一種腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法。所述測(cè)定方法采用槳法進(jìn)行釋放度測(cè)定，其中，溶出介質(zhì)為pH6.0±0.05的磷酸鹽緩沖液，攪拌槳的轉(zhuǎn)速為每分鐘50～75轉(zhuǎn)。相對(duì)于現(xiàn)有的測(cè)定方法，本發(fā)明的測(cè)定方法具有很強(qiáng)的區(qū)分力，為處方開發(fā)、質(zhì)量控制及臨床用藥提供提示性信息。
【專利說明】
一種腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 帕羅西汀是一種選擇性5-羥色胺再吸收抑制劑型的抗抑郁藥，屬于第三代抗抑郁 藥，副作用小。該藥1997年在美國(guó)上市，其化學(xué)名為(-)-(33,43)-4-(4-氟苯基)-3-[[3,4-(亞甲氧基)苯氧基]甲基]哌啶。在藥物中帕羅西汀通常以鹽酸鹽半水合物或鹽酸鹽無水物 等形式存在，其鹽酸鹽的結(jié)構(gòu)式如下：
[0004] 但是由于帕羅西汀對(duì)胃產(chǎn)生一定的刺激，且使用周期長(zhǎng)。因此，制備成腸溶緩釋片 是很有必要的。與普通的速釋劑型相比，該劑型可以使人體獲得平穩(wěn)的治療血藥濃度，并減 少胃腸道副反應(yīng)。
[0005] 在文獻(xiàn) CYP2D6and ABCBlgenetic variabi 1 ity : Influence on Paroxetine plasma level and therapeutic response;Ther Drug Monit 2008;474_482中報(bào)道了帕 羅西汀在個(gè)體間有很大的藥代動(dòng)力學(xué)差異性和多種多樣的反應(yīng)類型。此外，其藥代動(dòng)力學(xué) 差異性也受遺傳因素、年齡、性別、體重、給藥方法和肝損傷的影響。
[0006] 口服固體制劑在體內(nèi)只有溶出才能被機(jī)體吸收。帕羅西汀為生物藥劑學(xué)分類系統(tǒng) 的I類藥物，即高溶解性且口服后完全吸收。體內(nèi)外將具有很好的相關(guān)性，即在體外溶出的 特性可以反應(yīng)制劑在體內(nèi)的溶出行為。因此，需要建立一種合理的溶出度測(cè)定方法，科學(xué)客 觀的反應(yīng)制劑的質(zhì)量，并區(qū)分不同原料藥理化性質(zhì)、不同處方和不同工藝制備的樣品的質(zhì) 量差異，方可使藥品的安全性和有效性與原研藥相似。但是，鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片的溶 出方法僅被進(jìn)口藥品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)和美國(guó)藥典38版收載。
[0007] 進(jìn)口藥品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)中溶出方法為《中國(guó)藥典》2005年版二部附錄XD第二法方法2， 以O(shè).lmol/L鹽酸溶液750mL為溶劑，轉(zhuǎn)速為每分鐘150轉(zhuǎn)，依法操作2小時(shí)后取樣、測(cè)定，限度 不得過標(biāo)示量的1〇%。然后棄去上述溶液，加入口117.5七4 8(三羥甲基氨基甲烷）緩沖液 1000ml，轉(zhuǎn)速不變，繼續(xù)依法操作，在1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)與6小時(shí)時(shí)，取樣、測(cè)定。每片在1小 時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)與6小時(shí)時(shí)的釋放量應(yīng)分別為標(biāo)示量的0~20 %、20 %~45 %、60 %~90 % 和85%以上。
[0008] 《美國(guó)藥典》38版中溶出方法為溶出度〈711>項(xiàng)下的第一方法籃法，0.1m〇l/L鹽酸 溶液750mL為溶劑，轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn)，依法操作2小時(shí)后取樣、測(cè)定，限度不得過標(biāo)示量的 10 %。然后棄去上述溶液，加入pH7.5tris緩沖液lOOOmL，轉(zhuǎn)速不變，繼續(xù)依法操作，在2小 時(shí)、4小時(shí)與12小時(shí)時(shí)，取樣、測(cè)定。25mg規(guī)格的每片在2小時(shí)、4小時(shí)與12小時(shí)時(shí)的釋放量應(yīng) 分別為標(biāo)示量的10%~30%、40%~70%和80%以上。37.5mg規(guī)格的每片在2小時(shí)、4小時(shí)與 12小時(shí)時(shí)的釋放量應(yīng)分別為標(biāo)示量的20 %~45 %、60 %~85 %和80 %以上。
[0009] 對(duì)于腸溶片而言，起到酸性介質(zhì)中不釋放或少量釋放、堿性介質(zhì)中開始釋放的釋 放機(jī)理是通過具有耐酸性的腸溶衣膜進(jìn)行控制釋放。因此，上述兩種溶出度的測(cè)定方法都 經(jīng)過了酸性介質(zhì)才經(jīng)過堿性介質(zhì)，這樣就掩蓋了腸溶層對(duì)產(chǎn)品的釋放影響，不具有很好的 體外溶出的區(qū)分力效果，也就不能更好的區(qū)分產(chǎn)品之間的質(zhì)量差異。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 本發(fā)明主要目的就是提供一種合適的、具有很強(qiáng)區(qū)分力的腸溶緩釋片劑的釋放度 測(cè)定方法。該測(cè)定方法是通過實(shí)驗(yàn)研究確定的，能夠有效控制腸溶緩釋片劑(例如鹽酸帕羅 西汀腸溶緩釋片劑)的質(zhì)量指標(biāo)。
[0011] 本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
[0012] -種腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法，所述測(cè)定方法采用槳法進(jìn)行釋放度測(cè)定， 其中，溶出介質(zhì)為PH6.0±0.05的磷酸鹽緩沖液，攪拌槳的轉(zhuǎn)速為每分鐘50~75轉(zhuǎn)。
[0013]優(yōu)選地，所述攪拌槳的轉(zhuǎn)速為每分鐘50轉(zhuǎn)。
[0014]所述槳法為《中國(guó)藥典》2015年版四部"0900特性檢查法"項(xiàng)下的"0931溶出度與釋 放度測(cè)定法"項(xiàng)下的第二法槳法。
[0015] 本發(fā)明所述腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法中，除了上述條件之外，其他條件采 用與《中國(guó)藥典》2015年版四部"0900特性檢查法"項(xiàng)下的"0931溶出度與釋放度測(cè)定法"項(xiàng) 下的第二法槳法中相同的條件。
[0016] 所述測(cè)定方法中，在不同時(shí)間取樣后并補(bǔ)充溶出介質(zhì)，將所取樣品濾過，取續(xù)濾液 進(jìn)行測(cè)定(例如，注入高效液相色譜儀測(cè)定）。
[0017] 優(yōu)選地，所述測(cè)定方法中，取樣時(shí)間為2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)、16小時(shí) 與20小時(shí)時(shí)。
[0018] 優(yōu)選地，所述測(cè)定方法中，所述磷酸鹽緩沖液是將磷酸二氫鉀溶解于水中形成磷 酸二氫鉀水溶液，然后用〇. 2mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH6.0 ± 0.05。
[0019] 更優(yōu)選地，所述磷酸二氫鉀水溶液的濃度為0.2mol/L。
[0020]在一個(gè)具體實(shí)施方案中，所述磷酸鹽緩沖液制備方法為:稱取108.88g的磷酸二氫 鉀溶于4L水中形成磷酸二氫鉀水溶液，然后用0.2mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH6.0 ± 0.5。 [0021]優(yōu)選地，所述測(cè)定方法中，取腸溶緩釋片6粒，分別置于溶出杯中，每個(gè)溶出杯放置 1粒腸溶緩釋片，然后在每個(gè)溶出杯中添加上述溶出介質(zhì)l〇〇〇mL。
[0022]所述溶出杯是《中國(guó)藥典》2015年版四部"0900特性檢查法"項(xiàng)下的"0931溶出度與 釋放度測(cè)定法"中的第二法的溶出杯。
[0023]優(yōu)選地，所述測(cè)定方法中，所述溶出介質(zhì)使用之前加熱至42°C脫氣5分鐘。
[0024] 攪拌槳的速度影響藥物釋放的速度。若速度過慢，藥物將不能全部釋放;若速度過 快，就不具有區(qū)分力。
[0025] 優(yōu)選地，所述測(cè)定方法中，所述溶出介質(zhì)的溫度為37.5°C ± 0.5°C。
[0026]優(yōu)選地，所述腸溶緩釋片劑的外層具有腸溶層，且該腸溶層在pH5.5以上的溶出介 質(zhì)中溶解。
[0027]優(yōu)選地，所述腸溶緩釋片劑在20小時(shí)時(shí)的釋放度大于等于85%。
[0028] 優(yōu)選地，所述腸溶緩釋片劑為鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片。
[0029] 優(yōu)選地，所述鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片劑包括:包含含藥層和空白層的雙層片芯， 以及包覆所述雙層片芯的腸溶層。
[0030] 優(yōu)選地，以所述鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片劑的總重量計(jì)，各部分的重量百分比含 量如下：
[0031] 含藥層 50%~70%
[0032] 空白層 25%~40%
[0033] 腸溶層 5 %~20 %
[0034]其中，
[0035] 所述含藥層中：活性成分6 %~18 %、緩釋材料6 %~15 %、稀釋劑30 %~50 %、潤(rùn) 滑劑0.2%~1.5%、助流劑0~1 %;
[0036] 所述空白層中：粘合劑7 %~12 %、稀釋劑13 %~18 %、增塑劑4 %~8 %、潤(rùn)滑劑 0.1%~1%、助流劑0~1%;
[0037] 所述腸溶層包括腸溶材料、增塑劑和抗粘劑；以所述緩釋片劑的總重量計(jì)，所述腸 溶層包括腸溶材料4%~8 %、增塑劑1 %~5 %和抗粘劑0.1 %~1 % ;所述腸溶材料為尤特 奇，所述增塑劑為檸檬酸三乙酯，所述抗粘劑為滑石粉。
[0038] 在一個(gè)具體實(shí)施方案中，以所述鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片劑的總重量計(jì)，各組分 的重量百分比含量如下：
[0040]所述雙層片芯是通過分別將含藥層和空白層中的部分組分混勻加水制成顆粒，再 與潤(rùn)滑劑和助流劑混合通過壓制雙層片法制備而成。
[0041 ] 所述鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片劑也已在申請(qǐng)?zhí)枮镃N2016102661188,發(fā)明名稱為 "一種含有雙層片芯的緩釋片劑"的專利文獻(xiàn)中充分公開。該專利文獻(xiàn)的全部?jī)?nèi)容通過引用 的方式并入到本申請(qǐng)中。
[0042]在一個(gè)【具體實(shí)施方式】中，本發(fā)明提供鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片的釋放度測(cè)定方 法，所述方法包括以下步驟：
[0043] (1)溶出介質(zhì)的制備:將3500mL的0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液與392mL的0.2mol/L氫 氧化鈉溶液混合后，再加水稀釋至14L，搖勻，然后用0.2mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH6.0 土 〇. 5;使用前加熱至42°C脫氣5分鐘，所述0.2mol/L磷酸二氫鉀緩沖液的制備方法為:稱取 108.88g的磷酸二氫鉀溶于4L水中。
[0044] (2)取鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片6粒，分別置于《中國(guó)藥典》2015年版四部"0900特 性檢查法"項(xiàng)下的"0931溶出度與釋放度測(cè)定法"中的第二法的溶出杯中，每個(gè)溶出杯放置1 粒鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片，然后分別在溶出杯中添加上述制備的溶出介質(zhì)l〇〇〇mL，溶出 介質(zhì)溫度為37.5 °C± 0.5 °C，攪拌槳的轉(zhuǎn)速為每分鐘50~75轉(zhuǎn)，在2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小 時(shí)、12小時(shí)、16小時(shí)與20小時(shí)時(shí)，各取溶液5mL，并補(bǔ)充相同溫度、相同體積的溶出介質(zhì);取續(xù) 濾液作為供試品溶液。
[0045] (3)對(duì)照品溶液的制備：精密稱取鹽酸帕羅西汀半水合物對(duì)照品約25mg，置于 100mL量瓶中，加入5mL甲醇，超聲2分鐘使其溶解，用上述制備的溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖 勻，即得對(duì)照品母液;精密移取3mL對(duì)照品母液置于20mL量瓶中，用上述制備的溶出介質(zhì)稀 釋至刻度，搖勻，即得。
[0046] (4)高效液相色譜條件:Agilent高效液相色譜儀，色譜柱Agilent ZoRBAxTMS，4? 6 X 250mm，5wn，柱溫30°C，體積比為60:40:1的乙腈:pH4 ? 5緩沖液:三乙胺為流動(dòng)相，流速為 1. OmL/min，所述pH4.5緩沖液的制備方法為:將7.8g醋酸銨用純化水溶解并稀釋至200mL， 然后用冰醋酸調(diào)節(jié)pH到4.5，即得;紫外檢測(cè)器的測(cè)定波長(zhǎng)為295nm。
[0047] (5)液相色譜測(cè)定:分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液各40此，進(jìn)行高效液相色譜分 析;按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，分別計(jì)算出在不同時(shí)間的釋放度。
[0048] 本發(fā)明的測(cè)定方法應(yīng)用于藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，該方法操作簡(jiǎn)單、方便，靈敏度高， 可為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的確立提供關(guān)鍵技術(shù)依據(jù)，也為處方設(shè)計(jì)、生產(chǎn)控制及臨床用藥提供重要性 信息，具有明顯的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。相對(duì)于現(xiàn)有的測(cè)定方法，本發(fā)明的測(cè)定方法具有很 強(qiáng)的區(qū)分力，為處方開發(fā)、質(zhì)量控制及臨床用藥提供提示性信息。
【附圖說明】
[0049] 圖1為實(shí)施例1制備的腸溶緩釋片劑與原研藥在槳法，pH6.0磷酸鹽緩沖液溶出介 質(zhì)中，攪拌槳轉(zhuǎn)速為75轉(zhuǎn)/分鐘條件下的釋放度曲線。
[0050] 圖2為實(shí)施例1制備的腸溶緩釋片劑與原研藥在槳法，0.1N鹽酸中2小時(shí)后，繼續(xù)在 Tris緩沖液介質(zhì)中，攪拌槳轉(zhuǎn)速為150轉(zhuǎn)/分鐘條件下的釋放度曲線。
[0051] 圖3為實(shí)施例1制備的腸溶緩釋片劑與原研藥在籃法，0.1N鹽酸中2小時(shí)后，繼續(xù)在 Tr is緩沖液介質(zhì)中，轉(zhuǎn)籃轉(zhuǎn)速為100轉(zhuǎn)/分鐘條件下的釋放度曲線。
[0052]圖4為實(shí)施例1制備的腸溶緩釋片劑與原研藥在槳法，pH6.0磷酸鹽緩沖液溶出介 質(zhì)中，攪拌槳轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘條件下的釋放度曲線。
【具體實(shí)施方式】
[0053] 基于以上
【發(fā)明內(nèi)容】
的描述，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠全面地應(yīng)用本發(fā)明，所有相同原 理或類似的改動(dòng)均應(yīng)視為包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
[0054] 為了更好的理解和闡明本發(fā)明，以下就本發(fā)明提供的腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定 方法給出示例性說明，但其不應(yīng)被理解為對(duì)
【發(fā)明內(nèi)容】
的限制。
[0055] 以下實(shí)施例中所用設(shè)備儀器主要包括：
[0056] G20型濕法混合制粒機(jī);BSL-25型混合機(jī);GFSJ型粉碎機(jī);ZP10A型壓片機(jī);BGB-5F 高效包衣機(jī);RC806溶出儀。
[0057] 實(shí)施例1 [0058] 處方如表1所示：
[0059]表1:1000片鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片(37.5mg/片)處方
[0062] 制備方法：
[0063] 1)含藥層總混粉的制備：
[0064] 按照上表中處方量將鹽酸帕羅西汀、乳糖和緩釋材料羥丙甲基纖維素K4M置于濕 法混合制粒機(jī)中，設(shè)置攪拌速度為150~250轉(zhuǎn)/分，切割刀速度為2000~3000轉(zhuǎn)/分，干混后 逐漸加入適量純化水制成大小適宜的顆粒。制得的濕顆粒移至流化床中干燥，物料溫度為 50°C，之后過1.5mm的篩網(wǎng)得到含有鹽酸帕羅西汀的顆粒。將處方量的助流劑和潤(rùn)滑劑過20 目篩后和上述鹽酸帕羅西汀顆?；旌暇鶆?，備用。
[0065] 2)空白層總混粉的制備：
[0066] 按照上表中處方量將聚乙二醇、乳糖和羥丙甲基纖維素E5LV置于濕法混合制粒機(jī) 中，設(shè)置攪拌速度為150~250轉(zhuǎn)/分，切割刀速度為2000~3000轉(zhuǎn)/分，干混后逐漸加入適量 純化水制成大小適宜的顆粒。制得的濕顆粒移至流化床中干燥，物料溫度為50°C，之后過 1.5mm的篩網(wǎng)得到粒徑合適的空白顆粒。將處方量的助流劑和潤(rùn)滑劑過20目篩后和上述的 空白顆?；旌暇鶆?，備用。
[0067] 3)壓制片芯
[0068] 將上述含藥層總混粉和空白層總混粉按照處方量調(diào)節(jié)片重，調(diào)整壓片力壓制成雙 層片芯。
[0069] 4)包腸溶衣
[0070]將腸溶材料尤特奇L30D-55、增塑劑檸檬酸三乙酯、抗粘劑滑石粉分散于相應(yīng)介質(zhì) 中，攪拌均勻，混懸液包衣于上述雙層片芯上。
[0071] 實(shí)驗(yàn)例1(實(shí)施例1制備的腸溶緩釋片劑與原研藥在槳法，PH6.0磷酸鹽緩沖液介質(zhì) 中，攪拌槳轉(zhuǎn)速為75轉(zhuǎn)/分鐘條件下的釋放度測(cè)定）
[0072] 分別取實(shí)施例1制備的樣品和原研藥(原研藥的生產(chǎn)廠家為:GSK)進(jìn)行累計(jì)釋放度 測(cè)定，具體步驟如下：
[0073] (1)溶出介質(zhì)的制備:將3500mL的0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液與392mL的0.2mol/L氫 氧化鈉溶液混合后，再加水稀釋至14L，搖勻，然后用0.2mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH6.0 土 〇. 5。使用前加熱至42°C并脫氣5分鐘，所述0.2mol/L磷酸二氫鉀緩沖液的制備方法為:稱取 108.88g的磷酸二氫鉀溶于4L水中。
[0074] (2)取鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片6粒，分別置于《中國(guó)藥典》2015年版四部"0900特 性檢查法"項(xiàng)下的"0931溶出度與釋放度測(cè)定法"中的第二法的溶出杯中，每個(gè)溶出杯放置1 粒鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片，然后分別在溶出杯中添加上述制備的溶出介質(zhì)l〇〇〇mL，溶出 介質(zhì)溫度為37.5 °C ± 0.5 °C，攪拌槳的轉(zhuǎn)速為每分鐘75轉(zhuǎn)，在2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)、12 小時(shí)、16小時(shí)與20小時(shí)時(shí)，各取溶液5mL，并補(bǔ)充相同溫度、相同體積的溶出介質(zhì)。取續(xù)濾液 作為供試品溶液進(jìn)行分析。
[0075] (3)對(duì)照品溶液的制備：精密稱取鹽酸帕羅西汀半水合物對(duì)照品約25mg，置于 100mL量瓶中，加入5mL甲醇，超聲2分鐘使其溶解，用上述制備的溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖 勻，即得對(duì)照品母液。精密移取3mL對(duì)照品母液置于20mL量瓶中，用上述制備的溶出介質(zhì)稀 釋至刻度，搖勻，即得。
[0076] (4)高效液相色譜條件:Agilent高效液相色譜儀，色譜柱Agilent ZoRBAxTMS，4.6 X 250mm，5wn，柱溫30°C，體積比為60:40:1的乙腈:pH4 ? 5緩沖液:三乙胺為流動(dòng)相，流速為 1. OmL/min，所述pH4.5緩沖液的制備方法為:將7.8g醋酸銨用純化水溶解并稀釋至200mL， 然后用冰醋酸調(diào)節(jié)pH到4.5，即得;紫外檢測(cè)器的測(cè)定波長(zhǎng)為295nm。
[0077] (5)液相色譜測(cè)定:分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液各40此，進(jìn)行高效液相色譜分 析。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，分別計(jì)算出在不同時(shí)間的釋放度。
[0078]實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖1。圖1為實(shí)施例1制備的腸溶緩釋片劑與原研藥在槳法，PH6.0磷酸 鹽緩沖液介質(zhì)中，攪拌槳轉(zhuǎn)速為75轉(zhuǎn)/分鐘條件下的溶出曲線。
[0079]由圖1可知，用上述釋放度測(cè)定法，實(shí)施例1制備的鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片的釋 放度曲線和原研藥的釋放度曲線趨勢(shì)相同，但實(shí)施例1制備的樣品釋放慢于原研藥。說明該 釋放度測(cè)定方法可以區(qū)分制劑的差異，可用于鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片的質(zhì)量評(píng)價(jià)。
[0080] 實(shí)驗(yàn)例2(實(shí)施例1制備的腸溶緩釋片劑與原研藥在槳法，0.1N鹽酸中2小時(shí)后，繼 續(xù)在Tris緩沖液介質(zhì)中，攪拌槳轉(zhuǎn)速為150轉(zhuǎn)/分鐘條件下的釋放度測(cè)定）
[0081] 分別取實(shí)施例1制備的樣品和原研藥(原研藥的生產(chǎn)廠家為:GSK)進(jìn)行累計(jì)釋放度 測(cè)定，具體步驟如下：
[0082] (1)溶出介質(zhì)的制備:稱取Tris 6.06g溶于1 OOOmL水中，加鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH7.5，得 到pH7.5的Tris緩沖液;精密量取鹽酸9mL置于1000mL容量瓶中，加純化水稀釋至刻度，混 勻，即得0. lmol/L鹽酸溶液。使用前加熱至42.0°C并脫氣5分鐘。
[0083] (2)供試品溶液的制備：
[0084] 酸中取鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片6粒，分別置于《中國(guó)藥典》2015年版四部"0900特 性檢查法"項(xiàng)下的"0931溶出度與釋放度測(cè)定法"中的第二法的溶出杯中，分別向1L體積的 溶出杯中添加上述制備的〇 . lmol/L鹽酸溶液介質(zhì)750mL，釋放介質(zhì)的溫度為37.5°C ±0.5 °C，攪拌槳的轉(zhuǎn)速為每分鐘150轉(zhuǎn)，在2小時(shí)時(shí)，取5mL溶液，濾過，續(xù)濾液為供試品溶液； [0085] 緩沖液中棄去上述溶出杯中酸液，用蒸餾水洗凈后立即加入0.05mo 1/L三羥甲基 氨基甲烷緩沖液(Tris緩沖液）1000mL，攪拌槳轉(zhuǎn)速為每分鐘150轉(zhuǎn)，繼續(xù)依法操作，在2小 時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)和10小時(shí)時(shí)，各取溶液5mL，并即時(shí)補(bǔ)充相同溫度、相同體積的溶出 介質(zhì)，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。
[0086] (3)對(duì)照品溶液的制備:精密稱取鹽酸帕羅西汀對(duì)照品適量，加入甲醇2mL使溶解， 加入0. lmo 1/L鹽酸溶液或加入pH7.5Tris緩沖液制成每lmL中含帕羅西汀約5. lmg的溶液， 作為酸中的對(duì)照品溶液或緩沖液中的對(duì)照品溶液。
[0087] (4)高效液相色譜條件:Agilent高效液相色譜儀，色譜柱Agilent ZoRBAxTMS，4.6 X 250mm，5wn，柱溫30 °C，體積比為615: 385的pH5.5緩沖液：乙腈為流動(dòng)相，流速為1. OmL/ min，所述pH5.5緩沖液的制備方法為:將3.96g醋酸銨溶于615mL水中，加入10mL三乙胺，然 后用冰醋酸調(diào)節(jié)pH到5 ? 5，即得;紫外檢測(cè)器的測(cè)定波長(zhǎng)為295nm和340nm〇 [0088] (5)液相色譜測(cè)定:分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液各40此，進(jìn)行高效液相色譜分 析。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，分別計(jì)算出在不同時(shí)間的釋放度。
[0089] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖2。圖2為實(shí)施例1制備的腸溶緩釋片劑與原研藥在槳法，0.1N鹽酸中 2小時(shí)后，繼續(xù)在Tris緩沖液介質(zhì)中，攪拌槳轉(zhuǎn)速為150轉(zhuǎn)/分鐘條件下的溶出曲線。
[0090] 由圖2可知，用上述釋放度測(cè)定法，實(shí)施例1制備的鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片的釋 放度曲線和原研藥的釋放度曲線趨勢(shì)相同。但是該釋放度測(cè)定方法未能區(qū)分出兩種制劑的 差異。
[0091 ]實(shí)驗(yàn)例3(實(shí)施例1制備的腸溶緩釋片劑與原研藥在籃法，0.1N鹽酸中2小時(shí)后，繼 續(xù)在Tris緩沖液介質(zhì)中，轉(zhuǎn)籃轉(zhuǎn)速為100轉(zhuǎn)/分鐘條件下的釋放度測(cè)定）
[0092]分別取實(shí)施例1制備的樣品和原研藥(原研藥的生產(chǎn)廠家為:GSK)進(jìn)行累計(jì)釋放度 測(cè)定，具體步驟如下：
[0093] (1)溶出介質(zhì)的制備:稱取Tris 6.06g溶于1 OOOmL水中，加鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH7.5，得 到pH7.5的Tris緩沖液;精密量取鹽酸9mL置于1000mL容量瓶中，加純化水稀釋至刻度，混 勻，即得0. lmol/L鹽酸溶液。使用前加熱至42.0°C并脫氣5分鐘。
[0094] (2)供試品溶液的制備：
[0095] 酸中取鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片6粒，分別置于《中國(guó)藥典》2015年版四部"0900特 性檢查法"項(xiàng)下的"0931溶出度與釋放度測(cè)定法"中的第一法的溶出杯中，分別向1L體積的 溶出杯中添加上述制備的〇 . lmol/L鹽酸溶液介質(zhì)750mL，釋放介質(zhì)的溫度為37.5°C ±0.5 °C，轉(zhuǎn)籃轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn)，在2小時(shí)時(shí)，取5mL溶液，濾過，續(xù)濾液為供試品溶液；
[0096] 緩沖液中棄去上述溶出杯中酸液，用蒸餾水洗凈后立即加入0.05mo 1/L三羥甲基 氨基甲烷緩沖液(Tri s緩沖液)1 OOOmL，轉(zhuǎn)籃轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn)，繼續(xù)依法操作，在2小時(shí)、4 小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)、16小時(shí)和20小時(shí)時(shí)，各取溶液5mL，并即時(shí)補(bǔ)充相同溫度、相同 體積的溶出介質(zhì)，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。
[0097] (3)對(duì)照品溶液的制備:精密稱取鹽酸帕羅西汀對(duì)照品適量，加入甲醇2mL使溶解， 加入0. lmo 1/L鹽酸溶液或加入pH7.5Tris緩沖液制成每lmL中含帕羅西汀約5. lmg的溶液， 作為酸中的對(duì)照品溶液或緩沖液中的對(duì)照品溶液。
[0098] (4)高效液相色譜條件:Agilent高效液相色譜儀，色譜柱Agilent ZoRBAxTMS，4.6 X 250mm，5wn，柱溫30 °C，體積比為615: 385的pH5.5緩沖液：乙腈為流動(dòng)相，流速為1. OmL/ min，所述pH5.5緩沖液的制備方法為:將3.96g醋酸銨溶于615mL水中，加入10mL三乙胺，然 后用冰醋酸調(diào)節(jié)pH到5 ? 5，即得;紫外檢測(cè)器的測(cè)定波長(zhǎng)為295nm和340nm〇 [0099] (5)液相色譜測(cè)定:分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液各40此，進(jìn)行高效液相色譜分 析。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，分別計(jì)算出在不同時(shí)間的釋放度。
[0100] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖3。圖3為實(shí)施例1制備的腸溶緩釋片劑與原研藥在籃法，0.1N鹽酸中 2小時(shí)后，繼續(xù)在Tris緩沖液介質(zhì)中，轉(zhuǎn)籃轉(zhuǎn)速為100轉(zhuǎn)/分鐘條件下的釋放度曲線。
[0101] 由圖3可知，用上述釋放度測(cè)定法，實(shí)施例1制備的鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片的釋 放度曲線和原研藥的釋放度曲線趨勢(shì)相同。但是該釋放度測(cè)定方法未能區(qū)分出兩種制劑的 差異。
[0102] 實(shí)驗(yàn)例4(實(shí)施例1制備的腸溶緩釋片劑與原研藥在槳法，pH6.0磷酸鹽緩沖液溶出 介質(zhì)中，攪拌槳轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘條件下的釋放度測(cè)定）
[0103] 分別取實(shí)施例1制備的樣品和原研藥(原研藥的生產(chǎn)廠家為:GSK)進(jìn)行累計(jì)釋放度 測(cè)定。除了攪拌槳的轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘之外，其他步驟與實(shí)驗(yàn)例1相同。
[0104] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖4。圖4為實(shí)施例1制備的腸溶緩釋片劑與原研藥在槳法，pH6.0磷酸 鹽緩沖液介質(zhì)中，攪拌槳轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘條件下的溶出曲線。
[0105] 由圖4可知，用上述釋放度測(cè)定法，實(shí)施例1制備的鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片的釋 放度曲線和原研藥的釋放度曲線趨勢(shì)相同，但實(shí)施例1制備的樣品釋放明顯慢于原研藥。說 明該釋放度測(cè)定方法能很好的區(qū)分制劑的差異，可用于鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片的質(zhì)量評(píng) 價(jià)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法，其特征在于，所述測(cè)定方法采用槳法進(jìn)行釋 放度測(cè)定，其中，溶出介質(zhì)為PH6.0 ±0.05的磷酸鹽緩沖液，攪拌槳的轉(zhuǎn)速為每分鐘50~75 轉(zhuǎn)。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法，其特征在于，攪拌槳的轉(zhuǎn)速 為每分鐘50轉(zhuǎn)。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法，其特征在于，所述測(cè)定方法 中，取樣時(shí)間為2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)、16小時(shí)與20小時(shí)時(shí)。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法，其特征在于，所述磷酸鹽緩 沖液是將磷酸二氫鉀溶解于水中形成磷酸二氫鉀水溶液，然后用〇.2mol/L氫氧化鈉溶液調(diào) 節(jié)pH6.0 ± 0.05;優(yōu)選地，所述磷酸二氫鉀水溶液的濃度為0.2mol/L。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法，其特征在于，所述測(cè)定方法 中，取腸溶緩釋片6粒，分別置于溶出杯中，每個(gè)溶出杯放置1粒腸溶緩釋片，然后在每個(gè)溶 出杯中添加所述溶出介質(zhì)l〇〇〇mL。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法，其特征在于，所述測(cè)定方法 中，所述溶出介質(zhì)使用之前加熱至42°C脫氣5分鐘。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法，其特征在于，所述測(cè)定方法 中，所述溶出介質(zhì)的溫度為37.5 °C ± 0.5 °C。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法，其特征在于，所述腸溶緩釋 片劑的外層具有腸溶層，且該腸溶層在PH5.5以上的溶出介質(zhì)中溶解。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法，其特征在于，所述腸溶緩釋 片劑為鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片;優(yōu)選地，所述鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片劑包括:包含含藥 層和空白層的雙層片芯，以及包覆所述雙層片芯的腸溶層。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的腸溶緩釋片劑的釋放度測(cè)定方法，其特征在于，所述測(cè)定方 法包括以下步驟： (1) 溶出介質(zhì)的制備:將3500mL的0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液與392mL的0.2mol/L氫氧化 鈉溶液混合后，再加水稀釋至14L，搖勻，然后用0.2mo 1/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH6.0 ± 0.5;使 用前加熱至42°C脫氣5分鐘，所述0.2mol/L磷酸二氫鉀緩沖液的制備方法為:稱取108.88g 的磷酸二氫鉀溶于4L水中； (2) 取鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片6粒，分別置于《中國(guó)藥典》2015年版四部"0900特性檢 查法"項(xiàng)下的"0931溶出度與釋放度測(cè)定法"項(xiàng)下第二法中的溶出杯中，每個(gè)溶出杯放置1粒 鹽酸帕羅西汀腸溶緩釋片，然后分別在溶出杯中添加上述制備的溶出介質(zhì)1000mL，溶出介 質(zhì)溫度為37.5°C ±0.5°C，攪拌槳的轉(zhuǎn)速為每分鐘50~75轉(zhuǎn)，在2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)、 12小時(shí)、16小時(shí)與20小時(shí)時(shí)，各取溶液5mL，并補(bǔ)充相同溫度、相同體積的溶出介質(zhì)；取續(xù)濾 液作為供試品溶液； (3) 對(duì)照品溶液的制備：精密稱取鹽酸帕羅西汀半水合物對(duì)照品約25mg，置于100mL量 瓶中，加入5mL甲醇，超聲2分鐘使其溶解，用上述制備的溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì) 照品母液;精密移取3mL對(duì)照品母液置于20mL量瓶中，用上述制備的溶出介質(zhì)稀釋至刻度， 搖勻，即得； (4) 高效液相色譜條件:Agilent高效液相色譜儀，色譜柱AgilentZoRBAxTMS，4.6X 250mm，5μπι，柱溫30 °C，體積比為60 : 40 :1的乙腈：pH4 · 5緩沖液：三乙胺為流動(dòng)相，流速為 1. OmL/min，所述pH4.5緩沖液的制備方法為:將7.8g醋酸銨用純化水溶解并稀釋至200mL， 然后用冰醋酸調(diào)節(jié)pH到4.5,即得;紫外檢測(cè)器的測(cè)定波長(zhǎng)為295nm; (5)液相色譜測(cè)定：分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液各40yL，進(jìn)行高效液相色譜分析； 按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，分別計(jì)算出在不同時(shí)間的釋放度。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK106053663SQ201610536367
【公開日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年7月8日
【發(fā)明人】徐國(guó)杰, 高春榮, 蔣傳真, 譚海松, 諸弘剛
【申請(qǐng)人】海南華益泰康藥業(yè)有限公司