一種試劑盒、樣品前處理方法和二硫氰基甲烷檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種前處理試劑盒和分析系統(tǒng)，該前處理試劑盒中總計(jì)流管，接收控制器控制，當(dāng)連通樣品儲(chǔ)存容器和可更換微型萃取柱，并斷開至少一個(gè)密閉試劑容器和可更換微型萃取柱的連通時(shí)，將樣品儲(chǔ)存容器中的第一溶液注入到可更換微型萃取柱；當(dāng)連通任意密閉試劑容器和可更換微型萃取柱，并斷開樣品儲(chǔ)存容器和可更換微型萃取柱的連通時(shí)，將任意密閉試劑容器中的第二溶液注入到可更換微型萃取柱；可更換微型萃取柱當(dāng)接收到第一溶液注入時(shí)，吸附第一溶液中的待檢測(cè)成分，當(dāng)接收到第二溶液注入時(shí)，脫附待檢測(cè)成分；收集器收集脫附后的待檢測(cè)成分和第二溶液。本發(fā)明提供的方案實(shí)現(xiàn)了對(duì)水體中低濃度二硫氰基甲烷的前處理。
【專利說明】
一種試劑盒、樣品前處理方法和二硫氰基甲烷檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及分析技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種試劑盒、樣品前處理方法和二硫氰基甲 烷檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 二硫氰基甲烷(分子結(jié)構(gòu)式為NCS-CH2-SCN)是一種有機(jī)硫氰化合物，其對(duì)細(xì)菌、真 菌、藻類、霉菌、水體中原生動(dòng)物和后生動(dòng)物都有很好的殺滅作用和抑制作用，常常作為孔 雀石綠的替代藥，通過全池潑灑和浸泡等方式應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖過程殺菌。
[0003] 二硫氰基甲烷的加入，會(huì)使水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中產(chǎn)生的養(yǎng)殖廢水具有腐蝕性和毒害作 用，一旦養(yǎng)殖廢水被直接排入江河湖泊中，將對(duì)人體健康和生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生嚴(yán)重的危害，那么 對(duì)水體中二硫氰基甲烷的檢測(cè)顯得尤為重要。由于二硫氰基甲烷微溶于水，其在水中濃度 較低(通常為yg/l級(jí)以下），在對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)之前常常需要進(jìn)行前處理，目前，文獻(xiàn)中尚無水 體中低濃度二硫氰基甲烷的前處理。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明實(shí)施例提供了一種試劑盒、樣品前處理方法和二硫氰基甲烷檢測(cè)方法，實(shí) 現(xiàn)了水體中低濃度二硫氰基甲烷的前處理。
[0005] -種試劑盒，包括:樣品儲(chǔ)存容器、至少一個(gè)密閉試劑容器、總計(jì)流管、控制器、可 更換微型萃取柱及收集器，其中，
[0006] 所述樣品儲(chǔ)存容器和所述至少一個(gè)密閉試劑容器分別通過各自對(duì)應(yīng)的管線連接 到所述總計(jì)流管；
[0007]所述總計(jì)流管具有多閥門，一端連接所述管線，另一端連接所述可更換微型萃取 柱的頂端，用于接收到所述控制器控制，當(dāng)所述多閥門連通所述樣品儲(chǔ)存容器和所述可更 換微型萃取柱，并斷開所述至少一個(gè)密閉試劑容器和所述可更換微型萃取柱間的連通時(shí)， 將所述樣品儲(chǔ)存容器中的樣品溶液注入到所述可更換微型萃取柱；當(dāng)所述多閥門連通所述 至少一個(gè)密閉試劑容器中任意密閉試劑容器和所述可更換微型萃取柱，并斷開所述樣品儲(chǔ) 存容器和所述可更換微型萃取柱間的連通時(shí)，將所述任意密閉試劑容器中的洗脫液注入到 所述可更換微型萃取柱；
[0008] 所述可更換微型萃取柱，用于當(dāng)接收到所述樣品溶液注入時(shí)，吸附所述樣品溶液 中的待檢測(cè)成分，當(dāng)接收到所述洗脫液注入時(shí)，脫附所述待檢測(cè)成分；
[0009] 所述收集器，用于收集所述可更換微型萃取柱脫附后的具有所述待檢測(cè)成分的洗 脫液。
[0010] 優(yōu)選地，所述收集器，包括:托盤、第一收集容器和第二收集容器，其中，
[0011] 所述托盤，用于放置所述第一收集容器和所述第二收集容器，當(dāng)所述樣品溶液注 入到所述可更換微型萃取柱時(shí)，接收所述控制器的調(diào)節(jié)，將所述第一收集容器調(diào)節(jié)到所述 可更換微型萃取柱下方；當(dāng)所述洗脫液注入到所述可更換微型萃取柱時(shí)，接收所述控制器 的調(diào)節(jié)，將所述第二收集容器調(diào)節(jié)到所述可更換微型萃取柱下方；
[0012] 所述第一收集容器，當(dāng)位于所述可更換微型萃取柱下方時(shí)，用于接收所述可更換 微型萃取柱流出的廢液；
[0013] 所述第二收集容器，當(dāng)位于所述可更換微型萃取柱下方時(shí)，用于接收所述可更換 微型萃取柱脫附后的所述待檢測(cè)成分和洗脫液。
[0014] 優(yōu)選地，所述至少一個(gè)密閉試劑容器，包括:第一密閉試劑容器、第二密閉試劑容 器和第三密閉試劑容器，其中，
[0015] 所述第一密閉試劑容器，用于盛裝去離子水；
[0016] 所述第二密閉試劑容器，用于盛裝甲醇；
[0017]所述第三密閉試劑容器，用于盛裝洗脫液；
[0018]所述總計(jì)流管，用于接收所述控制器控制，通過所述多閥門連通所述第二密閉試 劑容器和所述可更換微型萃取柱，并控制所述第二密閉試劑容器中甲醇流速，向所述可更 換微型萃取柱中注入第一設(shè)定量甲醇;通過所述多閥門連通所述第一密閉試劑容器和所述 可更換微型萃取柱，并控制所述第一密閉試劑容器中去離子水流速，向所述可更換微型萃 取柱中注入第二設(shè)定量去離子水;通過所述多閥門連通所述第三密閉試劑容器和所述可更 換微型萃取柱，并控制所述第三密閉試劑容器中洗脫液流速，向所述可更換微型萃取柱中 注入第三設(shè)定量洗脫液；
[0019]所述可更換微型萃取柱，用于當(dāng)分別接收所述第一設(shè)定量甲醇和第二設(shè)定量去離 子水時(shí)，活化;當(dāng)接收所述第三設(shè)定量洗脫液時(shí)，通過所述洗脫液脫附所述待檢測(cè)成分。
[0020] 優(yōu)選地，所述待檢測(cè)成分，包括:二硫氰基甲烷；
[0021] 所述洗脫液，包括：甲醇、乙腈及1:1的二氯甲烷和丙酮混合液中的任意一種。
[0022] -種利用上述任一所述的試劑盒實(shí)現(xiàn)的前處理方法，對(duì)樣品溶液進(jìn)行過濾，并將 過濾后的樣品溶液加入到所述試劑盒中的樣品儲(chǔ)存容器中，將洗脫液加入到所述試劑盒中 的一個(gè)密閉試劑容器中，還包括：
[0023] 所述試劑盒中的可更換微型萃取柱接收第四設(shè)定量的樣品溶液注入；
[0024] 所述試劑盒中的可更換微型萃取柱吸附樣品溶液中的待檢測(cè)成分；
[0025] 所述試劑盒中的可更換微型萃取柱接收第三設(shè)定量的洗脫液注入，脫附所述待檢 測(cè)成分；
[0026] 通過所述試劑盒中的收集器收集脫附后的具有所述待檢測(cè)成分的洗脫液。
[0027] 優(yōu)選地，在所述對(duì)樣品溶液進(jìn)行過濾之前，進(jìn)一步包括:通過乙酸將樣品溶液pH調(diào) 節(jié)到4.0-6.0范圍內(nèi)；
[0028] 所述對(duì)樣品溶液進(jìn)行過濾，包括:通過孔徑為0.45μπι的濾膜對(duì)pH范圍為4.0-6.0的 樣品溶液過濾。
[0029] 優(yōu)選地，在通過所述試劑盒中的收集器收集脫附后的具有所述待檢測(cè)成分的洗脫 液之后，進(jìn)一步包括:通過氮吹方式濃縮所述待檢測(cè)成分，并利用定容試劑對(duì)濃縮后的待檢 測(cè)成分進(jìn)行定容，所述定容試劑包括：甲醇和乙腈中的任意一種，優(yōu)選乙腈。
[0030] 優(yōu)選地，在所述試劑盒中的可更換微型萃取柱接收第四設(shè)定量的樣品溶液注入之 前，進(jìn)一步包括:分別利用第一設(shè)定量甲醇和第二設(shè)定量去離子水活化所述試劑盒中的可 更換微型萃取柱；
[0031]所述試劑盒中的可更換微型萃取柱接收第四設(shè)定量樣品溶液注入，包括:活化后 的可更換微型萃取柱接收第四設(shè)定量樣品溶液注入。
[0032]優(yōu)選地，上述方法進(jìn)一步包括：
[0033] 控制所述樣品溶液和所述洗脫液注入所述可更換微型萃取柱的流速，并控制所述 樣品溶液注入所述可更換微型萃取柱第四設(shè)定量，控制所述洗脫液注入所述可更換微型萃 取柱第三設(shè)定量，其中，所述樣品溶液，包括:具有二硫氰基甲烷的水溶液;所述洗脫液，包 括：甲醇、乙腈及1:1的二氯甲烷和丙酮混合液中的任意一種，優(yōu)選乙腈。
[0034] -種基于上述任一所述的試劑盒實(shí)現(xiàn)的二硫氰基甲烷檢測(cè)方法，包括：
[0035] 將試劑盒收集到的具有二硫氰基甲烷的洗脫液濃縮；
[0036] 利用定容溶劑將濃縮后的二硫氰基甲烷定容；
[0037] 獲取5-10μ1定容溶液；
[0038]通過色譜檢測(cè)5-10μ1定容溶液中二硫氰基甲烷濃度。
[0039]優(yōu)選地，所述定容溶劑，包括：甲醇和乙腈中的任意一種，優(yōu)選乙腈。
[0040] 優(yōu)選地，所述色譜，包括:高效液相色譜；
[0041] 所述高效液相色譜檢測(cè)二硫氰基甲烷濃度的條件設(shè)置，包括：
[0042] 吸收波長(zhǎng)為254nm;
[0043] 流動(dòng)相為30%乙腈-70%乙酸銨/乙酸；
[0044] 流動(dòng)相流速為0.8ml/min。
[0045] 本發(fā)明實(shí)施例提供了一種試劑盒、樣品前處理方法和二硫氰基甲烷檢測(cè)方法，通 過試劑盒中的控制器控制可更換微型萃取柱接收第四設(shè)定量樣品溶液注入，并吸附樣品溶 液中的待檢測(cè)成分，通過試劑盒中的可更換微型萃取柱接收第三設(shè)定量洗脫液注入，脫附 待檢測(cè)成分，通過試劑盒中的收集器收集脫附后的具有待檢測(cè)成分的洗脫液，能夠?qū)Υ龣z 測(cè)成分進(jìn)行富集，通過實(shí)驗(yàn)表明，當(dāng)二硫氰基甲烷作為待檢測(cè)成分，本發(fā)明實(shí)施例提供的試 劑盒能夠?qū)悠啡芤喝琊B(yǎng)殖水體中的二硫氰基甲烷進(jìn)行富集，并通過洗脫液即可將吸附的 二硫氰基甲烷完全脫附，將低濃度的二硫氰基甲烷的富集為高濃度的二硫氰基甲烷，實(shí)現(xiàn) 了水體中二硫氰基甲烷的前處理。
【附圖說明】
[0046] 為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例或現(xiàn) 有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖是本發(fā)明 的一些實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可以根據(jù) 這些附圖獲得其他的附圖。
[0047] 圖1是本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例提供的一種試劑盒的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0048] 圖2是本發(fā)明實(shí)施例提供的二硫氰基甲烷標(biāo)準(zhǔn)色譜圖；
[0049] 圖3是本發(fā)明實(shí)施例提供的經(jīng)過試劑盒前處理后的養(yǎng)殖水樣品中的二硫氰基甲烷 色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0050] 為使本發(fā)明實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例 中的附圖，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例是 本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例，基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員 在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0051]如圖1所示，本發(fā)明實(shí)施例提供一種試劑盒，該試劑盒包括:樣品儲(chǔ)存容器101、至 少一個(gè)密閉試劑容器102、總計(jì)流管103、控制器104、可更換微型萃取柱105及收集器106,其 中，
[0052] 樣品儲(chǔ)存容器101和至少一個(gè)密閉試劑容器102分別通過各自對(duì)應(yīng)的管線連接到 總計(jì)流管103;
[0053]總計(jì)流管103具有多閥門1031，一端連接管線，另一端連接可更換微型萃取柱105 的頂端，用于接收控制器104控制，當(dāng)多閥門1031連通樣品儲(chǔ)存容器101和可更換微型萃取 柱105,并斷開至少一個(gè)密閉試劑容器102和可更換微型萃取柱105間的連通時(shí)，將樣品儲(chǔ)存 容器101中的樣品溶液注入到可更換微型萃取柱105;當(dāng)多閥門1031連通至少一個(gè)密閉試劑 容器102中任意密閉試劑容器和可更換微型萃取柱105,并斷開樣品儲(chǔ)存容器101和可更換 微型萃取柱105間的連通時(shí)，將任意密閉試劑容器102中的洗脫液注入到可更換微型萃取柱 105；
[0054]可更換微型萃取柱105,用于當(dāng)接收到樣品溶液注入時(shí)，吸附樣品溶液中的待檢測(cè) 成分，當(dāng)接收到洗脫液注入時(shí)，脫附待檢測(cè)成分；
[0055] 收集器106,用于收集可更換微型萃取柱105脫附后的具有待檢測(cè)成分的洗脫液。
[0056] 在圖1所示的實(shí)施例中，通過試劑盒中的控制器可更換微型萃取柱接收第四設(shè)定 量樣品溶液注入，并吸附樣品溶液中的待檢測(cè)成分，通過試劑盒中的可更換微型萃取柱接 收第三設(shè)定量洗脫液注入，脫附待檢測(cè)成分，通過試劑盒中的收集器收集脫附后的具有待 檢測(cè)成分的洗脫液，能夠?qū)Υ龣z測(cè)成分進(jìn)行富集，通過實(shí)驗(yàn)表明，當(dāng)二硫氰基甲烷作為待檢 測(cè)成分，本發(fā)明實(shí)施例提供的試劑盒能夠?qū)悠啡芤喝琊B(yǎng)殖水體中的二硫氰基甲烷進(jìn)行富 集，并通過洗脫液即可將吸附的二硫氰基甲烷完全脫附，將低濃度的二硫氰基甲烷的富集 為高濃度的二硫氰基甲烷，實(shí)現(xiàn)了水體中二硫氰基甲烷的前處理。
[0057]在將樣品溶液注入到可更換微型萃取柱中時(shí)，可更換微型萃取柱吸附待檢測(cè)成分 后的廢液將排出可更換微型萃取柱，在本發(fā)明另一實(shí)施例中，為了實(shí)現(xiàn)對(duì)可更換微型萃取 柱排出的廢液的收集，同時(shí)實(shí)現(xiàn)廢液收集和洗脫液收集自動(dòng)完成，上述試劑盒中收集器，包 括:托盤、第一收集容器和第二收集容器(圖中未示出），其中，
[0058] 托盤，用于放置第一收集容器和第二收集容器，當(dāng)樣品溶液注入到可更換微型萃 取柱時(shí)，接收控制器的調(diào)節(jié)，將第一收集容器調(diào)節(jié)到可更換微型萃取柱下方；當(dāng)洗脫液注入 到可更換微型萃取柱時(shí)，接收控制器的調(diào)節(jié)，將第二收集容器調(diào)節(jié)到可更換微型萃取柱下 方;該實(shí)施例中的托盤能夠受控制器的調(diào)控，進(jìn)行移動(dòng)，當(dāng)向可更換微型萃取柱中注入的是 樣品溶液時(shí)，通過調(diào)節(jié)托盤，將第一接收器調(diào)節(jié)到可更換微型萃取柱下方，收集廢液；當(dāng)向 可更換微型萃取柱中注入的是洗脫液時(shí)，通過調(diào)節(jié)托盤，將第二接收器調(diào)節(jié)到可更換微型 萃取柱下方，具有待檢測(cè)成分的洗脫液;BP :
[0059] 第一收集容器，當(dāng)位于可更換微型萃取柱下方時(shí)，用于接收可更換微型萃取柱流 出的廢液；
[0060] 第二收集容器，當(dāng)位于可更換微型萃取柱下方時(shí)，用于接收可更換微型萃取柱脫 附后的待檢測(cè)成分和洗脫液。
[0061] 在本發(fā)明又一實(shí)施例中，為了能夠使可更換微型萃取柱吸附最大化，在可更換微 型萃取柱使用之前通過甲醇和去離子水對(duì)可更換微型萃取柱進(jìn)行活化，同時(shí)利用少量的洗 脫液將可更換微型萃取柱中吸附的帶檢測(cè)成分完全脫附，上述至少一個(gè)密閉試劑容器102， 包括:第一密閉試劑容器、第二密閉試劑容器和第三密閉試劑容器，其中，
[0062] 第一密閉試劑容器，用于盛裝去離子水；
[0063] 第二密閉試劑容器，用于盛裝甲醇；
[0064] 第三密閉試劑容器，用于盛裝洗脫液；
[0065] 通過將用于活化可更換微型萃取柱的去離子水和甲醇分別存儲(chǔ)到第一密閉試劑 容器和第二密閉試劑容器，由于控制器能夠控制第一密閉試劑容器和第二密閉容器與可更 換微型萃取柱相通，并控制第一設(shè)定量甲醇和第二設(shè)定量去離子水分別注入到可更換微型 萃取柱，實(shí)現(xiàn)了活化可更換微型萃取柱的自動(dòng)化，即：
[0066] 總計(jì)流管103,用于接收控制器104控制，通過多閥門1031連通第二密閉試劑容器 和可更換微型萃取柱105,并控制第二密閉試劑容器中甲醇流速，向可更換微型萃取柱105 中注入第一設(shè)定量甲醇;通過多閥門1031連通第一密閉試劑容器和可更換微型萃取柱105， 并控制第一密閉試劑容器中去離子水流速，向可更換微型萃取柱105中注入第二設(shè)定量去 離子水;通過多閥門1031連通第三密閉試劑容器和可更換微型萃取柱105,并控制第三密閉 試劑容器中洗脫液流速，向可更換微型萃取柱中注入第三設(shè)定量洗脫液；
[0067] 可更換微型萃取柱105,用于當(dāng)分別接收第一設(shè)定量甲醇和第二設(shè)定量去離子水 時(shí)，活化;當(dāng)接收第三設(shè)定量洗脫液時(shí)，通過洗脫液脫附待檢測(cè)成分。
[0068] 例如：可以控制甲醇、去離子水及洗脫液流速為5ml/min，可以控制甲醇的第一設(shè) 定量為5-8ml、去離子水的第二設(shè)定量為5-8ml及洗脫液的第三量為8ml。
[0069] 由于二硫氰基甲烷微溶于水，且在環(huán)境中二硫氰基甲烷不穩(wěn)定，易分解，使得二硫 氰基甲烷在水體中的含量較低，而通過本發(fā)明實(shí)施例提供的試劑盒中的可更換微型萃取柱 能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)二硫氰基甲烷的富集，而為了能夠收集完整試劑盒富集的二硫氰基甲烷，洗脫 液一般選擇甲醇、乙腈及1:1的二氯甲烷和丙酮混合液中的任意一種，優(yōu)選為乙腈。通過實(shí) 驗(yàn)結(jié)果表明，通過本發(fā)明實(shí)施例提供的試劑盒能夠?qū)υO(shè)定量的水溶液(如l〇〇〇ml養(yǎng)殖水體） 中的二硫氰基甲烷實(shí)現(xiàn)完全吸附，而今需要8ml洗脫液即可完全將富集于可更換微型萃取 柱中的二硫氰基甲烷洗脫出來，實(shí)現(xiàn)了對(duì)二硫氰基甲烷的富集。該水溶液的量一般根據(jù)其 含有的二硫氰基甲烷而定，對(duì)于二硫氰基甲烷濃度較高的水體可以取500ml注入可更換微 型萃取柱，對(duì)于二硫氰基甲烷濃度較低的水體可以取1000ml、2000ml甚至更多注入可更換 微型萃取柱，以保證富集后的二硫氰基甲烷的濃度足夠高，從而使后續(xù)檢測(cè)的準(zhǔn)確度更高。
[0070] 對(duì)于上述試劑盒來說，可以設(shè)計(jì)將試劑盒中的各個(gè)部分放入一個(gè)殼體內(nèi)，通過在 殼體中為樣品儲(chǔ)存容器101、至少一個(gè)密閉試劑容器102設(shè)置一定的區(qū)域，由于控制器104的 存在，其能夠施加一定的動(dòng)力使樣品儲(chǔ)存容器101、至少一個(gè)密閉試劑容器102中的溶液注 入到可更換微型萃取柱105中，還可為每一個(gè)管線設(shè)置一個(gè)蠕動(dòng)栗，通過控制器控制蠕動(dòng)栗 來實(shí)現(xiàn)將樣品儲(chǔ)存容器101、至少一個(gè)密閉試劑容器102中的溶液注入到可更換微型萃取柱 中。其中，樣品儲(chǔ)存容器101和至少一個(gè)密閉試劑容器102在殼體中的位置可以靈活設(shè)置，其 可設(shè)置于殼體頂部，位于總計(jì)流管103之上，遵循液體從高向低出流動(dòng)的原理，減少控制器 控制樣品儲(chǔ)存容器101和至少一個(gè)密閉試劑容器102中的溶液注入到可更換微型萃取柱105 的過程中所消耗的能量。
[0071] 本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例提供一種利用上述任意一種試劑盒實(shí)現(xiàn)的前處理方法，該前處 理方法包括步驟如下：
[0072] A1、對(duì)樣品溶液進(jìn)行過濾，并將過濾后的樣品溶液加入到試劑盒中的樣品儲(chǔ)存容 器中，將洗脫液加入到試劑盒中的一個(gè)密閉試劑容器中；
[0073] 該步驟是為了去除樣品溶液中大顆粒物質(zhì)，從而避免樣品溶液中大顆粒物質(zhì)對(duì)可 更換微型萃取柱的污染，另外，將過濾后的樣品溶液加入到試劑盒中的樣品儲(chǔ)存容器中，將 洗脫液加入到試劑盒中的一個(gè)密閉試劑容器中是進(jìn)行前處理之前的準(zhǔn)備工作，通過將洗脫 液加入到密閉試劑容器中可以避免洗脫液的揮發(fā)，從而使洗脫液能夠較長(zhǎng)時(shí)間的保存，而 無需每次進(jìn)行前處理時(shí)重新加入洗脫液。
[0074] A2、試劑盒中的可更換微型萃取柱接收第四設(shè)定量樣品溶液注入；
[0075] 在該步驟中，優(yōu)選地通過試劑盒中的控制器控制樣品儲(chǔ)存容器中的樣品溶液注入 到可更換微型萃取柱中的流速為5ml/min，該樣品溶液的量一般根據(jù)其含有的二硫氰基甲 烷而定，對(duì)于二硫氰基甲烷濃度較高的水體可以取500ml注入可更換微型萃取柱，對(duì)于二硫 氰基甲烷濃度較低的水體可以取1000ml、2000ml甚至更多注入可更換微型萃取柱，以保證 富集后的^硫氛基甲燒的濃度足夠尚，從而使后續(xù)檢測(cè)的準(zhǔn)確度更尚。
[0076] A3、試劑盒中的可更換微型萃取柱吸附樣品溶液中的待檢測(cè)成分；
[0077] A4、試劑盒中的可更換微型萃取柱接收第三設(shè)定量洗脫液注入，脫附待檢測(cè)成分；
[0078] 在該步驟中，優(yōu)選地，通過試劑盒中的控制器控制密閉試劑容器中的洗脫液注入 到可更換微型萃取柱中的流速為5ml/min，洗脫液液注入量為8ml，洗脫液，包括：甲醇、乙腈 及1:1的二氯甲烷和丙酮混合液中的任意一種，更優(yōu)選乙腈。
[0079] A5、通過試劑盒中的收集器收集脫附后的具有待檢測(cè)成分的洗脫液。
[0080] 由于洗脫液用量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于樣品溶液的量，同時(shí)，洗脫液能夠?qū)⒖筛鼡Q微型萃取柱 吸附的樣品溶液中的待檢測(cè)成分完全洗脫下來，使得該A5中得到的具有待檢測(cè)成分的洗脫 液中的待檢測(cè)成分的濃度，相比于樣品溶液中待檢測(cè)成分的濃度有很大的提高，而濃度的 提尚將有利于后續(xù)檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
[0081] 由于二硫氰基甲烷在環(huán)境中容易分解，為了保證二硫氰基甲烷的穩(wěn)定性，通過在 不同pH條件下檢測(cè)二硫氰基甲烷回收率的實(shí)驗(yàn)確定具有二硫氰基甲烷的樣品溶液的pH，本 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了樣品溶液在酸性(pH為5)、中性(pH為7)和堿性(pH為9)條件下二硫氰基甲烷的 回收率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示表明，隨著pH的降低，二硫氰基甲烷的回收率越來越高，而在強(qiáng)酸性 條件下可對(duì)試劑盒中的可更換微型萃取柱產(chǎn)生影響，因此，在本發(fā)明另一實(shí)施例中，在A1之 前進(jìn)一步包括:通過乙酸將樣品溶液pH調(diào)節(jié)到4.0-6.0范圍內(nèi)，優(yōu)選地，將樣品溶液pH調(diào)節(jié) 到5.0左右。
[0082] 為了保證將樣品溶液中的大顆粒物質(zhì)完全濾出，防止大顆粒物質(zhì)賭塞試劑盒中的 可替換可更換微型萃取柱，在本發(fā)明另一實(shí)施例中，A1中的對(duì)樣品溶液進(jìn)行過濾的具體實(shí) 施方式，包括:通過孔徑為〇. 45μπι的濾膜對(duì)pH范圍為4.0-6.0的樣品溶液過濾。
[0083]為了能夠進(jìn)一步對(duì)待檢測(cè)成分進(jìn)行濃縮，同時(shí)保證后續(xù)檢測(cè)的準(zhǔn)確性，在A5之后， 進(jìn)一步包括:通過氮吹方式濃縮待檢測(cè)成分，并利用定容試劑對(duì)濃縮后的待檢測(cè)成分進(jìn)行 定容，定容試劑包括：甲醇和乙腈中的任意一種，優(yōu)選乙腈；由于洗脫液一般為有機(jī)溶劑，其 揮發(fā)性比較強(qiáng)，該氮吹方式是將氮?dú)獯档骄哂写龣z測(cè)成分的洗脫液表面，由于氮?dú)饩哂休^ 好的穩(wěn)定性，其不與洗脫液發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，增加了洗脫液表面的空氣流通，從而使洗脫液快 速的揮發(fā)，大大縮短了濃縮時(shí)間。通過對(duì)濃縮后的待檢測(cè)成分進(jìn)行定容，可以通過后續(xù)檢測(cè) 出待檢測(cè)成分的濃度準(zhǔn)確的計(jì)算出濃縮后的待檢測(cè)成分的質(zhì)量，從而推算出樣品溶液中待 檢測(cè)成分的含量。
[0084] 為了能夠使試劑盒中可更換微型萃取柱的吸附最大化，在A2之前，進(jìn)一步包括:分 別利用第一設(shè)定量如5_8ml甲醇和第二設(shè)定量如5-8ml去離子水活化試劑盒中的可更換微 型萃取柱;通過該甲醇和去離子水實(shí)現(xiàn)對(duì)可更換微型萃取柱的活化。A2的【具體實(shí)施方式】包 括:活化后的可更換微型萃取柱接收第四設(shè)定量樣品溶液注入。
[0085] 以水體中包含的待檢測(cè)成分是二硫氰基甲烷為例，展開說明通過本發(fā)明實(shí)施例提 供的試劑盒實(shí)現(xiàn)的前處理方法，該前處理方法可以包括如下步驟：
[0086] B1、通過乙酸將具有二硫氰基甲烷的水溶液pH調(diào)節(jié)到4.0-6.0范圍內(nèi)；
[0087]從待檢水體中取設(shè)定量的水樣作為本實(shí)施例的水溶液，通過檢測(cè)不同pH的二硫氰 基甲烷的水溶液中二硫氰基甲烷的回收率發(fā)現(xiàn)，隨著pH的降低，二硫氰基甲烷的回收率越 來越高，而在強(qiáng)酸性條件下可對(duì)試劑盒中的可更換微型萃取柱產(chǎn)生影響，該步驟中以乙酸 溶液調(diào)節(jié)水溶液的pH，乙酸作為有機(jī)弱酸，其能夠比較快速的將水溶液pH調(diào)節(jié)到4.0-6.0范 圍內(nèi)，優(yōu)選pH為5.0左右，而不會(huì)使水溶液體積變化太大。另外，在弱酸性條件下，也能夠使 水溶液中的其他雜質(zhì)沉淀出來，從而在下述B2中將雜質(zhì)去除，減少雜質(zhì)對(duì)試劑盒中的可更 換微型萃取柱的污染。
[0088] B2、通過孔徑為0.45μπι的濾膜對(duì)pH范圍為4.0-6.0的具有二硫氰基甲烷的水溶液 過濾；
[0089] 在該步驟中，通過0.45μπι的濾膜，能夠?qū)⑺芤褐械拇箢w粒物質(zhì)去除，例如:對(duì)于 養(yǎng)殖水體來說，其除了一些脂類有機(jī)物、二硫氰基甲烷等有機(jī)物之外，還存在大顆粒的腐殖 質(zhì)類物質(zhì)，那么，當(dāng)水溶液為養(yǎng)殖水樣品時(shí)，通過該步驟能夠?qū)B(yǎng)殖水樣品中腐殖質(zhì)類的物 質(zhì)去掉。
[0090] Β3、將過濾后的水溶液加入到試劑盒中的樣品儲(chǔ)存容器中，將洗脫液加入到試劑 盒中的一個(gè)密閉試劑容器中；
[0091 ]將過濾后的水溶液加入到試劑盒中的樣品儲(chǔ)存容器中，將洗脫液加入到試劑盒中 的一個(gè)密閉試劑容器中是進(jìn)行前處理之前的準(zhǔn)備工作，通過將洗脫液加入到密閉試劑容器 中可以避免洗脫液的揮發(fā)，從而使洗脫液能夠較長(zhǎng)時(shí)間的保存，而無需每次進(jìn)行前處理時(shí) 重新加入洗脫液。
[0092]值得說明的是，為了進(jìn)一步去除養(yǎng)殖水樣品中的除二硫氰基甲烷之外的其他有機(jī) 物，還可在將養(yǎng)殖水樣品加入樣品儲(chǔ)存容器之前，將養(yǎng)殖水樣品過各種類型的萃取柱，從而 將酯類等有機(jī)物去除，另外，還可以在試劑盒中設(shè)置多個(gè)各種類型的萃取柱，將各種類型的 萃取柱串聯(lián)，在將水溶液注入可替換可更換微型萃取柱之前，將水溶液依次流過各個(gè)串聯(lián) 的各種類型的萃取柱，該過程也實(shí)現(xiàn)了去除除二硫氰基甲烷之外的其他有機(jī)物，從而降低 了水溶液中的其他有機(jī)物對(duì)二硫氰基甲烷回收率的影響。
[0093] Β4、分別利用5-8ml的甲醇和去離子水活化試劑盒中的可更換微型萃取柱；
[0094] 通過甲醇和去離子水對(duì)試劑盒中的可更換微型萃取柱活化，能夠使試劑盒中的可 更換微型萃取柱對(duì)水溶液中的二硫氰基甲烷具有較好的吸附性，同時(shí)通過選擇乙腈作為洗 脫液能夠盡可能完整的將可更換微型萃取柱吸附的二硫氰基甲烷脫附，從而保障了對(duì)水溶 液中二硫氰基甲烷富集的完整性。
[0095] B5、試劑盒中活化后的可更換微型萃取柱接收設(shè)定量水溶液注入，注入流速為 5ml/min；
[0096] 該步驟設(shè)定的流速為5ml/min，使流經(jīng)可更換微型萃取柱后的廢液一滴一滴的滴 入廢液收集容器中，保證水溶液能夠全面的與可更換微型萃取柱中的吸附材料接觸，從而 使得水溶液中的二硫氰基甲烷能夠盡可能完全的被吸附在可更換微型萃取柱中。為了能夠 更優(yōu)的選擇可更換微型萃取柱的類型，本發(fā)明實(shí)施例通過實(shí)驗(yàn)對(duì)比了Oasis HLB固相萃取 柱、Oasis MCX固相萃取柱和DSC-18固相萃取柱對(duì)于水溶液中二硫氰基甲烷的回收率的影 響，結(jié)果表明，Oasis MCX固相萃取柱和C-18固相萃取柱萃取回收率較低，Oasis HLB固相萃 取柱對(duì)二硫氰基甲烷的回收率在85%以上，因此，在該步驟中，優(yōu)選地，以O(shè)asis HLB固相萃 取柱作為可更換微型萃取柱。該水溶液的量與水溶液中二硫氰基甲烷的含量相關(guān)，通過實(shí) 驗(yàn)表明，在該步驟中可以接收1 〇〇〇ml養(yǎng)殖水樣品的注入。
[0097] B6、試劑盒中的可更換微型萃取柱吸附水溶液中的二硫氰基甲烷；
[0098]當(dāng)B5選擇Oasis HLB固相萃取柱作為可更換微型萃取柱時(shí)，水溶液以流動(dòng)相的方 式流經(jīng)Oasis HLB固相萃取柱過程中，Oasis HLB固相萃取柱吸附水溶液中的二硫氰基甲 烷，同時(shí)將吸附二硫氰基甲烷后的水溶液即廢液排出。
[0099] B7、試劑盒中的可更換微型萃取柱接收8ml的洗脫液注入，脫附待檢測(cè)成分，洗脫 液的注入流速為5ml/min;
[0100] 將吸附的設(shè)定量水溶液中的二硫氰基甲烷通過8ml洗脫液進(jìn)行洗脫，實(shí)現(xiàn)對(duì)二硫 氰基甲烷的回收，同時(shí)大大增加了二硫氰基甲烷的濃度，有利于二硫氰基甲烷檢測(cè)的準(zhǔn)確 性。通過洗脫液的注入流速為5ml/min，可以使洗脫液能夠完全與可更換微型萃取柱中的吸 附材料接觸，從而使二硫氰基甲烷的回收率在合理范圍內(nèi)。另外，通過檢測(cè)不同流速對(duì)二硫 氰基甲烷的回收率的影響表明，隨著流速的降低，二硫氰基甲烷回收率升高，當(dāng)流速降低到 5ml/min以下時(shí)，二硫氰基甲烷回收率變化不明顯且用時(shí)大大增加，因此，在該步驟中，控制 洗脫液的注入流速為5ml/min。
[0101] -般來說，常見的洗脫液包括：甲醇、乙腈及1:1的二氯甲烷和丙酮混合液中的任 意一種，在本發(fā)明實(shí)施例中，檢測(cè)上述三種洗脫液對(duì)二硫氰基甲烷回收率的影響，結(jié)果表 明，甲醇、乙腈、1:1二氯甲烷和丙酮混合液分別對(duì)可更換微型萃取柱進(jìn)行洗脫，洗脫后對(duì)應(yīng) 的二硫氰基甲烷的回收率分別為72.8 %和85.2 %、69.1 %，因此，該步驟中，優(yōu)選乙腈作為 二硫氰基甲烷的洗脫液。
[0102] B8、通過試劑盒中的收集器收集脫附后的具有待檢測(cè)成分的洗脫液。
[0103] 由于洗脫液用量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于樣品溶液的量，同時(shí)，洗脫液能夠?qū)⒖筛鼡Q微型萃取柱 吸附的樣品溶液中的待檢測(cè)成分完全洗脫下來，使得該B8中得到的具有待檢測(cè)成分的洗脫 液中的待檢測(cè)成分的濃度，相比于水溶液中待檢測(cè)成分的濃度有很大的提高，而濃度的提 尚將有利于后續(xù)檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
[0104] B9、通過氮吹方式濃縮洗脫液中的待檢測(cè)成分；
[0105] 上述B8回收后的二硫氰基甲烷溶于8ml洗脫液中，為了能夠進(jìn)一步對(duì)8ml洗脫液中 的二硫氰基甲烷進(jìn)行濃縮，且更換為與流動(dòng)相一致的定容液。該步驟中通過氮吹方式去除 洗脫液，由于洗脫液一般為有機(jī)溶劑，其揮發(fā)性比較強(qiáng)，該氮吹方式是將氮?dú)獯档骄哂写龣z 測(cè)成分的洗脫液表面，由于氮?dú)饩哂休^好的穩(wěn)定性，其不與洗脫液發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，增加了洗 脫液表面的空氣流通，從而使洗脫液快速的揮發(fā)，大大縮短了濃縮時(shí)間。
[0106] 另外，由于以色譜對(duì)二硫氰基甲烷進(jìn)行檢測(cè)過程中，常以甲醇或乙腈作為流動(dòng)相， 那么，當(dāng)洗脫液為1:1二氯甲烷和丙酮混合液時(shí)，在該步驟中，需要將1:1二氯甲烷和丙酮混 合液完全揮發(fā)，只剩下二硫氰基甲烷，并轉(zhuǎn)溶劑為甲醇或者乙腈，通過下述B10對(duì)二硫氰基 甲烷進(jìn)行定容；當(dāng)洗脫液為甲醇或者乙腈時(shí)，在該步驟中，可將收集器中收集的溶液蒸發(fā)到 剩余l(xiāng)ml，從而可以省略下述B10的過程，當(dāng)蒸發(fā)后，收集器中的溶液小于lml時(shí)，可通過下述 B10將溶液定容到lml。
[0107] B10、利用定容試劑對(duì)濃縮后的待檢測(cè)成分進(jìn)行定容，定容試劑包括：甲醇和乙腈 中的任意一種，優(yōu)選乙腈；
[0108] 由于甲醇揮發(fā)性大于乙腈，而溶劑大量的揮發(fā)，將影響二硫氰基甲烷濃度檢測(cè)的 準(zhǔn)確性，因此，在該步驟中，定容優(yōu)選乙腈作為定容試劑。
[0109] 由于試劑盒濃縮后的二硫氰基甲烷濃度高，那么，通過將濃縮后高濃度的二硫氰 基甲烷的檢測(cè)結(jié)果換算為實(shí)際樣品中的二硫氰基甲烷的濃度，便可知實(shí)際樣品中低濃度二 硫氰基甲烷的濃度，從而實(shí)現(xiàn)測(cè)定水體中的二硫氰基甲烷。
[0110] 本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例提供一種基于上述任一所述的試劑盒實(shí)現(xiàn)的二硫氰基甲烷檢 測(cè)方法，該檢測(cè)方法包括可以包括如下步驟：
[0111] C1、將試劑盒收集到的具有二硫氰基甲烷的洗脫液濃縮；
[0112] 該步驟提出的濃縮過程是為了進(jìn)一步提高二硫氰基甲烷的濃度，從而提高二硫氰 基甲烷檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性。該步驟的濃縮過程可以通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的方式濃縮，還可以 通過氮吹的方式將洗脫液揮發(fā)實(shí)現(xiàn)濃縮，由于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)針對(duì)大容積量比較方便，在該步驟 中，優(yōu)選地氮吹的方式進(jìn)行濃縮。
[0113] C2、利用定容溶劑將濃縮后的二硫氰基甲烷定容；
[0114] 通過該步驟定容，可以準(zhǔn)確的推算出水溶液中二硫氰基甲烷的含量，
[0115] 水溶液中二硫氰基甲烷的濃度可以通過下述公式(1)進(jìn)行計(jì)算：
(1)
[0117] 其中，Θ表征水溶液中二硫氰基甲烷的濃度;Vi表征濃縮定容體積;V2表征水溶液的 體積；當(dāng)定容體積Vi = lml;水溶液體積V2 = 1000ml，推算得
，即通過定容到lml，對(duì) 1000ml水溶液(如養(yǎng)殖水樣品）中的二硫氰基甲烷進(jìn)行濃縮能夠有效地簡(jiǎn)化計(jì)算過程。
[0118] C3、獲取5-10μ1定容溶液；
[0119] 在本發(fā)明實(shí)施例中以色譜檢測(cè)二硫氰基甲烷的濃度，而色譜的量程在25μ1以下， 即當(dāng)該步驟中獲取的定容溶液超過25μ1時(shí)，色譜無法準(zhǔn)確檢測(cè)二硫氰基甲烷的濃度。通過 5-1 ΟμL定容溶液能夠使色譜的出峰位置較佳，優(yōu)選地，1 ΟμL定容溶液使色譜出峰位置最佳。
[0120] C4、通過色譜檢測(cè)5-10μ1定容溶液中二硫氰基甲烷濃度。
[0121] 在該檢測(cè)過程中需要對(duì)色譜中的各個(gè)參數(shù)如流動(dòng)相、吸收波長(zhǎng)、流動(dòng)相流速等進(jìn) 行設(shè)置，而這些參數(shù)將直接影響檢測(cè)二硫氰基甲烷的靈敏度。
[0122] 在本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例中，上述定容溶劑，包括：甲醇和乙腈中的任意一種，優(yōu)選乙 腈。甲醇和乙腈是色譜中常用的溶劑，但由于甲醇揮發(fā)性較高，常常造成檢測(cè)結(jié)果偏高，因 此，本發(fā)明實(shí)施例優(yōu)選乙腈作為定容溶劑。
[0123] 在本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例中，色譜，包括:高效液相色譜；
[0124] 高效液相色譜檢測(cè)二硫氰基甲烷濃度的條件設(shè)置，包括：
[0125] 吸收波長(zhǎng)為254nm;流動(dòng)相為30 %乙腈-70 %乙酸銨/乙酸；流動(dòng)相流速為0.8ml/ min〇
[0126] 通過對(duì)二硫氰基甲烷進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描發(fā)現(xiàn)，其在254nm處有最大吸收，因此，本發(fā) 明實(shí)施例確定高效液相色譜的檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。
[0127] 在高效液相色譜中，主要通過對(duì)特征吸收峰處積面積，并將特征吸收峰處積的面 積轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的濃度，而出峰的峰形越窄，沒有拖尾，對(duì)峰積出的峰面積轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的濃度 的準(zhǔn)確性越高，而峰面積轉(zhuǎn)化為濃度的過程常常通過標(biāo)準(zhǔn)曲線來完成。下面將通過實(shí)驗(yàn)摸 索高效液相色譜檢測(cè)二硫氰基甲烷濃度的條件的優(yōu)化設(shè)置，以優(yōu)化出峰峰形，另外通過配 置一系列標(biāo)準(zhǔn)樣品來做二硫氰基甲烷的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0128] 高效液相色譜檢測(cè)二硫氰基甲烷濃度的條件優(yōu)化過程：
[0129] 通過選擇乙腈-乙酸銨/氨水(pH為9)、乙腈-水和乙腈-乙酸胺/乙酸(pH為5)分別 作流動(dòng)相進(jìn)行比較實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，當(dāng)采用乙腈-水和乙腈-乙酸銨/氨水作為流動(dòng)相時(shí)，二 硫氰基甲烷的峰形較寬，后拖尾嚴(yán)重；當(dāng)選用乙腈-乙酸胺/乙酸作為流動(dòng)相，峰形得到了很 好的改善，因此，本發(fā)明實(shí)施例選擇乙腈-乙酸胺/乙酸作為流動(dòng)相。
[0130] 通過將緩沖溶液pH分別調(diào)至5、7、9進(jìn)行優(yōu)化。當(dāng)緩沖液pH = 7和9時(shí)，高效液相色譜 對(duì)二硫氰基甲烷靈敏度不高，只有當(dāng)pH為5時(shí)，峰形最好，靈敏度最高。
[0131]比較了乙腈-水和乙腈-乙酸胺/乙酸(pH為5)的比例為30:70和50:50兩種流動(dòng)相， 30:70的流動(dòng)相不僅峰形好，而且靈敏度也高，重復(fù)性也好。
[0132] 通過上述高效液相參數(shù)設(shè)置(吸收波長(zhǎng)為254nm;流動(dòng)相為30%乙腈-70%乙酸銨/ 乙酸;流動(dòng)相流速為〇.8ml/min)形成的二硫氰基甲烷的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖（如圖2所示）和經(jīng)過試 劑盒前處理后的養(yǎng)殖水樣品中的二硫氰基甲烷色譜圖（如圖3所示），在流動(dòng)相流速為 0.8ml/min時(shí)，二硫氰基甲燒的出峰位置在9-10min。
[0133] 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作過程:稱取二硫氰基甲烷0.0050g，溶于50ml乙腈中，作為儲(chǔ)備液。 后用乙腈-乙酸胺/乙酸作溶劑進(jìn)行稀釋，分別至lmg/1、2mg/l、5mg/l、10mg/l、20mg/l。采用 上述色譜條件（吸收波長(zhǎng)為254nm;流動(dòng)相為30 %乙腈-70 %乙酸銨/乙酸；流動(dòng)相流速為 0.8ml/min)，進(jìn)樣10μ1。以二硫氰基甲烷的濃度及所得到的相應(yīng)峰面積做定量校準(zhǔn)曲線，得 到線性方程Υ = 4874.7Χ-1823.3，相關(guān)系數(shù)0.9971。另外，通過將高、中、低三個(gè)濃度的二硫 氰基甲烷標(biāo)準(zhǔn)溶液，采用上述色譜條件（吸收波長(zhǎng)為254nm;流動(dòng)相為30%乙腈-70%乙酸 銨/乙酸;流動(dòng)相流速為0.8ml/min)，每組平行做7次。計(jì)算其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差<9.15%以內(nèi)， 表明本發(fā)明實(shí)施例提供的該種測(cè)試方法能夠比較準(zhǔn)確的測(cè)定出水溶液中二硫氰基甲烷的 濃度。
[0134] 值得說明的是，在本發(fā)明中所提及的可更換微型萃取柱中吸附材料的量一般以mg 來計(jì)量如具有60mg吸附材料的Oasis HLB固相萃取柱等。另外，在本發(fā)明中提及的二硫氰基 甲烷回收率主要是指通過本發(fā)明實(shí)施例提供的試劑盒從樣品溶液中回收二硫氰基甲烷的 量占樣品溶液中二硫氰基甲烷的百分比，那么，回收率越高，在后續(xù)檢測(cè)過程中，檢測(cè)結(jié)果 也就越能表征樣品溶液中^?硫氛基甲燒的含量。
[0135] 根據(jù)上述方案，本發(fā)明的各實(shí)施例，至少具有如下有益效果：
[0136] 1.通過試劑盒中的可更換微型萃取柱接收第四設(shè)定量樣品溶液注入，并吸附樣品 溶液中的待檢測(cè)成分，通過試劑盒中的可更換微型萃取柱接收第三設(shè)定量洗脫液注入，脫 附待檢測(cè)成分，通過試劑盒中的收集器收集脫附后的具有待檢測(cè)成分的洗脫液，能夠?qū)Υ?檢測(cè)成分進(jìn)行富集，通過實(shí)驗(yàn)表明，當(dāng)二硫氰基甲烷作為待檢測(cè)成分，本發(fā)明實(shí)施例提供的 試劑盒能夠?qū)悠啡芤喝琊B(yǎng)殖水體中的二硫氰基甲烷進(jìn)行富集，并通過洗脫液即可將吸附 的二硫氰基甲烷完全脫附，將低濃度的二硫氰基甲烷的富集為高濃度的二硫氰基甲烷，實(shí) 現(xiàn)了水體中二硫氰基甲烷的前處理。
[0137] 2.由于試劑盒濃縮后的二硫氰基甲烷濃度高，那么，通過將濃縮后高濃度的二硫 氰基甲烷的檢測(cè)結(jié)果換算為實(shí)際樣品中的二硫氰基甲烷的濃度，便可知實(shí)際樣品中低濃度 二硫氰基甲烷的濃度，從而實(shí)現(xiàn)測(cè)定水體中的二硫氰基甲烷。
[0138] 3.在試劑盒中通過控制器調(diào)節(jié)總計(jì)流管中的多閥門，使樣品儲(chǔ)存容器和至少一個(gè) 密閉試劑容器能夠分別與可更換微型萃取柱相通，并且每次僅有一個(gè)容器與可更換微型萃 取柱相通，使得樣品溶液和洗脫液能夠自動(dòng)的注入到可更換微型萃取柱中，而無須人工的 參與，因此，本發(fā)明實(shí)施例提供的試劑盒實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化。
[0139] 4.通過本發(fā)明實(shí)施例提供的的試劑盒和前處理方法能夠較完整的對(duì)樣品溶液中 二硫氰基甲烷進(jìn)行富集，而通過本發(fā)明提供的高效液相色譜檢測(cè)方法和檢測(cè)條件，對(duì)于二 硫氰基甲烷靈敏度高、準(zhǔn)確度好，能夠有效地提高了低濃度二硫氰基甲烷的檢測(cè)準(zhǔn)確性。 [0140]需要說明的是，在本文中，諸如第一和第二之類的關(guān)系術(shù)語僅僅用來將一個(gè)實(shí)體 或者操作與另一個(gè)實(shí)體或操作區(qū)分開來，而不一定要求或者暗示這些實(shí)體或操作之間存在 任何這種實(shí)際的關(guān)系或者順序。而且，術(shù)語"包括"、"包含"或者其任何其他變體意在涵蓋非 排他性的包含，從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者設(shè)備不僅包括那些要素， 而且還包括沒有明確列出的其他要素，或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設(shè)備所固 有的要素。在沒有更多限制的情況下，由語句"包括一個(gè)......"限定的要素，并不排 除在包括所述要素的過程、方法、物品或者設(shè)備中還存在另外的相同因素。
[0141]本發(fā)明中所提供的各個(gè)實(shí)施例均可根據(jù)需要而相互組合，例如任意兩個(gè)、三個(gè)或 更多個(gè)實(shí)施例中的特征相互組合以構(gòu)成本發(fā)明的新的實(shí)施例，這也在本發(fā)明的保護(hù)范圍 內(nèi)，除非另行說明或者在技術(shù)上構(gòu)成矛盾而無法實(shí)施。
[0142]最后需要說明的是：以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，僅用于說明本發(fā)明的技 術(shù)方案，并非用于限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所做的任何修改、 等同替換、改進(jìn)等，均包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種試劑盒，其特征在于，包括:樣品儲(chǔ)存容器、至少一個(gè)密閉試劑容器、總計(jì)流管、 控制器、可更換微型萃取柱及收集器，其中， 所述樣品儲(chǔ)存容器和所述至少一個(gè)密閉試劑容器分別通過各自對(duì)應(yīng)的管線連接到所 述總計(jì)流管； 所述總計(jì)流管具有多閥門，一端連接所述管線，另一端連接所述可更換微型萃取柱的 頂端，用于接收所述控制器控制，當(dāng)所述多閥門連通所述樣品儲(chǔ)存容器和所述可更換微型 萃取柱，并斷開所述至少一個(gè)密閉試劑容器和所述可更換微型萃取柱間的連通時(shí)，將所述 樣品儲(chǔ)存容器中的樣品溶液注入到所述可更換微型萃取柱；當(dāng)所述多閥門連通所述至少一 個(gè)密閉試劑容器中任意密閉試劑容器和所述可更換微型萃取柱，并斷開所述樣品儲(chǔ)存容器 和所述可更換微型萃取柱間的連通時(shí)，將所述任意密閉試劑容器中的洗脫液注入到所述可 更換微型萃取柱； 所述可更換微型萃取柱，用于當(dāng)接收到所述樣品溶液注入時(shí)，吸附所述樣品溶液中的 待檢測(cè)成分，當(dāng)接收到所述洗脫液注入時(shí)，脫附所述待檢測(cè)成分； 所述收集器，用于收集所述可更換微型萃取柱脫附后的具有所述待檢測(cè)成分的洗脫 液。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述收集器，包括:托盤、第一收集容器 和第二收集容器，其中， 所述托盤，用于放置所述第一收集容器和所述第二收集容器，當(dāng)所述樣品溶液注入到 所述可更換微型萃取柱時(shí)，接收所述控制器的調(diào)節(jié)，將所述第一收集容器調(diào)節(jié)到所述可更 換微型萃取柱下方；當(dāng)所述洗脫液注入到所述可更換微型萃取柱時(shí)，接收所述控制器的調(diào) 節(jié)，將所述第二收集容器調(diào)節(jié)到所述可更換微型萃取柱下方； 所述第一收集容器，當(dāng)位于所述可更換微型萃取柱下方時(shí)，用于接收所述可更換微型 萃取柱流出的廢液； 所述第二收集容器，當(dāng)位于所述可更換微型萃取柱下方時(shí)，用于接收所述可更換微型 萃取柱脫附后的所述待檢測(cè)成分和洗脫液。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述至少一個(gè)密閉試劑容器，包括:第一 密閉試劑容器、第二密閉試劑容器和第三密閉試劑容器，其中， 所述第一密閉試劑容器，用于盛裝去離子水； 所述第二密閉試劑容器，用于盛裝甲醇； 所述第三密閉試劑容器，用于盛裝洗脫液； 所述總計(jì)流管，用于接收所述控制器控制，通過所述多閥門連通所述第二密閉試劑容 器和所述可更換微型萃取柱，并控制所述第二密閉試劑容器中甲醇流速，向所述可更換微 型萃取柱中注入第一設(shè)定量甲醇;通過所述多閥門連通所述第一密閉試劑容器和所述可更 換微型萃取柱，并控制所述第一密閉試劑容器中去離子水流速，向所述可更換微型萃取柱 中注入第二設(shè)定量去離子水;通過所述多閥門連通所述第三密閉試劑容器和所述可更換微 型萃取柱，并控制所述第三密閉試劑容器中洗脫液流速，向所述可更換微型萃取柱中注入 第三設(shè)定量洗脫液； 所述可更換微型萃取柱，用于當(dāng)分別接收所述第一設(shè)定量甲醇和第二設(shè)定量去離子水 時(shí)，活化;當(dāng)接收所述第三設(shè)定量洗脫液時(shí)，通過所述洗脫液脫附所述待檢測(cè)成分。4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任一所述的試劑盒，其特征在于， 所述待檢測(cè)成分，包括:二硫氰基甲烷； 所述洗脫液，包括：甲醇、乙腈及1:1的二氯甲烷和丙酮混合液中的任意一種。5. -種利用權(quán)利要求1至4任一所述的試劑盒實(shí)現(xiàn)的前處理方法，其特征在于，對(duì)樣品 溶液進(jìn)行過濾，并將過濾后的樣品溶液加入到所述試劑盒中的樣品儲(chǔ)存容器中，將洗脫液 加入到所述試劑盒中的一個(gè)密閉試劑容器中，還包括： 所述試劑盒中的可更換微型萃取柱接收第四設(shè)定量的樣品溶液注入； 所述試劑盒中的可更換微型萃取柱吸附樣品溶液中的待檢測(cè)成分； 所述試劑盒中的可更換微型萃取柱接收第三設(shè)定量的洗脫液注入，脫附所述待檢測(cè)成 分； 通過所述試劑盒中的收集器收集脫附后的具有所述待檢測(cè)成分的洗脫液。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于， 在所述對(duì)樣品溶液進(jìn)行過濾之前，進(jìn)一步包括:通過乙酸將樣品溶液pH調(diào)節(jié)到4.0-6.0 范圍內(nèi)； 所述對(duì)樣品溶液進(jìn)行過濾，包括:通過孔徑為〇. 45μηι的濾膜對(duì)pH范圍為4.0-6.0的樣品 溶液過濾； 和/或， 在通過所述試劑盒中的收集器收集脫附后的具有所述待檢測(cè)成分的洗脫液之后，進(jìn)一 步包括:通過氮吹方式濃縮所述待檢測(cè)成分，并利用定容試劑對(duì)濃縮后的待檢測(cè)成分進(jìn)行 定容，所述定容試劑包括：甲醇和乙腈中的任意一種； 和/或， 在所述試劑盒中的可更換微型萃取柱接收第四設(shè)定量的樣品溶液注入之前，進(jìn)一步包 括:分別利用第一設(shè)定量甲醇和第二設(shè)定量去離子水活化所述試劑盒中的可更換微型萃取 柱； 所述試劑盒中的可更換微型萃取柱接收第四設(shè)定量樣品溶液注入，包括:活化后的可 更換微型萃取柱接收第四設(shè)定量樣品溶液注入。7. 根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征在于，進(jìn)一步包括： 控制所述樣品溶液和所述洗脫液注入所述可更換微型萃取柱的流速，并控制所述樣品 溶液注入所述可更換微型萃取柱第四設(shè)定量，控制所述洗脫液注入所述可更換微型萃取柱 第三設(shè)定量，其中，所述樣品溶液，包括:具有二硫氰基甲烷的水溶液;所述洗脫液，包括：甲 醇、乙腈及1:1的二氯甲烷和丙酮混合液中的任意一種。8. -種基于權(quán)利要求1至4任一所述的試劑盒實(shí)現(xiàn)的二硫氰基甲烷檢測(cè)方法，其特征在 于，包括： 將試劑盒收集到的具有二硫氰基甲烷的洗脫液濃縮； 利用定容溶劑將濃縮后的二硫氰基甲烷定容； 獲取5-10μ1定容溶液； 通過色譜檢測(cè)5-10μ1定容溶液中二硫氰基甲烷濃度。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于， 所述定容溶劑，包括：甲醇和乙腈中的任意一種。10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的方法，其特征在于，所述色譜，包括:高效液相色譜； 所述高效液相色譜檢測(cè)二硫氰基甲烷濃度的條件設(shè)置，包括： 吸收波長(zhǎng)為254nm; 流動(dòng)相為30 %乙腈-70 %乙酸銨/乙酸； 流動(dòng)相流速為〇.8ml/min。
【文檔編號(hào)】G01N30/74GK106018636SQ201610507287
【公開日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年6月30日
【發(fā)明人】楊秋紅, 艾曉輝, 劉永濤, 胥寧, 董靖, 楊移斌
【申請(qǐng)人】中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所