專利名稱：中成藥所含藥味的鑒定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥測試方法，具體涉及一種中成藥所含藥味的鑒定方法。
隨著人們生活水平的不斷提高，醫(yī)療保健事業(yè)得以迅速發(fā)展，中成藥已逐漸被人們所應(yīng)用。由于中藥的質(zhì)量控制未能科學(xué)規(guī)范，尤其是中成藥中所含藥味的鑒定一直是比較困難的問題。因此在較大程度上限制了中成藥的應(yīng)用。
目前，常用于中成藥所含藥味的鑒定方法是薄層色譜法，中國藥典95版一部所收載的中成藥，其鑒別項(xiàng)目均采用此法。但是，在鑒定時(shí)僅用一個標(biāo)準(zhǔn)化合物作依據(jù)，方法比較粗糙。
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有鑒定方法的不足，探索一種能從中成藥中鑒定其所含藥味的科學(xué)方法。
本發(fā)明提供了一種中成藥所含藥味的鑒定方法。本發(fā)明的方法是以色譜相對保留值指紋譜來鑒定的。
“色譜相對保留值指紋譜”系本發(fā)明者在1988年首次提出，并用于柴胡屬植物的品種區(qū)分和鑒別，該論文發(fā)表于藥學(xué)學(xué)報(bào)(1988年23(11)839～845)。根據(jù)指紋譜可鑒定符合藥典用藥要求的柴胡品種，也指出了有毒的柴胡品種。以后，在1991年又于中國中藥雜志發(fā)表了這一方法在麝香、檀香等貴重進(jìn)口藥材方面的鑒別應(yīng)用，1993年又將該法從氣相色譜擴(kuò)展到高效液相色譜，對大黃屬植物進(jìn)行了鑒別鑒定研究，接著又在地榆、紅參、牛黃、吳茱萸等中藥的鑒別研究中作了進(jìn)一步的完善。
本發(fā)明的基本原理是基于每一味中藥有特征的色譜相對保留值。若能在相同色譜條件下的中成藥指紋譜中找到該味中藥的特征指紋，即可由此作為該味中藥的鑒定基礎(chǔ)。由于每個中成藥樣品都可經(jīng)色譜試驗(yàn)獲得其色譜圖，該色譜圖可作其內(nèi)在性質(zhì)的表征和鑒定的依據(jù)，但色譜圖的可比性很差，本發(fā)明通過色譜峰的相對保留值使其數(shù)據(jù)化，形成數(shù)據(jù)化的指紋譜，使各樣品的指紋譜具有了可比性，也使中成藥所含藥味的指紋譜鑒定成為可能。
本發(fā)明的中成藥所含藥味的鑒定方法包括下列步驟一.建立指紋譜在相同的色譜條件下，分別進(jìn)行中成藥和待鑒藥味的色譜分析實(shí)驗(yàn)，然后選定待鑒藥味中的特征峰作為內(nèi)參照峰，分別求取每個色譜峰的相對保留值，以相對保留值及各自對應(yīng)的峰面積構(gòu)成色譜相對保留值指紋譜；二.確立特征指紋對樣品的色譜圖進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，建立它們的色譜相對保留值指紋譜，從中確立待鑒藥味的特征指紋；三.鑒定藥味從中成藥指紋譜中尋找該藥味的特征指紋，據(jù)此鑒定該藥味的存在與否。
本發(fā)明的方法中內(nèi)參照峰的標(biāo)定是建立指紋譜的關(guān)鍵，本發(fā)明采用外標(biāo)定位法，并經(jīng)LC-MS和GC-MS法驗(yàn)證，完全正確可靠。
本發(fā)明方法中特征指紋確立時(shí)，應(yīng)注意①藥味的特征組分；②含量較高的色譜峰應(yīng)進(jìn)入特征指紋，特征指紋的峰面積和應(yīng)大于藥味所有色譜峰面積和的50％；③特征指紋在中成藥指紋譜中的檢出率應(yīng)大于50％。
本發(fā)明方法準(zhǔn)確可靠，有廣泛的應(yīng)用前景。
本發(fā)明的成功意味著中成藥中所含藥味的鑒定將不再成為疑難問題，它對藥品的質(zhì)量起到保證作用，從而確保臨床療效；還可制止中成藥的摻偽作假；并能為中成藥的出口提供切實(shí)可靠的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；為中藥走向國際市場創(chuàng)造條件。
本發(fā)明除可用于中成藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)外，對于那些復(fù)雜組分的樣品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)也同樣適用。
實(shí)例1.麝香保心丸中麝香的鑒定首先以相同萃取條件分別制備麝香保心丸和麝香的樣品溶液，然后又以相同的色譜條件分別對麝香保心丸和麝香進(jìn)行氣相色譜分析，得到各自的氣相色譜數(shù)據(jù)和譜圖。本研究為證實(shí)相對保留值的可信性，特借助市質(zhì)監(jiān)局計(jì)量研究所的GC-MS儀進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，因此在以相對保留值作比較依據(jù)時(shí)，尚可用質(zhì)譜數(shù)據(jù)作核對，由此證明相對保留值方法的可靠和可信，同時(shí)也證明其穩(wěn)定性和重復(fù)性。
根據(jù)色譜相對保留值原理建立各自的指譜指紋譜，見附表一，麝香的指紋譜鑒定表。表一列出了兩者各自的指紋譜。首先對麝香的指紋譜進(jìn)行特征指紋的選擇，根據(jù)標(biāo)樣和質(zhì)譜的鑒定，峰號3(tR＝15.272，α＝1.000)的色譜峰是麝香酮，確立它作為基準(zhǔn)峰是正確可靠的。同法，在麝香保心丸的指紋譜中確定峰號8(tR＝15.305)的色譜峰是麝香酮，確立它作為基準(zhǔn)峰。根據(jù)兩者的相對保留值(α)進(jìn)行對比，凡兩個α值相差在1％范圍內(nèi)者可以認(rèn)為兩者峰位相同而為同一物質(zhì)。例如麝香保心丸中α＝1.083與麝香中α＝1.084，兩者差值為9.2×10-4，遠(yuǎn)小于1％。經(jīng)MS鑒定為十六碳酸。依次進(jìn)行對比，麝香中有十個峰可在麝香保心丸中找到，其中麝香酮、十六碳酸、十八碳酸、5α-和5β-雄甾-3.17-二酮等已有MS鑒定。另外麝香保心丸中α值為2.699、2.725和麝香中α值為2.705、2.737這兩對峰是麝香的特征峰。
麝香中的上述十個峰可認(rèn)定為麝香的指紋特征，經(jīng)與麝香保心丸的指紋譜對照，可按此作為麝香鑒定的依據(jù)。α值分別為下列各值1.000、1.083、1.183、1.286、1.3891.442、1.669、1.864、2.699、2.725表1麝香保心丸中麝香的指紋譜鑒定表麝香保心丸(1) 麝香
實(shí)例2.麝香保心丸中蘇合香的鑒定實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備、實(shí)驗(yàn)操作步驟等同實(shí)例1。在蘇合香的鑒定中以Rt＝18.758和Rt＝18.749分別為麝香保心丸和蘇合香的對照基準(zhǔn)，該兩峰經(jīng)MS和標(biāo)準(zhǔn)品對照，鑒定為桂皮酸芐酯。表2蘇合香指紋譜鑒定表，兩者指紋譜的對比，在麝香保心丸的指紋譜中，可找到蘇合香的特征指紋達(dá)二十二個色譜峰，其α值分別為0.756、0.884、0.911、1.000、1.072、1.133、1.145、1.176、1.192、1.196、1.200、1.216、1.227、1.246、1.260、1.266、1.275、1.282、1.293、1.317。在蘇合香的指紋譜中95％以上的色譜峰均可在麝香保心丸的指紋譜中找到，說明該鑒定是可信的。表2麝香保心丸中蘇合香的指紋譜鑒定表麝香保心丸(2) 蘇合香1表示相對保留值與質(zhì)譜圖分析都一致的化合物。2保心丸*20與*21質(zhì)譜圖分析的結(jié)構(gòu)和蘇合香*11非常相似，只是在*20的C5位以及*21為左旋有差異。 3表示相對保留值相近。
實(shí)例3.麝香保心丸中肉桂的鑒定實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)操作步驟和實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備同實(shí)例1。在表3肉桂指紋譜鑒定表中，保心丸和肉桂的指紋譜建立均以Rt＝8.813和Rt＝8.787的色譜峰作為對照基準(zhǔn)，該兩色譜峰經(jīng)對照品和MS鑒定為桂皮醛。對照保心丸和肉桂兩者的指紋譜，在麝香保心丸的指紋譜中可找到十一個肉桂的特征指紋，其α值分別為1.000、1.610、1.879、2.183、2.192、2.230、2.697、2.745、3.243、3.732、4.700。其核對窗口為小于1％，鑒定結(jié)果可靠。表3肉桂的指紋譜鑒定表麝香保心丸(3) 肉桂
權(quán)利要求
1.一種中成藥所含藥味的鑒定方法，其特征在于該方法包括下列步驟(1)建立指紋譜在相同的色譜條件下，分別進(jìn)行中成藥和待鑒藥味的色譜分析實(shí)驗(yàn)，然后選定待鑒藥味中的特征峰作為內(nèi)參照峰，分別求取每個色譜峰的相對保留值，以相對保留值及各自對應(yīng)的峰面積構(gòu)成色譜相對保留值指紋譜；(2)確立特征指紋對樣品的色譜圖進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，建立它們的色譜相對保留值指紋譜，從中確立待鑒藥味的特征指紋；(3)鑒定藥味從中成藥指紋譜中尋找該藥味的特征指紋，據(jù)此鑒定該藥味的存在與否。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中成藥所含藥味的鑒定方法，其特征在于其中所述的確立特征指紋時(shí)應(yīng)含有藥味的特征組分；含量較高的色譜峰應(yīng)進(jìn)入特征指紋，特征指紋的峰面積和應(yīng)大于藥味所有色譜峰面積和的50％；特征指紋在中成藥指紋譜中的檢出率應(yīng)大于50％。
全文摘要
本發(fā)明涉及中藥鑒定方法。本發(fā)明提供了一種中成藥所含藥味的鑒定方法。本發(fā)明通過從中成藥指紋譜中找中藥的特征指紋來鑒定是否含有某味中藥。本發(fā)明方法準(zhǔn)確可靠,有廣泛應(yīng)用的前景。
文檔編號G06F19/00GK1326163SQ0011629
公開日2001年12月12日 申請日期2000年5月31日 優(yōu)先權(quán)日2000年5月31日
發(fā)明者洪筱坤, 王智華 申請人:上海中醫(yī)藥大學(xué)