一種定量加樣的甘油三酯檢測芯片的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實用新型屬于檢測技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種定量加樣的甘油三酯檢測芯片。
【背景技術(shù)】
[0002]芯片技術(shù)是將生物或化學(xué)的基本操作單元集成到一塊芯片上完成。因其生物試樣消耗少，分析速度快，費用低等特點，已在醫(yī)藥、化學(xué)及生命科學(xué)等領(lǐng)域得到快速發(fā)展。
[0003]目前傳統(tǒng)芯片材料主要集中在石英、玻璃材料及高分子聚合物等。紙具有生物相容性好、成本低、操作簡單等特點，成為芯片制作的新型材料，將在快速檢測及監(jiān)控等領(lǐng)域具有潛在應(yīng)用價值。
[0004]本實用新型基于紙制芯片，結(jié)合脂肪酶、甘油激酶、甘油3-磷酸氧化酶、辣根過氧化物酶及其底物的顯色體系，提供了一種定量加樣的用于甘油三酯檢測的新技術(shù)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本實用新型目的是提出了一種定量加樣的甘油三酯檢測芯片。
[0006]本實用新型所采用的技術(shù)方案是:本實用新型的一種定量加樣的甘油三酯檢測芯片，包括紙芯片，紙芯片采用紙材料制成，其特征是:在紙芯片上設(shè)有一個樣品區(qū)、一個空白對照區(qū)和兩個甘油三酯檢測區(qū)，紙芯片的中心有一個樣品區(qū)，樣品區(qū)與自動微量注射栗連接，通過自動微量注射栗向樣品區(qū)中自動定量注射樣品，空白對照區(qū)通過微通道與樣品區(qū)連通，在紙芯片上的兩個甘油三酯檢測區(qū)為并排設(shè)置，并排設(shè)置的兩個甘油三酯檢測區(qū)分別通過微通道與樣品區(qū)連通。
[0007]本實用新型的有益效果為:本實用新型基于紙制芯片，結(jié)合脂肪酶、甘油激酶、甘油3-磷酸氧化酶、辣根過氧化物酶及其底物的顯色體系，提供了一種定量加樣的用于甘油三酯檢測的新技術(shù)，可用于醫(yī)學(xué)快速診斷、食品安全等領(lǐng)域研究。
【附圖說明】
[0008]圖I為本實用新型的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0009]圖中：I，樣品區(qū)；2，空白對照區(qū)；3，甘油三酯檢測區(qū)；4，微通道;5，紙芯片;6，自動微量注射栗。
【具體實施方式】
[0010]如圖I所示，本實用新型所述的一種定量加樣的甘油三酯檢測芯片，包括紙芯片5，紙芯片5采用紙材料制成，其特征是:在紙芯片5上設(shè)有一個樣品區(qū)1、一個空白對照區(qū)2和兩個甘油三酯檢測區(qū)3，紙芯片5的中心有一個樣品區(qū)I，樣品區(qū)I與自動微量注射栗6連接，通過自動微量注射栗6向樣品區(qū)I中自動定量注射樣品，空白對照區(qū)2通過微通道4與樣品區(qū)I連通，在紙芯片5上的兩個甘油三酯檢測區(qū)3為并排設(shè)置，并排設(shè)置的兩個甘油三酯檢測區(qū)3分別通過微通道4與樣品區(qū)I連通。檢測時，用自動微量注射栗6控制定量取5 yL樣品于樣品區(qū)，經(jīng)微通道4流通至甘油三酯檢測區(qū)3，反應(yīng)Smin后，使用掃描儀掃描得到芯片檢測甘油三酯的顯色圖像，用Photoshop讀取顯色值。根據(jù)顯色劑顏色的不同，即可測定甘油三酯的濃度。
[0011]本實用新型所提供的芯片制作分為以下5個步驟：
[0012](I)利用矢量作圖軟件繪制好所需的芯片微通道構(gòu)型（I，樣品區(qū)；2，空白對照區(qū)；3，甘油三酯檢測區(qū)；4，微通道;紙材料）；為檢測區(qū)和空白對照區(qū)直徑為3 mm，加樣品區(qū)直徑為4 mm，微通道的管道為I mmXl mm。
[0013](2)利用熱蠟打印機將繪制的芯片微通道構(gòu)型矢量圖，打印到定性濾紙上，得到用于甘油三酯檢測的芯片。
[0014](3)甘油三酯檢測液的配制：
[0015]I)混合顯色劑為50 mmol/L 4-氨基安替吡啉(4-AAP)，50 mmol/L 3，5_二氯-2-羥基苯磺酸鈉(DHBS)，置于4°C避光保存?zhèn)溆谩?br>[0016]2)酶試劑為20 U/mL脂肪酶(LP)、20 U/mL甘油激酶(GK)、20 U/mL甘油3-磷酸氧化酶(GPO)，20 U/mL辣根過氧化酶(HRP)置于4°C避光保存?zhèn)溆谩?br>[0017]3)反應(yīng)液體系：4-AAP:DHBS ：HRP：LP：GK：GP0 按體積5:5:1:1:1:1混合后，使用移液槍吸取IyL滴加于甘油三酯檢測區(qū)域。待進行樣品檢測時甘油三酯檢測區(qū)域顯橙紅色。
[0018](4)用自動微量注射栗控制定量取5yL樣品于樣品區(qū)，經(jīng)微通道流通至甘油三酯檢測區(qū)，反應(yīng)Smin后，使用掃描儀掃描得到芯片檢測甘油三酯的顯色圖像，用Photoshop讀取顯色值。根據(jù)顯色劑顏色的不同，即可測定甘油三酯的濃度。
[0019](5)血清樣品中甘油三酯的測定：在pH值7.0，將50 mmol/L 4_AAP、50 mmol/LDHBS、20 U/mL HRP^20 U/mL LP、20 U/mL GK^20 U/mL GPO的顯色體系按體積5:5:1:1:I ： I混合后，取I yL顯色體系溶液滴加在甘油三酯檢測區(qū)；再用自動微量注射栗控制定量加5此血清樣品滴加到樣品區(qū)，經(jīng)微管道到達甘油三酯檢測區(qū)反應(yīng)10 min，顯色后。利用掃描儀掃描得到芯片檢測甘油三酯的顯色圖像，再利用Photoshop軟件對檢測區(qū)域顯色進行數(shù)據(jù)處理，根據(jù)實驗得出的標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程即可計算血清樣品中的甘油三酯的含量。
【主權(quán)項】
1.一種定量加樣的甘油三酯檢測芯片，包括紙芯片（5)，紙芯片(5)采用紙材料制成，其特征是：在紙芯片（5)上設(shè)有一個樣品區(qū)（1)、一個空白對照區(qū)（2)和兩個甘油三酯檢測區(qū)(3)，紙芯片(5)的中心有一個樣品區(qū)（1)，樣品區(qū)（I)與自動微量注射栗(6)連接，通過自動微量注射栗(6)向樣品區(qū)（I)中自動定量注射樣品，空白對照區(qū)（2)通過微通道(4)與樣品區(qū)(I)連通，在紙芯片(5)上的兩個甘油三酯檢測區(qū)（3)為并排設(shè)置，并排設(shè)置的兩個甘油三酯檢測區(qū)（3)分別通過微通道(4)與樣品區(qū)（I)連通。
【專利摘要】本實用新型公開<b>一種定量加樣的甘油三酯檢測芯片</b>，包括紙芯片，紙芯片采用紙材料制成，其特征是：在紙芯片上設(shè)有一個樣品區(qū)、一個空白對照區(qū)和兩個甘油三酯檢測區(qū)，紙芯片的中心有一個樣品區(qū)，樣品區(qū)與自動微量注射泵連接，通過自動微量注射泵向樣品區(qū)中自動定量注射樣品，空白對照區(qū)通過微通道與樣品區(qū)連通，在紙芯片上的兩個甘油三酯檢測區(qū)為并排設(shè)置，并排設(shè)置的兩個甘油三酯檢測區(qū)分別通過微通道與樣品區(qū)連通。本實用新型制作簡便，檢測快速，易被推廣使用。
【IPC分類】G01N21/78
【公開號】CN205157441
【申請?zhí)枴緾N201520939794
【發(fā)明人】姜煒煒
【申請人】姜煒煒
【公開日】2016年4月13日
【申請日】2015年11月21日