一種基于量子點(diǎn)的同時(shí)檢測(cè)兩種肺癌標(biāo)志物的光電免疫傳感器的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及一種基于量子點(diǎn)的同時(shí)檢測(cè)兩種肺癌標(biāo)志物的光電免疫傳感器，屬于納米功能材料、免疫分析、光電傳感、絲網(wǎng)印刷技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]肺癌是我國(guó)惡性腫瘤中發(fā)病率高的腫瘤之一，據(jù)衛(wèi)生部全國(guó)腫瘤防治辦公室資料，自90年代以來肺癌死亡率居城市居民癌癥死亡率之首位。20年中，肺癌發(fā)病率的增長(zhǎng)速度為所有癌癥之冠，嚴(yán)重威脅人們的健康。癌胚抗原(CEA)是最早用于肺癌診斷的腫瘤標(biāo)志物之一，其診斷價(jià)值早已被肯定。近年來，新的腫瘤標(biāo)志物細(xì)胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)被認(rèn)為是迄今為止所發(fā)現(xiàn)的用于診斷肺鱗癌和小細(xì)胞肺癌較靈敏的腫瘤標(biāo)志物之一，但其單項(xiàng)檢測(cè)仍有一定的局限性。因此發(fā)展快速、簡(jiǎn)便、靈敏的細(xì)胞角蛋白19片段和癌胚抗原檢測(cè)手段顯得十分必要。
[0003]本實(shí)用新型涉及一種基于量子點(diǎn)的同時(shí)檢測(cè)兩種肺癌標(biāo)志物的光電免疫傳感器，使用雙通道絲網(wǎng)印刷電極制備的雙通道電化學(xué)免疫傳感器可同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞角蛋白19片段和癌胚抗原，與其它檢測(cè)方法相比，具有靈敏度高，特異性好，成本低廉、快速方便和檢測(cè)效率高等優(yōu)勢(shì)，可實(shí)現(xiàn)細(xì)胞角蛋白19片段和癌胚抗原的同時(shí)檢測(cè)。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0004]本實(shí)用新型的技術(shù)方案是:
[0005]一種基于量子點(diǎn)的同時(shí)檢測(cè)兩種肺癌標(biāo)志物的光電免疫傳感器，其特征在于，在玻璃基底上依次印刷導(dǎo)電銀漿制成電極引線和電極觸點(diǎn)；印刷導(dǎo)電碳油墨制成輔助電極；印刷混合60%硫化鎘量子點(diǎn)的導(dǎo)電油墨制成兩個(gè)工作電極；印刷銀/氯化銀混合油墨制成參比電極；印刷絕緣油墨制成敏感池；印刷絕緣油墨覆蓋中間導(dǎo)電部分制成絕緣層和在工作電極區(qū)域制成一個(gè)電解池凹槽，制得雙通道絲網(wǎng)印刷電極；在上述的雙通道絲網(wǎng)印刷電極的一個(gè)工作電極表面上，設(shè)有金納米粒子層和細(xì)胞角蛋白19片段抗體層，在另外一個(gè)工作電極表面上設(shè)有金納米粒子層和癌胚抗原抗體層，制得雙通道電化學(xué)免疫傳感器；在兩個(gè)工作電極表面加入待測(cè)樣品；引出線端與電化學(xué)工作站連接，在光照下完成檢測(cè)。
[0006]本實(shí)用新型具備以下優(yōu)勢(shì):
[0007](I)本實(shí)用新型采用金納米粒子，可增大工作電極的表面積，提高細(xì)胞角蛋白19片段和癌胚抗原抗體固載量，增強(qiáng)電子傳遞，提高傳感器的靈敏度。
[0008](2)本實(shí)用新型傳感器利用抗原抗體的特異反應(yīng)，特異性好。
[0009](3)本實(shí)用新型傳感器檢測(cè)方法簡(jiǎn)單、快速，易于推廣。
[0010](4)本實(shí)用新型傳感器與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有制備簡(jiǎn)單、加工方便、成本低、易于商品化的優(yōu)點(diǎn)。
[0011](5)本實(shí)用新型制備的雙通道電化學(xué)免疫傳感器，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞角蛋白19片段和癌胚抗原的快速同時(shí)測(cè)定，顯著提高了檢測(cè)效率。
【附圖說明】
[0012]圖1為雙通道絲網(wǎng)印刷電極結(jié)構(gòu)圖。1、電極引線，2、電極觸點(diǎn)，3、輔助電極，4、工作電極，5、參比電極，6、敏感池，7、絕緣層，8、電解池凹槽。
【具體實(shí)施方式】
[0013]下面結(jié)合附圖和實(shí)施例進(jìn)一步說明本實(shí)用新型。
[0014]實(shí)施例1雙通道絲網(wǎng)印刷電極的制備
[0015]結(jié)合圖1，進(jìn)行雙通道絲網(wǎng)印刷電極的制備，整個(gè)印刷電極在厚度為2mm、長(zhǎng)度為40mm、寬度為20mm的玻璃板。
[0016]制備步驟如下:
[0017](I)在玻璃基底上印刷導(dǎo)電銀漿制成的電極引線I和電極觸點(diǎn)2 ;
[0018](2)印刷導(dǎo)電碳油墨制成輔助電極3 ；
[0019](3)印刷混合60%硫化鎘量子點(diǎn)的導(dǎo)電碳油墨制成工作電極4 ;
[0020](4)印刷銀/氯化銀混合油墨制成參比電極5 ;
[0021](5)印刷絕緣油墨制成敏感池6、絕緣層7和電解池凹槽8，制得雙通道絲網(wǎng)印刷電極。
[0022]實(shí)施例2光電免疫傳感器的制備
[0023](I)取一片實(shí)施例1制備的雙通道絲網(wǎng)印刷電極，用超純水沖洗，去掉電極表面的其他物質(zhì)，在每個(gè)工作電極表面分別設(shè)置金納米粒子，制成金納米粒子層，常溫干燥；
[0024](2)在(I)制得的其中一個(gè)工作電極的巰基化金納米粒子層上，設(shè)置一層細(xì)胞角蛋白19片段抗體，4°C條件下晾干，制成細(xì)胞角蛋白19片段抗體層；
[0025](3)在(I)制得的另一個(gè)工作電極的巰基化金納米粒子層上，設(shè)置一層癌胚抗原抗體，4°C條件下晾干，制成癌胚抗原抗體層；
[0026](4)用BSA溶液封閉(2)和(3)中的工作電極上的非特異性活性位點(diǎn)，制得雙通道電化學(xué)免疫傳感器。
[0027]實(shí)施例3本實(shí)用新型傳感器的應(yīng)用
[0028](I)分別取6PL樣品溶液滴涂于制得的雙通道電化學(xué)免疫傳感器的工作電極上，保持電極濕潤(rùn)2h ;
[0029](2)連接電化學(xué)工作站，在電解池凹槽內(nèi)，加入10PL pH為7.4的含有抗壞血酸的PBS緩沖溶液，在光照下，對(duì)樣品中細(xì)胞角蛋白19片段和癌胚抗原進(jìn)行同時(shí)檢測(cè)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種基于量子點(diǎn)的同時(shí)檢測(cè)兩種肺癌標(biāo)志物的光電免疫傳感器，其特征在于，在玻璃基底上依次印刷導(dǎo)電銀漿制成電極引線(I)和電極觸點(diǎn)(2);印刷導(dǎo)電碳油墨制成輔助電極(3);印刷導(dǎo)電油墨制成兩個(gè)工作電極(4);印刷銀/氯化銀混合油墨制成參比電極(5);印刷絕緣油墨制成敏感池(6);印刷絕緣油墨覆蓋中間導(dǎo)電部分制成絕緣層(7)和在工作電極區(qū)域制成一個(gè)電解池凹槽(8)，制得雙通道絲網(wǎng)印刷電極；在上述的雙通道絲網(wǎng)印刷電極的一個(gè)工作電極表面上，設(shè)有金納米粒子層和細(xì)胞角蛋白19片段抗體層，在另外一個(gè)工作電極表面上設(shè)有金納米粒子層和癌胚抗原抗體層，制得雙通道電化學(xué)免疫傳感器；在兩個(gè)工作電極表面加入待測(cè)樣品；引出線端與電化學(xué)工作站連接，在光照下完成檢測(cè)。
【專利摘要】本實(shí)用新型涉及一種基于量子點(diǎn)的同時(shí)檢測(cè)兩種肺癌標(biāo)志物的光電免疫傳感器。在玻璃基板上依次印刷印刷引線、觸電、輔助電極、兩個(gè)工作電極、參比電極，制得雙通道絲網(wǎng)印刷電極。然后在其工作電極上制備金納米粒子層和抗體層，制得同時(shí)檢測(cè)兩種真菌毒素雙通道絲網(wǎng)印刷免疫傳感器。本傳感器成本低、檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定、操作方便，適用于細(xì)胞角蛋白19片段和癌胚抗原的快速同時(shí)測(cè)定。
【IPC分類】G01N33/68, G01N33/574
【公開號(hào)】CN204855530
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201520447385
【發(fā)明人】楊磊, 魏琴, 馬洪敏, 吳丹, 范大偉, 張勇, 杜斌
【申請(qǐng)人】濟(jì)南大學(xué)
【公開日】2015年12月9日
【申請(qǐng)日】2015年6月28日