技術(shù)編號:413251
提示:您尚未登錄,請點(diǎn) 登 陸 后下載,如果您還沒有賬戶請點(diǎn) 注 冊 ,登陸完成后,請刷新本頁查看技術(shù)詳細(xì)信息。技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明屬于分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種克隆及蛋白表達(dá)質(zhì)粒載體,即一種含有NusA蛋白融合標(biāo)簽的快速克隆及蛋白表達(dá)質(zhì)粒載體。背景技術(shù)傳統(tǒng)的克隆方法是通過將質(zhì)粒載體同目的基因片段分別用相同的雙酶切消化后產(chǎn)生2-4個(gè)堿基的粘性末端,利用連接酶將互補(bǔ)的粘性末端進(jìn)行連接,隨后轉(zhuǎn)化大腸桿菌細(xì)胞,表達(dá)純化蛋白。由于粘性末端長度比較短,后續(xù)必須通過T4DNA連接酶將載體和目的基因片段進(jìn)行連接,并且在此過程中可能會(huì)有部分載體發(fā)生自連接。這種方法克隆基因大約需要兩到三天時(shí)間。為了實(shí)現(xiàn)不依賴于連接酶的克隆方法,就需要構(gòu)建一種...
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