專利名稱:利用海參漂燙液制取海參糖蛋白的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種海參加工液的處理，尤其是一種利用海參漂燙液制取海參糖蛋白的方法。
背景技術(shù)：
經(jīng)研究驗證，海參(主要是刺參)體內(nèi)含50多種對人體生理活動有益的營養(yǎng)成分，其中蛋白質(zhì)含量較高，其蛋白質(zhì)含有18種氨基酸，富含皂苷、粘多糖、神經(jīng)節(jié)苷脂、留醇、膠原蛋白等多種活性物質(zhì)；微量元素種類豐富，包括鈣、磷、鐵、鎂、鋅、硒、礬、錳等；以及維生素B1、B2以及尼克酸等多種維生素。其能夠延續(xù)人體衰老，補腎益氣，強精健髓，消除疲勞的能力，更具有抗凝血、抗腫瘤、抗菌、抗病毒及提高免疫力等作用。由于海參所具有眾多生理、藥理活性，其作為滋補品日漸受到消費者的青睞。因此，加工海參的企業(yè)也越來越多。鮮海參在捕撈后，由于自身存在自溶酶等蛋白水解酶類，很容易化皮，自溶。為了便于保存，鮮海參通常要沸水浴漂燙處理，以滅掉自身的酶類，才利于后續(xù)的貯存加工。然而在沸水漂燙的過程中產(chǎn)生大量的漂燙液(有文獻也稱海參加工廢液、海參煮液等)，漂燙液中含有多種活性物質(zhì)如海參皂苷、海參糖蛋白、海參蛋白等。目前，利用海參漂燙液提取活性物質(zhì)的文獻已有公開報道。例如，公開號為CN1313479的發(fā)明專利公開的一種“利用海參加工廢液制備海參皂甙的工藝方法”、公開號為CN1985852的發(fā)明專利公開的一種“利用海參煮汁提取海參多糖等多種活性成分的方法”、公開號為CN10134332的發(fā)明專利申請公開的一種“利用海參加工廢液提取海參多糖的方法”、公開號為CN101532044的發(fā)明專利申請公開的“一種海參煮液提取海參膠原蛋白小肽凍干粉的制備方法”、公開號為CN101585873的發(fā)明專利申請公開的一種“從海參加工廢棄液中回收蛋白質(zhì)及粗多糖的方法”、公開號為CN102060905的發(fā)明專利申請公開的一種“利用鮮海參加工廢液制備海參皂苷Holotoxin
照品的工藝方法”。
糖蛋白是分支的寡糖鏈與多肽鏈共價相連所構(gòu)成的復(fù)合糖，主鏈較短，在大多數(shù)情況下，糖的含量小于蛋質(zhì)質(zhì)。同時，糖蛋白還是一種結(jié)合蛋白質(zhì)，糖蛋白是由短的寡糖鏈與蛋白質(zhì)共價相連構(gòu)成的分子。其具有提高身體免疫力、輔助抗瘤等生物活性。目前，還未見到過利用海參漂燙液提取海參糖蛋白的報道。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，本發(fā)明提供一種利用海參漂燙液制取海參糖蛋白的方法。該制取方法操作簡單、生產(chǎn)周期短、制取的產(chǎn)品利用價值高。
本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是一種利用海參漂燙液制取海參糖蛋白的方法，其是以海參漂燙液為原料，經(jīng)減壓濃縮后進行醇沉；離心，收集沉淀；沉淀干燥后制成粉末；將該粉末采用濃度65-85%的乙醇溶液進行脫鹽處理；離心或者壓濾收集沉淀再重復(fù)脫鹽處理2-3次；脫鹽后的沉淀進行干燥處理，得固定粉末；將固定粉末復(fù)溶于純凈水中，再采用蛋白水解酶水解，得水解液；水解液滅酶，離心，收集上清液；將上清液通過管膜過濾，收集濾過液；將濾過液采用截留分子量為3000Da的濾膜超濾，收集截留液；將截留液進行干燥處理，得海參糖蛋白干品。
所述水解復(fù)溶于純凈水中的固定粉末所采用的蛋白水解酶或為復(fù)合蛋白酶，其用量為固體粉末重量的3-6%。、或為風(fēng)味酶,其用量為固體粉末重量的3-6%。、或為木瓜蛋白酶，其用量為固體粉末重量的3-8%。、或為堿性蛋白酶，其用量為固體粉末重量的3-6%。、或為上述蛋白水解酶中的兩種以上。
本發(fā)明是以鮮海參加工過程中所產(chǎn)生的漂燙液為原料，經(jīng)減壓濃縮，醇沉，沉淀干燥后制成粉末，醇洗脫鹽，復(fù)溶于水后酶解，離心，上清液經(jīng)管濾，超濾，干燥，得海參糖蛋白干品。本發(fā)明利用了海參漂燙液為原料，克服了利用海參原材料提取海參糖蛋白所帶來的成本高、得率低等缺點。另外，本發(fā)明將海參漂燙液濃縮醇沉、沉淀干燥后利用含水的乙醇溶液進行脫鹽處理，克服了海參漂燙液鹽度高、粘稠度高易堵塞超濾設(shè)備的難題。按照本發(fā)明所提供的技術(shù)方案提取的海參糖蛋白，多糖含量在10-20%之間，蛋白含量在50-70%之間。經(jīng)動物實驗證實，其具有良好的提高免疫力，升高白細(xì)胞數(shù)量，輔助抗腫瘤等生物活性。本發(fā)明的制取方法，其設(shè)備投入低，操作簡單，生產(chǎn)周期短，對環(huán)境無污染，所獲得的海參糖蛋白具有極高的利用價值。
具體實施方式
一種利用海參漂燙液制取海參糖蛋白的方法，其具體工藝步驟如下
(I)、以海參漂燙液為原料，將其采用減壓濃縮設(shè)備濃縮至固形物含量在20%_45%之間；
(2)、將所得濃縮液中加入乙醇進行沉淀，使其終濃度為55%_85%之間；
(3)、將乙醇沉淀后的溶液進行離心處理，收集沉淀；
(4)、將沉淀進行干燥后采用粉碎設(shè)備制成粉末；
(5)、將該粉末采用濃度為65-85%的乙醇溶液進行脫鹽處理，采用離心或者壓濾的方式收集沉淀后按照上述方案再重復(fù)脫鹽處理2-3次；
(6)、收集脫鹽處理的沉淀進行干燥處理，得固體粉末；
(7)、將固體粉末復(fù)溶于純凈水中，其純凈水的用量為固體粉末重量的30-45倍，再采用蛋白水解酶進行酶解，控制酶解溫度40-55°C，時間l_5h，得酶解液；將酶解液加熱至90-100°C，保持10-30min，進行滅酶處理；滅酶后酶解液冷卻至4°C，離心去除沉淀，收集上清液；其中，所述的蛋白水解酶
或為復(fù)合蛋白酶，其用量為固體粉末重量的3_6%。；
或為風(fēng)味酶，其用量為固體粉末重量的3_6%。；
或為木瓜蛋白酶，其用量為固體粉末重量的3_8%。；
或為堿性蛋白酶，其用量為固體粉末重量的3_6%。；
或為上述蛋白水解酶中的兩種以上；
(8)、將上清液通過管膜過濾，得濾過液；將濾過液通過截留分子量為3000Da的濾膜進行超濾，收集截留液；
( 9 )、將截留液進行干燥處理，得海參糖蛋白干品。
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步說明。[0024]實施例1
一種利用海參漂燙液制取海參糖蛋白的方法，其具體工藝步驟如下
(I)、稱取海參漂燙液2000L為原料，采用減壓濃縮設(shè)備濃縮至體積150L，固形物
含量為40%左右；
(2)、將所得濃縮液中加入濃度為95%的乙醇進行沉淀，使其終濃度為60%之間；
(3)、將乙醇沉淀后的溶液利用三足式離心機離心，控制轉(zhuǎn)速2000rpm，收集沉淀；
(4 )、將收集的沉淀進行干燥后采用粉碎機制成粉末；
(5)、將該粉末加入到濃度為70%的乙醇溶液中，攪拌脫鹽處理，脫鹽后采用壓濾收集沉淀，并將該沉淀按照上述方案再重復(fù)脫鹽處理3次；
(6)、收集脫鹽處理的沉淀進行干燥處理，得固體粉末5kg ；
(7)、將該固體粉末加入到200L純凈水中，加熱至100°C保持30min，充分溶脹，冷卻至55°C，加入復(fù)合蛋白酶20g水解lh，然后加入風(fēng)味酶25g水解2. 5h，得酶解液；將酶解液加熱至100°C，保持lOmin，進行滅酶處理；滅酶后酶解液冷卻至4°C，再采用三足式離心機離心去除沉淀，其轉(zhuǎn)速控制為2000rpm，收集上清液；
(8)、將上清液通過截留分子量IOKda的管膜過濾，得濾過液；將濾過液通過截留分子量為3000Da的濾膜進行超濾，收集截留液；
( 9 )、將截留液噴霧干燥，得海參糖蛋白干品。
實施例2
一種利用海參漂燙液制取海參糖蛋白的方法，其具體工藝步驟如下
(I)、稱取海參漂燙液6000L為原料，采用減壓濃縮設(shè)備濃縮至體積400L，固形物含量為37%左右；
(2)、將所得濃縮液中加入濃度為95%的乙醇進行沉淀，使其終濃度為65%之間；
(3)、將乙醇沉淀后的溶液利用三足式離心機離心，控制轉(zhuǎn)速2000rpm，收集沉淀；
(4 )、將收集的沉淀進行干燥后采用粉碎機制成粉末；
(5)、將該粉末加入到濃度為65%的乙醇溶液中，攪拌脫鹽處理，脫鹽后采用壓濾收集沉淀，并將該沉淀按照上述方案再重復(fù)脫鹽處理2次；
(6)、收集脫鹽處理的沉淀進行干燥處理，得固體粉末20kg ；
(7)、將該固體粉末加入到700L純凈水中，加熱至100°C保持30min，充分溶脹，冷卻至45°C，加入堿性蛋白酶160g，水解2h，然后加入木瓜蛋白酶60g，水解3h，得酶解液；將酶解液加熱至90°C，保持30min滅酶，進行滅酶處理；滅酶后酶解液冷卻至4°C，再采用三足式離心機離心去除沉淀，其轉(zhuǎn)速控制為2500rpm，收集上清液；
(8)、將上清液通過截留分子量IOKda的管膜過濾，得濾過液；將濾過液通過截留分子量為3000Da的濾膜進行超濾，收集截留液；
( 9 )、將截留液冷凍干燥，得海參糖蛋白干品。
實施例3
一種利用海參漂燙液制取海參糖蛋白的方法，其具體工藝步驟如下
(I)、稱取海參漂燙液2000L為原料，采用減壓濃縮設(shè)備濃縮至體積200L，固形物含量為20%左右；
(2)、將所得濃縮液中加入濃度為95%的乙醇進行沉淀，使其終濃度為85%之間；[0050](3)、將乙醇沉淀后的溶液利用三足式離心機離心，控制轉(zhuǎn)速2000rpm，收集沉淀；
(4)、將收集的沉淀進行干燥后采用粉碎機制成粉末；
(5)、將該粉末加入到濃度為85%的乙醇溶液中，攪拌脫鹽處理，脫鹽后采用壓濾收集沉淀，并將該沉淀按照上述方案再重復(fù)脫鹽處理2次；
(6)、收集脫鹽處理的沉淀進行干燥處理，得固體粉末3kg ；
(7)、將該固體粉末加入到90L純凈水中，加熱至100°C保持30min，充分溶脹，冷卻至40°C，加入堿性蛋白酶18g，水解2h，得酶解液；將酶解液加熱至95°C，保持20min，進行滅酶處理；滅酶后酶解液冷卻至4°C，再采用管式離心機離心去除沉淀，其轉(zhuǎn)速控制為2500rpm,收集上清液；
(8)、將上清液通過截留分子量IOKda的管膜過濾，得濾過液；將濾過液通過截留分子量為3000Da的濾膜進行超濾，收集截留液；
( 9 )、將截留液冷凍干燥，得海參糖蛋白干品。
權(quán)利要求
1.一種利用海參漂燙液制取海參糖蛋白的方法，其特征在于其具體工藝步驟如下(1)、以海參漂燙液為原料，將其采用減壓濃縮設(shè)備濃縮至固形物含量為20%；(2)、將所得濃縮液中加入濃度為95%的乙醇進行沉淀，使其終濃度為85%；(3)、將乙醇沉淀后的溶液利用三足式離心機離心，控制轉(zhuǎn)速2000rpm，收集沉淀；(4)、將收集的沉淀進行干燥后采用粉碎機制成粉末；(5)、將粉末加入到濃度為85%的乙醇溶液中，攪拌脫鹽處理，脫鹽后采用壓濾收集沉淀，并將該沉淀按照上述方案再重復(fù)脫鹽處理2次；(6)、收集脫鹽處理的沉淀進行干燥處理，得固體粉末；(7)、將得到的固體粉末復(fù)溶于純凈水中，其純凈水的用量為固體粉末重量的30倍，加熱至100°C保持30min，充分溶脹，冷卻至40°C，加入堿性蛋白酶，堿性蛋白酶的用量為固體粉末重量的6%。,水解2h,得酶解液；將酶解液加熱至95°C,保持20min,進行滅酶處理；滅酶后酶解液冷卻至4°C，再采用管式離心機離心去除沉淀，其轉(zhuǎn)速控制為2500rpm，收集上清液；(8)、將上清液通過截留分子量IOKda的管膜過濾，得濾過液；將濾過液通過截留分子量為3000Da的濾膜進行超濾，收集截留液；(9 )、將截留液冷凍干燥，得海參糖蛋白干品。
專利摘要
本發(fā)明涉及一種利用海參漂燙液制取海參糖蛋白的方法，是以海參漂燙液為原料，經(jīng)減壓濃縮，醇沉，沉淀干燥后制成粉末，粉末醇洗脫鹽，復(fù)溶于純凈水后酶解，離心，上清液經(jīng)管濾，超濾，干燥，得海參糖蛋白干品。本發(fā)明的制取方法設(shè)備投入低，操作簡單，生產(chǎn)周期短，得率高，產(chǎn)品成本低，所獲得的海參糖蛋白生物活性好。
文檔編號A23J1/04GKCN102406048 B發(fā)布類型授權(quán) 專利申請?zhí)朇N 201110384722
公開日2013年4月17日 申請日期2011年11月29日
發(fā)明者袁文鵬, 胡煒, 孫永軍, 王志偉, 劉昌衡, 張綿松, 孟秀梅, 唐聚德 申請人:山東好當(dāng)家海洋發(fā)展股份有限公司, 山東省科學(xué)院生物研究所導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan專利引用 (7), 非專利引用 (2),