用于淋巴結檢測的低滲溶液的制作方法
【專利說明】
[0001] 相關申請的交叉引用
[0002] 本申請要求于2013年3月11日提交的美國臨時專利申請第61/775,780號的優(yōu) 先權，其全部內容通過引用結合于此作為參考。
技術領域
[0003] 本申請通常涉及內科診斷學領域和診斷方法以及用于對外科切除的組織進行定 位的器件。
【背景技術】
[0004] 每年大約有1250000例新發(fā)乳腺癌病例被診斷。在大多數情況下，迫切需要手術 去除腫瘤，和切除前哨淋巴結，并組織學地檢測它們以確定癌癥是否已擴散到體內的其他 部位。前哨淋巴結是從腫瘤接受淋巴引流的第一結。之所以這樣稱呼是因為它們可靠地提 醒臨床醫(yī)生任何癌癥的擴散。前哨淋巴結活檢是當今乳腺癌手術中的醫(yī)療標準。
[0005] 在手術中定位前哨淋巴結是很困難的。定位前哨淋巴結的一種方法是將深藍色染 料注入乳腺中的淋巴系統(tǒng)內。然后染料分散在整個乳腺淋巴系統(tǒng)并且外科醫(yī)生移除任何有 顏色的結。這種方法被公認為容易出錯。
[0006] -種改進的方法包括將放射性染料注入淋巴結內。以類似的方式，染料引流穿過 整個淋巴系統(tǒng)和然后外科醫(yī)生使用輻射探測器以幫助定位前哨淋巴結。然而，放射性同位 素的使用提出了重大的和昂貴的后勤負擔，這是因為除了需要用于常規(guī)手術的外科醫(yī)生之 外，還需要分配核醫(yī)學放射學家的時間和資源。此外，許多患者都不愿意接受放射性注射。 這些因素可以成為使用放射性同位素定位前哨淋巴結的重要障礙。
[0007] 進一步改進的方法包括將磁性粒子的懸浮液注射到淋巴結內，并等待磁性粒子引 流穿過整個淋巴系統(tǒng)。然后使用磁力計檢測粒子，其揭示了淋巴結的位置。參見美國專利[0008] 因此，需要存在能夠使更有效的程序成為可能的組合物。
[0009] 本發(fā)明解決這方面的需要。

【發(fā)明內容】

[0010] 本發(fā)明涉及一種用于醫(yī)用注射的低滲懸浮液。在一個實施例中，該組合物包括約 13mg/mL至約200mg/mL的磁性粒子，和選自約0. 01% w/v至約0. 6% w/v的無機鹽（例如， 氯化鈉）或約〇. 5% w/v至約I. 5% w/v的二元醇的滲透物。
[0011] 低滲懸浮液的實施例可以包括一個或多個下列特征：
[0012] 磁性粒子可以是氧化鐵粒子，諸如超順磁性氧化鐵粒子（例如，磁赤鐵礦）。
[0013] 所述磁性粒子可以被包衣，諸如被葡聚糖（例如，羧基葡聚糖）包衣。
[0014] 懸浮液可以具有約13mg/mL的磁性粒子，約28mg/mL的磁性粒子，56mg/mL的磁性 粒子，100mg/mL的磁性粒子，140mg/mL的磁性粒子或約200mg/mL的磁性粒子。
[0015] 懸浮液可以具有約80m0sm/kg至約160m0sm/kg的滲透壓。
[0016] 懸浮液可以包括輔料（賦形劑）。
[0017] 無機鹽可以存在的量為約0. 01 % w/v至0. 6% w/v，約0. 05% w/v至0. 3% w/v， 約0. 1 % w/v至0. 3% w/v，小于約0. 6% w/v或者小于約0. 3% w/v。
[0018] 本發(fā)明還提供了一種在患者（例如，人）中定位淋巴結的方法。該方法包括以下 步驟：提供低滲懸浮液；將低滲懸浮液注射到患者體內；等待直至磁性粒子被截留在淋巴 結中；和通過檢測磁性粒子的位置來檢測淋巴結的位置。
[0019] 該方法可包括一個或多個下列特征：
[0020] 該方法可以包括將0. 2mL的低滲懸浮液，0. 4mL的低滲懸浮液或0. 8mL的低滲懸浮 液注射到患者體內。
[0021] 可使用磁力計實施檢測。
[0022] 本發(fā)明還提供了一種快速定位患者（例如，人）體內淋巴結的方法。該方法包括 下述步驟：提供包括磁性粒子的低滲懸浮液；將低滲懸浮液注射至患者體內；并通過檢測 磁性粒子的位置在注射的10分鐘內或在短短的5分鐘內檢測淋巴結，基于檢測，檢測足以 立即開始淋巴結上的醫(yī)療程序。
[0023] 本發(fā)明還提供一種使用磁熱療治療患者的方法，該方法包括以下步驟：提供低滲 懸浮液；將低滲懸浮液注射到患者體內；和將患者暴露于交變磁場。
【附圖說明】
[0024] 不必按照比例繪制附圖，相反，通常應該強調，基于示例性原則來設置附圖。附圖 在所有方面被認為是說明性的并且不旨在限制本發(fā)明，本發(fā)明的范圍僅受權利要求的限 定。
[0025] 圖1示出了對于不同的鹽基低滲溶液在淋巴腺處的SentimagOH茲力計測量（Abs 單位）。結果表示為從0至2小時的平均值土SEM，η = 3。
[0026] 圖2示出了對于不同的鹽基和非鹽基低滲溶液在淋巴結處的Seiitimag?磁力計 測量（Abs單位）。結果表示為從0至120分鐘的平均值土SEM，η = 3。
【具體實施方式】
[0027] 本發(fā)明部分涉及發(fā)現(xiàn)的用于快速檢測患者體內的淋巴結的組合物。這些組合物包 括低滲溶液中的磁性粒子的懸浮液。低滲溶液的滲透壓有利于在注射之后磁性粒子快速引 流或傳輸穿過淋巴系統(tǒng)，從而降低初始注射和淋巴結檢測之間的停工時間。在初始注射之 后的短短5到15分鐘內，可以魯棒（robustly)地檢測鄰近注射位點的淋巴結，這比當前方 法快至少50%，從而允許更有效的術前檢查。此外，本發(fā)明的低滲溶液是通用溶劑，并且與 等滲或高滲溶液相比，可以與更寬范圍內的輔料一起使用。此外，快速移動到淋巴結可以減 少在注射部位處的殘留標記或紋身（tattooing)。
[0028] 在本發(fā)明的意義內的低滲溶液是具有約80m0sm至約160m0sm的滲透壓的水溶液。 等滲溶液具有大約300m0sm的滲透壓，并且高滲溶液具有大于350m0sm的滲透壓。
[0029] 在優(yōu)選實施例中，無機鹽（例如，氯化鈉）或二元醇（例如，丙二醇）用來配制低 滲溶液。具有約〇. 01% w/v至約0. 6% w/v的鹽的無機鹽溶液（例如，氯化鈉）產生適用 于本發(fā)明的低滲溶液。具有約〇. 5% w/v至約1. 5% w/v的二元醇的二元醇溶液（例如，丙 二醇）適用于本發(fā)明的低滲溶液。
[0030] 可以使用合適的無機鹽來制備低滲溶液，例如，無機鹽包括一價和二價鹽，諸如氯 化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化銨、碳酸氫鈉、硫酸氫鈉、硫酸鈉、硫酸銨、磷酸鈉、磷酸鉀、氯化 鈣、硫酸鎂、醋酸鉀和醋酸鈉。
[0031] 可以使用合適的二元醇來制備低滲溶液，例如，二元醇包括短鏈、直鏈或支鏈烷基 二醇類，諸如丙二醇。
[0032] 磁性粒子可以由合適的磁性材料和一個或多個包衣組成。在一些實施例中，磁性 粒子含有諸如磁鐵礦或磁赤鐵礦的氧化鐵。磁性核可由生物相容性包衣包圍，以減小毒性， 防止粒子結塊，或修改在體內的殘留時間。例如，合適的包衣包括葡聚糖、羧基葡聚糖、其 他糖類、白蛋白、聚乙二醇（PEG)、可生物相容的聚合物、聚乙二醇化淀粉、聚乙烯醇（PVA)、 聚乙烯吡咯烷酮（PVP)、聚乙烯亞胺（PEI)、聚葡萄糖山梨醇羧基甲基醚和殼聚糖。其他包 衣材料包括諸如金的金屬、聚乙二醇膠體金納米粒子、銀、碳、硅、硅樹脂、氨基硅烷和陶瓷。 為了表現(xiàn)出超順磁性行為，粒子的磁性核應當低于特定的直徑，取決于材料和結構，通常在 3_25nm的范圍內。
[0033] 磁性粒子還可以被功能化，以允許它們停留在例如癌細胞的特定的組織或細胞類 型中，或靶向特定的生物系統(tǒng)，以將治療方法傳遞至這些區(qū)域。通過附接或者包衣生物載體 來實現(xiàn)功能化，生物載體包括諸如抗體、酶或蛋白質。
[0034] 在一個實施例中，氧化鐵由于其毒性低而可用作磁性核，但可形成超順磁性核的 其他材料也是可以接受的。核材料應該是能夠被磁有序化的。核材料可以是金屬，諸如鈷、 鐵或鎳、金屬合金、稀土和過渡金屬合金、含有鋁、鋇、鉍、鈰、鉻、鈷、銅、鏑、鉺、銪、釓、鈥、 鐵、鑭、镥、錳、鉬、釹、鎳、鈮、鈀、鉑、鐠、钷、釤、鍶、鋱、銩、鈦、釩、鐿和釔或它們的混合物的M 型或尖晶石鐵氧體。也可以通過氧化鐵（II)鹽和另一種金屬鹽的組合來形成核。有益的金 屬鹽包括鋁、鋇、鉍、鈰、鉻、鈷、銅、鏑、鉺、銪、釓、鈥、鐵、鑭、镥、錳、鉬、釹、鎳、鈮、鈀、鉑、鐠、 銀、魯、鎖、鋪、鎊、欽、f凡、鏡和紀的鹽。
[0035] 低滲溶液的滲透壓具有允許與各種輔料相結合的進一步優(yōu)勢，從而導致不同的配 方選擇。例如，可以與本發(fā)明的低滲溶液一起使用的合適的輔料包括：
[0036] ?共溶劑，諸如乙醇、丙二醇、聚丙二醇、PEG 400、甘油、芐醇及其組合；
[0037] ?油，諸如油脂、液體石蠟、芝麻油，PEG植物油以及它們的組合；表面活性劑，諸如 聚氧乙烯脂肪酸酯、聚乙二醇40蓖麻油、聚山梨酯20、聚山梨酯80和它們的組合；
[0038] ?脂質體，諸如卵磷脂、蛋黃卵磷脂、磷脂酰甘油、磷脂、蛋黃磷脂以及它們的組 合；
[0039] ?碳水化合物，諸如葡萄糖；
[0040] ?氨基酸或氨基酸混合物，諸如Aminosyn? II、Travasol·?:和Hepat .Amine?;
[0041] ?增稠劑/穩(wěn)定劑，諸如羧甲基纖維素；和
[0042] ?緩沖劑，適用于注射。
[0043] 如果輔料增加溶液的滲透壓，則可以調整無機鹽和/或二元醇的用量，從而使得 低滲溶液的總滲透壓介于約80m0sm和約160m0sm之間。
[0044] 本發(fā)明的組合物可用于檢測人類或任何其他哺乳動物（諸如豬）內的淋巴結。例 如，包括磁性粒子的低滲溶液可以注射到乳腺癌患者內。然后使用諸如SentiMag? (英 國，劍橋，Endomagnetics)的磁力計來檢測溶液中的磁性粒子，以揭示患者體內前哨淋巴結 的位置。
[0045] 低滲溶液的進一步應用是磁熱療，其中，將溶液施用至身體以用于加熱組織的目 的。在該應用中，納米粒子的濃度是在20mg/mL和200mg/mL之間，更優(yōu)選在lOOmg/mL和 140mg/mL 之間。
[0046] 本發(fā)明的低滲組合物可以作為試劑盒的部分隨時可用地供給，試劑盒包括容器， 諸如小瓶或注射器和用于給藥組合物的說明書。
[0047] 實例
[0048] 實例 1
[0049] 示出對人類患者使用2ml Sie腿a+像_ (英國，劍橋，Endomagnetics)的臨床試驗， 表明在腋淋巴結中表現(xiàn)出緩慢的吸收，和在3〇分鐘之后的較差的外部信號。Sieima+?是 高度低滲的，具有30m0sm/kg的滲透壓。據推測，當將Sienna+?注入到間質組織內時，周 圍的細胞迅速從注射液吸收水以維持滲透壓力。這將留下更多集中質量的Meaim+?::，而 同時降低間質壓力，有效減少了至淋巴系統(tǒng)的傳輸。據信，體積的增加增大了間質壓力，從 而增加了由淋巴系統(tǒng)吸收的速度。然而，體積的較大增加可能被證明使患者不舒服。此外， 用于前哨淋巴結