免疫化驗(yàn)(“MSIA”)抗體的底物。一種合適的可商購的MSIA底物包括來自固有生物探針公司(Intrinsic B1probes Inc.)(坦佩(Tempe)，亞利桑那州(AZ))的那些和在美國專利號(hào)6，783，672中所述的那個(gè)。一種示例性MSIA方法更詳細(xì)地描述在美國專利號(hào)6，974，704中。
[0085]在樣品已經(jīng)穿過二次處理站80之后，所制備的樣品通過傳送組合件60傳送到分析分級站90。分析分級站90包括用于分別接納器皿58或器皿架84的兩個(gè)或更多個(gè)器皿位置94 (圖7A)或兩個(gè)或更多個(gè)器皿架位置94’(圖7B)。在特定示意性實(shí)例中，分析分級站90，90’容納約一百三十二個(gè)器皿58 (圖7A)或二十四個(gè)器皿架84 (圖7B)，這二十四個(gè)器皿架每個(gè)又能夠接納多達(dá)約六個(gè)器皿58，總共一百四十四個(gè)器皿58。每個(gè)器皿位置94在分析分級站90內(nèi)可以是固定的，使得一旦個(gè)別器皿84被放置在分析分級站90的器皿位置94內(nèi)時(shí)，其位置不會(huì)改變，但通過傳送組合件60轉(zhuǎn)移。
[0086]雖然沒有明確地示出，但是分析分級站90可以包括一個(gè)冷卻系統(tǒng)，用于將分析分級站90的溫度維持在一個(gè)恒定的受控溫度下，例如約4°C到約10°C的一個(gè)溫度。以此方式，并且連同先前描述的器皿58的鉸鏈蓋一起，在所制備的樣品等待分析的同時(shí)，所制備的樣品的降解或蒸發(fā)速率被進(jìn)一步降低。
[0087]可替代地，分析分級站90可以包括一個(gè)加熱系統(tǒng)或如上所述的一個(gè)溫育站，用于將分析分級站90的溫度維持在一個(gè)用于溫育的恒定的受控溫度下，例如從約23°C到約70°C范圍內(nèi)的一個(gè)溫度。一些樣本類型、尤其是微生物樣本可能需要在分析之前以其他方式制備的樣品的延長溫育。
[0088]當(dāng)選擇一種特定制備的樣品進(jìn)行分析時(shí)，含有所制備的樣品的器皿58通過傳送組合件60從分析分級站90轉(zhuǎn)移到注射器站92。注射器站92可以包括一個(gè)注射器移液管組合件96 (圖8)，用于將所制備的樣品的一個(gè)等分試樣從器皿58轉(zhuǎn)移到樣品分析站24。注射器移液管組合件96 (圖8)包括一個(gè)移液管軸97，該移液管軸可以按類似于上文詳細(xì)地描述的樣品移液管組合件62的方式構(gòu)造。
[0089]根據(jù)圖7A-7B和圖8中所示的實(shí)施例，提供一個(gè)洗滌站98，它具有一個(gè)流體地聯(lián)接到其中的溶劑供應(yīng)器99，用于視需要在抽吸-分配之間洗滌移液管軸97。在另一個(gè)實(shí)施例中，沒有在此明確地示出，移液管軸97可以被成型成用于接收一個(gè)一次性尖端，該一次性尖端可以外加或替代洗滌站98加以提供。
[0090]注射器站92可以包括一個(gè)具有類似于采樣站56的結(jié)構(gòu)的可旋轉(zhuǎn)臺(tái)102并且可以包括一個(gè)器皿頂蓋打開和關(guān)閉裝置103，該器皿頂蓋打開和關(guān)閉裝置用于在器皿58被傳送到預(yù)備位置100 (圖8)時(shí)打開和關(guān)閉它的鉸鏈蓋。在通過注射器移液管組合件96抽吸所制備的樣品的一個(gè)等分試樣之后，器皿58可以旋轉(zhuǎn)遠(yuǎn)離預(yù)備位置100，由此關(guān)閉鉸鏈蓋并且使器皿58準(zhǔn)備通過傳送組合件60進(jìn)行接收，以便傳送和釋放到一個(gè)儲(chǔ)存設(shè)施(未示出)或一個(gè)廢棄物槽106，通向器皿廢棄物儲(chǔ)存器107。一次性移液管尖端還可以從移液管軸97噴出到廢棄物槽106中。
[0091]如上面詳細(xì)描述的那樣，在所制備的樣品移動(dòng)到樣品分析站24之前，在樣品制備站20制備樣本樣品23(圖6)。因此，樣品制備站20的單獨(dú)地或共同起作用的可移動(dòng)部分中的至少一些可以包括用于將所制備的樣品從樣品制備系統(tǒng)12傳送到樣品分析系統(tǒng)14的傳送機(jī)構(gòu)，這些可移動(dòng)部分包括采樣站56、傳送組合件60、可旋轉(zhuǎn)臺(tái)44，102、注射器站92以及注射器移液管組合件96。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將理解，在不脫離本發(fā)明的原理的情況下，可以使用一個(gè)用于將所制備的樣品從樣品制備系統(tǒng)12傳送到樣品分析系統(tǒng)14的傳送機(jī)構(gòu)的替代實(shí)施例。在示例性實(shí)施例中，該傳送機(jī)構(gòu)可以包括注射器移液管組合件96，它移取所制備的樣品的一個(gè)等分試樣，用于分配到樣品分析站24中。
[0092]現(xiàn)在詳細(xì)描述樣品分析站24，并且特別是圖7A-7C和圖9A-9B，樣品分析站24的一個(gè)實(shí)施例可以是具有一個(gè)液相色譜站110和一個(gè)質(zhì)譜儀站112的一個(gè)LCMS系統(tǒng)。液相色譜站110(在下文中稱為“LC站”110)可以包括一個(gè)、兩個(gè)或更多個(gè)注射端口 104a，104b，用于從注射器移液管組合件96接納所制備的樣品的等分試樣進(jìn)行分析。注射端口 104a，104b可以在線連接到一個(gè)或多個(gè)色譜柱，用于將所制備的樣品分離成在一個(gè)或多個(gè)洗脫時(shí)間洗脫的相關(guān)分析物和多種輔助或廢棄物洗脫液。如示意性實(shí)施例中所示，LC站110包括兩個(gè)分離通道，即LC通道118a，118b ( 一個(gè)第三LC通道118c以虛線示出)。
[0093]當(dāng)LC站110不被配置成以便通過先前在本文檔中討論的不含水解的方法分離化合物時(shí)，那么所有的LC分離通道都可以類似于LC通道118a進(jìn)行配置。這個(gè)通道包括串聯(lián)安排的一根制備柱7和一根分析柱116。否則的話，當(dāng)LC站110被配置成以便通過不含水解的方法分離化合物時(shí)，該LC站可以包括一個(gè)類似于圖9A中所示的LC通道118b進(jìn)行配置的通道。如圖9A中所展示，這個(gè)通道可以包括如先前在本文檔中所述那樣安排的分析柱對18a和18b。在替代實(shí)施例中，通道118b還可以包括如圖9B中所展示的制備柱7。在圖9A和9B中所示的實(shí)例中，通道118b類似于圖3中所展示的色譜系統(tǒng)3進(jìn)行配置。然而，這個(gè)通道可以可替代地類似于圖1A-1D中所示的色譜系統(tǒng)la、圖1E-1G中所展示的系統(tǒng)lb、圖4中所展示的系統(tǒng)39進(jìn)行配置，或以根據(jù)本傳授內(nèi)容的任何替代性方式進(jìn)行配置。兩個(gè)LC通道118a，118b中的每一個(gè)以能夠如在下面詳細(xì)描述的那樣將樣品多路或交錯(cuò)引入到質(zhì)譜儀120中的方式在上游與對應(yīng)的注射器端口 104a，104b相關(guān)聯(lián)以及在下游與質(zhì)譜儀站112的單個(gè)質(zhì)譜儀120相關(guān)聯(lián)。
[0094]根據(jù)一些實(shí)施例，制備柱7可以是實(shí)質(zhì)上用于基質(zhì)干擾去除的尺寸排阻親和液相色譜柱。被包括在LC通道118a中的分析柱116可以是用于分析物分離的反相LC柱。示例性實(shí)施例包括美國專利號(hào)5，772，874 ;5，919，368 ；以及6，149，816中詳細(xì)地描述的賽科侖(Cyclone)P 0.5 X 50mm渦輪流(TURB0FL0W)尺寸排阻親和液相色譜柱(馬薩諸塞州沃爾瑟姆的賽默飛世爾科技公司(Thermo Fisher Scientif ic, Inc.，Waltham, MA))，和海潑斯?fàn)柦?Hypersil GOLD) PFP 2.1 X 50mm, 1.9ym UHPLC分析柱(馬薩諸塞州沃爾瑟姆的賽默飛世爾科技公司)。根據(jù)附加實(shí)施例的柱可以是例如以包裝好的尖端形式、標(biāo)準(zhǔn)包裝形式可獲得的毛細(xì)管柱(具有大約300 μπι的內(nèi)徑)、納米柱(具有在從約74 μπι到約100 μπι范圍內(nèi)的內(nèi)徑)，以及用于二維工作的兩相柱。在其他實(shí)施例中，制備柱7可以是常規(guī)的尺寸排阻柱或可以被用作基質(zhì)干擾去除裝置的任何其他液相色譜柱。
[0095]LC通道118a的恰當(dāng)制備柱7和分析柱116的選擇可以至少部分基于這個(gè)LC通道提供相關(guān)分析物對比洗脫劑的保留時(shí)間范圍的能力。常規(guī)地，制備柱7和分析柱116針對來自一個(gè)特定類型的樣品的特定分析物進(jìn)行匹配；然而，柱7，116的匹配可以在從一種化驗(yàn)類型到另一種化驗(yàn)類型之間變化。
[0096]LC通道118b可以容易地在如圖9A中所示的其配置與和通道118a的配置類似或相同的替代性配置之間來回轉(zhuǎn)換。這些轉(zhuǎn)換可以通過在模塊化可互換的筒柱內(nèi)提供柱對7，116和柱對118a，118b來促進(jìn)，每個(gè)筒柱包括被配合或匹配成以便彼此聯(lián)合操作的兩根柱。舉例來說，圖11示意性地展示了可以出于此目的使用的一個(gè)雙柱色譜筒柱。圖11中所示的設(shè)備的附加細(xì)節(jié)描述在共同未決的國際PCT申請?zhí)朠CT/US2011/058229中，該申請公開為國際申請公開號(hào)WO 2012/058515A2并且轉(zhuǎn)讓給了本發(fā)明的受讓人。圖11中所示的雙柱色譜筒柱240包括一個(gè)殼體241，該殼體具有兩根至少部分地包含在其中的色譜柱:總體上表示為柱242的第一柱和總體上表示為柱244的第二柱。柱242，244優(yōu)選地但不一定固定到殼體241。為了執(zhí)行一種特定分析物(或多種分析物)的色譜分離，可以匹配每個(gè)筒柱中的兩根柱。舉例來說，在一個(gè)第一筒柱中，第一柱242可以包括凈化柱或制備柱7 ;而同一筒柱的第二柱244包括單個(gè)分析柱116。在與第一筒柱可互換的一個(gè)第二筒柱中，第一柱242可以包括第一分析柱18a，而第二柱244包括第二分析柱18b。
[0097]第一柱242包括兩個(gè)柱端配件242f，在這兩個(gè)柱端的每一個(gè)處都有一個(gè)這種端配件。同樣，第二柱在它的兩端的每一個(gè)處包括一個(gè)端配件244f。如所已知的，柱端配件是用于流體連接到外部管道的附接點(diǎn)。因此，采用連接器248以便將第一柱242的兩個(gè)端配件連接到流體管線以及將第二柱244的兩個(gè)端配件連接到其他流體管線。這些流體管線在圖11中總體上示出為流體管線247，但可以包括如圖1、圖3、圖4或圖9A-9B中所示的不同流體管線(這些流體管線在圖9A-9B中未標(biāo)記)。筒柱240可以包括一個(gè)無源鑒別特征(一個(gè)指示器或鑒別器)(例如，一個(gè)條形碼254或一個(gè)RFID模塊等等)，該特征可以用于鑒別該筒柱和它的針對外部設(shè)備/軟件的相關(guān)色譜方法。舉例來說，自動(dòng)化樣品制備和分析系統(tǒng)10，10’中的任一個(gè)可以包括一個(gè)條形碼閱讀器(未示出)或能夠解釋該無源鑒別特征的其他設(shè)備，該閱讀器或其他設(shè)備被電子地連接到樣品制備控制器22 (圖6)。這種特征可以使系統(tǒng)軟件能夠自動(dòng)地驗(yàn)證所插入的筒柱內(nèi)的這些柱對于目前正通過該系統(tǒng)執(zhí)行的一個(gè)分析方案是適當(dāng)?shù)摹?br>[0098]再次參看圖7A、7B、9A和9B，樣品分析站24包括一個(gè)分開的注射端口 156，該注射端口與閥133相關(guān)聯(lián)并且因此繞過了 LC通道118a，118b。該注射端口 156可以用于適當(dāng)時(shí)注射分別用于執(zhí)行校準(zhǔn)或?qū)φ辗治龅男?zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)或?qū)φ諛?biāo)準(zhǔn)。在一些實(shí)施例中，校準(zhǔn)溶液供應(yīng)器158(圖7B)可以設(shè)置在注射端口 156附近以便于當(dāng)需要校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)時(shí)獲取。為了下文質(zhì)譜儀120的討論的清楚起見，將僅討論所制備的樣品注射。然而應(yīng)了解，將以類似方式分析通過注射端口 156注射的樣品校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)或?qū)φ諛?biāo)準(zhǔn)。
[0099]所注射的所制備樣品以已知方式移動(dòng)通過LC通道118a的柱7，116或以先前在本文檔中描述的方式移動(dòng)通過LC通道118b的柱7，18a和18b。樣品和任何溶劑沿著通道118a的移動(dòng)使得相關(guān)分析物中的至少一種將在不同于其他相關(guān)分析物和/或基質(zhì)組分(即，洗脫液)的保留時(shí)間的保留時(shí)間洗脫離開柱7，116。將來自第一 LC通道118a和第二 LC通道118b兩者的洗脫液和分析物引導(dǎo)到閥133中，其中洗脫液被引導(dǎo)到廢棄物容器134中，而分析物被引導(dǎo)到質(zhì)譜儀站112的電離源140中。針對一些樣品的樣品引入的替代方法可以包括(但不限于)也可以用于將樣品引入到質(zhì)譜儀120的在線方法(例如流動(dòng)注射分析、直接注入(direct infus1n)以及注射環(huán)路)和離線方法(例如固相萃取、血斑表面涂覆、基質(zhì)輔助激光解吸/電離(“MALDI”)板涂，或普通表面上的涂覆)。
[0100]如圖9A-9B中所示，大氣壓電離(或者電噴霧電離(“ESI”)或者大氣壓化學(xué)電離(“APCI”))裝置(在此通常稱為“霧化電離器”)用于電離由電離源140所接收的分析物。在這方面，霧化電離器包括毛細(xì)管、探針或針(在下文中稱為“針”142)，在其中具有溶劑導(dǎo)管(未示出)并且該溶劑導(dǎo)管被其中的氣體導(dǎo)管(未示出)包圍。氣體導(dǎo)管的出口定位在距溶劑導(dǎo)管出口近側(cè)約0.1mm到約0.2mm。在ESI操作中，電壓發(fā)生器144電耦合到針142，并且可操作以在可以位于質(zhì)譜儀120處的針142與反電極之間形成高電壓差。
[0101]在使用中，將溶劑以在從約400 μ L/min到約2000 μ L/min范圍內(nèi)的速率供應(yīng)到溶劑導(dǎo)管；然而，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員將容易地了解，溶劑供應(yīng)器隨所選擇的特定電離源140而變化。所用的具體溶劑取決于研宄中的分析物的化學(xué)性質(zhì)，并且用于選擇適當(dāng)溶劑的方法對于本領(lǐng)域內(nèi)的普通技術(shù)人員而言是眾所周知的。將氣體、典型地惰性氣體(例如N2)在從約O巴到約7巴范圍內(nèi)的壓力下供應(yīng)到氣體導(dǎo)管。電壓發(fā)生器144被激活并且向針142內(nèi)的溶劑提供一個(gè)電壓電勢，該電壓電勢典型地在從約_5kV到約5kV的范圍內(nèi)。
[0102]在APCI操作中，電壓發(fā)生器144電耦合到位于出口遠(yuǎn)側(cè)的電暈放電電極145。施加到電暈放電電極145的高電壓(如果存在)可操作以點(diǎn)燃等離子體，這有助于霧化溶劑的電離；然而，其他電離方法可以使用并且在本領(lǐng)域中是大體上已知的。等離子體引起溶劑和分析物(多種)的電離，并且一部分帶電的溶劑/分析物(多種)將以分析物的氣相離子(“氣相離子”)形式進(jìn)入質(zhì)譜儀120中。在美國專利申請公開號(hào)2012/0104248A1中描述了在ESI與APCI模式之間可切換的離子源。
[0103]位于電暈放電電極145遠(yuǎn)側(cè)的撇渣器160結(jié)合輔助氣體(未示出，但被引導(dǎo)在出口與撇渣器160之間)起作用，用于包含這些氣相離子和/或使它們聚集到質(zhì)譜儀120的真空室中。該輔助氣體可以按總體上從約OL/min到約15L/min范圍內(nèi)的速率供應(yīng)。
[0104]仍然參看圖9A-9B，質(zhì)譜儀120的示意性實(shí)例包括與電離源140的接口 146、質(zhì)量過濾器148以及離子檢測器150。含有質(zhì)量過濾器148和離子檢測器150的區(qū)域維持在真空中。這個(gè)接口 146包括孔152，該孔提供進(jìn)入含有質(zhì)量過濾器148同時(shí)維持真空壓力的更尚真空室的開口。
[0105]在所展示的實(shí)例中，質(zhì)量過濾器148示出為常規(guī)四極桿；然而，本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)了解如何確定對于指定化驗(yàn)選擇恰當(dāng)?shù)馁|(zhì)量過濾器形態(tài)。實(shí)際上，其他質(zhì)譜儀實(shí)施例可以包括例如單一四極桿形態(tài)、飛行時(shí)間(“T0F”)、傅里葉變換(