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      一種牛大力壯苗組織培養(yǎng)基及其制備方法與流程

      文檔序號:11668012閱讀:379來源:國知局
      本發(fā)明屬于培養(yǎng)基制備
      技術領域
      ,具體涉及一種牛大力壯苗組織培養(yǎng)基。
      背景技術
      :牛大力,別名豬腳笠、金鐘根、山蓮藕、倒吊金鐘、大力薯,為豆科豆科崖豆藤屬植物,其主要成分為蛋白質、淀粉質及生物堿等。牛大力以根入藥,全年可采挖,為傳統(tǒng)的藥食同源植物。牛大力性平、味甘,有補腎潤肺、強筋活絡的功效,常用于治療腰肌勞損、風濕性關節(jié)炎、肺結核、慢性支氣管炎、慢性肝炎等病癥。牛大力除了入藥煎劑外,亦常為廣東民間入湯做食療、藥膳之用。牛大力有效成分有高麗槐素、芒柄花素、查爾酮類化合物、異黃酮類、糠醛、牛大力多糖等,這些成分具有抗炎殺菌、免疫調節(jié)作用,并由一定抗氧化和清除自由基作用。牛大力經采挖后,經清洗、晾曬可直接入藥,也可用于食用,更可經深加工,制成牛大力保健酒、牛大力花茶等深加工產品。牛大力是制藥企業(yè)加工中成藥、保健品的常用原料,近年來,隨著我國中醫(yī)藥事業(yè)蓬勃發(fā)展,人們生活水平逐漸提高,保健意識不斷增強,牛大力的市場需求也在不斷擴大。目前,牛大力的繁殖方法主要有種子繁育、扦插繁育、組織培養(yǎng)繁育等幾種模式。種子繁育及扦插培養(yǎng)對牛大力種苗本身要求較高,且培育周期較長,不利于牛大力種植推廣;因此,選擇優(yōu)良的牛大力種苗,采用組織培養(yǎng)的模式進行繁育,是一種高效繁育培養(yǎng)牛大力的方法,能大大縮短牛大力的培育時間,且提高牛大力幼苗的成活率,繁育所得植株健康,有利于提高牛大力的結薯能力及產量。在植物組織培養(yǎng)過程中,根據植物生長發(fā)育過程所需求的養(yǎng)分不同,可分為三種培養(yǎng)基,分別為誘導分化培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基、壯苗組織培養(yǎng)基。其中,壯苗組織培養(yǎng)基起到促進組培苗生長發(fā)育的目的,從而能夠增強組培苗的健康,提升組培苗對養(yǎng)分的吸收能力,間接地移栽成活率。針對不同的植物,壯苗組織培養(yǎng)基的成分也應有所區(qū)別。以上
      背景技術
      內容的公開僅用于輔助理解本發(fā)明的發(fā)明構思及技術方案,其并不必然屬于本專利申請的現有技術,在沒有明確的證據表明上述內容在本專利申請的申請日已經公開的情況下,上述
      背景技術
      不應當用于評價本申請的新穎性和創(chuàng)造性。技術實現要素:本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種牛大力壯苗組織培養(yǎng)基,以實現牛大力組培苗的壯苗培育。為了解決以上技術問題,本發(fā)明采用以下技術方案:一種牛大力壯苗組織培養(yǎng)基,包括以下原料:瓊脂28~90g、葡萄糖7~22g、激素0.2~1g、無機鹽溶液2~10g、α-萘乙酸鈉0.2~0.8g、活性炭9~25g、核黃素0.1~0.7g、玉米素0.1~0.8g、水解酪蛋白10~30g、有機物55~125g、三蒸水20~60g。優(yōu)選地,所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基,包括以下原料:瓊脂30~85g、葡萄糖10~18g、激素0.3~0.8g、無機鹽溶液3~9g、α-萘乙酸鈉0.3~0.7g、活性炭10~22g、核黃素0.3~0.6g、玉米素0.2~0.6g、水解酪蛋白12~26g、有機物65~110g、三蒸水25~50g。優(yōu)選地,所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基,包括以下原料:瓊脂35~70g、葡萄糖12~16g、激素0.4~0.6g、無機鹽溶液4~7g、α-萘乙酸鈉0.4~0.6g、活性炭12~20g、核黃素0.4~0.5g、玉米素0.3~0.5g、水解酪蛋白14~22g、有機物75~95g、三蒸水28~42g。優(yōu)選地,所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基,所述有機物包括土豆泥、蘋果泥、香蕉泥中的一種。優(yōu)選地,所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基,所述激素包括ga、tdz、cppu、aba中的一種。更優(yōu)選地,所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基,所述的無機鹽溶液中的無機鹽包括硼酸鈉、氯化鋅、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化錳、氯化鈣中的一種或幾種。更優(yōu)選地,所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基的制備方法,包括以下步驟:s1:激素先用少量95%酒精溶解后,加入去離子水配置成溶液;s2:葡萄糖使用去離子水配置成10%的溶液;s3:向燒杯中加入三蒸水,接著加入s1所得的激素溶液、無機鹽溶液、α-萘乙酸鈉、活性炭、核黃素、玉米素、水解酪蛋白、有機物,充分攪拌;s4:向s3所制成的溶液中加入s2所得的葡萄糖溶液,充分攪拌,使用10%naoh和10%hcl溶液調節(jié)至體系ph值為5~6.6;s5:向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂,加熱攪拌,待溶液沸騰后分裝于培養(yǎng)瓶中;s6:將步驟s5所制成的誘導組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中滅菌一段時間后,即制成壯苗組織培養(yǎng)基。進一步地,所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基的制備方法,所使用的試劑級別均為分析純。進一步地,所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基的制備方法,步驟s5中所述培養(yǎng)瓶為罐頭瓶。更進一步地,所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基的制備方法,步驟s6中滅菌溫度為120~135℃,滅菌時間為5~15min。本發(fā)明具有以下有益效果:(1)本發(fā)明所述壯苗組織培養(yǎng)基,其原料租分來源廣泛,制備方法易于操作,且儲存期長;(2)本發(fā)明所述的壯苗組織培養(yǎng)基,含有促進牛大力種苗發(fā)育的錳、α-萘乙酸等促進成分,且所含無機鹽濃度低,能夠有效促進組培苗的生長;(3)本發(fā)明所述的壯苗組織培養(yǎng)基能夠有效促進牛大力組培苗莖稈發(fā)育粗壯、芽生長。具體實施方式下面結合具體實施方式對本發(fā)明作進一步詳細說明。應該強調的是,下述說明僅僅是示例性的,而不是為了限制本發(fā)明的范圍及其應用。實施例1:一種牛大力壯苗組織培養(yǎng)基,包括以下原料:瓊脂28g、葡萄糖7g、ga0.2g、含有硼酸鈉、氯化鋅、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化錳、氯化鈣的無機鹽溶液2g、α-萘乙酸鈉0.2g、活性炭9g、核黃素0.1g、玉米素0.1g、水解酪蛋白10g、土豆泥55g、三蒸水20g。所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基的制備方法,包括以下步驟:s1:ga先用少量95%酒精溶解后,加入去離子水配置成溶液;s2:葡萄糖使用去離子水配置成10%的溶液;s3:向燒杯中加入三蒸水,接著加入s1所得的ga溶液、無機鹽溶液、α-萘乙酸鈉、活性炭、核黃素、玉米素、水解酪蛋白、土豆泥,各試劑均為分析純,充分攪拌;s4:向s3所制成的溶液中加入s2所得的葡萄糖溶液,充分攪拌,使用10%naoh和10%hcl溶液調節(jié)至體系ph值為5.5;s5:向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂,加熱攪拌,待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中;s6:將步驟s5所制成的誘導組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在120℃下滅菌15min,即制成壯苗組織培養(yǎng)基。更進一步地,所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基的制備方法,步驟s6中滅菌溫度為120~135℃,滅菌時間為5~15min。實施例2一種牛大力壯苗組織培養(yǎng)基,包括以下原料:瓊脂90g、葡萄糖22g、tdz1g、含有硼酸鈉、氯化鋅、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化錳、氯化鈣的無機鹽溶液10g、α-萘乙酸鈉0.8g、活性炭25g、核黃素0.7g、玉米素0.8g、水解酪蛋白30g、蘋果泥125g、三蒸水60g。所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基的制備方法,包括以下步驟:s1:tdz先用少量95%酒精溶解后,加入去離子水配置成溶液;s2:葡萄糖使用去離子水配置成10%的溶液;s3:向燒杯中加入三蒸水,接著加入s1所得的tdz溶液、無機鹽溶液、α-萘乙酸鈉、活性炭、核黃素、玉米素、水解酪蛋白、蘋果泥,各試劑均為分析純,充分攪拌;s4:向s3所制成的溶液中加入s2所得的葡萄糖溶液,充分攪拌,使用10%naoh和10%hcl溶液調節(jié)至體系ph值為6.5;s5:向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂,加熱攪拌,待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中;s6:將步驟s5所制成的誘導組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在135℃下滅菌5min,即制成壯苗組織培養(yǎng)基。實施例3一種牛大力壯苗組織培養(yǎng)基,包括以下原料:瓊脂30g、葡萄糖10g、cppu0.3g、含有硼酸鈉、氯化鋅、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化錳、氯化鈣的無機鹽溶液3g、α-萘乙酸鈉0.3g、活性炭10g、核黃素0.3g、玉米素0.2g、水解酪蛋白12g、香蕉泥65g、三蒸水25g。所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基的制備方法,包括以下步驟:s1:cppu先用少量95%酒精溶解后,加入去離子水配置成溶液;s2:葡萄糖使用去離子水配置成10%的溶液;s3:向燒杯中加入三蒸水,接著加入s1所得的cppu溶液、無機鹽溶液、α-萘乙酸鈉、活性炭、核黃素、玉米素、水解酪蛋白、香蕉泥,各試劑均為分析純,充分攪拌;s4:向s3所制成的溶液中加入s2所得的葡萄糖溶液,充分攪拌,使用10%naoh和10%hcl溶液調節(jié)至體系ph值為5.6;s5:向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂,加熱攪拌,待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中;s6:將步驟s5所制成的誘導組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在130℃下滅菌8min,即制成壯苗組織培養(yǎng)基。實施例4一種牛大力壯苗組織培養(yǎng)基,包括以下原料:瓊脂85g、葡萄糖18g、aba0.8g、含有硼酸鈉、氯化鋅、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化錳、氯化鈣的無機鹽溶液9g、α-萘乙酸鈉0.7g、活性炭22g、核黃素0.6g、玉米素0.6g、水解酪蛋白26g、土豆泥110g、三蒸水50g。所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基的制備方法,包括以下步驟:s1:aba先用少量95%酒精溶解后,加入去離子水配置成溶液;s2:葡萄糖使用去離子水配置成10%的溶液;s3:向燒杯中加入三蒸水,接著加入s1所得的aba溶液、無機鹽溶液、α-萘乙酸鈉、活性炭、核黃素、玉米素、水解酪蛋白、土豆泥,各試劑均為分析純,充分攪拌;s4:向s3所制成的溶液中加入s2所得的葡萄糖溶液,充分攪拌,使用10%naoh和10%hcl溶液調節(jié)至體系ph值為5.5;s5:向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂,加熱攪拌,待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中;s6:將步驟s5所制成的誘導組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在135℃下滅菌5min,即制成壯苗組織培養(yǎng)基。實施例5一種牛大力壯苗組織培養(yǎng)基,包括以下原料:瓊脂55g、葡萄糖15g、ga0.5g、含有硼酸鈉、氯化鋅、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化錳、氯化鈣的無機鹽溶液6g、α-萘乙酸鈉0.5g、活性炭15g、核黃素0.5g、玉米素0.4g、水解酪蛋白18g、蘋果泥85g、三蒸水36g。所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基的制備方法,包括以下步驟:s1:ga先用少量95%酒精溶解后,加入去離子水配置成溶液;s2:葡萄糖使用去離子水配置成10%的溶液;s3:向燒杯中加入三蒸水,接著加入s1所得的ga溶液、無機鹽溶液、α-萘乙酸鈉、活性炭、核黃素、玉米素、水解酪蛋白、蘋果泥,各試劑均為分析純,充分攪拌;s4:向s3所制成的溶液中加入s2所得的葡萄糖溶液,充分攪拌,使用10%naoh和10%hcl溶液調節(jié)至體系ph值為6.2;s5:向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂,加熱攪拌,待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中;s6:將步驟s5所制成的誘導組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在128℃下滅菌12min,即制成壯苗組織培養(yǎng)基。為了更詳細說明本發(fā)明的有益效果,以下還提供了具體的試驗結果。選取牛大力新鮮種子切片180份作為組織培養(yǎng)的外植體,隨機分為a、b、c、d、e、f六組,每組30份。每組經升汞消毒后分別接入相同組分的誘導培養(yǎng)基,培育10天后移入相同生根培養(yǎng)基中培養(yǎng),繼續(xù)培育10天后,a~e組種苗移入采用本發(fā)明實施例1~5所述配方及方法制備成的壯苗組織培養(yǎng)基中,f組接入市售普通壯苗組織培養(yǎng)基中,繼續(xù)培養(yǎng)10天后,比較各組組培苗的生長狀況,實驗數據如下表所示。組別莖稈平均直徑/mm平均每株葉芽數/個a2.88.2b3.18.6c2.77.7d3.09.3e2.88.4f2.16.7由此可見,本發(fā)明所述的牛大力壯苗組織培養(yǎng)基與市售普通培養(yǎng)基相比,能夠提升牛大力組培苗的莖稈粗壯程度及增加平均葉芽數,能夠有效促進牛大力種苗的生長發(fā)育。以上內容不能認定本發(fā)明的具體實施只局限于這些說明,對于本發(fā)明所屬
      技術領域
      的普通技術人員來說,在不脫離本發(fā)明構思的前提下,還可以做出若干簡單推演或替換,都應當視為屬于本發(fā)明由所提交的權利要求書確定的專利保護范圍。當前第1頁12
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