本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)種植領(lǐng)域，具體涉及一種獼猴桃實(shí)生苗培育方法。
背景技術(shù)：
中華獼猴桃原產(chǎn)于我國，較多處于野生狀態(tài)，其果實(shí)富含維生素C，具有“長壽果”、“仙桃”之美稱，是新興栽培果樹。
目前，對于野生中華獼猴桃的實(shí)生苗培育技術(shù)的研究還相對較少。中國科學(xué)院植物研究所的徐本美研究了赤霉素對于獼猴桃發(fā)芽的影響，然而其所得的發(fā)芽率并不盡如人意，且未對發(fā)芽勢和存活率做考察。山東農(nóng)業(yè)大學(xué)的龐祥梅同樣研究了赤霉素和不同苗床基質(zhì)對于中華獼猴桃實(shí)生苗培育的影響，但其所得效果較差。
因此，如何提高野生中華獼猴桃實(shí)生苗培育中的發(fā)芽率、發(fā)芽勢和存活率成為本領(lǐng)域亟待解決的技術(shù)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，本發(fā)明的目的在于提供一種獼猴桃實(shí)生苗培育方法，該方法包括如下步驟：
(1)采集種子；
(2)對所得種子進(jìn)行消毒；
(3)將消毒后的種子置于用蒸餾水潤濕過的濾紙上，用0.1％的克菌丹溶液保持種子保持種子潤濕；
(4)于4℃下，對步驟(3)所得物進(jìn)行密封避光冷藏2個(gè)月；
(5)將步驟(4)所得物浸泡在50μmol/L的褪黑素溶液中，然后進(jìn)行密封避光處理；
(6)將步驟(5)所得物進(jìn)行變溫處理15天，處理時(shí)，每天于4℃下處理16h，再于25±1℃培養(yǎng)箱中處理8h；
(7)將步驟(6)所得物于25±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至種子全部露白，期間用0.1％的克菌丹溶液使種子保持濕潤；
(8)將露白的種子播在由草炭土、濕椰殼和珍珠巖按體積比2:2:1的比例混勻制成的育苗盤中，表面覆蓋細(xì)土，澆水；育苗盤放到25±1℃的培養(yǎng)室，白晝時(shí)間均設(shè)置為12h，每天早晚適量澆水，保持混合土壤濕潤，每周澆一次0.1％的克菌丹溶液殺菌；
(9)將步驟(8)所得物繼續(xù)放到25±1℃的培養(yǎng)室，白晝時(shí)間均設(shè)置為12h，每天早晚噴水，3天澆一次水，每周澆1次Hoagland全營養(yǎng)液，每2周澆一次0.2％尿素溶液和0.2％磷酸二氫鉀溶液，保持混合土壤濕潤。
所述獼猴桃為野生中華獼猴桃。
優(yōu)選的，步驟(1)中，采集種子的方法為：
1)采摘成熟的野生中華獼猴桃果實(shí)，常溫存放；
2)待果實(shí)充分軟熟，去皮放入細(xì)紗網(wǎng)袋內(nèi)搓碎揉爛；在水中淘洗，使雜質(zhì)和癟粒漂出，留下種子；
3)將種子攤放在干燥通風(fēng)處陰干；晾干后將結(jié)塊的種子搓散，裝入自封袋中，置于干燥陰涼處備用。
優(yōu)選的，步驟(2)中，利用5％的次氯酸鈉溶液對種子進(jìn)行處理消毒，處理時(shí)間為5分鐘。
優(yōu)選的，步驟(5)中，密封避光處理時(shí)間為24小時(shí)。
優(yōu)選的，步驟(7)的處理時(shí)間為25天。
優(yōu)選的，步驟(8)中，育苗盤中每孔放四顆種子。
優(yōu)選的，步驟(8)中，所束細(xì)土的厚度為0.2cm。
優(yōu)選的，步驟(9)中，培養(yǎng)時(shí)，采用營養(yǎng)缽，營養(yǎng)缽的規(guī)格為23cm×18cm，每個(gè)營養(yǎng)缽栽一棵苗。
本發(fā)明的有益效果：
1、本發(fā)明可使野生中華獼猴桃種子具有高達(dá)91.80％的發(fā)芽率和高達(dá)90.09％的發(fā)芽勢，顯著高于現(xiàn)有常規(guī)技術(shù)；
2、本發(fā)明可使得實(shí)生苗的存活率高達(dá)99.8％。
具體實(shí)施方式
下面通過實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行具體描述，有必要在此指出的是以下實(shí)施例只是用于對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的說明，不能理解為對本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，該領(lǐng)域的技術(shù)熟練人員根據(jù)上述發(fā)明內(nèi)容所做出的一些非本質(zhì)的改進(jìn)和調(diào)整，仍屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
實(shí)施例1
(1)采集種子：
1)采摘成熟的野生中華獼猴桃果實(shí)，常溫存放；
2)待果實(shí)充分軟熟，去皮放入細(xì)紗網(wǎng)袋內(nèi)搓碎揉爛；在水中淘洗，使雜質(zhì)和癟粒漂出，留下種子；
4)將種子攤放在干燥通風(fēng)處陰干；晾干后將結(jié)塊的種子搓散，裝入自封袋中，置于干燥陰涼處備用。
(2)用5％的次氯酸鈉溶液浸泡獼猴桃種子5min進(jìn)行消毒，之后用蒸餾水多次清洗種子去除次氯酸鈉；
(3)將消毒后的種子置于用蒸餾水潤濕過的濾紙上，用0.1％的克菌丹溶液保持種子保持種子潤濕；
(4)于4℃下，對步驟(3)所得物進(jìn)行密封避光冷藏2個(gè)月；
(5)將步驟(4)所得物浸泡在50μmol/L的褪黑素溶液中，然后進(jìn)行密封避光處理；
(6)將步驟(5)所得物進(jìn)行變溫處理15天，4℃6h、25±1℃培養(yǎng)箱8h；
(7)將步驟(6)所得物于25±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至種子全部露白，期間用0.1％的克菌丹溶液使種子保持濕潤；
(8)將露白2mm左右的種子播在由草炭土、濕椰殼和珍珠巖按體積比2:2:1的比例混勻制成的育苗盤中，表面覆蓋細(xì)土，澆水；育苗盤放到25±1℃的培養(yǎng)室，白晝時(shí)間均設(shè)置為12h，每天早晚適量澆水，保持混合土壤濕潤，每周澆一次0.1％的克菌丹溶液殺菌；
(9)將步驟(8)所得物繼續(xù)放到25±1℃的培養(yǎng)室，白晝時(shí)間均設(shè)置為12h，每天早晚噴水，3天澆一次水，每周澆1次Hoagland全營養(yǎng)液，每2周澆一次0.2％尿素溶液和0.2％磷酸二氫鉀溶液，保持混合土壤濕潤。
利用本方法，所得發(fā)芽率為91.80％，發(fā)芽勢為90.09％，實(shí)生苗存活率為98％。
實(shí)驗(yàn)例1
低溫和褪黑素對獼猴桃種子萌發(fā)的影響
(1)用5％的次氯酸鈉溶液浸泡獼猴桃種子5min進(jìn)行消毒，之后用蒸餾水多次清洗種子去除次氯酸鈉。
(2)在直徑為9cm的培養(yǎng)皿中放置兩層濾紙，用蒸餾水濕潤濾紙，趕走濾紙下的氣泡。
(3)將消毒后種子鋪在培養(yǎng)皿的濾紙上，每個(gè)處理放入一個(gè)培養(yǎng)皿，100粒種子。
(4)分別在9個(gè)培養(yǎng)皿中加入蒸餾水、1μmol/L褪黑素、10μmol/L褪黑素、50μmol/L褪黑素、100μmol/L褪黑素、200μmol/L褪黑素、300mg/L赤霉素、650mg/L赤霉素和1000mg/L赤霉素以保持種子濕潤。
(5)將培養(yǎng)皿用黑色塑料袋包起來放入冰箱4℃冷藏15天。
(6)之后轉(zhuǎn)移到25℃培養(yǎng)箱至種子露白，期間分別加相應(yīng)處理液保持種子濕潤。
(7)每天觀察統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率，最后計(jì)算發(fā)芽勢。
表1不同褪黑素濃度對獼猴桃發(fā)芽率的影響
從表1結(jié)果可以看出褪黑素處理溶液在10μmol/L到100μmol/L均能促進(jìn)獼猴桃種子萌芽，以50μmol/L的發(fā)芽率最高為16％，并顯著高于其他濃度的處理；而1μmol/L和200μmol/L褪黑素溶液處理種子均未露白。冷藏獼猴桃種子經(jīng)過3個(gè)濃度水平的赤霉素溶液處理后均有露白，650mg/L和1000mg/L赤霉素溶液處理的發(fā)芽率相對較高，分別為21％和30％；而300mg/L赤霉素溶液處理的發(fā)芽率僅為15％，顯著低于其他兩個(gè)濃度的發(fā)芽率。蒸餾水處理的對照組無萌芽?？傮w，各處理的發(fā)芽率和發(fā)芽勢都不高，分析其只要原因是低溫層積時(shí)間太短，未達(dá)到需冷量，發(fā)芽率及發(fā)芽勢都不高，故后期試驗(yàn)延長低溫層積時(shí)間至2個(gè)月。
表2不同濃度褪黑素(MT)和赤霉素(GA)處理對獼猴桃種子萌發(fā)的影響
實(shí)驗(yàn)例2低溫層化、褪黑素和變溫處理對獼猴桃種子萌發(fā)的影響
1低溫層積處理(1初月開始，2月底結(jié)束)
(1)用5％的次氯酸鈉溶液浸泡種子5min進(jìn)行消毒，之后用蒸餾水多次清洗種子去除次氯酸鈉。
(2)在直徑為9cm的培養(yǎng)皿中放置兩層濾紙，用蒸餾水濕潤濾紙，趕走濾紙下的氣泡。
(3)將洗凈的種子放入培養(yǎng)皿的濾紙上鋪開，添加0.1％的克菌丹溶液保持種子適宜濕度而不要有太多積水。
(4)將培養(yǎng)皿用塑料袋包起來，放入冰箱4℃冷藏2個(gè)月，注意保濕除菌。
2褪黑素和變溫處理(3月初開始，3月底結(jié)束)
(1)由預(yù)試驗(yàn)結(jié)果選出赤霉素濃度為800mg/L和褪黑素濃度為50μmol/L。
(2)取出低溫層化的種子分成4組，分別浸泡在蒸餾水、800mg/L的赤霉素溶液、50μmol/L的褪黑素溶液以及含有800mg/L赤霉素和50μmol/L褪黑素的混合溶液中，用黑色塑料袋將培養(yǎng)皿包起，避光24h。
(6)將避光處理的種子進(jìn)行變溫處理15天，4℃6h、25±1℃培養(yǎng)箱8h。
(7)變溫處理結(jié)束后，將黑色塑料袋包著培養(yǎng)皿放到25±1℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)至種子全部露白，大約25天。
(8)每天觀察并添加0.1％的克菌丹溶液使種子保持濕潤并防止細(xì)菌滋生，統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率，最后計(jì)算發(fā)芽勢。
設(shè)計(jì)褪黑素處理濃度為50μmol/L，赤霉素處理濃度為800mg/L。另外，為了提高獼猴桃種子的萌芽率，低溫層積時(shí)間延長為2個(gè)月，層積處理后增加了4-25℃的變溫處理。
從表3中可以看出，①2個(gè)月的低溫層積處理大大地提高了萌芽率。即使層積后用清水處理獼猴桃種子的萌芽率也達(dá)到78％；②低溫層積處理和變溫處理后再用50μmol/L的褪黑素處理能顯著地提高種子萌芽率，對提高發(fā)芽勢的作用達(dá)到極顯著。③赤霉素和褪黑素共同處理與單獨(dú)用赤霉素處理相比沒有促進(jìn)作用，反而降低了萌芽率。
赤霉素或褪黑素溶液浸泡24h有助于打破獼猴桃種子休眠，促進(jìn)發(fā)芽，效果好于單獨(dú)赤霉素處理。
表3野生中華獼猴桃種子發(fā)芽率與發(fā)芽勢
實(shí)驗(yàn)例3基質(zhì)對幼苗成活率的影響
在獼猴桃實(shí)生苗培育過程中使用了三種基質(zhì)(表4)。結(jié)果表明草炭土比營養(yǎng)土更適合獼猴桃幼苗的生長。營養(yǎng)土：蛭石：珍珠巖(3：1：1)混合的基質(zhì)偏堿性，pH在8～9，萌芽的真葉呈深綠色。但長出的第一片真葉出現(xiàn)黃化現(xiàn)象，胚根褐化，部分幼苗葉片萎蔫死亡，死亡率為30.25％，說明堿性土壤不適宜獼猴桃幼苗生長。
草炭土：蛭石：珍珠巖(4：1：1)的基質(zhì)，土壤pH＝6～7，保水性較好，但透水性較差。黃化幼苗移入該基質(zhì)中經(jīng)過1～2周葉片恢復(fù)深綠色，逐漸長出幼小側(cè)根。但由于基質(zhì)透水性較差須根生長緩慢，部分幼苗根部褐化腐爛而死亡，死亡率為36.51％。澆水多，根容易腐爛；澆水少，基質(zhì)容易板結(jié)。
將露白后的獼猴桃幼苗移入草炭土：椰殼(濕)：珍珠巖＝2：2：1(體積比)基質(zhì)中。該基質(zhì)土壤疏松，透氣性及保水性都較好，pH范圍在6到7，幼苗進(jìn)入快速生長期，成活率達(dá)到99.80％，能充分吸收土壤中營養(yǎng)，生長狀況良好。說明獼猴桃幼苗適宜在偏酸性、透氣保水的基質(zhì)中生長。
表4基質(zhì)對獼猴桃幼苗成活率的影響