建立奧利亞羅非魚雄性純系的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本項(xiàng)發(fā)明屬于奧利羅非魚的種質(zhì)改良技術(shù)。尤其是能夠通過親本選擇、催熟，雌核發(fā)育，交配選擇，回交的方法，建立起奧利亞羅非魚雄性純系的一種方法。
【背景技術(shù)】
[0002]奧尼雜交羅非魚(奧利亞羅非魚父本與尼羅羅非魚母本交配的后代)是我國主要的羅非魚養(yǎng)殖品種之一，經(jīng)過近二三十年養(yǎng)殖，特別是親本的過度利用，使親本遺傳多樣性增加，通過傳統(tǒng)的表型性狀挑選方法，很難在遺傳性狀方面得到精確改良，導(dǎo)致制出的奧尼雜交羅非魚苗的雄性率、抗逆性等性狀存在不同程度的差異與分化，品種優(yōu)良性狀存在衰退趨勢。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為了解決目前奧尼雜交羅非魚親本，尤其是父本奧利亞羅非魚種質(zhì)優(yōu)良性狀的退化現(xiàn)象，本發(fā)明提供一種建立奧利亞羅非魚雄性純系的一種方法。
[0004]原理:奧利亞羅非魚性別決定的染色體類型是Z、W類型，即ZZ表現(xiàn)為雄性，Zff表現(xiàn)為雌性，要獲得奧利亞羅非魚雄性性狀優(yōu)良純系，必須從現(xiàn)有良種中挑選出親本進(jìn)行建立。本方法建立奧利亞羅非魚雄性純系的原理是，奧利亞羅非魚雌魚產(chǎn)兩種類型的卵子，Z型和W型，雌核發(fā)育后再經(jīng)染色體加倍產(chǎn)生兩種性別的魚苗(而X、Y染色體性別決定類型雌核發(fā)育后代只產(chǎn)生全雌魚XX，如尼羅羅非魚)，即ZZ表現(xiàn)為雄性(純系)，Wff表現(xiàn)為雌性(非需要的)，經(jīng)過雌核發(fā)育產(chǎn)生的雄性魚苗ZZ數(shù)量一般滿足不了生產(chǎn)的大量需求，要進(jìn)行純系擴(kuò)大。具體的是經(jīng)過純化的雄魚ZZ與正常用的雌性奧利亞羅非魚ZW進(jìn)行交配，交配產(chǎn)生雄魚Zz和雌魚Zw各占50%，魚養(yǎng)殖至性成熟。其中的雌魚(Zw，所含Z染色體來自純化的雄魚)再與雌核發(fā)育的雄魚(ZZ)進(jìn)行交配，產(chǎn)生的魚苗養(yǎng)殖至性成熟，結(jié)果產(chǎn)生大量的奧亞利雄魚(ZZ)個(gè)體，即純系。其中Zw型表現(xiàn)為雌魚(淘汰不用)。
[0005]一種建立奧利亞羅非魚優(yōu)良性狀雌性純系的方法，其特征在于包括以下步驟:
一、親本選擇
6月份繁殖季節(jié)，在現(xiàn)有的奧利亞羅非魚保有的品種中，選擇2齡的個(gè)體進(jìn)行繁殖，繁殖在網(wǎng)箱內(nèi)進(jìn)行，網(wǎng)箱I立方米大小，每只網(wǎng)箱放養(yǎng)2尾奧利亞羅非魚雄魚3尾奧利亞羅非魚雌魚，以后每隔一周檢查一次雌魚的產(chǎn)卵情況(卵含在雌魚口腔內(nèi))，產(chǎn)卵量在1500粒以上的雌魚挑出集中在專池中養(yǎng)殖作為備用親魚，1500粒以下雌魚的棄之不用。在挑選過程中，適當(dāng)補(bǔ)充雌性親本，達(dá)到所需要的選擇數(shù)量。
[0006]第二年6月，準(zhǔn)備的備用親魚和2齡紅羅非魚雄魚，分別用網(wǎng)箱分隔飼養(yǎng)，每只網(wǎng)箱放養(yǎng)一尾奧利亞羅非魚雌魚或紅羅非魚雄魚，精養(yǎng)15天左右，當(dāng)發(fā)現(xiàn)一些網(wǎng)箱內(nèi)的魚不再攝食，紅羅非魚雄魚色彩亮麗占居網(wǎng)箱一角時(shí)，即達(dá)到親本催熟要求。
[0007]二、雌核發(fā)育
按照常規(guī)雌核發(fā)育的方法，對紅羅非魚雄魚的精子進(jìn)行滅活，遺傳物質(zhì)失活的精子與奧利亞羅非魚雌魚的卵子“受精”，低溫誘導(dǎo)卵子染色體加倍成正常的二倍體，然后進(jìn)行人工孵化，完成雌核發(fā)育。
[0008]雌核發(fā)育的魚苗中，有正常的奧利亞羅非魚苗(為雌核發(fā)育的后代，其中Wff (罕)和ZZ U )各占50%)，而紅色帶黑色斑點(diǎn)的魚苗為雜交苗(沒有失活的精子與卵子正常受精所至)，棄之不用。雌核發(fā)育的后代魚苗養(yǎng)殖成性成熟，其中有雄魚(ZZ)(占群體中個(gè)體數(shù)量的50%)即為雌核發(fā)育所產(chǎn)生的雄性純系奧利亞羅非魚。
[0009]三、交配選擇
雌核發(fā)育產(chǎn)生的雄性純系奧利亞羅非魚ZZ，與正常的雌魚ZW進(jìn)行交配，產(chǎn)生雄魚Zz和雌魚Zw魚苗，魚苗養(yǎng)殖至性成熟，淘汰其中的雄魚Zz，選擇保留其中的雌魚Zw用于回交。
[0010]四、回交
選擇保留的雌魚Zw與雌核發(fā)育所產(chǎn)生的雄性純系奧利亞羅非魚ZZ進(jìn)行回交，生產(chǎn)出的魚苗養(yǎng)殖到性成熟，其中的雄魚ZZ的Z染色體均來自雌核發(fā)育，即為群體擴(kuò)大后的奧利亞雄性純系羅非魚。
[0011]本發(fā)明通過親本選擇、催熟，雌核發(fā)育，交配選擇，回交的方法，能夠建立奧利亞羅非魚優(yōu)良的純系，有效保持奧利亞羅非魚作為繁殖父本的優(yōu)良性狀。
【具體實(shí)施方式】
[0012]—、親本選擇
6月份繁殖季節(jié)，在現(xiàn)有的奧利亞羅非魚保有的品種中，選擇2齡的個(gè)體進(jìn)行繁殖，繁殖在網(wǎng)箱內(nèi)進(jìn)行，網(wǎng)箱I立方米大小60只，每只網(wǎng)箱放養(yǎng)2尾雄魚3尾雌，以后每隔一周檢查一次雌魚的產(chǎn)卵情況(卵含在雌魚口腔內(nèi))，產(chǎn)卵量在1500粒以上的雌魚挑出集中在專池中養(yǎng)殖作為備用親魚，1500粒以下雌魚的棄之不用。在挑選過程中，適當(dāng)補(bǔ)充雌性親本，達(dá)到所需要的選擇數(shù)量。I個(gè)月后共挑出奧利亞羅非魚雌300尾。
[0013]第二年6月，準(zhǔn)備30尾2齡紅羅非魚雄魚，從300尾奧利亞羅非魚中挑選出性腺發(fā)育好、個(gè)體較大的60尾，紅羅非魚雄魚和后備用親魚奧利亞羅非魚雌魚，分別用網(wǎng)箱分隔飼養(yǎng)，每只網(wǎng)箱放養(yǎng)一尾雌魚或雄魚，精養(yǎng)15天左右，當(dāng)發(fā)現(xiàn)一些網(wǎng)箱內(nèi)的魚不再攝食，雄魚色彩亮麗占居網(wǎng)箱一角時(shí)，即達(dá)到親本催熟要求。
[0014]二、雌核發(fā)育
按照常規(guī)雌核發(fā)育的方法，對紅羅非魚的精子進(jìn)行滅活，遺傳物質(zhì)失活的精子與奧利亞羅非魚卵子“受精”(激發(fā)卵子發(fā)育而不參與遺傳物質(zhì)傳遞)，低溫誘導(dǎo)卵子染色體加倍成正常的二倍體，然后進(jìn)行人工孵化，完成雌核發(fā)育。共獲得雌核發(fā)育魚苗2800尾，
經(jīng)過3個(gè)月的養(yǎng)殖，雌核發(fā)育的魚苗中，有正常的奧利亞羅非魚苗(為雌核發(fā)育的后代)，而紅色帶黑色斑點(diǎn)的魚苗為雜交苗(沒有失活的精子與卵子正常受精所至)，棄之不用。去除畸形和生長緩慢的個(gè)體，共獲得雌核發(fā)育魚200余尾。保留其中有100余尾雄魚(ZZ)，挑去雌魚(WW)。
[0015]三、交配選擇
雌核發(fā)育產(chǎn)生的雄性純系奧利亞羅非魚(ZZ) 100尾中，挑選性腺發(fā)育良好共計(jì)30尾，與正常的雌魚(Zw) 100尾進(jìn)行交配，共獲魚苗60000尾(40%的雌魚產(chǎn)卵，每尾平均產(chǎn)1500尾左右)魚苗養(yǎng)殖至性成熟，淘汰其中的雄魚(Zz)，選擇保留其中的雌魚30000尾，養(yǎng)成后得到雌魚(Zw)1000余尾用于回交。根據(jù)生產(chǎn)規(guī)模選擇保留雌魚。(按40%雌魚產(chǎn)卵，每尾產(chǎn)1500尾魚苗，10000雌魚可產(chǎn)600萬尾苗，其中300萬尾為雄性奧利亞羅非魚)
四、回交
選擇保留的雌魚(Zw) 10000尾中挑選400尾，與雌核發(fā)育所產(chǎn)生的雄性純系(ZZ) 100尾進(jìn)行回交，生產(chǎn)出的240000尾魚苗養(yǎng)殖到性成熟，其中的120000尾雄魚(ZZ)的Z染色體均來自雌核發(fā)育，即為群體擴(kuò)大后的奧利亞雄性純系羅非魚。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.建立奧利亞羅非魚雄性純系的方法，其特征在于包括下述步驟: (1)親本選擇: 6月份繁殖季節(jié)，在現(xiàn)有的奧利亞羅非魚保有的品種中，選擇2齡的個(gè)體進(jìn)行繁殖，每隔一周檢查一次奧利亞羅非魚雌魚的產(chǎn)卵情況，挑出產(chǎn)卵量在1500粒以上的雌魚作為備用親魚； 第二年6月，將備用親魚和2齡紅羅非魚雄魚，分隔飼養(yǎng)，精養(yǎng)12-18天，達(dá)到親本催熟要求； (2)雌核發(fā)育: 按照常規(guī)雌核發(fā)育的方法，對紅羅非魚雄魚的精子進(jìn)行滅活，遺傳物質(zhì)失活的精子與奧利亞羅非魚備用親魚的卵子“受精”，低溫誘導(dǎo)卵子染色體加倍成正常的二倍體，然后進(jìn)行人工孵化，完成雌核發(fā)育； 雌核發(fā)育的魚苗中，剔除沒有失活的精子與奧利亞羅非魚備用親魚的卵子正常受精的雜交苗，雌核發(fā)育的后代魚苗養(yǎng)殖成性成熟，其中雄魚即為雌核發(fā)育所產(chǎn)生的雄性純系奧利亞羅非魚(ZZ)； (3)交配選擇: 雌核發(fā)育產(chǎn)生的雄性純系奧利亞羅非魚(ZZ)，與正常的奧利亞羅非魚雌魚(zw)進(jìn)行交配，魚苗養(yǎng)殖至性成熟，淘汰其中的雄魚(Zz)，選擇保留其中的雌魚(Zw)用于回交； (4)回交: 選擇保留的雌魚(Zw)與雌核發(fā)育所產(chǎn)生的雄性純系奧利亞羅非魚(ZZ)進(jìn)行回交， 生產(chǎn)出的魚苗養(yǎng)殖到性成熟，其中的雄魚(ZZ)的Z染色體均來自雌核發(fā)育，即為群體擴(kuò)大后的奧利亞雄性純系羅非魚。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立奧利亞羅非魚雄性純系的方法，其特征在于:所述步驟Cl)中繁殖過程在網(wǎng)箱內(nèi)進(jìn)行，網(wǎng)箱I立方米大小，每只網(wǎng)箱放養(yǎng)2尾雄魚3尾雌魚。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立奧利亞羅非魚雄性純系的方法，其特征在于:所述步驟Cl)中備用親魚的挑選過程中，定期補(bǔ)充奧利亞羅非魚雌魚。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立奧利亞羅非魚雄性純系的方法，其特征在于:所述步驟(O中分隔飼養(yǎng)采用網(wǎng)箱分隔飼養(yǎng)，每只網(wǎng)箱放養(yǎng)一尾備用親魚或2齡紅羅非魚雄魚。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的建立奧利亞羅非魚雄性純系的方法，其特征在于:當(dāng)網(wǎng)箱內(nèi)的魚不再攝食，紅羅非魚雄魚色彩亮麗占居網(wǎng)箱一角時(shí)，即達(dá)到親本催熟要求。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立奧利亞羅非魚雄性純系的方法，其特征在于:所述步驟(2)中雌核發(fā)育所產(chǎn)生的雄性純系奧利亞羅非魚(ZZ)占雌核發(fā)育的魚苗的50%。
【專利摘要】本發(fā)明公布了一種建立奧利亞羅非魚雄性純系的方法，經(jīng)過純化的雄魚ZZ與正常用的雌性奧利亞羅非魚zw進(jìn)行交配，交配產(chǎn)生雄魚Zz和雌魚Zw各占50%，魚養(yǎng)殖至性成熟。其中的雌魚Zw，所含Z染色體來自純化的雄魚再與雌核發(fā)育的雄魚ZZ進(jìn)行交配，產(chǎn)生的魚苗養(yǎng)殖至性成熟，結(jié)果產(chǎn)生大量的純系奧亞利雄魚ZZ個(gè)體。本發(fā)明通過親本選擇、催熟，雌核發(fā)育，交配選擇，回交的方法，能夠建立奧利亞羅非魚優(yōu)良的純系，有效保持奧利亞羅非魚作為繁殖父本的優(yōu)良性狀。
【IPC分類】A01K61/00
【公開號】CN105165684
【申請?zhí)枴?br>【發(fā)明人】徐跑, 何杰, 強(qiáng)俊
【申請人】中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心
【公開日】2015年12月23日
【申請日】2015年9月30日