本發(fā)明屬于食用菌栽培領(lǐng)域，具體涉及一種靈芝出菇方法。

背景技術(shù)：

靈芝是我國傳統(tǒng)的藥用真菌，因其廣泛的營養(yǎng)價值和藥用價值而深受青睞。靈芝多糖和三萜是靈芝中主要的藥理活性成分，在提高機體免疫功能、抗腫瘤、保肝和降血壓等方面效果顯著。如何有效提高靈芝產(chǎn)量、多糖和三萜含量成為靈芝研究的一個熱點，具有廣泛的應(yīng)用前景。

傳統(tǒng)袋料栽培靈芝均采取單孔開袋方式，靈芝子實體較大，市場上對靈芝子實體的應(yīng)用以靈芝切片和精粉為主，產(chǎn)品品質(zhì)透明度低，使得消費者對靈芝產(chǎn)品購買信心不足。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種靈芝出菇方法，靈芝朵型較小，未開始彈射孢子，可以整朵子實體出售，無需切片處理，既節(jié)約生產(chǎn)成本，又增強產(chǎn)品的透明度，且能有效提高其子實體中多糖、三萜等有效活性成分。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一種靈芝出菇方法，操作步驟如下：

（1）菌袋培養(yǎng)：在超凈臺上將原種轉(zhuǎn)接至37×22聚乙烯塑料袋中，23-28℃培養(yǎng)30-35天至菌絲長滿菌袋；所述菌袋含以下重量份原料：茶梗20份，木屑61份，麩皮15份，玉米粉3份，石膏1份，pH為4-6，含水量為60-65%，121℃滅菌180min。

（2）開袋出菇：在菌蓋上用皮筋扎一層直徑為10-12cm圓形玻璃紙，距菌袋兩端2.5-4.0cm，以“V”型等距在四周開6-8個直徑為1.5-2.5cm十字孔，用繩子將菌袋吊起出菇，溫度26-28℃，空氣濕度85-90%。

（3）采收：當靈芝未完全成熟，即芝蓋邊緣白色或黃色生長圈剩0.3-0.5cm時采收，將新鮮靈芝放入烘箱55-60℃烘干，收集烘干靈芝，密封。

（4）靈芝三萜提取與檢測：取步驟（3）烘干的子實體研磨成粉末狀。精確稱取干燥靈芝子實體粉末2g，加85%乙醇50mL常溫浸提2h，150W超聲0.5h，反復(fù)提取兩次，合并兩次提取液后過濾，濾液60℃旋轉(zhuǎn)蒸干，用甲醇溶解定容至50mL，并采用香草醛-冰醋酸法檢測三萜含量。

（5）靈芝多糖提取與檢測：取步驟（3）烘干的子實體研磨成粉末狀。精確稱取干燥靈芝子實體粉末2g，加40mL蒸餾水90℃水浴4h，過濾。重復(fù)一次，收集兩次濾液，加蒸餾水定容至100mL。吸取10mL多糖溶液，加入三倍的無水乙醇進行醇沉過夜。5 000r/min離心10min后棄去上清液，所得沉淀用2mL蒸餾水溶解，最后用sevag法去除蛋白，吸取上層清液用蒸餾水定容至50mL。多糖的檢測采用苯酚硫酸法。

本發(fā)明的優(yōu)點及有益之處：這種多孔出菇方式的靈芝子實體朵型較小，可以整朵子實體出售，無需切片處理，增強產(chǎn)品的透明度；在未完全成熟時采收，子實體未開始彈射孢子，既節(jié)約生產(chǎn)成本，又能有效提高其子實體中多糖、三萜等有效活性成分。通過這種出菇方式，靈芝多糖含量15.59mg/g，是對照組的1.62倍；三萜含量達9.95mg/g，比對照組提高39.6%。

附圖說明

圖1靈芝開袋方式簡圖。

圖2 靈芝開袋示意圖。

圖3靈芝多糖三萜含量示意圖，其中單孔表示普通開袋岀菇，多孔表示應(yīng)用本方法岀菇。靈芝多糖含量15.59mg/g，是對照組的1.62倍；三萜含量達9.95mg/g，比對照組提高39.6%。

具體實施方式

為了充分公開本發(fā)明的靈芝出菇的方法，以下結(jié)合實例加以說明。

實施例1

一種靈芝出菇的方法。包括以下步驟：

（1）菌袋培養(yǎng)：在超凈臺上將原種轉(zhuǎn)接至37×22聚乙烯塑料袋中，25℃培養(yǎng)35天至菌絲長滿菌袋；所述菌袋配方為：茶梗20份，木屑61份，麩皮15份，玉米粉3份，石膏1份，pH為4，含水量為60%，121℃滅菌180min。

（2）開袋出菇：在菌蓋上用皮筋扎一層直徑為10cm圓形玻璃紙，距菌袋兩端2.5cm，以“V”型等距在四周開6個直徑為1.5cm十字孔，用繩子將菌袋吊起出菇，溫度26℃，空氣濕度85%。

（3）采收：當靈芝未完全成熟，即芝蓋邊緣白色或黃色生長圈剩0.3cm時采收，將新鮮靈芝放入烘箱55℃烘干，收集烘干靈芝，密封。

（4）靈芝三萜提取與檢測：取步驟（3）烘干的子實體研磨成粉末狀。精確稱取干燥靈芝子實體粉末2g，加85%乙醇50mL常溫浸提2h，150W超聲0.5h，反復(fù)提取兩次，合并兩次提取液后過濾，濾液60℃旋轉(zhuǎn)蒸干，用甲醇溶解定容至50mL，并采用香草醛-冰醋酸法檢測三萜含量。

（5）靈芝多糖提取與檢測：取步驟（3）烘干的子實體研磨成粉末狀。精確稱取干燥靈芝子實體粉末2g，加40mL蒸餾水90℃水浴4h，過濾。重復(fù)一次，收集兩次濾液，加蒸餾水定容至100mL。吸取10mL多糖溶液，加入三倍的無水乙醇進行醇沉過夜。5 000r/min離心10min后棄去上清液，所得沉淀用2mL蒸餾水溶解，最后用sevag法去除蛋白，吸取上層清液用蒸餾水定容至50mL。多糖的檢測采用苯酚硫酸法。

本方法測得的靈芝多糖含量15.59mg/g，是對照組的1.62倍；三萜含量達9.95mg/g，比對照組提高39.6%。

實施例2

一種靈芝的出菇方法。包括以下步驟：

（1）菌袋培養(yǎng)：在超凈臺上將原種轉(zhuǎn)接至37×22聚乙烯塑料袋中，28℃培養(yǎng)30天至菌絲長滿菌袋；所述菌袋配方為：茶梗20份，木屑61份，麩皮15份，玉米粉3份，石膏1份，pH為6，含水量為65%，121℃滅菌180min。

（2）開袋出菇：在菌蓋上用皮筋扎一層直徑為12cm圓形玻璃紙，距菌袋兩端4.0cm，以“V”型等距在四周開8個直徑為2.5cm十字孔，用繩子將菌袋吊起出菇，溫度28℃，空氣濕度90%。

（3）采收：當靈芝未完全成熟，即芝蓋邊緣白色或黃色生長圈剩0.5cm時采收，將新鮮靈芝放入烘箱60℃烘干，收集烘干靈芝，密封。

（4）靈芝三萜提取與檢測：取步驟（3）烘干的子實體研磨成粉末狀。精確稱取干燥靈芝子實體粉末2g，加85%乙醇50mL常溫浸提2h，150W超聲0.5h，反復(fù)提取兩次，合并兩次提取液后過濾，濾液60℃旋轉(zhuǎn)蒸干，用甲醇溶解定容至50mL，并采用香草醛-冰醋酸法檢測三萜含量。

（5）靈芝多糖提取與檢測：取步驟（3）烘干的子實體研磨成粉末狀。精確稱取干燥靈芝子實體粉末2g，加40mL蒸餾水90℃水浴4h，過濾。重復(fù)一次，收集兩次濾液，加蒸餾水定容至100mL。吸取10mL多糖溶液，加入三倍的無水乙醇進行醇沉過夜。5 000r/min離心10min后棄去上清液，所得沉淀用2mL蒸餾水溶解，最后用sevag法去除蛋白，吸取上層清液用蒸餾水定容至50mL。多糖的檢測采用苯酚硫酸法。

本方法測得的靈芝多糖含量17.29mg/g，是對照組的2.1倍；三萜含量達9.97mg/g，比對照組提高40.6%。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例，凡依本發(fā)明申請專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。