本發(fā)明屬于食用菌栽培領(lǐng)域，具體涉及一種快速培育牛樟芝的方法。
背景技術(shù)：
牛樟芝（Antrodia camphorata）又名牛樟菇，屬于非褶菌目、多孔菌科、薄孔菌屬多年生蕈菌類，具有護(hù)肝、抗癌、調(diào)節(jié)免疫、抗過敏、解毒和抗炎等功效，因而受到保健人群、疾病患者的青睞及市場(chǎng)的熱捧。牛樟芝的人工栽培方法有牛樟樹椴木栽培法、固態(tài)栽培法和液體發(fā)酵法。但椴木栽培法培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，培養(yǎng)成本高，得到的牛樟芝產(chǎn)量低，而固態(tài)栽培法和液體發(fā)酵法雖然培養(yǎng)時(shí)間短，但無法獲得野生牛樟芝某些特有的化學(xué)組分，得不到市場(chǎng)的認(rèn)可。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種快速培育牛樟芝的方法，其利用櫟樹段栽培牛樟芝，既保護(hù)了資源稀缺的牛樟樹，又可解決牛樟芝因營養(yǎng)不足，導(dǎo)致的菌絲生長(zhǎng)、繁殖慢，培養(yǎng)周期長(zhǎng)等生產(chǎn)瓶頸問題，可短期內(nèi)獲得具有較高生物量及近野生牛樟芝有效成分的牛樟芝子實(shí)體，有效緩解市場(chǎng)供求矛盾及藥企原料不足問題，具有良好的社會(huì)與經(jīng)濟(jì)效益。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
一種快速培育牛樟芝的方法，包括以下步驟：
1）蜜環(huán)菌菌液的制備：選擇幼嫩、健壯的野生蜜環(huán)菌菌索，取其尖端，用體積濃度為70％的酒精表面消毒5-7min，然后在無菌條件下去掉外部皮鞘，將白色菌髓部分切成長(zhǎng)1-1.5cm的小段，接種于斜面培養(yǎng)基上，在20-25℃條件下培養(yǎng)15-20d，至菌絲布滿斜面；再將所得菌絲剪成1.0-1.5cm的小段，按重量體積比1:2-3（g/mL）加入質(zhì)量濃度為1.0%-1.5%的葡萄糖溶液，1000r/min勻漿10min，得蜜環(huán)菌菌液；
2）蜜環(huán)菌接種：于每年10月-11月，選取直徑10cm以上的櫟樹，將其鋸成長(zhǎng)30cm的木段，堆積15-20d后，在木段上每隔3-4cm砍一個(gè)魚鱗口，深度至木質(zhì)部為度，將步驟1）制備的蜜環(huán)菌菌液接至切口處，于20-25℃、相對(duì)濕度55-65%條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
3）牛樟芝菌的接種：待步驟2）接種蜜環(huán)菌的櫟樹木段培養(yǎng)30-40d后，在木段原切口交互處再砍一個(gè)魚鱗口，在所有切口處均接種健康牛樟芝菌，于20-25℃、相對(duì)濕度70-85%條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
4）牛樟芝菌的培養(yǎng)：待切口出現(xiàn)白色的牛樟芝氣生菌絲時(shí)，將菌材移入培養(yǎng)床繼續(xù)培養(yǎng)40-50d，即收獲牛樟芝子實(shí)體。
步驟1）中斜面培養(yǎng)基的原料配方為：去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、麥麩提取物5g、根系提取物5g、瓊脂20g、磷酸二氫鉀3g、硫酸鎂1.5g、維生素B1 10mg，水100mL，調(diào)節(jié)pH至5~6.5。
其中，所述麥麩提取物是將麥麩用體積濃度為50%的酒精反復(fù)浸提2-3次后，將浸提液合并，真空濃縮至原體積1/5-1/6，再加入其體積1.5-2.0倍的水混勻即得；
所述根系提取物是將葫蘆科植物的根系用體積濃度為90%的甲醇浸泡12h，然后將浸泡液真空濃縮至干，加入其重量2.0-3.0倍的水溶解即得。
本發(fā)明的顯著效果在于：本發(fā)明利用資源豐富的櫟樹為基材，先在櫟樹段上接種蜜環(huán)菌，依靠蜜環(huán)菌生長(zhǎng)分解、獲取樹段中的營養(yǎng)，然后再接種牛樟芝菌，使牛樟芝菌通過蜜環(huán)菌獲得營養(yǎng)，快速生長(zhǎng)。該方法既保護(hù)了資源稀缺的牛樟樹，又可解決牛樟芝因營養(yǎng)不足，導(dǎo)致的菌絲生長(zhǎng)、繁殖慢，培養(yǎng)周期長(zhǎng)等生產(chǎn)瓶頸問題，其生產(chǎn)周期可較常規(guī)牛樟樹椴木栽培法縮短20-35天，能在短期內(nèi)獲得具有較高生物量及近野生牛樟芝有效成分的牛樟芝子實(shí)體，有效緩解市場(chǎng)供求矛盾及藥企原料不足問題，具有良好的社會(huì)與經(jīng)濟(jì)效益。
具體實(shí)施方式
為了使本發(fā)明所述的內(nèi)容更加便于理解，下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所述的技術(shù)方案做進(jìn)一步的說明，但是本發(fā)明不僅限于此。
實(shí)施例1
一種快速培育牛樟芝的方法，包括以下步驟：
1）蜜環(huán)菌菌液的制備：選擇幼嫩、健壯的野生蜜環(huán)菌菌索，取其尖端，用體積濃度為70％的酒精表面消毒5min，然后在無菌條件下去掉外部皮鞘，將白色菌髓部分切成長(zhǎng)1cm的小段，接種于斜面培養(yǎng)基上，每管放置一段，在20℃條件下培養(yǎng)20d，至菌絲布滿斜面；再將所得菌絲剪成1.0cm的小段，按重量體積比1:3（g/mL）加入質(zhì)量濃度為1.0%的葡萄糖溶液，1000r/min勻漿10min，得蜜環(huán)菌菌液；
2）蜜環(huán)菌接種：于每年10月-11月，將直徑10cm的櫟樹鋸成長(zhǎng)30cm的木段，堆積15d后，在木段上每隔3cm砍一個(gè)魚鱗口，深度至木質(zhì)部為度，將步驟1）制備的蜜環(huán)菌菌液接至切口處，于20℃、相對(duì)濕度55%條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
3）牛樟芝菌的接種：待步驟2）接種蜜環(huán)菌的櫟樹木段培養(yǎng)30d后，在木段原切口交互處再砍一個(gè)魚鱗口，在所有切口處均接種健康牛樟芝菌，于20℃、相對(duì)濕度70%條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
4）牛樟芝菌的培養(yǎng)：待切口出現(xiàn)白色的牛樟芝氣生菌絲時(shí)，將菌材移入培養(yǎng)床繼續(xù)培養(yǎng)40d，即收獲牛樟芝子實(shí)體。
所用斜面培養(yǎng)基的配方為：去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、麥麩提取物5g、根系提取物5g、瓊脂20g、磷酸二氫鉀3g、硫酸鎂1.5g、維生素B1 10mg，水100mL，調(diào)節(jié)pH至6.5。
其中，所述麥麩提取物是將麥麩用體積濃度為50%的酒精反復(fù)浸提2次后，將浸提液合并，真空濃縮至原體積1/5，再加入其體積2.0倍的水混勻即得；
所述根系提取物是將葫蘆科植物的根系用體積濃度為90%的甲醇浸泡12h，然后將浸泡液真空濃縮至干，加入其重量2.0倍的水溶解即得。
實(shí)施例2
一種快速培育牛樟芝的方法，包括以下步驟：
1）蜜環(huán)菌菌液的制備：選擇幼嫩、健壯的野生蜜環(huán)菌菌索，取其尖端，用體積濃度為70％的酒精表面消毒6min，然后在無菌條件下去掉外部皮鞘，將白色菌髓部分切成長(zhǎng)1.2cm的小段，接種于斜面培養(yǎng)基上，每管放置一段，在22℃條件下培養(yǎng)18d，至菌絲布滿斜面；再將所得菌絲剪成1.3cm的小段，按重量體積比1:2（g/mL）加入質(zhì)量濃度為1.2%的葡萄糖溶液，1000r/min勻漿10min，得蜜環(huán)菌菌液；
2）蜜環(huán)菌接種：于每年10月-11月，將直徑12cm的櫟樹鋸成長(zhǎng)30cm的木段，堆積16d后，在木段上每隔3cm砍一個(gè)魚鱗口，深度至木質(zhì)部為度，將步驟1）制備的蜜環(huán)菌菌液接至切口處，于22℃、相對(duì)濕度60%條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
3）牛樟芝菌的接種：待步驟2）接種蜜環(huán)菌的櫟樹木段培養(yǎng)35d后，在木段原切口交互處再砍一個(gè)魚鱗口，在所有切口處均接種健康牛樟芝菌，于23℃、相對(duì)濕度80%條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
4）牛樟芝菌的培養(yǎng)：待切口出現(xiàn)白色的牛樟芝氣生菌絲時(shí)，將菌材移入培養(yǎng)床繼續(xù)培養(yǎng)45d，即收獲牛樟芝子實(shí)體。
所用斜面培養(yǎng)基的配方為：去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、麥麩提取物5g、根系提取物5g、瓊脂20g、磷酸二氫鉀3g、硫酸鎂1.5g、維生素B1 10mg，水100mL，調(diào)節(jié)pH至6.0；
其中，所述麥麩提取物是將麥麩用體積濃度為50%的酒精反復(fù)浸提2次后，將浸提液合并，真空濃縮至原體積1/5，再加入其體積1.8倍的水混勻即得；
所述根系提取物是將葫蘆科植物的根系用體積濃度為90%的甲醇浸泡12h，然后將浸泡液真空濃縮至干，加入其重量2.5倍的水溶解即得。
實(shí)施例3
一種快速培育牛樟芝的方法，包括以下步驟：
1）蜜環(huán)菌菌液的制備：選擇幼嫩、健壯的野生蜜環(huán)菌菌索，取其尖端，用體積濃度為70％的酒精表面消毒7min，然后在無菌條件下去掉外部皮鞘，將白色菌髓部分切成長(zhǎng)1.5cm的小段，接種于斜面培養(yǎng)基上，每管放置一段，在25℃條件下培養(yǎng)15d，至菌絲布滿斜面；再將所得菌絲剪成1.5cm的小段，按重量體積比1:2（g/mL）加入質(zhì)量濃度為1.5%的葡萄糖溶液，1000r/min勻漿10min，得蜜環(huán)菌菌液；
2）蜜環(huán)菌接種：于每年10月-11月，將直徑15cm的櫟樹鋸成長(zhǎng)30cm的木段，堆積20d后，在木段上每隔4cm砍一個(gè)魚鱗口，深度至木質(zhì)部為度，將步驟1）制備的蜜環(huán)菌菌液接至切口處，于25℃、相對(duì)濕度65%條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
3）牛樟芝菌的接種：待步驟2）接種蜜環(huán)菌的櫟樹木段培養(yǎng)40d后，在木段原切口交互處再砍一個(gè)魚鱗口，在所有切口處均接種健康牛樟芝菌，于25℃、相對(duì)濕度85%條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
4）牛樟芝菌的培養(yǎng)：待切口出現(xiàn)白色的牛樟芝氣生菌絲時(shí)，將菌材移入培養(yǎng)床繼續(xù)培養(yǎng)50d，即收獲牛樟芝子實(shí)體。
所用斜面培養(yǎng)基的配方為：去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、麥麩提取物5g、根系提取物5g、瓊脂20g、磷酸二氫鉀3g、硫酸鎂1.5g、維生素B1 10mg，水100mL，調(diào)節(jié)pH至5；
其中，所述麥麩提取物是將麥麩用體積濃度為50%的酒精反復(fù)浸提3次后，將浸提液合并，真空濃縮至原體積1/6，再加入其體積1.5倍的水混勻即得；
所述根系提取物是將葫蘆科植物的根系用體積濃度為90%的甲醇浸泡12h，然后將浸泡液真空濃縮至干，加入其重量3.0倍的水溶解即得。
將實(shí)施例1-3收獲的牛樟芝子實(shí)體與野生牛樟芝子實(shí)體進(jìn)行品質(zhì)比較，結(jié)果見表1。
表1 不同來源牛樟芝子實(shí)體的品質(zhì)比較
由表1可見，采用本發(fā)明方法栽培獲得的牛樟芝子實(shí)體與野生牛樟芝子實(shí)體品質(zhì)相近。
以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡依本發(fā)明申請(qǐng)專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。