本發(fā)明屬于培養(yǎng)基制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種牛大力生根組織培養(yǎng)基。

背景技術(shù)：

牛大力，別名豬腳笠、金鐘根、山蓮藕、倒吊金鐘、大力薯，為豆科豆科崖豆藤屬植物，其主要成分為蛋白質(zhì)、淀粉質(zhì)及生物堿等。牛大力以根入藥，全年可采挖，為傳統(tǒng)的藥食同源植物。牛大力性平、味甘，有補(bǔ)腎潤(rùn)肺、強(qiáng)筋活絡(luò)的功效，常用于治療腰肌勞損、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肺結(jié)核、慢性支氣管炎、慢性肝炎等病癥。牛大力除了入藥煎劑外，亦常為廣東民間入湯做食療、藥膳之用。牛大力有效成分有高麗槐素、芒柄花素、查爾酮類(lèi)化合物、異黃酮類(lèi)、糠醛、牛大力多糖等，這些成分具有抗炎殺菌、免疫調(diào)節(jié)作用，并由一定抗氧化和清除自由基作用。牛大力經(jīng)采挖后，經(jīng)清洗、晾曬可直接入藥，也可用于食用，更可經(jīng)深加工，制成牛大力保健酒、牛大力花茶等深加工產(chǎn)品。牛大力是制藥企業(yè)加工中成藥、保健品的常用原料，近年來(lái)，隨著我國(guó)中醫(yī)藥事業(yè)蓬勃發(fā)展，人們生活水平逐漸提高，保健意識(shí)不斷增強(qiáng)，牛大力的市場(chǎng)需求也在不斷擴(kuò)大。

目前，牛大力的繁殖方法主要有種子繁育、扦插繁育、組織培養(yǎng)繁育等幾種模式。種子繁育及扦插培養(yǎng)對(duì)牛大力種苗本身要求較高，且培育周期較長(zhǎng)，不利于牛大力種植推廣；因此，選擇優(yōu)良的牛大力種苗，采用組織培養(yǎng)的模式進(jìn)行繁育，是一種高效繁育培養(yǎng)牛大力的方法，能大大縮短牛大力的培育時(shí)間，且提高牛大力幼苗的成活率，繁育所得植株健康，有利于提高牛大力的結(jié)薯能力及產(chǎn)量。

在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，根據(jù)植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程所需求的養(yǎng)分不同，可分為三種培養(yǎng)基，分別為誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基、生根組織培養(yǎng)基、壯苗培養(yǎng)基。其中，生根組織培養(yǎng)基起到植物體生根的目的，直接決定了植物的根系發(fā)育程度，從而能夠提升組培苗對(duì)養(yǎng)分的吸收能力及移栽成活率。針對(duì)不同的植物，生根組織培養(yǎng)基的成分也應(yīng)有所區(qū)別。

以上背景技術(shù)內(nèi)容的公開(kāi)僅用于輔助理解本發(fā)明的發(fā)明構(gòu)思及技術(shù)方案，其并不必然屬于本專(zhuān)利申請(qǐng)的現(xiàn)有技術(shù)，在沒(méi)有明確的證據(jù)表明上述內(nèi)容在本專(zhuān)利申請(qǐng)的申請(qǐng)日已經(jīng)公開(kāi)的情況下，上述背景技術(shù)不應(yīng)當(dāng)用于評(píng)價(jià)本申請(qǐng)的新穎性和創(chuàng)造性。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種牛大力生根組織培養(yǎng)基，以實(shí)現(xiàn)對(duì)牛大力組培苗的高效誘導(dǎo)生根。

為了解決以上技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂35～105g、蔗糖12～48g、激素0.3～1.2g、無(wú)機(jī)鹽溶液3～14g、煙酸0.1～1.2g、活性炭8～25g、半胱氨酸0.2～1.2g、鏈霉素0.1～1.5g、水解乳蛋白7～18g、有機(jī)物40～120g、三蒸水15～60g。

優(yōu)選地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂40～90g、蔗糖18～42g、激素0.5～1g、無(wú)機(jī)鹽溶液5～12g、煙酸0.2～1g、活性炭10～22g、半胱氨酸0.3～1g、鏈霉素0.2～1.2g、水解乳蛋白8～15g、有機(jī)物50～110g、三蒸水20～50g。

優(yōu)選地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂45～80g、蔗糖20～36g、激素0.6～0.8g、無(wú)機(jī)鹽溶液6～10g、煙酸0.3～0.9g、活性炭12～20g、半胱氨酸0.5～0.8g、鏈霉素0.3～0.9g、水解乳蛋白10～14g、有機(jī)物55～95g、三蒸水25～45g。

優(yōu)選地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基，所述有機(jī)物包括牛奶、蘋(píng)果泥、香蕉泥中的一種。

更優(yōu)選地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基，所述激素包括6-ba、kt、cppu、aba中的一種。

更優(yōu)選地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基，其無(wú)機(jī)鹽溶液中的無(wú)機(jī)鹽包括硼酸鈉、氯化鋅、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化鈣中的一種或幾種。

進(jìn)一步地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：

s1：激素先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；

s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；

s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的激素溶液、無(wú)機(jī)鹽溶液、煙酸、活性炭、半胱氨酸、鏈霉素、水解乳蛋白、有機(jī)物，充分?jǐn)嚢瑁?/p>

s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分?jǐn)嚢瑁褂?0％naoh和10％hcl溶液調(diào)節(jié)至體系ph值為5～6.6；

s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于培養(yǎng)瓶中；

s6：將步驟s5所制成的誘導(dǎo)組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中滅菌一段時(shí)間后，即制成生根組織培養(yǎng)基。

進(jìn)一步地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，所使用的試劑級(jí)別均為分析純。

進(jìn)一步地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，步驟s5中所述培養(yǎng)瓶為罐頭瓶。

進(jìn)一步地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，步驟s6中滅菌溫度為120～135℃，滅菌時(shí)間為5～15min。

本發(fā)明具有以下有益效果：

(1)本發(fā)明所述生根組織培養(yǎng)基，其成分來(lái)源廣泛，制備方法易于操作，且儲(chǔ)存期長(zhǎng)；

(2)本發(fā)明所述的生根組織培養(yǎng)基，含有對(duì)促進(jìn)植物生根明顯的硼、脫落酸等成分；

(3)本發(fā)明所述的生根組織培養(yǎng)基能夠有效促進(jìn)牛大力組培苗幼體生根，提升生根率及移栽成活率。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)該強(qiáng)調(diào)的是，下述說(shuō)明僅僅是示例性的，而不是為了限制本發(fā)明的范圍及其應(yīng)用。

實(shí)施例1：

一種牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂35g、蔗糖12g、6-ba0.3g、含有硼酸鈉、氯化鋅、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化鈣的無(wú)機(jī)鹽溶液3g、煙酸0.1g、活性炭8g、半胱氨酸0.2g、鏈霉素0.1g、水解乳蛋白7g、牛奶40g、三蒸水15g。

所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：

s1：6-ba先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；

s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；

s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的6-ba溶液、無(wú)機(jī)鹽溶液、煙酸、活性炭、半胱氨酸、鏈霉素、水解乳蛋白、牛奶，各試劑均為分析純，然后充分?jǐn)嚢瑁?/p>

s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分?jǐn)嚢瑁褂?0％naoh和10％hcl溶液調(diào)節(jié)至體系ph值為5.5；

s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中；

s6：將步驟s5所制成的誘導(dǎo)組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在120℃下滅菌15min，即制成生根組織培養(yǎng)基。

實(shí)施例2

一種牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂105g、蔗糖48g、kt1.2g、含有硼酸鈉、氯化鋅、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鈣的無(wú)機(jī)鹽溶液14g、煙酸1.2g、活性炭25g、半胱氨酸1.2g、鏈霉素1.5g、水解乳蛋白18g、蘋(píng)果泥120g、三蒸水60g。

所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：

s1：kt先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；

s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；

s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的kt溶液、無(wú)機(jī)鹽溶液、煙酸、活性炭、半胱氨酸、鏈霉素、水解乳蛋白、蘋(píng)果泥，各試劑均為分析純，然后充分?jǐn)嚢瑁?/p>

s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分?jǐn)嚢?，使?0％naoh和10％hcl溶液調(diào)節(jié)至體系ph值為5.8；

s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中；

s6：將步驟s5所制成的誘導(dǎo)組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在135℃下滅菌5min，即制成生根組織培養(yǎng)基。

實(shí)施例3

一種牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂40g、蔗糖18g、cppu0.5g、含有硼酸鈉、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化鈣的無(wú)機(jī)鹽溶液5g、煙酸0.2g、活性炭10g、半胱氨酸0.3g、鏈霉素0.2g、水解乳蛋白8g、香蕉泥50g、三蒸水20g。

所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：

s1：cppu先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；

s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；

s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的cppu溶液、無(wú)機(jī)鹽溶液、煙酸、活性炭、半胱氨酸、鏈霉素、水解乳蛋白、香蕉泥，各試劑均為分析純，然后充分?jǐn)嚢瑁?/p>

s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分?jǐn)嚢?，使?0％naoh和10％hcl溶液調(diào)節(jié)至體系ph值為6.5；

s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中；

s6：將步驟s5所制成的誘導(dǎo)組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在125℃下滅菌12min，即制成生根組織培養(yǎng)基。

實(shí)施例4

一種牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂90g、蔗糖42g、aba1g、含有硼酸鈉、氯化鋅、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化鈣的無(wú)機(jī)鹽溶液12g、煙酸1g、活性炭22g、半胱氨酸1g、鏈霉素1.2g、水解乳蛋白15g、牛奶110g、三蒸水50g。

所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：

s1：aba先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；

s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；

s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的aba溶液、無(wú)機(jī)鹽溶液、煙酸、活性炭、半胱氨酸、鏈霉素、水解乳蛋白、牛奶，各試劑均為分析純，然后充分?jǐn)嚢瑁?/p>

s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分?jǐn)嚢?，使?0％naoh和10％hcl溶液調(diào)節(jié)至體系ph值為5.8；

s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中；

s6：將步驟s5所制成的誘導(dǎo)組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在135℃下滅菌6min，即制成生根組織培養(yǎng)基。

實(shí)施例5

一種牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂55g、蔗糖28g、aba0.7g、無(wú)機(jī)鹽溶液8g、煙酸0.6g、活性炭16g、半胱氨酸0.7g、鏈霉素0.5g、水解乳蛋白12g、蘋(píng)果泥80g、三蒸水30g。

更優(yōu)選地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基，其無(wú)機(jī)鹽溶液中的無(wú)機(jī)鹽包括硼酸鈉、氯化鋅、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化鈣中的一種或幾種。

進(jìn)一步地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：

s1：aba先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；

s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；

s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的aba溶液、無(wú)機(jī)鹽溶液、煙酸、活性炭、半胱氨酸、鏈霉素、水解乳蛋白、蘋(píng)果泥，各試劑均為分析純，然后充分?jǐn)嚢瑁?/p>

s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分?jǐn)嚢?，使?0％naoh和10％hcl溶液調(diào)節(jié)至體系ph值為6.2；

s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中；

s6：將步驟s5所制成的誘導(dǎo)組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在130℃下滅菌8min，即制成生根組織培養(yǎng)基。

為了更詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的有益效果，以下還提供了具體的試驗(yàn)結(jié)果。

選取牛大力新鮮種子切片180份作為組織培養(yǎng)的外植體，隨機(jī)分為a、b、c、d、e、f六組，每組30份。每組經(jīng)升汞消毒后分別接入相同組分的誘導(dǎo)培養(yǎng)基，培育10天后，a～e組種苗移入采用本發(fā)明實(shí)施例1～5所述配方及方法制備成的生根組織培養(yǎng)基中，f組接入市售普通生根組織培養(yǎng)基中，繼續(xù)培養(yǎng)7天后，比較各組的生根率。后移入種植地種植培育，記錄種苗成活率，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如下表所示。

由此可見(jiàn)，本發(fā)明所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基與市售普通培養(yǎng)基相比，能夠提升牛大力組培苗的生根率，且移栽成活率較高。

以上內(nèi)容不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說(shuō)明，對(duì)于本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡(jiǎn)單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明由所提交的權(quán)利要求書(shū)確定的專(zhuān)利保護(hù)范圍。