一種提取木犀草素的方法
【專利說明】一種提取木犀草素的方法
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明涉及一種從含木犀草素植物如蘇葉、金銀花等天然藥材或其提取物中分離提取高純度木犀草素的方法。
【背景技術(shù)】
[0003]木犀草素是一種天然黃酮類化合物，存在于蘇葉、金銀花、荊芥等天然藥材及洋白菜、菜花、胡蘿卜等蔬菜中，研究表明具有抗炎、抗過敏、抗腫瘤、抗氧化、保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)等多種藥理學(xué)作用，臨床主要用于呼吸系統(tǒng)炎癥性疾病、腫瘤疾病及心血管疾病等的治療。
[0004]目前有關(guān)木犀草素粗體物的提取方法有酒精浸提法、甲醇浸提法等及進(jìn)一步的聚酰胺層析法進(jìn)行提純。也有相關(guān)較高純度木犀草素的提取方法，如李紅霞等(中國專利申請?zhí)?00910004229.1)公開了“一種分離純化木犀草素的方法”，步驟包括乙醇粗提，聚合物制備，萃取柱純化等，操作步驟較復(fù)雜，且需要較長的分離提取時(shí)間。
[0005]本發(fā)明以含木犀草素植物如蘇葉、金銀花等天然藥材或其提取物為原料，通過水提醇沉及高效液相色譜制備技術(shù)等方法，可快速從中分離提取到高純度的木犀草素。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是提供了一種快速從含木犀草素植物如蘇葉、金銀花等天然藥材或其提取物中分離提取木犀草素的工藝。
[0007]本發(fā)明的目的是由以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
一種從含木犀草素植物如蘇葉、金銀花等天然藥材或其提取物中提取高純度木犀草素的工藝，其步驟如下:
A.將所用材料分別進(jìn)行淋洗處理、2-3次煎煮提取，合并2-3次煎煮提取的液體，得到初提物；所述的2-3次煎煮提取中，材料與水的重量比為1:10-20 ;所述的淋洗處理和煎煮處理均采用蒸餾水，煎煮時(shí)間為30-60min ；
B.將所述的初提物進(jìn)行濃縮處理，得到濃縮液；所述的濃縮藥液中，材料濃度為Ig/ml ;所述的濃縮處理中，采用減壓濃縮的方法；
C.向所述的濃縮液中加無水乙醇，得到乙醇溶液；所述乙醇溶液中，乙醇濃度為75%；將所述的乙醇溶液進(jìn)行低溫離心處理，得到乙醇上清液和沉淀；所述的低溫離心處理中，溫度為4°C，離心力為5000g，時(shí)間為30min ；
D.將所述的乙醇上清液進(jìn)行回收乙醇處理，得到提取物；所述的提取物中，材料濃度為 lg/ml ；
E.將所述的提取物用流動相配制成50-300mg/ml的提取物溶液，或材料提取物用流動相配制成5-20mg/ml的溶液,將木犀草素標(biāo)準(zhǔn)品用流動相配制成0.lmg/ml的木犀草素溶液，均過0.45μπι微孔濾膜，所述的流動相為甲醇和0.2%乙酸的混合物(體積比為65:35)； F.將木犀草素標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣制備型高效液相色譜儀確定木犀草素出峰的保留時(shí)間；將提取物溶液進(jìn)樣制備型高效液相色譜儀，收集與標(biāo)準(zhǔn)品木犀草素一致的保留時(shí)間組分，提取物溶液連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣收集同一組分，低溫干燥即得到高純度木犀草素；
G.所述的制備型高效液相色譜條件是:VarianProstar 210制備型高效液相色譜儀，色譜柱 Dynamax HPLC column, 250 X 21.4 mm, Microsorb 100-8 C18 ;流速為 1ml/min，柱溫25°C，檢測波長為350nm ;流動相為甲醇和0.2%乙酸的混合物(體積比為65:35)，提取物的進(jìn)樣體積為l_2ml。
[0008]【具體實(shí)施方式】:
實(shí)施例1:
唇形科植物中藥蘇葉飲片0.5kg以蒸餾水淋洗，飲片與蒸餾水的重量比為1:15，以YZN50型液體真空濃縮煎藥機(jī)煎煮2次，每次時(shí)間lh，合并煎液減壓濃縮至生藥濃度為Ig/ml。加入無水乙醇，得到乙醇濃度為75%蘇葉提取液，4°C、5000g離心30min，棄沉淀，得到蘇葉乙醇上清液，以YZN50型液體真空濃縮煎藥機(jī)減壓回收乙醇，得到蘇葉濃度為lg/ml蘇葉提取物。
[0009]將蘇葉提取物用流動相配制成200mg/ml的蘇葉提取物溶液，將木犀草素標(biāo)準(zhǔn)品用流動相配制成0.lmg/ml的木犀草素溶液，均過0.45Pm微孔濾膜；將木犀草素標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣制備型高效液相色譜儀確定木犀草素出峰的保留時(shí)間為14.15min，將蘇葉提取物溶液進(jìn)樣制備型高效液相色譜儀，收集與標(biāo)準(zhǔn)品木犀草素一致的保留時(shí)間組分，蘇葉提取物溶液連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣制備型高效液相色譜儀收集同一組分，低溫干燥即得到木犀草素；
將獲得的木犀草素用流動相配制成0.lmg/ml的木犀草素溶液；同時(shí)，將木犀草素標(biāo)準(zhǔn)品用流動相配制成0.lmg/ml的木犀草素溶液。將木犀草素溶液及標(biāo)準(zhǔn)品，依次進(jìn)樣分析型高效液相色譜儀，檢測木犀草素純度> 95% ;分析型高效液相色譜儀為Agilent 1100，分析色譜柱為Eclipse XDB- C18 5 Pm,4.6X150 mm。流速為0.8 ml/min，檢測波長為 350 nm。流動相為甲醇和0.2%乙酸的混合物(體積比為65:35)，進(jìn)樣體積為10 μ?。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種從含木犀草素植物如蘇葉、金銀花等天然藥材或其提取物中提取木犀草素的方法，其特征在于:所述的方法主要涉及水提醇沉技術(shù)和高效液相色譜制備技術(shù)，與傳統(tǒng)水提萃取等方法比較具有速度快、純度高的特點(diǎn)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從含木犀草素植物如蘇葉、金銀花等天然藥材或其提取物中提取木犀草素的方法，其特征在于該方法包括以下步驟: A.將所用材料分別進(jìn)行淋洗處理、2-3次煎煮提取，合并2-3次煎煮提取的液體，得到初提物；所述的2-3次煎煮提取中，材料與水的重量比為1:10-20 ;所述的淋洗處理和煎煮處理均采用蒸餾水，煎煮時(shí)間為30-60min ； B.將所述的初提物進(jìn)行濃縮處理，得到濃縮液；所述的濃縮藥液中，材料濃度為Ig/ml ;所述的濃縮處理中，采用減壓濃縮的方法； C.向所述的濃縮液中加無水乙醇，得到乙醇溶液；所述乙醇溶液中，乙醇濃度為75%；將所述的乙醇溶液進(jìn)行低溫離心處理，得到乙醇上清液和沉淀；所述的低溫離心處理中，溫度為4°C，離心力為5000g，時(shí)間為30min ； D.將所述的乙醇上清液進(jìn)行回收乙醇處理，得到提取物；所述的提取物中，材料濃度為 lg/ml ； E.將所述的提取物用流動相配制成50-300mg/ml的提取物溶液，或材料提取物用流動相配制成5-20mg/ml的溶液,將木犀草素標(biāo)準(zhǔn)品用流動相配制成0.lmg/ml的木犀草素溶液，均過0.45μπι微孔濾膜，所述的流動相為甲醇和0.2%乙酸的混合物(體積比為65:35)； F.將木犀草素標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣制備型高效液相色譜儀確定木犀草素出峰的保留時(shí)間；將提取物溶液進(jìn)樣制備型高效液相色譜儀，收集與標(biāo)準(zhǔn)品木犀草素一致的保留時(shí)間組分，提取物溶液連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣收集同一組分，低溫干燥即得到高純度木犀草素； G.所述的制備型高效液相色譜條件是:VarianProstar 210制備型高效液相色譜儀，色譜柱 Dynamax HPLC column, 250 X 21.4 mm, Microsorb 100-8 C18 ;流速為 1ml/min，柱溫25°C，檢測波長為350nm ;流動相為甲醇和0.2%乙酸的混合物(體積比為65:35)，提取物的進(jìn)樣體積為l_2ml。
【專利摘要】一種從含木犀草素植物如蘇葉、金銀花等天然藥材或其提取物中分離提取高純度木犀草素的方法，其特征在于將所用材料進(jìn)行水提醇沉處理，回收乙醇得到其提取物。先用木犀草素標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣制備型高效液相色譜儀確定木犀草素出峰的保留時(shí)間，再將提取物溶液進(jìn)樣制備型高效液相色譜儀，收集與標(biāo)準(zhǔn)品木犀草素一致的保留時(shí)間組分，提取物溶液重復(fù)進(jìn)樣收集同一組分，低溫干燥即得到高純度木犀草素。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是通過水提醇沉及高效液相色譜制備技術(shù)，可快速從含木犀草素植物如蘇葉、金銀花等天然藥材或其提取物中分離提取到高純度的木犀草素。
【IPC分類】C07D311/40, C07D311/30
【公開號】CN105646424
【申請?zhí)枴?br>【發(fā)明人】姜代勛, 李佳, 李豐男, 陳武
【申請人】北京農(nóng)學(xué)院
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2014年11月15日