1.一種何魯牽牛組織培養(yǎng)的方法,其特征在于:該方法包括如下步驟:
1)、培養(yǎng)基的配制:
(1)基本培養(yǎng)基:WPM培養(yǎng)基,其中蔗糖20~30g/L,瓊脂6~9g/L,pH=5.8;
(2)啟動培養(yǎng)基:WPM+6-BA 0.2~0.5mg/L+NAA 0~0.02mg/L+0.1%~0.3%活性炭;
(3)增殖培養(yǎng)基:WPM+6-BA 0.1~0.5mg/L+0.1%~0.3%活性炭;
(4)生根培養(yǎng)基:WPM+IBA 0.1~0.3mg/L+0.1%~0.3%活性炭;
2)、外植體的選取及消毒:
選取何魯牽牛的莖段作為外植體,清洗并消毒后備用;
3)、腋芽的誘導:
將步驟2)消毒處理后的莖段在無菌條件下接種于啟動培養(yǎng)基上培養(yǎng),培養(yǎng)4周后從葉腋處誘導出腋芽;
4)、不定芽的增殖:
將步驟3)誘導出的腋芽切下轉(zhuǎn)至增殖培養(yǎng)基上進行不定芽的增殖,培養(yǎng)4~6周后有不定芽叢形成;
5)、生根及移栽:
將步驟4)增殖獲得的不定芽叢在無菌條件下分割成單株后轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上,培養(yǎng)3~5周后生根,將生根植株從培養(yǎng)基中取出并清洗后移栽至基質(zhì)中。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的何魯牽牛組織培養(yǎng)的方法,其特征在于:在所述步驟1)中,所述的培養(yǎng)基包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的組分具體為:
(1)基本培養(yǎng)基:WPM培養(yǎng)基,其中蔗糖30g/L,瓊脂8g/L,pH=5.8;
(2)啟動培養(yǎng)基:WPM+6-BA 0.3mg/L+NAA 0.01mg/L+0.1%活性炭;
(3)增殖培養(yǎng)基:WPM+6-BA 0.2mg/L+0.1%活性炭;
(4)生根培養(yǎng)基:WPM+IBA 0.2mg/L+0.1%活性炭。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的何魯牽牛組織培養(yǎng)的方法,其特征在于:在所述步驟2)中,所述的消毒處理是將何魯牽牛的莖段先用飽和洗衣粉溶液浸泡30min后,再用自來水沖洗干凈,然后依次在體積比為70%的酒精溶液和有效氯飽和度為1%的次氯酸鈉溶液中分別浸泡40s和7min,期間搖晃幾次,最后用無菌水沖洗3~5遍,每遍1min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的何魯牽牛組織培養(yǎng)的方法,其特征在于:在所述步驟3)中,所述的腋芽的誘導培養(yǎng)是將消毒處理后的莖段在無菌條件下接種于啟動培養(yǎng)基上進行腋芽的誘導。