一種測(cè)定食用菌中溴化阻燃劑的分析方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種測(cè)定食用菌中溴化阻燃劑的分析方法，包括以下步驟：用溴聯(lián)苯醚和溴聯(lián)苯類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)品制備標(biāo)準(zhǔn)溶液，QuEChERS提取和凈化樣品后進(jìn)行分散液液微萃取處理，用平行定量濃縮儀減壓濃縮后，以1.0mL正己烷復(fù)溶，過(guò)0.2μm濾膜，供氣相色譜?串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定，以峰面積外標(biāo)法定量。本發(fā)明方法靈敏度高，檢測(cè)限為0.48μg/kg～50μg/kg，彌補(bǔ)了單一的提取方法檢測(cè)食用菌中溴化阻燃劑種類(lèi)少的不足，與傳統(tǒng)的檢測(cè)方法相比，本發(fā)明簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確、靈敏度高、精密度好，適用于大批量檢測(cè)食用菌樣品。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種測(cè)定食用菌中溴化阻燃劑的分析方法 【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種測(cè)定食用菌中溴化阻燃劑的分析方法，屬于輕工化學(xué)分析技術(shù)領(lǐng) 域。 【【背景技術(shù)】】
[0002] 溴化阻燃劑(brominated flame retandants，BFRs)是普遍使用的工業(yè)化學(xué)制劑， 被廣泛用于印刷電路板、塑料、涂層、電線電纜及樹(shù)脂類(lèi)電子元件中。近幾年，它在環(huán)境中被 檢測(cè)到，對(duì)人和哺乳動(dòng)物有一定的毒性。2012年7月31日：國(guó)際環(huán)保組織綠色和平對(duì)中國(guó)5個(gè) 城市11個(gè)普通家庭的室內(nèi)灰塵進(jìn)行了抽樣檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)灰塵樣本中均含有溴化阻燃劑等四大 類(lèi)有毒有害物質(zhì)。在BFRs產(chǎn)品中，大約1/3含有多聚溴化二苯醚(polybrominated diphenyl ethers，PBDEs); 1/3含四溴雙酸A(tetrabromobisphenol Α,ΤΒΒΡΑ)及其衍生物；1/3含其他 溴化合物，如多溴二苯聯(lián)苯化〇1丫131'0111；[1^丨6(1131?11611718，？13138)和六溴環(huán)丙烷十二燒 (hexabromocyclododecane，HBQ))。從2003年起，我國(guó)每年至少有500萬(wàn)臺(tái)電視機(jī)、400萬(wàn)臺(tái) 冰箱、600萬(wàn)臺(tái)洗衣機(jī)需要報(bào)廢。此外，我國(guó)還有近500萬(wàn)臺(tái)電腦、上千萬(wàn)部手機(jī)進(jìn)入淘汰期。 很多研究證實(shí)，BFRs在制造、循環(huán)再造或處理?xiàng)壷眉揖蛹跋M(fèi)性產(chǎn)品過(guò)程中所釋出的有害 物質(zhì)能夠迀移到食品(尤其是水產(chǎn)品）中，人如果食用了上述被污染的食物將會(huì)對(duì)人體健康 造成的損害。BFRs會(huì)妨礙大腦和骨骼發(fā)育;其燃燒會(huì)釋放出溴化的二惡英和呋喃，這兩種物 質(zhì)很容易誘發(fā)癌癥，該類(lèi)物質(zhì)侵入人體后會(huì)危害內(nèi)分泌系統(tǒng)，影響激素在體內(nèi)的平衡。血液 中高濃度的溴化阻燃劑P B B或P B D E將對(duì)人體的肝臟、甲狀激素的分泌、繁殖等系統(tǒng)造 成惡劣影響。2012年10月19日，英國(guó)食品標(biāo)準(zhǔn)局繼歐盟食品安全局(EFSA)發(fā)布了有關(guān)溴化 阻燃劑的意見(jiàn)之后，英國(guó)食品標(biāo)準(zhǔn)局將就食品中的溴化阻燃劑征求相關(guān)研究。2014年3月5 日，歐盟就食品中溴化阻燃劑的痕量監(jiān)控發(fā)布委員會(huì)建議2014/118/EU，要求成員國(guó)在2014 和2015年監(jiān)控食品中的溴化阻燃劑，并對(duì)抽樣程序、不同食品中溴化阻燃劑的監(jiān)控種類(lèi)和 定量限、分析方法、報(bào)告方式作了規(guī)定。
[0003] 我國(guó)現(xiàn)在關(guān)于電子電器產(chǎn)品中多溴聯(lián)苯和多溴聯(lián)苯醚的檢測(cè)方法研究較多，但對(duì) 食品中溴化阻燃劑殘留檢測(cè)較少進(jìn)行相關(guān)研究。QuEChERS(Quick，Easy，Cheap，Effective， RuggedandSafe)方法快速、簡(jiǎn)便、成本低廉、易于操作，已逐步被應(yīng)用于農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)。分 散液液微萃取技術(shù)(DLLME)集采樣、濃縮于一體，具有簡(jiǎn)單、快速、成本低、對(duì)環(huán)境友好、富集 倍數(shù)高等優(yōu)點(diǎn)。 【
【發(fā)明內(nèi)容】
】
[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題填補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的空白，提供一種QuEChERS-DLLME-GC-MS/MS聯(lián)用測(cè)定食用菌中溴化阻燃劑的檢測(cè)方法。本發(fā)明方法高效、快速、成本低、操作簡(jiǎn)單 等優(yōu)勢(shì)，準(zhǔn)確度和精密度好。
[0005] 本發(fā)明為實(shí)現(xiàn)上述目的，采用以下技術(shù)方案：
[0006] -種測(cè)定食用菌中溴化阻燃劑的分析方法，其特征在于包括以下步驟：
[0007] a、制備標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確稱取適量的3-溴聯(lián)苯醚、3，4 二溴聯(lián)苯醚、2，4，4 三溴聯(lián) 苯醚、2,3'，4,4'_四溴聯(lián)苯醚、2,2'，3,4,4'_五溴聯(lián)苯醚、2,2'，3,4,4'，5'_六溴聯(lián)苯醚、2， 3,3'，4,4'，5'，6_七溴聯(lián)苯醚、2,3,3'，4,4'，5,5'，6_八溴聯(lián)苯醚、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'， 6_九溴聯(lián)苯醚、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'，6,6'_十溴聯(lián)苯醚、2-溴聯(lián)苯、2,5_二溴聯(lián)苯、2,4,6-三溴聯(lián)苯、2,2'，5'，5'_四溴聯(lián)苯、2,2'，4,5'，6_五溴聯(lián)苯、2,2'，4,4'，6,6'_六溴聯(lián)苯、2， 3,3'，4,4'，5,5'_七溴聯(lián)苯、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'_八溴聯(lián)苯、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'，6_九 溴聯(lián)苯、十溴聯(lián)苯標(biāo)準(zhǔn)品置于一個(gè)50mL容量瓶中，并用異辛烷定容至刻度，配制成濃度為10 yg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液備用；
[0008] b、樣品的QuEChERS提取和凈化:稱取2.00g食用菌樣品于50mL高速離心管中，加入 10mL水，再加入10mL乙腈和0.25g氯化鈉，禍旋震蕩5min，以15000r/min，溫度為5°C離心 lOmin，上層液轉(zhuǎn)移至已提前放入0.05g C18、0.04g正丙基乙二胺(PSA)、0.5g MgS04的15mL 離心管中，渦旋震蕩5min，以15000r/min，溫度為5°C離心3min，上清液轉(zhuǎn)入30mL玻璃管中 (1);下層溶液轉(zhuǎn)移至15mL離心管(2)中進(jìn)行分散液液微萃取處理；
[0009] C、分散液液微萃取提取:將l.OmL丙酮(分散劑)和30yL四氯乙烷(萃取劑)混合，用 lmL的玻璃注射器迅速注入15mL離心管（2)溶液中，輕晃離心管，混合形成水、丙酮、四氯乙 烷的乳濁液，以4000r/min離心2min，用50yL微型注射器移取15mL離心管（2)中離心后的沉 積于30mL玻璃管（1)中，進(jìn)行濃縮；
[0010] d、濃縮:將30mL玻璃管（1)中合并的樣品提取液在40°C下用平行定量濃縮儀減壓 濃縮至干，以1. OmL正己烷復(fù)溶，過(guò)0.2μπι濾膜，供氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定；
[0011] e、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀分析:氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜儀;色譜:DB-5HT色譜柱 (15m X 0.25mm X 0. Ιμπι);進(jìn)樣方式:不分流進(jìn)樣，分流流量:50mL/min，不分流時(shí)間：lmin;進(jìn) 樣口溫度：280°C，；柱溫采用程序升溫:初始溫度120°C，保持2min，以20°C/min升到320 °C， 以5°C/min升到340°C ;流速1.5mL/min;進(jìn)樣體積：lyL;電子轟擊離子(El) :70eV;離子源溫 度:240 °C ;傳輸線溫度:300 °C ;溶劑延遲時(shí)間：2.9min;碰撞氣(Ar)壓力：1.5mTorr;掃描模 式：定時(shí)選擇性反應(yīng)監(jiān)測(cè)（timing selective reation monitoring，SRM)模式；定量方法： 峰面積外標(biāo)法定量。
[0012]各目標(biāo)化合物的質(zhì)量分析參數(shù)見(jiàn)表1:
[0013]表1:各化合物質(zhì)量分析參數(shù) 序號(hào)化合物 娜時(shí)伺，T_碰^量 /mm /(m/z) /V) 231.91 151.88* 15 I …設(shè)聯(lián)木(PBBI) 3 02 233.92 151.84 15 ，抑、247.98 140,%^ 15 :2 -溴聯(lián)苯醚(PBDEsl) 3.03 V ' 249.98 140.96 15 1 iS7 3 二麵苯賺腿2) 474 329；6〇 220.9, 15 4 1馨(PBB2) 4.86 3 丨丨.8〇 ]5 丨資 313.80 151.83 15 r _______________________ r 389.77 310,99" 15 5 -Uk 乂 (PBBJ) 5.04 391.80 311.01 15 4〇S X〇 ?4S Qs 7.5 6 三溴聯(lián)苯醚(PBDEs3) 5,97 v 7 407.77 247,94 15 t,rl,, ,, , " 309,80 149.76- 22 「 ^ 7 叫漢 6.25
[0014] 469.76 309.88 25 RO 9 I o 00 i c 8:四漠聯(lián)苯醚(PBDEs4) 7.14 二::上= , 485.74 325.82* 15 了-響似#…^、 468.72 389.96" 10 9 五溴聯(lián)苯(ΡΒΒ5) 7.42 549.75 469.12 15 f、占 "、，，4 τ>,、 405,53 296.83 20 10 五溴聯(lián)苯醚(PBDES5 8.3 ^ 565.49 405.86" 20 467.66 307.9522 II 六如Κ本 ΡΒΒ6) 8.49 、 627.85 547.29 10 、，…lf" I ι.τ"ι"τ、Γ?Γ、「，、 48.),60 324.0 / 15 12 ^臭聯(lián)本醚，祕(mì)）9 16 643.54 483.76^ 25 ,....... 545.70 385.67* 20 13 比城 P_ 9·64 626.79 546,5 15 Αη 4S4 14 七溴聯(lián)苯醚(PBDEs7) 10.06 :二 ；_ f 723.61 564.0S 15 15 八溴聯(lián)苯(PBB8) 10.70 704.78 625,62* 15 785.85 704.78 20 641 %丨0丨 丨8 16 A 嫌?(PBDEsS) 10 83 二= 799,72 639.92" 22 ,,, , v 784.83 705.78* 20 17 凡說(shuō)収笨(PBB9) 11 31 863.92 784.83 20
[0015] 18 ,165 1^ η ^9；； Λ , ^ 783.86 623.68* 2.0 19 ·)>?^^(ΡΒΒ10) 1 S5 1 ' 944.75 785.52 28 ，伽W 801,70 641.55* V 20 十設(shè)i ;j'::M'(PBDEsiO) 12.51 v_ 958.80 801.98 2)
[0016] 注:帶為定量離子。
[0017] 本發(fā)明中的3-溴聯(lián)苯醚、3，4 ' -二溴聯(lián)苯醚、2，4，4 ' -三溴聯(lián)苯醚、2，3 '，4，4 ' -四溴 聯(lián)苯醚、2,2'，3,4,4'_五溴聯(lián)苯醚、2,2'，3,4,4'，5'_六溴聯(lián)苯醚、2,3,3'，4,4'，5'，6_七溴 聯(lián)苯醚、2,3,3'，4,4'，5,5'，6_八溴聯(lián)苯醚、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'，6_九溴聯(lián)苯醚、2,2'，3， 3'，4,4'，5,5'，6,6'_十溴聯(lián)苯醚(聯(lián)苯醚類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)于美國(guó)AccuStandard公司混合標(biāo)準(zhǔn)品 溶液，濃度為50yg/mL); 2-溴聯(lián)苯標(biāo)、2，5-二溴聯(lián)苯、2，4，6-三溴聯(lián)苯、2，2'，5 '，5 ' -四溴聯(lián) 苯、2，2 '，4，5 '，6-五溴聯(lián)苯標(biāo)準(zhǔn)品、2，2 '，4，4 '，6，6 ' -六溴聯(lián)苯(聯(lián)苯類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)品均購(gòu)于德國(guó) Dr.公司）、2,3,3'，4,4'，5,5'_七溴聯(lián)苯、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'_八溴聯(lián)苯、2,2'，3,3'，4， 4'，5,5'，6-九溴聯(lián)苯、十溴聯(lián)苯標(biāo)準(zhǔn)品（均購(gòu)于加拿大Wellington Laboratories公司）。
[0018] 其中，2,3,3'，4,4'，5,5'_七溴聯(lián)苯、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'_八溴聯(lián)苯、2,2'，3， 3'，4,4'，5,5'，6_九溴聯(lián)苯、十溴聯(lián)苯標(biāo)準(zhǔn)品具體為2,3,3'，4,4'，5,5'_七溴聯(lián)苯異辛烷溶 液、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'_八溴聯(lián)苯異辛烷溶液、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'，6_九溴聯(lián)苯異辛 烷溶液、十溴聯(lián)苯異辛烷溶液，即以異辛烷為溶劑配制的標(biāo)準(zhǔn)品。
[0019] 本發(fā)明步驟a中，配制的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度是指其中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度均為 10yg/mL。冷凝溫度為0°C;真空度采用梯度下降的方式300mbar 0.1h，100mbar O.lh， 30mbar濃縮至干。
[0020] 本發(fā)明濃縮步驟中，
[0021]本發(fā)明中的氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀為T(mén)SQ Quantum XLS系列氣相色譜-三重四極桿 質(zhì)譜聯(lián)用儀(配Xcalibur數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，美國(guó)賽默飛世爾公司）。
[0022]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明有如下優(yōu)點(diǎn)：
[0023] 1、采用本方法測(cè)定食用菌中溴化阻燃劑，靈敏度高，檢測(cè)限為0.48yg/kg~50yg/ kg〇
[0024] 2、本方法將QuEChERS和分散液液微萃取技術(shù)同時(shí)運(yùn)用于食用菌中溴化阻燃劑的 檢測(cè)，彌補(bǔ)了單一的提取方法檢測(cè)食用菌中溴化阻燃劑種類(lèi)少的不足。
[0025] 3、與傳統(tǒng)的檢測(cè)方法相比，本發(fā)明簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確、靈敏度高、精密度好，適用于 大批量檢測(cè)食用菌樣品。 【【附圖說(shuō)明】】
[0026]圖1是濃度為0.5yg/mL溴化阻燃劑標(biāo)準(zhǔn)品的總離子流圖；
[0027]圖2是陰性空白樣品總離子流圖；
[0028]圖3是陰性樣品加標(biāo)總離子流圖。 【【具體實(shí)施方式】】
[0029]以下結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步更詳細(xì)的說(shuō)明。
[0030]本發(fā)明首先確定最優(yōu)條件的控制參數(shù)。影響QuEChERS效率的主要因素包括：萃取 溶劑選擇和吸附劑的優(yōu)化。影響分散液液微萃取(DLLME)效率的主要因素包括:萃取劑的類(lèi) 型和用量、分散劑的用量和鹽濃度的影響。
[0031] QuEChERS萃取溶劑的選擇:含水率是QuEChERS萃取的重要參數(shù)。QuEChERS最初的 設(shè)計(jì)是針對(duì)水果、蔬菜、生物體等含水率超過(guò)75%的環(huán)境基質(zhì)，萃取溶劑選取了不同比例乙 腈水混合溶劑。經(jīng)試驗(yàn)在只加乙腈的情況下，20種溴化阻燃劑回收率均不足30%;加入50% 水后，回收率為80 %~108 %。
[0032] QuEChERS吸附劑的優(yōu)化：目前常用的吸附劑主要有C18、PSA(正丙基乙二胺)和GCB (石墨化炭黑）X18比較適合去除脂類(lèi)等疏水性雜質(zhì)，但是也有可能會(huì)去除目標(biāo)物部分多溴 聯(lián)苯醚化合物;PSA是一種弱陰離子交換劑，主要用于去除脂肪酸，這些干擾物在ESI負(fù)離子 模式下對(duì)目標(biāo)物產(chǎn)生嚴(yán)重的離子抑制現(xiàn)象，但是過(guò)量使用PSA會(huì)引起萃取液pH值上升，目標(biāo) 物靈敏度下降;GCB主要用于去除色素類(lèi)物質(zhì)，對(duì)于芳香族化合物具有較強(qiáng)的去除能力。GCB 的加入雖然有助于萃取液更澄清，但是目標(biāo)物回收率明顯降低，因此，不加入GCB;MgS04主 要用于吸附萃取溶劑乙腈中的水，最終確定加入〇.〇5g C18(優(yōu)化范圍0.02~0.20g)、0.04g PSA(優(yōu)化范圍0 · 01~0 · 06g)和0 · 5g MgS04(優(yōu)化范圍0 · 1~1 · 0g)去除干擾物、保證靈敏度 的最佳選擇。
[0033]分散液液微萃取(DLLME)萃取劑的類(lèi)型和用量的確定考察了不同萃取劑(氯苯、四 氯乙烷、二氯甲烷和三氯甲烷)對(duì)回收率的影響，每組實(shí)驗(yàn)平行測(cè)定三次。結(jié)果表明，四氯乙 烷作為萃取劑對(duì)目標(biāo)物的回收率達(dá)到最大。二氯甲烷與分散劑無(wú)法形成穩(wěn)定的兩相體系； 相同體積下不同的萃取劑所形成的沉積相的體積液不同，沉積相體積四氯乙烷為30yL，氯 苯為40yL，三氯甲烷為35yL，實(shí)驗(yàn)表明，四氯乙烷有較高的回收率，萃取效果最好，因此選用 四氯乙烷作為萃取劑。
[0034] 分散劑的用量考察了丙酮體積分別為0 · 30、0 · 50、0 · 75、1 · 00、1 · 25和1 · 50mL時(shí)對(duì) 萃取回收率的影響（四氯乙烷體積30.Ομυ，試驗(yàn)結(jié)果顯示萃取回收率隨丙酮體積的增加而 增大，在1.0m L時(shí)達(dá)到最大，隨著丙酮體積的進(jìn)一步增加回收率反而減小。這主要是由于丙 酮體積小于1. 〇m L時(shí)，萃取劑不能很好地分散在水溶液中，傳質(zhì)效果差，萃取效率低;而當(dāng) 丙酮體積大于1. 〇m L時(shí)，目標(biāo)化合物在水溶液中的溶解度增大，使其不易被四氯乙烷萃取， 故回收率下降。因此，選擇分散劑丙酮的最佳體積為1.0m L。
[0035]鹽濃度的影響：水溶液中無(wú)機(jī)鹽質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)目標(biāo)物的萃取效率有一定影響。方法 中QuEChERS和分散液液微萃取(DLLME)都要求加入一定量鹽，這可能是因?yàn)榧欲}增加離子 強(qiáng)度，會(huì)降低目標(biāo)化合物在水相的溶解度，提高其在有機(jī)相的分配系數(shù);但當(dāng)鹽濃度過(guò)大 時(shí)，樣品溶液的粘度變大，目標(biāo)物與鹽離子之間的靜電作用力增強(qiáng)，導(dǎo)致其傳質(zhì)能力降低， 從而降低了回收率。方法驗(yàn)證向提取溶液中加入NaCl (0.00~0.5g)，考察了鹽效應(yīng)對(duì)回收 率的影響。實(shí)驗(yàn)表明，在加入ο. 00~ο. 25g的NaCl時(shí)，回收率隨著鹽濃度的增加而增加，并且 在加入0.25g Na C1時(shí)回收率最大;再繼續(xù)加鹽，回收率降低。因此，本實(shí)驗(yàn)選擇加入0.25g 的NaCl。
[0036] 濃縮條件的優(yōu)化:多溴聯(lián)苯醚和多溴聯(lián)苯具有持久性有機(jī)污染物的特征，方法中 需要濃縮的提取液含有最多的是乙腈，其次是四氯乙烷、丙酮和極少量的水，由于乙腈沸點(diǎn) 較高，用氮吹濃縮或旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮時(shí)間都比較長(zhǎng)，且混合溶液中還含有極少量的水難以完 全蒸干，影響最后結(jié)果的準(zhǔn)確性。長(zhǎng)時(shí)間的高溫條件下，目標(biāo)化合物也會(huì)發(fā)生一定的降解。 本方法選擇平行樣品定量濃縮儀進(jìn)行樣品提取液的減壓濃縮，并對(duì)濃縮的條件進(jìn)行摸索， 確定濃縮溫度為40°C;冷凝溫度為0°C;真空度采用梯度下降的方式（300mbar O.lh， lOOmbar 0. lh，30mbar濃縮至干），該方法可以一次同時(shí)處理24份樣品提取液，完全蒸干僅 需2.0h。
[0037] 實(shí)施例1:
[0038] (1 )、標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:準(zhǔn)確稱取適量的3-溴聯(lián)苯醚、3，4 二溴聯(lián)苯醚、2，4，4 三溴 聯(lián)苯醚、2,3'，4,4'_四溴聯(lián)苯醚、2,2'，3,4,4'_五溴聯(lián)苯醚、2,2'，3,4,4'，5'_六溴聯(lián)苯醚、 2,3,3'，4,4'，5'，6_七溴聯(lián)苯醚、2,3,3'，4,4'，5,5'，6_八溴聯(lián)苯醚、2,2'，3,3'，4,4'，5， 5'，6-九溴聯(lián)苯醚、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'，6,6'_十溴聯(lián)苯醚(購(gòu)于美國(guó)AccuStandard公司 混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液，濃度為50yg/mL); 2-溴聯(lián)苯、2，5-二溴聯(lián)苯、2，4，6-三溴聯(lián)苯、2，2 '，5 '， 5'_四溴聯(lián)苯、2,2'，4,5'，6_五溴聯(lián)苯、2,2'，4,4'，6,6'_六溴聯(lián)苯(購(gòu)于德國(guó)Dr.公司）、2， 3,3'，4,4'，5,5'_七溴聯(lián)苯異辛烷溶液、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'_八溴聯(lián)苯異辛烷溶液、2， 2'，3,3'，4,4'，5,5'，6_九溴聯(lián)苯異辛烷溶液、十溴聯(lián)苯異辛烷標(biāo)準(zhǔn)品溶液于50mL容量瓶 中，并用異辛烷定容至刻度，配制成濃度為l〇yg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液備用；
[0039] (2)、樣品的QuEChERS提取和凈化:稱取2.00g食用菌樣品于50mL高速離心管中，加 入10mL水，再加入10mL乙腈和0.5g氯化鈉，禍旋震蕩5min，以15000r/min，溫度為5 °C離心 lOmin。上清液轉(zhuǎn)移至已提前放入0.058(：18、0.048正丙基乙二胺(？34)、0.58]\%304的151^離 心管中，渦旋震蕩5min，以15000r/min，溫度為5°C離心3min，上清液轉(zhuǎn)入30mL玻璃管中，下 層溶液轉(zhuǎn)移至15mL離心管中進(jìn)行分散液液微萃取處理；
[0040] (3)、分散液液微萃取提取:將l.OmL丙酮(分散劑)和30yL四氯乙烷(萃取劑)混合， 用lmL的玻璃注射器迅速注入(2)15mL離心管溶液中，輕晃離心管，混合形成水、丙酮、四氯 乙烷的乳濁液，以4000r/min離心2min，用50yL微型注射器移取離心后的沉積相于（2)30mL 玻璃管，進(jìn)行濃縮；
[0041] (4)、濃縮:合并的（2)和（3)樣品提取液在40°C下用平行定量濃縮儀減壓濃縮至 干，以1. OmL正己烷復(fù)溶，過(guò)0.2μπι濾膜，供氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定；
[0042] (5)、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀分析：TSQ Quantum XLS系列三重四極桿質(zhì)譜儀（配 Xcalibur數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，美國(guó)賽默飛世爾公司）；色譜:DB-5HT色譜柱（15mX 0.25mmX 0.1μ m);進(jìn)樣方式:不分流進(jìn)樣，分流流量:50mL/min，不分流時(shí)間：lmin;進(jìn)樣口溫度:280°C，；柱 溫采用程序升溫:初始溫度120°C，保持2min，以20°C/min升到320°C，以5°C/min升到340°C ; 流速1.5mL/min;進(jìn)樣體積：lyL;電子轟擊離子源(El): 70eV;離子源溫度:240°C ;傳輸線溫 度:300°C ;溶劑延遲時(shí)間：2.9min;碰撞氣(Ar)壓力：1.5mtorr;掃描模式:定時(shí)選擇性反應(yīng) 監(jiān)測(cè)（timing selective reation monitoring，SRM)模式；定量方法：峰面積外標(biāo)法定量。
[0043] 方法線性范圍、相關(guān)系數(shù)和精密度試驗(yàn)：
[0044] 將（1)的混合標(biāo)準(zhǔn)工作系列溶液按照實(shí)驗(yàn)方法用GC-MS/MS進(jìn)行測(cè)定，并繪制標(biāo)準(zhǔn) 工作曲線，以3倍信噪比（S/N)對(duì)應(yīng)的目標(biāo)物濃度作為檢測(cè)限(L0D)，20種目標(biāo)化合物組分的 線性范圍、線性方程及相關(guān)系數(shù)R 2、檢測(cè)限(L0D)見(jiàn)表2。通過(guò)對(duì)加標(biāo)陰性食用菌樣品的重復(fù) 檢驗(yàn)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD) (η = 6)為：1.20~6.25 %，表3給出了加標(biāo)陰性樣品的精密度實(shí)驗(yàn) 結(jié)果。
[0045] 表2:20種目標(biāo)化合物的線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)
[0047]表3陰性樣品加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差
[0050]檢測(cè)中，將lyL濃度為0.5yg/mL溴化阻燃劑混合標(biāo)準(zhǔn)品注入氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀 TSQ Quantum XLS，按照儀器條件e進(jìn)行檢測(cè)，得到圖譜1;取食用菌陰性樣品，根據(jù)本發(fā)明的 前處理方法進(jìn)行處理，樣品溶液注入氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀中，按照儀器條件e進(jìn)行檢測(cè)，得 到圖譜2;取食用菌陰性樣品2.00g，加入0.25yg溴化阻燃劑混合標(biāo)準(zhǔn)品，根據(jù)本發(fā)明的前處 理方法進(jìn)行處理，樣品溶液注入氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀中，按照儀器條件e進(jìn)行檢測(cè)，得到圖 譜3。
[0051 ]本發(fā)明將QuEChERS和分散液液微萃取技術(shù)同時(shí)運(yùn)用于食用菌中溴化阻燃劑的檢 測(cè)，把兩種提取凈化技術(shù)的優(yōu)勢(shì)進(jìn)行了互補(bǔ)，方法具有高效、快速、成本低、操作簡(jiǎn)單等優(yōu) 勢(shì)，準(zhǔn)確度和精密度均符合食品對(duì)污染物檢測(cè)分析的要求，適用于各食品檢測(cè)機(jī)構(gòu)對(duì)食用 菌中溴化阻燃劑的日常監(jiān)控。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種測(cè)定食用菌中溴化阻燃劑的分析方法，其特征在于包括以下步驟： a、 制備標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確稱取適量的3-溴聯(lián)苯醚、3，4 二溴聯(lián)苯醚、2，4，4 三溴聯(lián)苯 醚、2,3'，4,4'_四溴聯(lián)苯醚、2,2'，3,4,4'_五溴聯(lián)苯醚、2,2'，3,4,4'，5'_六溴聯(lián)苯醚、2,3， 3'，4,4'，5'，6_七溴聯(lián)苯醚、2,3,3'，4,4'，5,5'，6_八溴聯(lián)苯醚、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'，6-九溴聯(lián)苯醚、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'，6,6'_十溴聯(lián)苯醚、2-溴聯(lián)苯、2,5_二溴聯(lián)苯、2,4,6_三 溴聯(lián)苯、2,2'，5'，5'_四溴聯(lián)苯、2,2'，4,5'，6_五溴聯(lián)苯、2,2'，4,4'，6,6'_六溴聯(lián)苯、2,3， 3'，4,4'，5,5'_七溴聯(lián)苯、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'_八溴聯(lián)苯、2,2'，3,3'，4,4'，5,5'，6_九溴 聯(lián)苯、十溴聯(lián)苯標(biāo)準(zhǔn)品置于一個(gè)50mL容量瓶中，并用異辛烷定容至刻度，配制成濃度為10μ g/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液備用； b、 樣品的QuEChERS提取和凈化:稱取2.00g食用菌樣品于50mL高速離心管中，加入10mL 水，再加入10mL乙腈和0.25g氯化鈉，禍旋震蕩5min，以15000r/min，溫度為5°C離心10min， 上層液轉(zhuǎn)移至已提前放入〇.〇5g C18、0.04g正丙基乙二胺、0.5g MgS04的15mL離心管中，渦 旋震蕩5min，以15000r/min，溫度為5 °C離心3min，上清液轉(zhuǎn)入30mL玻璃管（1)中；下層溶液 轉(zhuǎn)移至15mL離心管(2)中進(jìn)行分散液液微萃取處理； c、 分散液液微萃取提取:將l.OmL丙酮和30yL四氯乙烷混合，用lmL的玻璃注射器迅速 注入15mL離心管（2)溶液中，輕晃離心管，混合形成水、丙酮、四氯乙烷的乳濁液，以4000r/ min離心2min，用50yL微型注射器移取離心后的沉積于30mL玻璃管（1)中，進(jìn)行濃縮； d、 濃縮:將30mL玻璃管（1)中合并的樣品提取液在40°C下用平行定量濃縮儀減壓濃縮 至干，以1. OmL正己烷復(fù)溶，過(guò)0.2μπι濾膜，供氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定； e、 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀分析:氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜儀;色譜:DB-5HT色譜柱（15m X0.25mmX0. Ιμπι);進(jìn)樣方式:不分流進(jìn)樣，分流流量:50mL/min，不分流時(shí)間：lmin;進(jìn)樣口 溫度：280 °C，；柱溫采用程序升溫:初始溫度120°C，保持2min，以20 °C/min升到320 °C，以5 °C/min升到340°C ;流速1.5mL/min;進(jìn)樣體積：lyL;電子轟擊離子源(El) :70eV;離子源溫 度:240°C ;傳輸線溫度:300°C ;溶劑延遲時(shí)間：2.9min;碰撞氣壓力：1.5mTorr;掃描模式:定 時(shí)選擇性反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式;定量方法:峰面積外標(biāo)法定量。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定食用菌中溴化阻燃劑的分析方法，其特征在于所述 混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度是指其中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度均為1 〇yg/mL。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定食用菌中溴化阻燃劑的分析方法，其特征在于所述 濃縮步驟中，冷凝溫度為〇°C;真空度采用梯度下降的方式300mbar 0.1h，100mbar O.lh， 30mbar濃縮至干。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定食用菌中溴化阻燃劑的分析方法，其特征在于所述 的碰撞氣為Ar。
【文檔編號(hào)】G01N30/06GK106018643SQ201610506731
【公開(kāi)日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年6月28日
【發(fā)明人】張憲臣, 盧俊文, 楊芳, 李浩洋, 李蓉, 華洪波, 張朋杰, 劉益鋒
【申請(qǐng)人】中山出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心