一種蝙蝠蛾擬青霉紫色素的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及天然食用色素的技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蝙蝠蛾擬青霉紫色素的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomyces hepiali)是野生冬蟲夏草分化成熟后期的一種重要內(nèi)生真菌?；瘜W(xué)分析表明該菌種蝙蝠蛾擬青霉的化學(xué)指紋圖譜與天然冬蟲夏草更為接近，也含有天然冬蟲夏草中所具有的蟲草素、甘露醇、蟲草多糖、多種生物活性物質(zhì)，具有抗氧化、抗腫瘤、抗輻射、調(diào)節(jié)機體免疫能力等多種生物功能。近年來，我們對分離自青海玉樹地區(qū)的蝙蝠蛾擬青霉菌株HNl菌株的研究發(fā)現(xiàn)，該菌株在特定條件的液體發(fā)酵過程中可以產(chǎn)生豐富的紫色素，進一步通過優(yōu)化提取條件，可以從其發(fā)酵菌絲體中提取到高穩(wěn)定性的紫色素，該紫色素?zé)o毒無害，安全穩(wěn)定，具有很好的脂溶性，可作為多種食品加工中的食用色素。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明目的旨在提供一種蝙蝠蛾擬青霉紫色素的制備方法，實現(xiàn)本發(fā)明的具體方案如下:
[0004]1、一種蝙蝠蛾擬青霉紫色素的制備方法，其特征在于包括以下操作步驟:
[0005](I)制備蝙蝠蛾擬青霉液體發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:白砂糖40g/L，酵母膏2.50g/L，麥芽粉10g/L，磷酸二氫鉀1.50g/L，硫酸鎂0.05g/L，土豆汁15g/L，分別各取200mL分裝于500mL的三角瓶中，于115°C下滅菌25分鐘后備用；
[0006](2)從保存于土豆斜面培養(yǎng)基的蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomyces hepiali)HNl菌株的母種中挖取大小約為0.5cmX0.5cm菌絲體塊，接種于新鮮的土豆斜面培養(yǎng)基上，15°C下靜置培養(yǎng)120小時，待菌絲體完全轉(zhuǎn)色為紫色時，再取0.5cmX0.5cm菌絲體塊3塊接種于裝有200mL種子培養(yǎng)基的容量為500mL的三角瓶中，于15°C下靜止培養(yǎng)12小時后，120轉(zhuǎn)/分鐘下振蕩培養(yǎng)48小時后，靜置12小時然后再120轉(zhuǎn)/分鐘下振蕩培養(yǎng)96小時，即可獲得蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵醪；
[0007](3)將步驟(2)中收獲得到的蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵醪用濾布壓濾并用蒸餾水洗滌3次后，可獲得深紫色的蝙蝠蛾擬青霉菌絲體；
[0008](4)將步驟(3)獲得的蝙蝠蛾擬青霉菌絲體按重量比1:1加水后用打漿機打漿后，在功率為300瓦下超聲破碎20分鐘冷凍干燥，然后按重量比1: 5加入氯仿(三氯甲燒)抽提2次后進彳丁合并；
[0009](5)將步驟(4)獲得的氯仿抽提液40°C下減壓蒸干后可獲得干燥的蝙蝠蛾擬青霉紫色素；
[0010](6)將步驟(5)所得到的蝙蝠蛾擬青霉紫色素用分光光度計進行光譜掃描確定其吸收光譜。
[0011]2、根據(jù)專利要求I所述的一種蝙蝠蛾擬青霉紫色素的制備方法，其特征在于:
[0012](I)所述步驟(I)中所述的蝙蝠蛾擬青霉液體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方:白砂糖40g/L，酵母膏2.50g/L，麥芽粉10g/L，磷酸二氫鉀1.50g/L，硫酸鎂0.05g/L，土豆汁15g/L ;
[0013](2)所述步驟(2)中所述的蝙蝠蛾擬青霉菌絲體接種時機為菌絲體完全轉(zhuǎn)色為紫色，斜面培養(yǎng)溫度和液體發(fā)酵溫度為15°C ;
[0014](3)所述步驟(2)中所述的120轉(zhuǎn)/分鐘下振蕩培養(yǎng)48小時后，靜置12小時然后再120轉(zhuǎn)/分鐘下振蕩培養(yǎng)96小時的培養(yǎng)方式；
[0015](4)所述步驟(4)中所述的蝙蝠蛾擬青霉紫色素的提取溶劑為1: 5的氯仿溶液，提取次數(shù)為2次以及40°C的減壓蒸餾條件。
【附圖說明】
[0016]圖1蝙蝠蛾擬青霉紫色素在不同溶劑中的吸收光譜
[0017]圖2蝙蝠蛾擬青霉紫色素在H2O2溶液中的穩(wěn)定性
[0018]圖3蝙蝠蛾擬青霉紫色素在Na2SO3S液中的穩(wěn)定性
[0019]圖4蝙蝠蛾擬青霉紫色素在不同溫度下的穩(wěn)定性
[0020]圖5蝙蝠蛾擬青霉紫色素在不同光照時間下的穩(wěn)定性
【具體實施方式】
[0021]下面通過實施例，對本發(fā)明作進一步描述。
[0022]實施例1:
[0023]本發(fā)明目的旨在提供一種蝙蝠蛾擬青霉紫色素的制備方法，實現(xiàn)本發(fā)明的具體方案如下:1、一種蝙蝠蛾擬青霉紫色素的制備方法，其特征在于包括以下操作步驟:
[0024](I)制備蝙蝠蛾擬青霉液體發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:白砂糖40g/L，酵母膏2.50g/L，麥芽粉10g/L，磷酸二氫鉀1.50g/L，硫酸鎂0.05g/L，土豆汁15g/L，分別各取200mL分裝于500mL的三角瓶中，于115°C下滅菌25分鐘后備用；
[0025](2)從保存于土豆斜面培養(yǎng)基的蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomyces hepiali)HNl菌株的母種中挖取大小約為0.5cmX0.5cm菌絲體塊，接種于新鮮的土豆斜面培養(yǎng)基上，15°C下靜置培養(yǎng)120小時，待菌絲體完全轉(zhuǎn)色為紫色時，再取0.5cmX0.5cm菌絲體塊3塊接種于裝有200mL種子培養(yǎng)基的容量為500mL的三角瓶中，于15°C下靜止培養(yǎng)12小時后，120轉(zhuǎn)/分鐘下振蕩培養(yǎng)48小時后，靜置12小時然后再120轉(zhuǎn)/分鐘下振蕩培養(yǎng)96小時，即可獲得蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵醪；
[0026](3)將步驟(2)中收獲得到的蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵醪用濾布壓濾并用蒸餾水洗滌3次后，可獲得深紫色的蝙蝠蛾擬青霉菌絲體；
[0027](4)將步驟(3)獲得的蝙蝠蛾擬青霉菌絲體按重量比1:1加水后用打漿機打漿后，在功率為300瓦下超聲破碎20分鐘冷凍干燥，然后按重量比1: 5加入氯仿(三氯甲燒)抽提2次后進彳丁合并；
[0028](5)將步驟(4)獲得的氯仿抽提液40°C下減壓蒸干后可獲得干燥的蝙蝠蛾擬青霉紫色素；
[0029](6)將步驟(5)所得到的蝙蝠蛾擬青霉紫色素用分光光度計進行光譜掃描確定其吸收光譜。
[0030]實施例2:
[0031]一種蝙蝠蛾擬青霉紫色素的制備方法
[0032](I)不同提取溶劑對蝙蝠蛾擬青霉色素提取率的影響
[0033]試驗了不同提取溶劑對蝙蝠蛾擬青霉菌絲體紫色素的影響，結(jié)果見圖1。
[0034]從圖1不同溶劑的提取效果可以看出，氯仿作為提取溶劑時，所提取的的蝙蝠蛾擬青霉紫色素色澤清麗，吸光值達到最高，可作為最佳的提取溶劑。
[0035](2)蝙蝠蛾擬青霉紫色素的穩(wěn)定性研究
[0036]研究了蝙蝠蛾擬青霉紫色素在H2O2溶液中的穩(wěn)定性，結(jié)果見圖2。從圖2可以看出，該色素在1-7%的H2O2中能夠保持較好的穩(wěn)定性，當(dāng)高于7%濃度后，該紫色素吸光值有較大下降。
[0037]研究了蝙蝠蛾擬青霉紫色素在Na2SO3S液中的穩(wěn)定性，結(jié)果見圖3。從圖3可以看出，該色素在0.05-0.3%的Na2SO3中能夠保持較好的穩(wěn)定性，當(dāng)高于0.3%濃度后，該紫色素吸光值有較大下降。
[0038]研究了蝙蝠蛾擬青霉紫色素在不同加熱溫度下的穩(wěn)定性，結(jié)果見圖4。從圖4可以看出，該色素在30-70°C下可以保持較好的穩(wěn)定性。
[0039]研究了蝙蝠蛾擬青霉紫色素在不同光照時間下的穩(wěn)定性，結(jié)果見圖5。從圖5可以看出，該色素在自然光照下11天內(nèi)可以保持較好的穩(wěn)定性。
【主權(quán)項】
1.一種蝙蝠蛾擬青霉紫色素的制備方法，其特征在于包括以下操作步驟: (1)制備蝙蝠蛾擬青霉液體發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:白砂糖40g/L，酵母膏2.50g/L，麥芽粉10g/L，磷酸二氫鉀1.50g/L，硫酸鎂0.05g/L，土豆汁15g/L，分別各取200mL分裝于500mL的三角瓶中，于115°C下滅菌25分鐘后備用； (2)從保存于土豆斜面培養(yǎng)基的蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomyceshepiali)HNl菌株的母種中挖取大小約為0.5cmX0.5cm菌絲體塊，接種于新鮮的土豆斜面培養(yǎng)基上，15°C下靜置培養(yǎng)120小時，待菌絲體完全轉(zhuǎn)色為紫色時，再取0.5cmX0.5cm菌絲體塊3塊接種于裝有200mL種子培養(yǎng)基的容量為500mL的三角瓶中，于15 °C下靜止培養(yǎng)12小時后，120轉(zhuǎn)/分鐘下振蕩培養(yǎng)48小時后，靜置12小時然后再120轉(zhuǎn)/分鐘下振蕩培養(yǎng)96小時，即可獲得蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵醪； (3)將步驟(2)中收獲得到的蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵醪用濾布壓濾并用蒸餾水洗滌3次后，可獲得深紫色的蝙蝠蛾擬青霉菌絲體； (4)將步驟(3)獲得的蝙蝠蛾擬青霉菌絲體按重量比1:1加水后用打漿機打漿后，在功率為300瓦下超聲破碎20分鐘冷凍干燥，然后按重量比1: 5加入氯仿(三氯甲烷)抽提2次后進彳丁合并； (5)將步驟(4)獲得的氯仿抽提液40°C下減壓蒸干后可獲得干燥的蝙蝠蛾擬青霉紫色素； (6)將步驟(5)所得到的蝙蝠蛾擬青霉紫色素用分光光度計進行光譜掃描確定其吸收光譜。2.根據(jù)專利要求I所述的一種蝙蝠蛾擬青霉紫色素的制備方法，其特征在于: (1)所述步驟(I)中所述的蝙蝠蛾擬青霉液體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方:白砂糖40g/L，酵母膏2.50g/L，麥芽粉10g/L，磷酸二氫鉀1.50g/L，硫酸鎂0.05g/L，土豆汁15g/L ; (2)所述步驟(2)中所述的蝙蝠蛾擬青霉菌絲體接種時機為菌絲體完全轉(zhuǎn)色為紫色，斜面培養(yǎng)溫度和液體發(fā)酵溫度為15°C ; (3)所述步驟(2)中所述的120轉(zhuǎn)/分鐘下振蕩培養(yǎng)48小時后，靜置12小時然后再120轉(zhuǎn)/分鐘下振蕩培養(yǎng)96小時的培養(yǎng)方式； (4)所述步驟(4)中所述的蝙蝠蛾擬青霉紫色素的提取溶劑為1: 5的氯仿溶液，提取次數(shù)為2次以及40°C的減壓蒸餾條件。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種蝙蝠蛾擬青霉紫色素的制備方法，其特征在于是按以下步驟制備的：(1)配制蝙蝠蛾擬青霉液體發(fā)酵培養(yǎng)基并高溫高壓滅菌；(2)加入蝙蝠蛾擬青霉液體菌種進行低溫深層發(fā)酵；(3)將發(fā)酵產(chǎn)物過濾后獲得深紫色菌絲體；(4)將菌絲體打漿并超聲破碎；(5)用溶劑萃取后減壓蒸餾獲得蝙蝠蛾擬青霉菌絲體紫色素。所述制備工藝制得的蝙蝠蛾擬青霉紫色素色澤清麗、穩(wěn)定，無毒無害，可作為天然色素用于多種食品加工行業(yè)。
【IPC分類】C12P1/02
【公開號】CN105177050
【申請?zhí)枴?br>【發(fā)明人】武忠偉, 何承云, 康壯麗, 胡喜貴, 李小軍, 王丙麗
【申請人】河南科技學(xué)院
【公開日】2015年12月23日
【申請日】2015年10月26日