本發(fā)明涉及食用菌生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及富硒靈芝孢子粉的采收方法。
背景技術(shù)：
靈芝是我國傳統(tǒng)的菌類珍品，享有“仙草”美譽(yù)。靈芝(學(xué)名：Ganoderma Lucidum Karst)，又稱靈芝草、仙草，別稱赤芝、紅芝、木靈芝、菌靈芝、萬年蕈、靈芝草，是多孔菌科植物赤芝或紫芝的全株，為多孔菌科真菌靈芝的子實(shí)體。外形呈傘狀，菌蓋腎形、半圓形或近圓形?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》和《本草綱目》即詳細(xì)記載了靈芝的藥效及功能。靈芝已作為藥物正式被國家藥典收載，是國家批準(zhǔn)的新資源食品，可藥食兩用。靈芝作為擁有數(shù)千年藥用歷史的中國傳統(tǒng)珍貴藥材，具有補(bǔ)氣安神，止咳平喘的功效，用于眩暈不眠，心悸氣短，虛勞咳喘。靈芝具備很高的藥用價(jià)值，經(jīng)過科研機(jī)構(gòu)數(shù)十年的現(xiàn)代藥理學(xué)研究證實(shí)，靈芝對于增強(qiáng)人體免疫力，調(diào)節(jié)血糖，控制血壓，輔助腫瘤放化療，保肝護(hù)肝，促進(jìn)睡眠等方面均具有顯著療效。靈芝多糖是靈芝藥用功能的主要有效成分之一，主要存在于靈芝細(xì)胞壁內(nèi)壁，大部分為β-葡聚糖，其單糖組成除含有大量葡萄糖外，還含有少量阿拉伯糖、木糖、巖藻糖，鼠李糖，半乳糖和甘露糖等，它們大多以(1-3)、(1-4)和(1-6)等糖苷鍵連接，具有廣泛的生物活性，如增強(qiáng)免疫力、清除人體自由基、保護(hù)心血管、抗輻射、保護(hù)肝臟、抗腫瘤等作用。三萜類也是靈芝的有效成分之一，靈芝所含三萜類不下百余種，其中以四環(huán)三萜類為主，靈芝的苦味與所含三萜類有關(guān)，對人體肝癌細(xì)胞具有細(xì)胞毒作用，也能抑制組織胺的釋放，具有保肝和抗過敏等作用。
硒是人體必需的微量元素。硒參與合成人體內(nèi)多種含硒酶和含硒蛋白。其中谷胱甘肽過氧化物酶，在生物體內(nèi)催化氫過氧化物或脂質(zhì)過氧化物轉(zhuǎn)變?yōu)樗蚋鞣N醇類，消除自由基對生物膜的攻擊，保護(hù)生物膜免受氧化損傷；硒參與構(gòu)成碘化甲狀腺胺酸脫碘酶。在體內(nèi)硒和維生素E協(xié)同，能夠保護(hù)細(xì)胞膜，防止不飽和脂肪酸的氧化。微量硒具有防癌作用及保護(hù)肝臟的作用。硒能提高人體免疫，促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖及抗體和免疫球蛋白的合成。硒對結(jié)腸癌、皮膚癌、肝癌、乳腺癌等多種癌癥具有明顯的抑制和防護(hù)的作用，其在機(jī)體內(nèi)的中間代謝產(chǎn)物甲基烯醇具有較強(qiáng)的抗癌活性。硒與維生素E、大蒜素、亞油酸、鍺、鋅等營養(yǎng)素具有協(xié)同抗氧化的功效，增加抗氧化活性。同時(shí)，硒具有減輕和緩解重金屬毒性的作用。
靈芝孢子粉是靈芝生長成熟期從菌蓋彈射出來極其細(xì)小的孢子，為靈芝的生殖細(xì)胞。大量的實(shí)驗(yàn)證實(shí)孢子粉具有較強(qiáng)的抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、調(diào)節(jié)血脂血糖的功效以及對神經(jīng)系統(tǒng)、心血管和呼吸系統(tǒng)有調(diào)節(jié)改善作用而受到社會(huì)大眾的追捧。由于靈芝孢子粉極其細(xì)小，會(huì)隨著空氣流動(dòng)而漫天飛舞，因此收集孢子粉就顯得尤為重要了。在長期的實(shí)踐中，人們根據(jù)當(dāng)?shù)氐脑耘嗔?xí)慣和實(shí)際經(jīng)驗(yàn)發(fā)明了幾種主要靈芝孢子粉的收集方法，具體如下：1、地膜法：在靈芝栽培后每行靈芝中間排放雙層條狀地膜，接收降落的孢子粉。在采收靈芝子實(shí)體時(shí)，用軟毛刷把菌蓋表面孢子粉刷入桶內(nèi)，然后采收孢子粉，采收時(shí)只采收地膜粉，下層孢子粉棄之不用。該方法的優(yōu)點(diǎn)是靈芝整體生長環(huán)境操作方便，成本低；缺點(diǎn)是收集的孢子粉中會(huì)含有一些沙土，孢子的純度不夠高。2、套筒采粉法：在靈芝將要成熟時(shí)，在靈芝菌柄基部套上0.02mm的超薄乙烯袋，袋底扎緊，袋口朝上，按靈芝的大小在袋內(nèi)套上硬紙筒，高15cm，直徑3-15cm，筒口上蓋上一紙板，防止孢子粉逃逸。套袋采粉要注意通風(fēng)，防止霉變，采粉期薄膜兩頭始終散開。該方法的優(yōu)點(diǎn)是收集的孢子粉純度極高，缺點(diǎn)是成本高。3、風(fēng)機(jī)吸附法：靈芝孢子的比重較輕，用風(fēng)機(jī)收集，200-300平方米的出芝棚使用兩臺孢子收集器。當(dāng)靈芝孢子開始釋放時(shí)，將兩臺孢子收集器背對著放置在出芝棚中間，距地面1-1.5米高，一般在晴天早晨4-8時(shí)、下午5-8時(shí)以及陰天全天打開電源收集靈芝孢子粉。該方法的優(yōu)點(diǎn)是操作便利，缺點(diǎn)是收集的孢子粉中會(huì)混有一些灰塵。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供富硒靈芝孢子粉的采收方法。
本發(fā)明所述的富硒靈芝孢子粉的采收方法，是通過如下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：
1)出芝架的制作：出芝架長寬高為300cm×50cm×180cm，每個(gè)出芝架由4層組成，出芝架底層與地面相距20cm，其余層的間距為40cm；
每個(gè)出芝架的頂部安裝一個(gè)可拆卸的300cm×100cm平面板，每個(gè)出芝架的底部用食品級的PVC板做成凹型的槽，在槽的中間預(yù)留一個(gè)直徑10cm的圓孔，各出芝架間預(yù)留70cm通道，兩側(cè)各預(yù)留50cm通道；
2)將靈芝菌袋直接擺放在層架上，靈芝菌袋接種口朝兩邊，每層擺放4至5層靈芝菌袋；
3)菌袋出芝后，噴灑富硒營養(yǎng)液，以均勻覆蓋靈芝表面為準(zhǔn)，控制出芝房溫度26℃，濕度85％-90％，保證充足的通風(fēng)促進(jìn)靈芝的生長發(fā)育，待靈芝開蓋生長，即將噴射孢子粉時(shí)，將300cm×100cm的平面板固定在出芝架頂部，用厚度為0.006cm的農(nóng)用薄膜將整個(gè)出芝架罩住，薄膜下部與PVC板凹面用透明膠連接，待靈芝噴射孢子粉后，控制靈芝出芝房溫度25℃、濕度70％-75％，直至孢子粉采收完畢；
本發(fā)明所述的富硒營養(yǎng)液，通過以下制備方法得到：
①原料準(zhǔn)備：準(zhǔn)備純凈水100份、L-硒蛋氨酸1.0份、玉米粉5份；
②將步驟①的原料混合后，放入蒸汽爆破罐，壓力4MPa，加熱至150℃，保持2min，然后在1-3s內(nèi)快速釋放壓力得到漿液，在25℃按體積百分比為10％接入培養(yǎng)成熟的枯草芽孢桿菌液體菌種，放入發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐中通入無菌空氣，進(jìn)行攪拌發(fā)酵，攪拌轉(zhuǎn)速250r/min，發(fā)酵時(shí)間為4h，溫度保持35-37℃，發(fā)酵結(jié)束后，迅速將溫度升至70℃保持1.0h滅活，得到。
所述枯草芽孢桿菌液體菌種的培養(yǎng)方法為：采用三角瓶液體菌種培養(yǎng)，以下為重量百分?jǐn)?shù)，將處理過的蛋白粉漿30.0-35.0％，KH2P04 1.0％,MgS042.0％，NaCl0.5％放入三角瓶中，攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH至5.6，125℃滅菌10min，冷卻至25℃，接入經(jīng)過斜面培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌菌種，28℃搖床培養(yǎng)60-100h，用于發(fā)酵罐接種。
本發(fā)明步驟1)所述的在槽的中間預(yù)留一個(gè)直徑10cm的圓孔，是為了方便孢子粉的收集；所述的兩側(cè)各預(yù)留50cm通道，是便于靈芝的采收。
步驟3)所述的孢子粉采收，為保證孢子的新鮮、不長霉，優(yōu)選每15天收集一次孢子粉。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：
1、現(xiàn)有技術(shù)中的富硒營養(yǎng)液，一般是使用無機(jī)硒，特別是亞硒酸鈉和硒酸鈉、亞硒酸鉀和硒酸鉀等，從金屬礦藏的副產(chǎn)品中獲得，無機(jī)硒有較大的毒性，且不易被吸收，作為營養(yǎng)液，吸收效果不好。本發(fā)明使用的硒蛋氨酸，是一種有機(jī)硒源，與無機(jī)硒相比，硒蛋氨酸具有安全、高效的優(yōu)點(diǎn)，它能夠替代部分蛋氨酸結(jié)合到體蛋白上形成一個(gè)可逆的硒貯存庫，而不存在中毒危險(xiǎn)。
2、硒蛋氨酸是自然界中硒以有機(jī)形式存在于植物和飼料谷物中的一種硒代氨基酸，谷類及飼料作物等植物生長不一定需要硒蛋氨酸，但隨著蛋氨酸的合成它們能利用環(huán)境中特別是土壤中的亞硒酸鹽和硒酸鹽合成硒蛋氨酸。土壤中的可利用硒越多，植物中的硒蛋氨酸含量越高。目前，硒蛋氨酸主要來源于天然硒酵母，是硒酵母中有機(jī)硒的主要存在形式，但是硒蛋氨酸具有濃厚的酵母味道，直接水溶后噴灑，吸收效率低且會(huì)影響到最終產(chǎn)品的口感和風(fēng)味?？莶菅堪麠U菌，是芽胞桿菌屬的一種，枯草芽孢桿菌菌體自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶等酶類，相當(dāng)于復(fù)合酶，本發(fā)明通過硒蛋氨酸混合枯草芽胞桿菌后發(fā)酵，利用硒蛋氨酸產(chǎn)品帶有的酵母成分發(fā)酵，一方面利于硒元素進(jìn)入靈芝，另一方面隨著蛋氨酸的合成它們能利用環(huán)境中特別是土壤中的亞硒酸鹽和硒酸鹽合成硒蛋氨酸，還可以有效改善、化解酵母風(fēng)味。
3、蒸汽爆破是利用高溫高壓水蒸氣處理生物質(zhì)原料，并通過瞬間泄壓過程實(shí)現(xiàn)對原料的表面結(jié)構(gòu)改變、組分分離和半纖維素降解，一般用于玉米秸稈、麥稈和木質(zhì)生物質(zhì)等原料的預(yù)處理。本發(fā)明通過“放入蒸汽爆破罐，壓力4MPa，加熱至150℃，保持2min，然后在1-3s內(nèi)快速釋放壓力”，通過瞬間將壓力降為0，一方面可以通過壓力的瞬間改變來滅菌，另一方面可以有效細(xì)化、分散硒蛋氨酸，更加有利于靈芝的吸收。
4、現(xiàn)有技術(shù)一般都是在自然條件下，等待成熟靈芝孢子的彈射，孢子彈射的高峰一般是晴天早晨4-8時(shí)、下午5-8時(shí)以及陰天全天。本發(fā)明通過引入熱脅迫，控制培養(yǎng)室所在房間的溫度、濕度，一方面通過溫度刺激促進(jìn)成熟靈芝孢子的彈射量，另一方面，溫度提高，可以縮短成熟靈芝的孢子彈射的釋放期，進(jìn)而縮短孢子的彈射的收集時(shí)間。
5、本發(fā)明靈芝孢子粉的損失小，純度高(幾乎可達(dá)100％)，質(zhì)地飽滿，與套袋相比，工作效率明顯提高，并能有效利用上層空間。
具體實(shí)施方式
下面以實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明并不局限于這些實(shí)施例。
實(shí)施例1-3：
為了驗(yàn)證本發(fā)明的技術(shù)效果，2016年，使用本發(fā)明技術(shù)生產(chǎn)3個(gè)批次的產(chǎn)品，每個(gè)批次的方法如下:
1)出芝架的制作：出芝架長寬高為300cm×50cm×180cm，每個(gè)出芝架由4層組成，出芝架底層與地面相距20cm，其余層的間距為40cm；
每個(gè)出芝架的頂部安裝一個(gè)可拆卸的300cm×100cm平面板，每個(gè)出芝架的底部用食品級的PVC板做成凹型的槽，在槽的中間預(yù)留一個(gè)直徑10cm的圓孔，各出芝架間預(yù)留70cm通道，兩側(cè)各預(yù)留50cm通道；
2)將靈芝菌袋直接擺放在層架上，靈芝菌袋接種口朝兩邊，每層擺放4至5層靈芝菌袋；
3)菌袋出芝后，噴灑富硒營養(yǎng)液，以均勻覆蓋靈芝表面為準(zhǔn)，控制出芝房溫度26℃，濕度85％-90％，保證充足的通風(fēng)促進(jìn)靈芝的生長發(fā)育，待靈芝開蓋生長，即將噴射孢子粉時(shí)，將300cm×100cm的平面板固定在出芝架頂部，用厚度為0.006cm的農(nóng)用薄膜將整個(gè)出芝架罩住，薄膜下部與PVC板凹面用透明膠連接，待靈芝噴射孢子粉后，控制靈芝出芝房溫度25℃、濕度70％-75％，每15天收集一次孢子粉，直至孢子粉采收完畢；
所述的富硒營養(yǎng)液，通過以下制備方法得到：
①原料準(zhǔn)備：準(zhǔn)備純凈水100份、L-硒蛋氨酸1.0份、玉米粉5份；
②將步驟①的原料混合后，放入蒸汽爆破罐，壓力4MPa，加熱至150℃，保持2min，然后在1-3s內(nèi)快速釋放壓力得到漿液，在25℃按體積百分比為10％接入培養(yǎng)成熟的枯草芽孢桿菌液體菌種，放入發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐中通入無菌空氣，進(jìn)行攪拌發(fā)酵，攪拌轉(zhuǎn)速250r/min，發(fā)酵時(shí)間為4h，溫度保持35-37℃，發(fā)酵結(jié)束后，迅速將溫度升至70℃保持1.0h滅活，得到。
所述枯草芽孢桿菌液體菌種的培養(yǎng)方法為：采用三角瓶液體菌種培養(yǎng)，以下為重量百分?jǐn)?shù)，將處理過的蛋白粉漿30.0-35.0％，KH2P04 1.0％,MgS042.0％，NaCl0.5％放入三角瓶中，攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH至5.6，125℃滅菌10min，冷卻至25℃，接入經(jīng)過斜面培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌菌種，28℃搖床培養(yǎng)60-100h，用于發(fā)酵罐接種。
對比例1：
1)出芝架的制作：出芝架長寬高為300cm×50cm×180cm，每個(gè)出芝架由4層組成，出芝架底層與地面相距20cm，其余層的間距為40cm；
每個(gè)出芝架的頂部安裝一個(gè)可拆卸的300cm×100cm平面板，每個(gè)出芝架的底部用食品級的PVC板做成凹型的槽，在槽的中間預(yù)留一個(gè)直徑10cm的圓孔，各出芝架間預(yù)留70cm通道，兩側(cè)各預(yù)留50cm通道；
2)將靈芝菌袋直接擺放在層架上，靈芝菌袋接種口朝兩邊，每層擺放4至5層靈芝菌袋；
3)菌袋出芝后，保證充足的通風(fēng)促進(jìn)靈芝的生長發(fā)育，待靈芝開蓋生長，即將噴射孢子粉時(shí)，將300cm×100cm的平面板固定在出芝架頂部，用厚度為0.006cm的農(nóng)用薄膜將整個(gè)出芝架罩住，薄膜下部與PVC板凹面用透明膠連接，待靈芝噴射孢子粉后，每15天收集一次孢子粉，直至孢子粉采收完畢。
對比例2：
方法同實(shí)施例1-3，將富硒營養(yǎng)液中L-硒蛋氨酸換成亞硒酸鈉。
對比例3：
套袋收集靈芝孢子粉。
結(jié)果對比：
結(jié)果表明，通過本發(fā)明的技術(shù)可以縮短收粉時(shí)間、增加收粉量。從具體實(shí)施例可以看出，收粉時(shí)間相比對照組，縮短20-23天左右，收粉量增加50％以上，得到孢子粉中硒含量相比對比例提高300-400％以上。