本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)疾病防治
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種采用銀杏葉防治黃瓜枯萎病的方法。
背景技術(shù)：
：在當(dāng)今黃瓜設(shè)施栽培中，病害是黃瓜設(shè)施栽培中重要的生物災(zāi)害，嚴(yán)重威脅黃瓜正常生產(chǎn)，數(shù)據(jù)表明：病蟲(chóng)害常年造成的產(chǎn)量損失占20％以上。其中黃瓜枯萎病在我國(guó)各地都有發(fā)生，特別是保護(hù)地黃瓜由于常年連作，土壤中病菌量逐年積累增多，發(fā)病日趨嚴(yán)重，一般發(fā)病率在10％～30％，嚴(yán)重的可達(dá)80％～90％。黃瓜枯萎病已成為黃瓜生產(chǎn)中的重要病害，并成為保護(hù)地黃瓜生產(chǎn)中的嚴(yán)重障礙。但是長(zhǎng)期以來(lái)，菜農(nóng)主要采用化學(xué)手段和噴灑農(nóng)藥來(lái)防治這些病害，不僅收效甚微，還增強(qiáng)了病原菌的抗藥性，同時(shí)也污染了生態(tài)環(huán)境。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的上述不足，本發(fā)明提供一種采用銀杏葉防治黃瓜枯萎病的方法，可有效解決枯萎病對(duì)黃瓜生產(chǎn)的影響，以及農(nóng)藥污染問(wèn)題。一種采用銀杏葉防治黃瓜枯萎病的方法，包括以下步驟：(1)收集銀杏樹(shù)落葉，洗凈，粉碎為粉末；(2)用水將上述銀杏葉粉末浸透，使其含水量達(dá)到50％～70％，再將其加入密閉容器中分層堆積，每層之間鋪撒尿素和有機(jī)物料腐熟劑，每3～5天翻動(dòng)一次，反應(yīng)20～30天，得腐熟銀杏葉；其中，每層每千克銀杏葉鋪撒10～12g尿素和20～30g有機(jī)物料腐熟劑；(3)將腐熟銀杏葉與腐葉土和蛭石混合，再于150～160℃滅菌2～4h，冷卻至室溫，再繼續(xù)滅菌2～4h，得滅菌基質(zhì)；其中，腐熟銀杏葉、腐葉土和蛭石的體積比為1～3:3:1；(4)用50％多菌靈500倍液浸泡黃瓜種子5～8h，再將消毒后的種子置于50～55℃的溫水中浸泡，并不斷攪拌，直至水溫降至30～35℃時(shí)，停止攪拌，繼續(xù)浸泡4～5h，然后于28℃催芽；(5)將催芽后的種子播種于步驟(3)所得滅菌基質(zhì)上，種子發(fā)芽后，采用葉面施肥的方法噴施水溶性復(fù)合肥補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，得到健康生長(zhǎng)的黃瓜幼苗。進(jìn)一步地，步驟(2)中每層每千克銀杏葉鋪撒尿素和有機(jī)物料腐熟劑的量分別為10g和20g。進(jìn)一步地，步驟(3)中腐熟銀杏葉、腐葉土和蛭石的體積比為3:3:1。進(jìn)一步地，步驟(5)中水溶性復(fù)合肥為n-ca-k-p比例為0.5:1.5:0.8:0.6的復(fù)合肥。本發(fā)明的有益效果為：1、在基質(zhì)中加入銀杏葉，可有效提升基質(zhì)的總孔隙度，使基質(zhì)的通氣透水性能得到極大的增強(qiáng)，并且，基質(zhì)的ph值、電導(dǎo)率均在適宜植物生長(zhǎng)的范圍內(nèi)，有利于幼苗的生長(zhǎng)。2、銀杏葉具有不同程度的抑菌、防蟲(chóng)和殺蟲(chóng)效果，在基質(zhì)中添加銀杏葉，可有效防止黃瓜幼苗在生長(zhǎng)過(guò)程中被枯萎病菌侵染，提升黃瓜幼苗抗病能力。3、植株體內(nèi)pal含量越高，表明植株對(duì)在逆境環(huán)境下的抗性越強(qiáng)，而銀杏葉可提升黃瓜幼苗內(nèi)的pal含量，增強(qiáng)黃瓜幼苗在逆境環(huán)境中的生存能力。4、銀杏葉可有效提升黃瓜幼苗體內(nèi)sod含量，提升黃瓜幼苗清除自由基的效率。5、將銀杏葉添加至基質(zhì)內(nèi)，通過(guò)銀杏葉來(lái)達(dá)到使黃瓜幼苗具備抗病、抗蟲(chóng)能力的目的，避免或減少了殺蟲(chóng)劑或農(nóng)藥的使用，降低了對(duì)環(huán)境和農(nóng)產(chǎn)品的危害，達(dá)到綠色生態(tài)生產(chǎn)的目的。具體實(shí)施方式下面對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式進(jìn)行描述，以便于本
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員理解本發(fā)明，但應(yīng)該清楚，本發(fā)明不限于具體實(shí)施方式的范圍，對(duì)本
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來(lái)講，只要各種變化在所附的權(quán)利要求限定和確定的本發(fā)明的范圍內(nèi)，這些變化是顯而易見(jiàn)的，一切利用本發(fā)明構(gòu)思的發(fā)明創(chuàng)造均在保護(hù)之列。實(shí)施例1一種采用銀杏葉防治黃瓜枯萎病的方法，包括以下步驟：(1)收集銀杏樹(shù)落葉，洗凈，粉碎為粉末；(2)用水將上述銀杏葉粉末浸透，使其含水量達(dá)到70％，再將其加入密閉容器中分層堆積，每層之間鋪撒尿素和有機(jī)物料腐熟劑，每3天翻動(dòng)一次，反應(yīng)30天，得腐熟銀杏葉；其中，每層每千克銀杏葉鋪撒10g尿素和30g有機(jī)物料腐熟劑；(3)將腐熟銀杏葉與腐葉土和蛭石混合，再于150℃滅菌2h，冷卻至室溫，再繼續(xù)滅菌2h，得滅菌基質(zhì)；其中，腐熟銀杏葉、腐葉土和蛭石的體積比為2:3:1；(4)用50％多菌靈500倍液浸泡黃瓜種子8h，再將消毒后的種子置于55℃的溫水中浸泡，并不斷攪拌，直至水溫降至30℃時(shí)，停止攪拌，繼續(xù)浸泡5h，然后于28℃催芽；(5)將催芽后的種子播種于步驟(3)所得滅菌基質(zhì)上，種子發(fā)芽后，采用葉面施肥的方法噴施n-ca-k-p比例為0.5:1.5:0.8:0.6的水溶性復(fù)合肥補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，得到健康生長(zhǎng)的正常黃瓜幼苗。實(shí)施例2一種采用銀杏葉防治黃瓜枯萎病的方法，包括以下步驟：(1)收集銀杏樹(shù)落葉，洗凈，粉碎為粉末；(2)用水將上述銀杏葉粉末浸透，使其含水量達(dá)到50％，再將其加入密閉容器中分層堆積，每層之間鋪撒尿素和有機(jī)物料腐熟劑，每3天翻動(dòng)一次，反應(yīng)30天，得腐熟銀杏葉；其中，每層每千克銀杏葉鋪撒10g尿素和20g有機(jī)物料腐熟劑；(3)將腐熟銀杏葉與腐葉土和蛭石混合，再于160℃滅菌2.5h，冷卻至室溫，再繼續(xù)滅菌3h，得滅菌基質(zhì)；其中，腐熟銀杏葉、腐葉土和蛭石的體積比為3:3:1；(4)用50％多菌靈500倍液浸泡黃瓜種子6h，再將消毒后的種子置于50℃的溫水中浸泡，并不斷攪拌，直至水溫降至35℃時(shí)，停止攪拌，繼續(xù)浸泡4h，然后于28℃催芽；(5)將催芽后的種子播種于步驟(3)所得滅菌基質(zhì)上，種子發(fā)芽后，采用葉面施肥的方法噴施n-ca-k-p比例為0.5:1.5:0.8:0.6的水溶性復(fù)合肥補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，得到健康生長(zhǎng)的正常黃瓜幼苗。實(shí)施例3一種采用銀杏葉防治黃瓜枯萎病的方法，包括以下步驟：(1)收集銀杏樹(shù)落葉，洗凈，粉碎為粉末；(2)用水將上述銀杏葉粉末浸透，使其含水量達(dá)到50％，再將其加入密閉容器中分層堆積，每層之間鋪撒尿素和有機(jī)物料腐熟劑，每3天翻動(dòng)一次，反應(yīng)28天，得腐熟銀杏葉；其中，每層每千克銀杏葉鋪撒12g尿素和28g有機(jī)物料腐熟劑；(3)將腐熟銀杏葉與腐葉土和蛭石混合，再于150℃滅菌4h，冷卻至室溫，再繼續(xù)滅菌2h，得滅菌基質(zhì)；其中，腐熟銀杏葉、腐葉土和蛭石的體積比為1:3:1；(4)用50％多菌靈500倍液浸泡黃瓜種子5h，再將消毒后的種子置于52℃的溫水中浸泡，并不斷攪拌，直至水溫降至30℃時(shí)，停止攪拌，繼續(xù)浸泡4h，然后于28℃催芽；(5)將催芽后的種子播種于步驟(3)所得滅菌基質(zhì)上，種子發(fā)芽后，采用葉面施肥的方法噴施n-ca-k-p比例為0.5:1.5:0.8:0.6的水溶性復(fù)合肥補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，得到健康生長(zhǎng)的正常黃瓜幼苗。對(duì)比例與實(shí)施例2相比，滅菌基質(zhì)中缺少銀杏葉，腐葉土和蛭石的體積比為3:1，其余步驟方法均相同。在相同條件下檢測(cè)實(shí)施例1～3和對(duì)比例中滅菌基質(zhì)，以及銀杏葉的理化性質(zhì)，其結(jié)果見(jiàn)表1。表1不同處理基質(zhì)的理化性質(zhì)由表1可知，加入銀杏葉后的基質(zhì)的總孔隙度均高于未加銀杏葉的基質(zhì)，隨著銀杏葉加入量的增加，總孔隙度也隨之加大，基質(zhì)的通氣透水性能得到大大增強(qiáng)，并且，基質(zhì)的ph值、電導(dǎo)率均在適宜植物生長(zhǎng)的范圍內(nèi)，尤以實(shí)施例2所得基質(zhì)為最佳。實(shí)驗(yàn)例在實(shí)施例1～3和對(duì)比例栽種的黃瓜生長(zhǎng)至三葉一心時(shí)，對(duì)幼苗進(jìn)行株高、莖粗、地上干重、地下干重等生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定，并計(jì)算壯苗指數(shù)(壯苗指數(shù)＝(莖粗/株高+根干物質(zhì)量/地上干物質(zhì)量)×全株干物質(zhì)量)，其結(jié)果見(jiàn)表2；然后對(duì)每株黃瓜苗接種枯萎病菌。接種時(shí)，病原菌先在pda培養(yǎng)基上活化一周，用紗布過(guò)濾除去液體培養(yǎng)基，稱(chēng)量菌絲體質(zhì)量，加少量石英砂用研缽研磨，將研碎的菌絲片段按每1g菌絲體加10ml無(wú)菌水制成菌絲懸液，在黃瓜苗兩側(cè)2cm處用刀片輕微傷根，灌根接種菌絲懸液，每株苗15ml。接種后進(jìn)行正常肥水管理，按需要增施葉面肥補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)。再以腐葉土和蛭石體積比為3:1的比例混合形成基質(zhì)，栽種黃瓜幼苗，培養(yǎng)方法與對(duì)比例相同。在接種病原菌0，1，3，5，7，9天后分別統(tǒng)計(jì)黃瓜幼苗菌根發(fā)病率、病情級(jí)數(shù)和病情指數(shù)。病情分級(jí)為：0級(jí)：全株無(wú)??；1級(jí)：發(fā)病輕微，全株有1/4以下的葉片出現(xiàn)萎蔫狀；2級(jí)：發(fā)病較重，全株有1/4～1/2的葉片出現(xiàn)萎蔫狀；3級(jí)：發(fā)病重，全株部有1/2以上的葉片出現(xiàn)萎蔫狀；4級(jí)：因病枯死或接近死亡。發(fā)病率(％)＝(發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總數(shù))×100％；病情指數(shù)(％)＝∑(發(fā)病級(jí)數(shù)×發(fā)病株數(shù))/調(diào)查總株數(shù)×發(fā)病最重級(jí)數(shù)×100％；相對(duì)防治效果＝(對(duì)照發(fā)病率－處理發(fā)病率)/對(duì)照發(fā)病率×100％；在接種黃瓜枯萎病菌0，1，3，5，7，9天后取黃瓜幼苗根系測(cè)定丙二醛(mda)、苯丙氨酸解氨酶(pal)和超氧化物歧化酶(sod)含量變化情況，測(cè)定方法參照李合生《植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)》與張志良，瞿偉菁《植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》而定，其結(jié)果見(jiàn)表3、表4和表5；另外，還測(cè)定了銀杏葉對(duì)黃瓜枯萎病的防治效果，其結(jié)果見(jiàn)表6。表2不同處理下黃瓜幼苗形態(tài)和生理指標(biāo)黃瓜生長(zhǎng)所用穴盤(pán)體積是固定的，基質(zhì)中銀杏葉所占比例越大就意味著腐葉土量會(huì)減少，而黃瓜生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)主要靠腐葉土提供，當(dāng)腐葉土過(guò)少即銀杏葉過(guò)多會(huì)導(dǎo)致黃瓜營(yíng)養(yǎng)不足，因此在基質(zhì)配比過(guò)程中應(yīng)注意腐葉土與銀杏葉的合理搭配，表2數(shù)據(jù)中，實(shí)施例1～3中實(shí)施例1培育的黃瓜幼苗生長(zhǎng)狀況最好，表明實(shí)施例1基質(zhì)中銀杏葉和腐葉土的比例為黃瓜幼苗的最佳生長(zhǎng)比例。表3接種后黃瓜中丙二醛(mda)含量變化(單位：nmol·g-1fw)植物體內(nèi)丙二醛含量反應(yīng)植物受到外界逆境的程度；由表3數(shù)據(jù)可知，接種枯萎病菌后，丙二醛含量均會(huì)有一定程度的上升，這說(shuō)明病菌侵染植株的過(guò)程中引起了丙二醛的反應(yīng)，之后隨著病害侵染的加重，丙二醛含量呈升高趨勢(shì)，而實(shí)施例1～3的基質(zhì)中加入有銀杏葉，實(shí)施例1～3培養(yǎng)的黃瓜苗中的丙二醛含量有小幅度的下降或停止上升的表現(xiàn)，對(duì)比例和空白對(duì)照組培養(yǎng)的黃瓜苗中的丙二醛含量隨時(shí)間的延長(zhǎng)而加大，這說(shuō)明銀杏葉抑制菌物的活力，減緩了病情的發(fā)生。表4黃瓜中苯丙氨酸解氨酶(pal)含量變化(單位：μ·mg-1·h-1fw)處理0d1d3d5d7d9d對(duì)比例2.3492.3912.4372.1262.2592.358實(shí)施例12.2512.1962.2542.3642.2592.198實(shí)施例22.2972.3062.5362.6812.4922.391實(shí)施例32.0442.2932.3642.1942.2482.267植物體內(nèi)苯丙氨酸解氨酶反映植物感病下的抗逆性強(qiáng)弱，在植株感病以后，植株體內(nèi)的苯丙氨酸解氨酶含量均上升，且出現(xiàn)一個(gè)峰值。由表4可知，從測(cè)定的pal含量變化情況來(lái)看，加入銀杏葉的基質(zhì)所生長(zhǎng)的黃瓜植株的pal含量峰值高于對(duì)比例，且持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，表明其對(duì)病菌的抗性強(qiáng)于對(duì)照，對(duì)逆境環(huán)境的反應(yīng)效果較好。表5黃瓜中超氧化物歧化酶(sod)含量變化(單位：μ·g-1fw)處理0d1d3d5d7d9d對(duì)比例303.27312.52326.73316.59309.58315.68實(shí)施例1313.62319.26340.59338.92316.59326.83實(shí)施例2369.73349.37372.61379.24386.29392.61實(shí)施例3332.67342.23323.57339.24362.26359.31對(duì)比例303.27312.52326.73316.59309.58315.68正常情況下，植物體內(nèi)超氧化物歧化酶在一穩(wěn)定水平，在植物感病后植物體內(nèi)超氧自由基增加，導(dǎo)致sod增加，以清除自由基，由表5數(shù)據(jù)可知，從測(cè)定的sod含量變化情況來(lái)看，實(shí)施例1～3培養(yǎng)的黃瓜幼苗中sod含量有升高，且均高于對(duì)比例和空白對(duì)照組，表明銀杏葉可提升幼苗體內(nèi)sod含量，以提升自由基清除效率，減緩病情。表6銀杏葉對(duì)黃瓜枯萎病的防治效果相對(duì)防治效果＝(對(duì)照發(fā)病率－處理發(fā)病率)/對(duì)照發(fā)病率×100％，以對(duì)比例數(shù)據(jù)作為公式中的對(duì)照數(shù)據(jù)，由表6數(shù)據(jù)可知，從發(fā)病率和病情防治效果來(lái)看，實(shí)施例1～3均優(yōu)于對(duì)比例，其中尤以實(shí)施例2表現(xiàn)較佳，表明對(duì)比完全使用市場(chǎng)上的營(yíng)養(yǎng)土，配合腐熟的銀杏葉會(huì)對(duì)黃瓜在抵抗枯萎病病害防治方面具有一定的防治效果，隨著銀杏葉的相對(duì)含量的增加，植株的病情有一定程度的緩解。當(dāng)前第1頁(yè)12