后讀取吸光度A2,計(jì)算吸光度變化 Δ A = A2-A1；
(d) 根據(jù)樣本中的血清淀粉樣蛋白A(SAA)的活性 .(mg/L)計(jì)算出 樣本中的血清淀粉樣蛋白A的濃度。
[0018] 實(shí)施例4 試劑盒的制備和使用方法 1、膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體的制備：先用50 mmol/L的MES緩沖液將粒徑為 120nm的聚苯乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為5%的溶液，然后每毫升 溶液中加入0.5 mg的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽，在25°C的條件下反 應(yīng)1小時，使用離心機(jī)，在20000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，棄上清，用50mmol/L的MES緩 沖液對沉淀進(jìn)行稀釋，再使用離心機(jī)，在20000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，棄上清，用 50mmol/L的MES緩沖液繼續(xù)對沉淀進(jìn)行稀釋，使得聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為2.0%，再使用 離心機(jī)，在20000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，棄上清，保留沉淀，再用50mmol/L的MES緩 沖液對沉淀進(jìn)行稀釋，并加入等體積的含8mg/ml抗血清淀粉樣蛋白A抗體的MES緩沖液，攪 拌均勻，使得最終聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為1%，在25°c的條件下反應(yīng)2小時，加入牛血清 白蛋白，使得牛血清白蛋白的最終濃度為20 g/L，4°C條件下封閉24小時即可制備得到膠乳 包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體； 2、 按照下列組分含量配制好試劑： 試劑R1: PBS緩沖液 185 mmol/L 氯化鈉 350 mmol/L 聚乙二醇-8000 10 g/L 疊氮鈉 0.9 g/L 牛血清白蛋白 56 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: PBS緩沖液 15 mmol/L 牛血清白蛋白 4 g/L 疊氮鈉 0.6 g/L 膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體 3 g/L 其溶劑為純化水； 3、 全自動生化分析儀參數(shù)設(shè)置 (a) 檢測溫度:37°C; (b) 檢測波長：主波長546nm、副波長800nm; (c) 反應(yīng)時間：10min，其中，孵育時間5min，加入試劑R2后立即測定讀取吸光度 Al，5min后讀取吸光度A2,計(jì)算吸光度變化ΔΑ = A2-A1 ; (d) 反應(yīng)方向：正反應(yīng)； 4、 檢測步驟 (a) 取200μ1試劑R1與2.4μ1待測樣本混勻； (b) 將混勻后的溶液在37°C的條件下孵育5min; (c) 加入40μ1試劑R2,立即測定讀取吸光度Al，5min后讀取吸光度A2,計(jì)算吸光度變化 ΔΑ = A2-A1; (d) 根據(jù)樣本中的血清淀粉樣蛋白A(SAA)的活性汁算出 樣本中的血清淀粉樣蛋白A的濃度。
[0019]表1為實(shí)施例1所制得的測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒以及實(shí)施例2所制得的測 定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒分別對質(zhì)控品1進(jìn)行測定的結(jié)果，其中質(zhì)控品1中的血清淀粉 樣蛋白A的濃度為10 mg/L，測定結(jié)果見表1:
由表1可知，本發(fā)明所制得的測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒對質(zhì)控品1的測定結(jié)果偏 差較小，因此測定準(zhǔn)確度高，而且實(shí)施例1為最優(yōu)的選擇。
[0020] 表2為實(shí)施例1所制得的測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒以及實(shí)施例2所制得的測定血 清淀粉樣蛋白A的試劑盒分別對質(zhì)控品2進(jìn)行測定的結(jié)果，其中質(zhì)控品2中的血清淀粉樣蛋 白A的濃度為35 mg/L，測定結(jié)果見表2:
由表2可知，本發(fā)明所制得的測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒對質(zhì)控品2的測定結(jié)果偏 差較小，因此測定準(zhǔn)確度高，而且實(shí)施例1為最優(yōu)的選擇。
[0021] 表3為實(shí)施例3所制得的測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒對同一待測樣本進(jìn)行的多 次反復(fù)測定以及實(shí)施例4所制得的測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒對同一待測樣本進(jìn)行的 多次反復(fù)測定，對所得的結(jié)果進(jìn)行SD和CV的計(jì)算，結(jié)果如下： 表3
由表3可知本發(fā)明所制得的測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒的精密度比較好，而且由表 3可知，實(shí)施例3為最優(yōu)的選擇。
[0022] 上述實(shí)施例僅例示性說明本發(fā)明的原理及其功效，而非用于限制本發(fā)明。任何熟 悉此技術(shù)的人士皆可在不違背本發(fā)明的精神及范疇下，對上述實(shí)施例進(jìn)行修飾或改變。因 此，舉凡所屬技術(shù)領(lǐng)域中具有通常知識者在未脫離本發(fā)明所揭示的精神與技術(shù)思想下所完 成的一切等效修飾或改變，仍應(yīng)由本發(fā)明的權(quán)利要求所涵蓋。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒，其特征在于:包括彼此獨(dú)立的試劑R1和試劑R2 雙液體組分，包括的成分及相應(yīng)含量為： 試劑R1: 緩沖液 15~185 mmol/L 無機(jī)鹽離子 150~350 mmol/L 促凝劑 10~35 g/L 防腐劑 0.1~0.9 g/L 穩(wěn)定劑 24~56 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 15~185 mmol/L 穩(wěn)定劑 4~18 g/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體 1~8 g/L 其溶劑為純化水。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒，其特征在于:包括彼此 獨(dú)立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，包括的成分及相應(yīng)含量為： 試劑R1: 緩沖液 100 mmol/L 無機(jī)鹽離子 180 mmol/L 促凝劑 20 g/L 防腐劑 0.7 g/L 穩(wěn)定劑 30 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 125 mmol/L 穩(wěn)定劑 11 g/L 防腐劑 〇.7g/L 膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體 4g/L 其溶劑為純化水。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒，其特征在于:所述的 試劑R1中，所述的緩沖液采用Tris緩沖液、PBS緩沖液、MES緩沖液、甘氨酸緩沖液中的一種 或多種的組合，所述的無機(jī)鹽離子采用氯化鈉、氯化鉀、氯化銨中的一種或多種的組合，所 述的促凝劑采用聚乙二醇-2000、聚乙二醇-8000、聚乙烯吡咯烷酮中的一種或多種的組合， 所述的防腐劑為疊氮鈉，所述的穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒，其特征在于:所述的 試劑R2中，所述的緩沖液采用Tris緩沖液、PBS緩沖液、MES緩沖液、甘氨酸緩沖液中的一種 或多種的組合，所述的穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白，所述的防腐劑為疊氮鈉。5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒，其特征在于:所述的 試劑R2中，所述的膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體的制備方法為:先用50 mmol/L的MES緩 沖液將粒徑為80_500nm的聚苯乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為1%-5% 的溶液，然后每毫升溶液中加入0.5 mg的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽， 在20°C_37°C的條件下反應(yīng)1小時，使用離心機(jī)，在20000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，棄 上清，用50mmol/L的MES緩沖液對沉淀進(jìn)行稀釋，再使用離心機(jī)，在20000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下 離心30分鐘，棄上清，用50mmol/L的MES緩沖液繼續(xù)對沉淀進(jìn)行稀釋，使得聚苯乙稀微球的 質(zhì)量濃度為〇.5%-2.0%，再使用離心機(jī)，在20000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，棄上清，保 留沉淀，再用50mmol/L的MES緩沖液對沉淀進(jìn)行稀釋，并加入等體積的含8mg/ml抗血清淀粉 樣蛋白A抗體的MES緩沖液，攪拌均勻，使得最終聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為1%，在20 °C_37 °C的條件下反應(yīng)2小時，加入牛血清白蛋白使得牛血清白蛋白的最終濃度為20 g/L，4°C條 件下封閉24小時即可制備得到膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體。6. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒的制備方法和使用方 法，其特征在于:包括以下步驟： (a) 按照下列組分含量配制好試劑： 試劑R1: 緩沖液 15~185 mmol/L 無機(jī)鹽離子 150~350 mmol/L 促凝劑 10~35 g/L 防腐劑 0.1~0.9 g/L 穩(wěn)定劑 24~56 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 15~185 mmol/L 穩(wěn)定劑 4~18 g/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 膠乳包被抗血清淀粉樣蛋白A抗體 1~8 g/L 其溶劑為純化水； (b) 將待測樣本與試劑R1和試劑R2混合，使其充分反應(yīng)； (c) 用全自動生化分析儀測定反應(yīng)后的吸光度差值； (d) 根據(jù)吸光度變化值計(jì)算出樣本中的血清淀粉樣蛋白A的濃度。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒的制備方法和使用方法， 其特征在于:步驟(b)中，所述的試劑R1和試劑R2的體積比為5:1。8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種測定血清淀粉樣蛋白A的試劑盒的制備方法和使用方法， 其特征在于:步驟(b)中，所述的待測樣本與試劑R1和試劑R2的總體積的體積比在1:5到1: 150之間。
【文檔編號】G01N21/31GK106018299SQ201610358105
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月26日
【發(fā)明人】蔡曉輝, 莊慶華, 吳錚, 徐運(yùn)
【申請人】安徽伊普諾康生物技術(shù)股份有限公司