技術領域：

本發(fā)明屬于生物學領域，涉及秦嶺巖白菜，具體來說是一種秦嶺巖白菜的無性繁殖方法。

背景技術：
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秦嶺巖白菜(bergeniascopulosat.p.wang)為虎耳草科巖白菜屬多年生草本，該屬植物全世界有10種，我國產(chǎn)7種，秦嶺巖白菜其根狀莖在陜西眉縣及秦嶺山區(qū)稱為盤龍七，不僅是我國3個特有種之一，而且為本屬最原始的種。國內(nèi)野生種多分布于陜西、四川及甘肅東南部，進人冬季，在原產(chǎn)地多枯萎落葉，但開花較早，花朵粉色，觀賞價值高。全草含有巖白菜素，根莖含藥量比較高，已被《中華本草》和《陜西中草藥》所收載，是陜西民間常用藥，澀、味苦、平；具有補脾健胃，收澀固腸，除濕利水，活血的功效；主治急慢性腸胃炎、浮腫、禿瘡、疥癬等，是治療呼吸系統(tǒng)疾病的特效藥。近些年，學者們對其開花特性、傳粉適應性及繁殖系統(tǒng)進行了分析研究，認為其存在自交退化現(xiàn)象，故自然結(jié)實率極低，種子萌發(fā)率不高，生長緩慢。

課題組于2012年建立了秦嶺巖白菜快繁技術體系，并率先在國內(nèi)實現(xiàn)了標準化生產(chǎn)，保護了野生資源，生產(chǎn)出的優(yōu)質(zhì)種苗在新疆、河南、福建、浙江等地進行了示范種植，收到了良好的社會效益與生態(tài)效益。近幾年材料費、人工費持續(xù)高漲，使得組培生產(chǎn)種苗的費用也居高不下，為了節(jié)約生產(chǎn)成本，又能提供優(yōu)質(zhì)種苗的目的，課題組就秦嶺巖白菜進行了系統(tǒng)栽培，并統(tǒng)計了一年生組培苗的分株芽苗數(shù)，利用分株芽苗培育生根及帶芽根莖扦插等無性繁殖方式，使大面積人工栽培和產(chǎn)業(yè)化開發(fā)成為可能。

技術實現(xiàn)要素：
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本發(fā)明的目的在于提供一種秦嶺巖白菜的無性繁殖方法，所述的這種秦嶺巖白菜的無性繁殖方法要解決現(xiàn)有技術中野生秦嶺巖白菜繁殖率低的技術問題，又降低組培生產(chǎn)中費用過高的現(xiàn)狀，使大面積人工栽培和產(chǎn)業(yè)化開發(fā)成為可能。

本發(fā)明提供了一種秦嶺巖白菜的無性繁殖方法，包括一個選擇芽苗的步驟，如果所述的芽苗高度超過5cm，則保留0.1～1cm的根莖基部并修切平整，根莖基部用0.1～2.0mg·l^-1iba浸泡15～50s后，再種植于混合基質(zhì)中進行培育；如果芽苗的高度低于5cm，保留于原根莖上，進行根莖穗條扦插，將根莖穗條的長度修切為1～6cm，于3～7月或者9～11月扦插于混合基質(zhì)中；所述的混合基質(zhì)由珍珠巖、草炭土和腐殖質(zhì)組成，種前先澆透水，然后用塑料薄膜搭拱棚封閉保濕，保持光照度在20001x～30001x，每天10～14h光照時間，棚內(nèi)溫度為20～28℃，施以肥水管理，培育2～3個月。。

進一步的，芽苗根莖基部可以保留0.1～1cm區(qū)間的任一長度；iba可以為0.1～2.0mg·l^-1區(qū)間的任一濃度；iba浸泡時間可以為15～50s區(qū)間的任一時間。

進一步的，根莖穗條的長度可以修切為1～6cm區(qū)間的任一長度；可以在3～7月或者9～11月區(qū)間任一月份里進行扦插。

進一步的，混合基質(zhì)使用前，先用水澆透，種植后后澆一遍1500x的多菌靈，種后緩苗前補水，緩苗后干透澆透，并延長光照來培育健壯種苗，澆肥原則是兩遍肥水之間加一遍清水，其ec控制在250～500um/cm之間，5～7天施一遍殺菌藥。

進一步的，所述的肥料由肥料寶力豐和銨鈣鎂組成，所述的寶力豐和銨鈣鎂的質(zhì)量為7:3。

進一步的，所述的拱棚內(nèi)光照度可以保持在20001x～30001x區(qū)間之間的任一強度；光照時間可以保持在10～14h區(qū)間之間的任一時間，溫度可以保持在20～128℃區(qū)間之間的任一溫度。

進一步的，當種苗根部形成土球，高度為10cm時，移植入口徑為8cm的小缽中進行再次培育。

本發(fā)明和已有技術相比，其技術進步是積極和明顯的。生根培育中，生根率最高可達100％。扦插培育中，成活率最高可達90％。本發(fā)明利用芽苗培育生根或者根莖穗條扦插等無性繁殖方式培育秦嶺巖白菜，種苗成本降低，使大面積人工栽培和產(chǎn)業(yè)化開發(fā)成為可能，保護了野生資源。

附圖說明：

圖1為秦嶺巖白菜10棵一年生組培苗芽苗總數(shù)的照片。

圖2為秦嶺巖白菜芽苗生根情況的照片。

圖3為秦嶺巖白菜根莖的照片。

圖4為秦嶺巖白菜根莖扦插的照片。

圖5為秦嶺巖白菜根莖扦插成活種苗的照片。

具體實施方式：

下述實施方式統(tǒng)計數(shù)據(jù)時，每種處理調(diào)查20個，每種處理重復3次。統(tǒng)計芽苗生根率、根莖扦插成活率。芽苗生根率＝生根株數(shù)/接種數(shù)，根莖扦插成活率＝成活數(shù)/扦插數(shù)。

采用excel2003和dps14.5數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。采用完全隨機單因素試驗統(tǒng)計法和lsd法進行方差分析和多重比較(α＝0.05)

實施例1

芽苗生根培育

1.1梯度設計

芽苗生根培育時，采用naa和iba處理，設置為0.1、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0計6種濃度梯度；浸泡時間設置為10s、15s、20s、30s、40s、50s六個梯度；芽苗基部修切為0.1、0.2、0.5、0.8、1.0cm五種長度。

1.2培養(yǎng)條件

芽苗生根培育時，在溫室里進行，操作后澆透水，然后用塑料薄膜搭拱棚封閉保濕，適時加蓋草簾或遮陽網(wǎng)遮陰降溫，保持光照度在20001x～30001x，每天10～14h光照時間，棚內(nèi)溫度為20～28℃。

1.3芽苗培育

表1不同生長激素及其濃度對芽苗生根的影響

*表中數(shù)據(jù)為平均值±標準誤差(n＝3)，同列數(shù)字后不同的字母表示0.05水平差異顯著性(p﹤0.05)，下同。

高度超過5cm的芽苗進行生根培育，保留1cm的基部并修切平整，用不同濃度生長素處理20s后，再種植于配制好的混合基質(zhì)中，施以肥水管理，一個月后統(tǒng)計生根率，不同激素及其濃度對芽苗生根的影響差異顯著(表1)。不管是采用naa還是iba處理，隨著激素濃度的升高，生根率也隨著提高，當濃度為1.0mg·l^-1時，生根率達到最高，分別為65％、75％，之后生長素濃度升高，反而對生根有抑制效果，生根率下降。篩選iba1.0mg·l^-1做為最佳處理濃度，與其它處理比較，差異顯著。

采用1.0mg·l^-1iba浸泡芽苗基部，浸泡時間設置為10s、15s、20s、30s、40s、50s六個梯度。結(jié)果顯示，浸泡時間對生根率影響顯著，短時速浸，生根率不高，隨著浸泡時間延長，生根率快速提高，浸泡時間為30s時，生根率達最高95％(表2)，與其它處理比較，差異顯著。綜合激素種類、濃度以及浸泡時間，篩選出1.0mg·l^-1iba浸泡30s為最佳處理方式。

表2不同浸泡時間對芽苗生根的影響

采用1.0mg·l^-1iba浸泡芽苗基部30s，芽苗基部修切為0.1、0.2、0.5、0.8、1.0cm五種長度。結(jié)果顯示，芽苗基部根莖越長，生根率越高，當長度為0.5cm時，生根率達到最高100％，與低于0.5cm的兩種處理比較，差異顯著(表3)。根據(jù)試驗結(jié)果以及節(jié)約根莖藥材考慮，芽苗基部的最佳保留長度為0.5cm。

表3不同芽苗基部長度對芽苗生根的影響

實施例2根莖扦插

高度低于5cm的芽苗，單獨切割下來不容易生根成活，宜保留于原根莖上，進行根莖扦插，才能成活。

2.1試驗設計

根莖扦插時，修切為1cm、2cm、3cm、4cm、5cm、6cm六種長度；扦插時間設置為1～12月等不同月份。

2.2培養(yǎng)條件

根莖扦插時，在溫室里進行，操作后澆透水，然后用塑料薄膜搭拱棚封閉保濕，適時加蓋草簾或遮陽網(wǎng)遮陰降溫，保持光照度在2000～30001x左右，10～14h光照時間，棚內(nèi)溫度為20～28℃左右。

2.3根莖扦插

根莖修切為1cm、2cm、3cm、4cm、5cm、6cm六種長度，發(fā)現(xiàn)根莖長度低于4cm時，對于扦插影響顯著(表4)。當根莖長度為1cm時，扦插成活率僅為15％，而當根莖長度達到4cm及以上時，扦插成活率可以達到100％，這與根莖積累營養(yǎng)多少緊密相關。為了降低種植成本提高藥材產(chǎn)量，根莖扦插時取4cm即可。

表4不同根莖長度對扦插成活率的影響

取4cm根莖扦插時，季節(jié)不同，成活率也有差異，不同月份扦插發(fā)現(xiàn)(表5)，3～7月、9～11月，扦插成活率在90％以上，與其它月份比較，差異顯著；而8月份雨水比較多的時候，根莖出現(xiàn)部分腐爛現(xiàn)象，影響成活率略低為85％；而在12月至明年的2月期間，成活率甚至降低到55％，這與溫度低，根莖發(fā)新根慢有直接關系。

表5不同月份扦插對成活率的影響

實施例3基質(zhì)及管理

秦嶺巖白菜芽苗生根培養(yǎng)和根莖穗條扦插都采用透氣性良好的進口草炭，草炭長度2mm左右，以珍珠巖:草炭土:腐殖質(zhì)＝2:1:1的比例調(diào)制成混合基質(zhì)，種植前2d澆透，種后澆一遍1500x的多菌靈。種后緩苗前補小水，哪里干補哪里，以當天蒸發(fā)完為佳；緩苗后干透澆透，并適當延長光照來培育健壯種苗。澆肥原則是兩遍肥水之間加一遍清水，其ec控制在250～500um/cm之間，肥料按寶力豐：銨鈣鎂＝7:3的比例混合。5～7d施一遍殺菌藥，及時防治根蛆。養(yǎng)護至2個月時，不論是芽苗還是根莖扦插苗，根部已經(jīng)形成土球，高度為10cm，此時可以作為成品苗發(fā)售。2個月以上的生根苗需要移植入口徑直徑為8cm的小缽中，以利于后期生長。

結(jié)論:

巖白菜芽苗生根培養(yǎng)或者根莖扦插成本低，管理較為簡單，這樣就形成了通過組培來生產(chǎn)前期母本苗，后期通過芽苗生根培養(yǎng)或者根莖扦插繁殖的生產(chǎn)鏈條，為大規(guī)模種植開發(fā)提供了保障和前提。