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      用于水稻育秧的棘孢木霉DQ3復(fù)合粉劑YBY及應(yīng)用的制作方法

      文檔序號:11391421閱讀:625來源:國知局

      一、技術(shù)領(lǐng)域

      本發(fā)明涉及的是農(nóng)作物病害防治的生物菌劑,具體涉及用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby及應(yīng)用。

      二、

      背景技術(shù):

      水稻原產(chǎn)中國,是人類非常重要的糧食作物之一。隨著我國人口不斷增長和土地資源短缺加劇,提高水稻產(chǎn)量對解決我國糧食自給問題起著十分重要的作用。因此,水稻生產(chǎn)技術(shù)一直是研究的熱點。民諺說:“秧好一半禾”,說明水稻秧苗健壯是增產(chǎn)的基礎(chǔ),要使水稻取得高產(chǎn),發(fā)揮最大的增產(chǎn)優(yōu)勢,應(yīng)培育壯秧苗。隨著水稻栽培技術(shù)的進步,水稻育秧技術(shù)也不斷發(fā)展,已形成了適應(yīng)不同種植制度、環(huán)境條件、秧齡長短、品種特性的水稻育秧技術(shù)。其中根據(jù)水稻生態(tài)特性及生理特性研制出一些新型的育秧劑和壯秧劑,同時為了有效防治秧苗時期的病害(立枯病、惡苗病、稻瘟病),采用了一些化學(xué)農(nóng)藥處理,這樣容易引起農(nóng)藥殘留超標和環(huán)境污染,并且單一藥劑的使用容易引起病蟲產(chǎn)生抗藥性,帶來諸多的社會、經(jīng)濟和生態(tài)問題。隨著人們對環(huán)保意識的增強和食品安全的重視,公眾對水稻的生物防治要求也與日俱增。

      棘孢木霉屬于半知菌門,絲孢目,木霉屬。是一類分布廣、繁殖快、具有較高生防價值且具有適應(yīng)性強、抑制或殺死病原菌明顯,同時有利植物根系發(fā)育、促進植物生長、誘導(dǎo)寄主植物產(chǎn)生抗逆性等特性,具有重要的經(jīng)濟意義。

      三、

      技術(shù)實現(xiàn)要素:

      本發(fā)明的一個目的是提供了用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby,這種用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby解決了目前使用的化學(xué)農(nóng)藥在防治水稻根部病害和土傳病害時產(chǎn)生的對人畜有毒,污染環(huán)境,有殘留的問題,同時可以促進水稻根系發(fā)育,提高抗逆性。本發(fā)明的另一個目的是提供這種用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby的應(yīng)用。

      為了實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的具體技術(shù)方案如下:這種用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby通過以下方法制備而成:

      步驟一:將棘孢木霉dq3菌株接種于pda斜面培養(yǎng)基,28℃培養(yǎng)72-96h,用滅菌蒸餾水洗下分生孢子,制成孢子液,孢子液中孢子數(shù)為106個/ml,然后將其按pd培養(yǎng)液的體積的1%接入滅菌的pd培養(yǎng)液中,放入28℃,120rpm培養(yǎng)36-48h;

      步驟二:將麩皮、硅藻土、稻殼、水按質(zhì)量比2:1:1:4的比例混合,攪拌均勻后,裝入200ml塑料瓶,裝入量為塑料瓶高的1/2,然后再121℃高壓濕熱滅菌20min,冷卻后按1%接種量接入塑料瓶中,上下?lián)u均勻,放在溫度28℃,濕度80%培養(yǎng)5-7d;將塑料瓶的發(fā)酵菌種按質(zhì)量比:1:500-1:1000加入無菌水中,攪拌均勻成制作孢子懸浮液,該孢子懸浮液作為固體淺盤發(fā)酵種子液;

      步驟三:固體淺盤發(fā)酵基質(zhì)以麥麩、硅藻土、糖蜜水、無菌水按質(zhì)量比2:1:1:1攪拌均勻后,分裝于塑料袋中,于121℃下滅菌20~30min后待用;育秧盤設(shè)置于固體發(fā)酵車間中,對固體發(fā)酵車間用甲醛和高錳酸鉀混合液密閉熏蒸滅菌24h,然后將已滅菌發(fā)酵基質(zhì)和固體淺盤發(fā)酵種子液按質(zhì)量比10:1的比例混合,均勻鋪展育秧盤里,鋪至厚度1-2cm,在恒溫28℃,保濕rh≥80%的條件下,培養(yǎng)7d,再倒入無菌室中進行風(fēng)干淺盤發(fā)酵產(chǎn)物,風(fēng)干后的淺盤發(fā)酵產(chǎn)物放入低溫粉碎儀中粉碎后,過200目篩,收集得到棘孢木霉dq3孢子粉;

      步驟四:將步驟三制備的棘孢木霉dq3孢子粉、井岡霉素原粉、sod粉劑、硅藻土、1000億/g枯草芽孢桿菌:按質(zhì)量比1000:1:2:500:100的比例混合,混勻后得到用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby。

      上述用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby的應(yīng)用:將所述的用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby與水稻種子按質(zhì)量比1:300-500浸種1個小時,催芽4-5天播種,用于促進水稻根系生長、抗病抗旱,防治水稻立枯病、紋枯病。

      上述用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby的應(yīng)用:當(dāng)水稻秧苗長1葉1心時,將所述的用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby與水按質(zhì)量比1:300-500混均,直接澆灌,用于促進水稻根系生長、抗病抗旱,防治水稻立枯病、紋枯病、稻瘟病。

      有益效果:

      1、本發(fā)明用于促進水稻根系生長、抗病抗旱,改良土壤,誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗性,抑制有害菌的生長繁殖,對人畜無毒,不污染環(huán)境。

      2、本發(fā)明具有快速占據(jù)生態(tài)位優(yōu)勢,產(chǎn)生抗生性次生代謝物,有效防治,防治水稻立枯病、紋枯病、稻瘟病。

      四、具體實施方式

      下面對本發(fā)明做進一步的說明:

      實施例1:

      這種用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby通過以下方法制備而成:

      步驟一:將棘孢木霉dq3菌株接種于pda斜面培養(yǎng)基,28℃培養(yǎng)72h,用滅菌蒸餾水洗下分生孢子,制成孢子液,孢子液中孢子數(shù)為106個/ml,然后按1%(體積比)接入滅菌的pd培養(yǎng)液中,放入28℃,120rpm培養(yǎng)36h;

      步驟二:將麩皮、硅藻土、稻殼、水按2:1:1:4(質(zhì)量比)的比例混合,攪拌均勻后,裝入200ml塑料瓶,裝入量為塑料瓶高的1/2,然后再121℃高壓濕熱滅菌20min,冷卻后按1%接種量接入塑料瓶中,上下?lián)u均勻,放在溫度28℃,濕度80%培養(yǎng)6d;將塑料瓶的發(fā)酵菌種按質(zhì)量比:1:500加入無菌水中,攪拌均勻成制作孢子懸浮液,該孢子懸浮液作為固體淺盤發(fā)酵種子液;

      步驟三:固體淺盤發(fā)酵基質(zhì)以麥麩、硅藻土、糖蜜水和無菌水(2:1:1:1)攪拌均勻后,分裝于塑料袋中,于121℃下滅菌20min后待用;育秧盤設(shè)置于固體發(fā)酵車間中,對固體發(fā)酵車間用甲醛和高錳酸鉀混合液(甲醛和高錳酸鉀混合液中甲醛和高錳酸鉀的質(zhì)量比為2:1)密閉熏蒸滅菌24h,然后將已滅菌發(fā)酵基質(zhì)和固體淺盤發(fā)酵種子液按10:1(質(zhì)量比)的比例混合,均勻鋪展育秧盤里,鋪至厚度1cm,在恒溫28℃,保濕rh≥80%的條件下,培養(yǎng)7d,再倒入無菌室中進行風(fēng)干淺盤發(fā)酵產(chǎn)物,風(fēng)干后的淺盤發(fā)酵產(chǎn)物放入低溫粉碎儀中粉碎后,過200目篩,收集得到棘孢木霉dq3孢子粉。

      步驟四:將步驟三制備的棘孢木霉dq3孢子粉、井岡霉素原粉、sod粉劑、硅藻土、1000億/g枯草芽孢桿菌按質(zhì)量比1000:1:2:500:100的比例混合,混勻后得到用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby。

      本實施例的應(yīng)用:浸種,將所得的用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合

      粉劑yby與水稻種子按(1:500)浸種1個小時,催芽4-5天播種,可以促進水稻根系生長、抗病抗旱、防治水稻立枯病、紋枯病、稻瘟病。

      實施例2:

      這種用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby通過以下方法制備而成:

      步驟一:將棘孢木霉dq3菌株接種于pda斜面培養(yǎng)基,28℃培養(yǎng)96h,用滅菌蒸餾水洗下分生孢子,制成孢子液,孢子液中孢子數(shù)為106個/ml,然后按1%(體積比)接入滅菌的pd培養(yǎng)液中,放入28℃,120rpm培養(yǎng)40h;

      步驟二:將麩皮、硅藻土、稻殼、水按2:1:1:4(質(zhì)量比)的比例混合,攪拌均勻后,裝入200ml塑料瓶,裝入量為塑料瓶高的1/2,然后再121℃高壓濕熱滅菌20min,冷卻后按1%接種量接入塑料瓶中,上下?lián)u均勻,放在溫度28℃,濕度80%培養(yǎng)7d;將塑料瓶的發(fā)酵菌種按質(zhì)量比:1:800加入無菌水中,攪拌均勻成制作孢子懸浮液,該孢子懸浮液作為固體淺盤發(fā)酵種子液;

      步驟三:固體淺盤發(fā)酵基質(zhì)以麥麩、硅藻土、糖蜜水和無菌水(2:1:1:1)攪拌均勻后,分裝于塑料袋中,于121℃下滅菌30min后待用;育秧盤設(shè)置于固體發(fā)酵車間中,對固體發(fā)酵車間用甲醛和高錳酸鉀混合液(2:1)(質(zhì)量比)密閉熏蒸滅菌24h,然后將已滅菌發(fā)酵基質(zhì)和固體淺盤發(fā)酵種子液按10:1(質(zhì)量比)的比例混合,均勻鋪展育秧盤里,鋪至厚度2cm,在恒溫28℃,保濕rh≥80%的條件下,培養(yǎng)7d,再倒入無菌室中進行風(fēng)干淺盤發(fā)酵產(chǎn)物,風(fēng)干后的淺盤發(fā)酵產(chǎn)物放入低溫粉碎儀中粉碎后,過200目篩,收集得到棘孢木霉dq3孢子粉。

      步驟四:將步驟三制備的棘孢木霉dq3孢子粉、井岡霉素原粉、sod粉劑、硅藻土、1000億/g枯草芽孢桿菌按質(zhì)量比1000:1:2:500:100的比例混合,混勻后得到用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby。

      本實施例的應(yīng)用:澆灌處理:當(dāng)水稻秧苗長1葉1心時,將本所得的用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby與水按1:300混均,直接澆灌,可以促進水稻根系生長、抗病抗旱、防治水稻立枯病、紋枯病、稻瘟病。

      實施例3:

      這種用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby通過以下方法制備而成:

      步驟一:將棘孢木霉dq3菌株接種于pda斜面培養(yǎng)基,28℃培養(yǎng)84h,用滅菌蒸餾水洗下分生孢子,制成孢子液,孢子液中孢子數(shù)為106個/ml,然后按1%(體積比)接入滅菌的pd培養(yǎng)液中,放入28℃,120rpm培養(yǎng)48h;

      步驟二:將麩皮、硅藻土、稻殼、水按2:1:1:4(質(zhì)量比)的比例混合,攪拌均勻后,裝入200ml塑料瓶,裝入量為塑料瓶高的1/2,然后再121℃高壓濕熱滅菌20min,冷卻后按1%接種量接入塑料瓶中,上下?lián)u均勻,放在溫度28℃,濕度80%培養(yǎng)7d;將塑料瓶的發(fā)酵菌種按質(zhì)量比:1:1000加入無菌水中,攪拌均勻成制作孢子懸浮液,該孢子懸浮液作為固體淺盤發(fā)酵種子液;

      步驟三:固體淺盤發(fā)酵基質(zhì)以麥麩、硅藻土、糖蜜水和無菌水(2:1:1:1)攪拌均勻后,分裝于塑料袋中,于121℃下滅菌30min后待用;育秧盤設(shè)置于固體發(fā)酵車間中,對固體發(fā)酵車間用甲醛和高錳酸鉀混合液(2:1)(質(zhì)量比)密閉熏蒸滅菌24h,然后將已滅菌發(fā)酵基質(zhì)和固體淺盤發(fā)酵種子液按10:1(質(zhì)量比)的比例混合,均勻鋪展育秧盤里,鋪至厚度2cm,在恒溫28℃,保濕rh≥80%的條件下,培養(yǎng)7d,再倒入無菌室中進行風(fēng)干淺盤發(fā)酵產(chǎn)物,風(fēng)干后的淺盤發(fā)酵產(chǎn)物放入低溫粉碎儀中粉碎后,過200目篩,收集得到棘孢木霉dq3孢子粉。

      步驟四:將步驟三制備的棘孢木霉dq3孢子粉、井岡霉素原粉、sod粉劑、硅藻土、1000億/g枯草芽孢桿菌按質(zhì)量比1000:1:2:500:100的比例混合,混勻后得到用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby。

      本實施例的應(yīng)用:澆灌處理:當(dāng)水稻秧苗長1葉1心時,將本所得的用于水稻育秧的棘孢木霉dq3復(fù)合粉劑yby與水按1:500混均,直接澆灌,可以促進水稻根系生長、抗病抗旱、防治水稻立枯病、紋枯病、稻瘟病。

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