一種肝浸膏規(guī)?；a(chǎn)工藝的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種肝浸膏規(guī)?；a(chǎn)工藝。
【背景技術(shù)】
[0002]肝浸膏(Hepar Extractum)是從新鮮或冷凍的動物肝臟中提取制備的浸膏，為抗貧血藥。其制劑有肝浸膏片、復(fù)方肝浸膏片、復(fù)方肝浸膏膠囊、復(fù)方肝浸膏糖漿、復(fù)方胚肝鐵銨片等。作為抗貧血及營養(yǎng)補(bǔ)充劑，主要用于缺鐵性貧血、病后體弱和營養(yǎng)不良等。
[0003]肝浸膏的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-(HD-0812)-2002，本品應(yīng)為棕色或深棕紅色膏狀物;有特殊香味，不得有焦味。肝浸膏中總固體應(yīng)不得低于70%(g/g);按總固體計算，含氮量應(yīng)不低于8.0%，總糖含量應(yīng)不得少于總固體的16.0%。
[0004]現(xiàn)有肝浸膏生產(chǎn)工藝基本采用酸水浸提法或熱水提取法，其缺點(diǎn)在于提取均不完全，固液分離困難，收得率太低，僅有5%和10%左右，從而使成本過高。其中，酸水浸提法還會造成環(huán)境污染，生產(chǎn)安全難以保證。
[0005]現(xiàn)有技術(shù)報道了一種肝浸膏的生產(chǎn)工藝:先將處理過的動物肝臟絞碎，加水1.5?2.5倍在40?45°C下用中性蛋白酶酶解1?3.5小時，再加入苯甲酸并升溫至沸騰，藥液靜置20?35分鐘后，濾過(棄去殘渣)，濾液濃縮至提取物的1/2后，加NaOH調(diào)節(jié)pH值至6.5?8.0，繼續(xù)濃縮至第一次濃縮體積的1/2?1/3，加入濃縮液2?5倍水稀釋，過濾，濾液濃縮至膏狀(總固體含量為70%)，得肝浸膏。該報道中記載，應(yīng)用該方法平均肝浸膏收得率約為21.0%，總氮轉(zhuǎn)移率最低約為37.12%。雖然，該報道中標(biāo)明的投料量達(dá)到了每批500kg的生產(chǎn)規(guī)模，但其生產(chǎn)工藝中加入了外來化學(xué)物質(zhì)苯甲酸(防腐劑)和NaOH(酸堿調(diào)節(jié)劑)，在最終產(chǎn)品中無法除去，作為原料藥，這可能會對肝浸膏的安全性有一定影響。
[0006]現(xiàn)有技術(shù)中報道了一種肝浸膏的制備方法:采用封凍后的健康牛肝臟，解凍，除去脂肪和結(jié)締組織，加2倍體積的水，在45?50°C條件下，用復(fù)合酶即胰酶(含胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶)酶解5小時，酶解液在85°C以下濃縮至膏狀(總固體達(dá)70%以上)，得肝浸膏。經(jīng)測定符合國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-(HD-0812)-2002規(guī)定。該報道中記載，應(yīng)用該方法肝浸膏平均收率約為26%，總氮轉(zhuǎn)移率最低約為72.40%。該專利申請公開的實施例中標(biāo)明的投料量僅為每批5.0kg，僅達(dá)到實驗室試驗規(guī)模，不能代表規(guī)?；a(chǎn)時的實際水平。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提供了一種肝浸膏的規(guī)模化生產(chǎn)工藝，該工藝能夠在規(guī)模化生產(chǎn)中實際使用，收得率高，肝浸膏收率達(dá)到28.5%?30.0%(含總固體> 70.0%)，按總固體計算，含有機(jī)氮量大于13.0%，總有機(jī)氮的轉(zhuǎn)移率達(dá)到90%以上，且在制備過程中不添加任何化學(xué)物質(zhì)。
[0008]本發(fā)明提供一種肝浸膏規(guī)模化生產(chǎn)工藝，是將新鮮或冷凍的健康牛、羊肝臟絞碎，細(xì)胞破壁，用混合酶進(jìn)行酶解，再用水提取得到的;所述混合酶為木瓜蛋白酶和動物蛋白水解酶。
[0009]作為優(yōu)選，所述混合酶中，木瓜蛋白酶和動物蛋白水解酶的質(zhì)量比為0.4?0.6:1;作為優(yōu)選，所述木瓜蛋白酶和動物蛋白水解酶的質(zhì)量比為1:2。
[0010]作為優(yōu)選，所述混合酶為凈肝質(zhì)量的0.5%?0.7%;作為優(yōu)選，所述混合酶為凈肝質(zhì)量的0.6%。
[0011 ]作為優(yōu)選，所述酶解的溫度為25_55°C。
[0012]作為優(yōu)選，所述酶解的時間為6-1Oh。
[0013]作為優(yōu)選，所述牛、羊肝臟的質(zhì)量為100-1000kg；
作為優(yōu)選，所述牛、羊肝臟的質(zhì)量為200-500kg。
[0014]本發(fā)明的方法在一次性投料100-1000kg的情況下，均能達(dá)到本發(fā)明目的，即肝浸膏收得率達(dá)到28.5%?30.0%(含總固體2 70.0%)，肝浸膏含有機(jī)氮量在13.0%以上(按總固體計算)，總有機(jī)氮轉(zhuǎn)移率可提高到90.0%以上。在一次性投料100-500kg時，肝浸膏收率及檢驗數(shù)據(jù)更趨穩(wěn)定，設(shè)備規(guī)模適中，工藝穩(wěn)定性良好。
[0015]作為優(yōu)選，酶解后，直接在酶解液中加入水進(jìn)行恒溫攪拌提取，得到提取液；
作為優(yōu)選，將水升溫至85_95°C進(jìn)行恒溫攪拌提取；
作為優(yōu)選，所述加入水的質(zhì)量為凈肝質(zhì)量的1-3倍；
作為優(yōu)選，所述恒溫攪拌提取的時間為1-2.5h;
作為優(yōu)選，所述恒溫攪拌提取后還有冷卻的步驟；
作為進(jìn)一步優(yōu)選，所述冷卻后的溫度為30-45°C。
[0016]作為優(yōu)選，將所述提取液離心分離，在殘渣中再加入水進(jìn)行恒溫攪拌提取，將提取液離心、過濾，合并分離液，將分離液減壓濃縮至稠膏狀；
作為優(yōu)選，所述在殘渣中加入水提取后，將提取液離心的轉(zhuǎn)速為1500轉(zhuǎn)/分鐘；
作為優(yōu)選，所述加入水的質(zhì)量為凈肝質(zhì)量的1-3倍；
作為優(yōu)選，將水升溫至85-95°C進(jìn)行恒溫攪拌提?。?br> 作為進(jìn)一步優(yōu)選，所述攪拌的轉(zhuǎn)速為85轉(zhuǎn)/分鐘；
作為優(yōu)選，所述恒溫攪拌提取的時間為1-2.5h;
作為優(yōu)選，所述恒溫攪拌提取后還有冷卻的步驟；
作為進(jìn)一步優(yōu)選，所述冷卻后的溫度為30-45°C。
[0017]本發(fā)明還提供應(yīng)用上述制備方法得到的肝浸膏。
[0018]在上述各優(yōu)選條件下，制備得到的肝浸膏的各項性能逐步提高。
[0019]本發(fā)明的有益效果如下:
(1)增加肝細(xì)胞破壁步驟，有利于細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的浸出(細(xì)胞質(zhì)等);有利于肝中蛋白質(zhì)與混合酶充分接觸，極大的提高了酶解的效果；
(2)采用生物酶解，相比酸水解或熱水水解條件更溫和，環(huán)境更友好，可以最大程度上將不溶于水的動物蛋白切割成可溶于水的氨基酸、短肽等有利于人體吸收的營養(yǎng)物質(zhì)。比較之下，酸水解條件竣烈，有可能在水解過程中形成其他物質(zhì)，有安全性隱患；而熱水水解在高溫狀態(tài)下動物蛋白會發(fā)生蛋白凝聚現(xiàn)象，不利于水溶性物質(zhì)的浸出。
[0020]本發(fā)明的混合酶(木瓜蛋白酶-動物蛋白水解酶)是在眾多酶中經(jīng)試驗優(yōu)選而來，木瓜蛋白酶和動物蛋白水解酶均為食品添加劑，其本身就是一種蛋白質(zhì)，經(jīng)滅酶處理后(高溫滅酶)，分解為氨基酸，安全性良好。木瓜蛋白酶和動物蛋白水解酶的酶解效果好，且價格低廉，肝浸膏生產(chǎn)成本低;混合酶中各組分用量也是經(jīng)試驗研究優(yōu)選獲得的數(shù)據(jù)，可以最大限度的將動物蛋白切割為水溶性的氨基酸和多肽。本發(fā)明的混合酶可使肝浸膏干固體收率以及總有機(jī)氮轉(zhuǎn)移率大幅度提高。
[0021](3)將酶解過程與第一次熱水提取過程合并，減少了過濾和裝罐步驟。由于無論酶解、酸水解還是熱水水解，其提取液粘度均很大，造成過濾困難。而將酶解過程與第一次熱水提取過程合并，會降低提取液的濃度，有利于營養(yǎng)物質(zhì)的浸出，并且減少了提取液過濾和提取殘渣重新裝罐的過程。
[0022](4)用本發(fā)明的工藝規(guī)?；可a(chǎn)肝浸膏，肝浸膏收得率達(dá)到28.5%?30.0%(含總固體2 70.0%)；按總固體計算，肝浸膏含氮量大于13.0%，總有機(jī)氮轉(zhuǎn)移率提高到90.0%以上(肝浸膏中總有機(jī)氮量與肝臟中總有機(jī)氮量的質(zhì)量百分比)。相比現(xiàn)有酸水浸提法或熱水提取法總固體收率僅有5%和10%左右，總有機(jī)氮轉(zhuǎn)移率僅30%?40%大幅度提高。而這種提高不僅僅是測定數(shù)據(jù)的改變，而是使肝浸膏質(zhì)量有了質(zhì)的改變，可使肝浸膏最大限度的發(fā)揮營養(yǎng)價值。
【具體實施方式】
[0023]以下的實施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實施例中所用的試驗材料，如無特殊說明，均為市售。
[0024]本發(fā)明中使用的木瓜蛋白酶和動物蛋白水解酶均為食品添加劑，均來源于南寧龐博生物工程有限公司。其檢驗依據(jù)為GB 25594-2010《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品工業(yè)用酶制劑》，用量與使用方法符合GB 2760-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》的規(guī)定。木瓜蛋白酶和動物蛋白水解酶均為蛋白質(zhì)，經(jīng)加熱滅酶工藝處理后，分解為氨基酸。
[0025]本發(fā)明中所描述的肝浸膏含氮量為肝浸膏中總無機(jī)氮量與總有機(jī)氮量之和;總有機(jī)氮量為含氮量減去總無機(jī)氮量?？偟D(zhuǎn)移率為肝浸霄中總氮量與肝臟中總氮量的質(zhì)量百分比?？傆袡C(jī)氮轉(zhuǎn)移率為肝浸霄中總有機(jī)氮量與肝臟中總有機(jī)氮量的質(zhì)量百分比。肝浸霄中總無機(jī)氮量，一般均低于0.1%，忽略不計。
[0026]本發(fā)明的肝浸膏規(guī)?；a(chǎn)工藝步驟如下:
(1)取剔除脂肪、筋膜和結(jié)締組織的新鮮或冷凍的健康牛、羊肝臟100-1000kg，絞碎成糜狀，用動物細(xì)胞研磨破碎均質(zhì)機(jī)將肝臟細(xì)胞破壁，制成肝勻漿;將肝臟細(xì)胞破壁有利于細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的浸出；
(2)將步驟(1)制備的肝勻漿置反應(yīng)釜中，加入凈肝質(zhì)量1-4倍重量的水，攪拌均勻，制成肝勻漿懸液;另取木瓜蛋白酶和動物蛋白水解酶按質(zhì)量比0.4-0.6:1比例混合(混合酶總用量為凈肝質(zhì)量的0.5%-0.7%)，加入凈肝質(zhì)量3?4倍量的水，分散均勾，在攪拌狀態(tài)下，緩緩加入上述肝勻漿懸液中，于25-55°C恒溫攪拌，酶解6-10小時；
(3)在步驟(2)的酶解產(chǎn)物中加入凈肝質(zhì)量1-3倍量的水，升溫至85-95°C攪拌提取1-
2..5小時，冷卻至30?45°C，靜置2小時，離心分離，收集肝提取液；
(4)在殘渣中再加入凈肝質(zhì)量1-3倍量的水，升溫至85-95°C攪拌提取1-2..5小時，攪拌的速度為85轉(zhuǎn)/分鐘，冷卻至30?45°C，靜置2小時，離心分離，離心的轉(zhuǎn)速為1500轉(zhuǎn)/分鐘；棄渣，合并步驟(3)和步驟(4)得到的肝提取液，于45-65°C減壓濃縮至稠膏狀(浸膏中總固體量之70%)。
[0027]本發(fā)明對原料的要求如下:必須是健康動物肝臟，如果是新鮮肝臟，色澤應(yīng)正常，外形應(yīng)基本保持完整，應(yīng)無變質(zhì)現(xiàn)象，無其它附著組織;若是冷凍肝臟，色澤應(yīng)均一，無脫水干固、變質(zhì)現(xiàn)象，解凍時應(yīng)無明顯的水質(zhì)冰塊。
[0028]應(yīng)用本發(fā)明方法制備得到的肝浸膏的具體理化性能指標(biāo)如下:
1.本品為掠色或深掠紅色霄狀物;有特殊香味，無焦味。
[0029]2.取本品0.2 g，加水50 ml溶解，取溶液5 ml，加茚三酮約5 mg，加熱，溶液顯蘭紫色。
[0030]3.酸度:取本品0.5 g，加水50 ml溶解，依法測定(中國藥典2000年版二部附錄VIH)，pH 值為4.0 ?6.0。
[0031 ] 4.溶解度:取本品加水制成1%濃度的溶液，為無沉淀的棕色液體。
[0032]5.總固體、脂肪、總糖含量:本品含總固體不低于70%(g/g)，脂肪不超過3.0%，總糖含量不少于總固體的16.0%。
[0033]6.熾灼殘渣:取本品l.0g，依法檢查(中國藥典2000年版二部附錄W N)，遺留殘渣不超過總固體的15.0%。
[0034]7.本品含氮量:按總固體計算，不低于13.0%?？傆袡C(jī)氮的轉(zhuǎn)移率不低于9