本發(fā)明屬于水產養(yǎng)殖技術領域，具體涉及一種泥鰍繁育精量化生產方法。
背景技術：
泥鰍（misgurnusanguillicaudatus）屬鯉形目花鰍亞科鰍科泥鰍屬，在我國已成為重要的特種水產經(jīng)濟品種。目前泥鰍的苗種主要來源于野生捕撈，由于過度捕撈、水域資源污染等原因，泥鰍苗種的天然資源急劇減少，遠不能滿足養(yǎng)殖業(yè)的需要，因此泥鰍人工繁育工作的開展勢在必行。開展泥鰍人工繁育精量化生產，合理安排苗種生產，提高苗種生產效率，減少勞動強度及繁育成本顯得至關重要。
目前泥鰍人工繁育方法主要有全人工繁育和半人工繁育，這兩種繁育技術大多停留在粗放的經(jīng)驗總結水平，催產時機掌握不當?shù)纫蛩貙е率芫实?，孵化率不高，而且對卵粒無法準確計量，苗種生產穩(wěn)定性差。苗種培育階段，大多采取開口仔魚直接下塘培育，受池塘條件、開口餌料、管理水平等諸多因素影響，仔魚死亡率極高，培育成活率大多在20%以下。
目前，已公開的泥鰍繁育方法中，如中國專利申請?zhí)枮椤?01310279033.x”的泥鰍工廠化育苗方法，這種采用車間生產工藝，提高了工作效率，使用解凍微型海水輪蟲作為仔魚開口餌料，解凍的輪蟲容易敗壞水質，需使用磺胺類殺菌藥，實際生產中操作不當，容易導致仔魚死亡率增加；如中國專利申請?zhí)枮椤?01410179451.6”的一種泥鰍工廠化人工繁殖提供成活率的育苗方法，采用自然交配法、擠精法或剖腹取精囊法，雖然能夠提高催產率、受精率和孵化率，但是勞動強度大，繁育成本高；如中國專利申請?zhí)枮椤?01410379073.6”的一種高成活率泥鰍繁育方法，提高了鰍苗成活率，但沒有對親鰍產卵量、苗種生產量進行精確計量。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種可以提高泥鰍繁育效率的方法，通過測定雌鰍相對懷卵量、產卵率，以及卵的受精率、孵化率和仔魚培育成活率等指標，實現(xiàn)精量化泥鰍苗種繁育生產。
本發(fā)明一種泥鰍繁育精量化生產方法，技術方案包括以下步驟：
（1）雌鰍繁殖力估算
在泥鰍人工繁殖生產前，隨機取0.5%~4%的親本雌鰍稱量體重，并解剖觀察卵巢中卵粒，卵粒呈金黃色半透明，說明卵已經(jīng)成熟，并將卵巢稱重。建立雌鰍體重與懷卵量的線性回歸方程，利用回歸方程，通過測定雌鰍的平均體重，計量雌鰍的相對懷卵量，初步估算其繁殖力。
（2）計算產卵率
（3）計算受精率
親鰍產卵受精結束后，隨機取卵粒樣品，3~5次重復，在受精卵胚胎發(fā)育的原腸中期階段，用肉眼觀察卵，卵內卵黃與卵膜分界明顯的為受精卵，渾濁不輕的為未受精卵，計算受精率。
（4）計算孵化率
將受精卵收集放入網(wǎng)箱，采用靜水網(wǎng)箱孵化方式進行受精卵孵化。網(wǎng)箱底部用系有重物，防止網(wǎng)箱底部上浮，網(wǎng)箱水深控制在10~30cm，箱底須完全脫離孵化池底，有利于網(wǎng)箱內外水體交流。受精卵孵化時間為22~35h，及時收集孵出仔魚，并轉入水箱或水泥池進行苗種培育，水深設置為20~30cm。與此同時，隨機取受精卵樣品計數(shù)受精卵數(shù)量并單獨進行孵化，3~5次重復，待仔魚孵出后計數(shù)孵出的仔魚數(shù)量，計算孵化率。
（5）計算仔魚培育成活率
采用豐年蟲作為泥鰍仔魚的開口餌料，泥鰍仔魚開口攝食時間需與豐年蟲幼體培育時間準確銜接，泥鰍仔魚孵化出后24~36h內，開始孵化培育豐年蟲；泥鰍仔魚開口攝食后0~5d內每天投喂豐年蟲，豐年蟲投喂密度為10~20ind/ml；泥鰍仔魚開口攝食后5d后逐步減少豐年蟲投喂量，同時增加配合飼料的投喂量，配合飼料的蛋白質含量為40%~45%，完成泥鰍仔魚由攝食豐年蟲餌料到攝食配合飼料的轉變，15d后只投喂配合飼料，投喂頻率為3~4次/d；仔魚培育30~45d后，轉入養(yǎng)殖池塘飼養(yǎng)或苗種出售。與此同時，隨機取初孵仔魚樣品并計數(shù)，在泥鰍仔魚培育池中設置小型網(wǎng)箱進行培育，3~5次重復，培育期末計數(shù)存活的仔魚，并計算仔魚培育成活率。仔魚培育期間的水體添加食鹽，維持鹽度在1‰~2‰范圍內，可以有效抑制細菌滋生，提高仔魚成活率。
（6）泥鰍苗種產量估算
在泥鰍繁育過程中，測定雌鰍相對懷卵量、產卵率，以及卵的受精率、孵化率和仔魚培育成活率，相應的計算公式為：相對懷卵量（粒/g）=（樣品卵粒數(shù)/樣品重量）×卵巢重量/（雌鰍體重-卵巢重量）；產卵率（%）=100×（產卵前雌鰍平均相對懷卵量-產卵后雌鰍平均相對懷卵量）/產卵前雌鰍平均相對懷卵量；受精率（%）=100×受精卵數(shù)/卵總數(shù)；孵化率（%）=100×出膜魚苗數(shù)/受精卵數(shù)；仔魚培育成活率（%）=100×（仔魚培育后存活尾數(shù)）/仔魚培育前尾數(shù)。
泥鰍苗種產量估算公式為：苗種產量（尾）=雌鰍總重×相對懷卵量×產卵率×受精率×孵化率×仔魚培育成活率。
作為優(yōu)選，所述步驟（2）中，親鰍催產操作前，使用間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽（ms-222）作為麻醉劑，在水溫為20℃時，麻醉劑使用濃度為200mg/l，隨著水溫增加，可以適當提高麻醉劑的濃度，每次麻醉的親鰍數(shù)量控制在200尾以內，親鰍麻醉后立即注射催產劑，然后放入清水中使其自然蘇醒，麻醉劑溶液現(xiàn)配現(xiàn)用，當日內的麻醉劑溶液可以重復使用。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比，具有如下優(yōu)勢：
（1）本方法能夠對親本量、產卵量、仔魚培育量準確計量，根據(jù)苗種需求量，合理控制苗種生產規(guī)模；
（2）本方法在親鰍注射催產劑前，將親鰍麻醉，有效提高了人工催產效率，有利于于泥鰍規(guī)?；姆庇a；
（3）本方法能夠準確掌握泥鰍仔魚開口攝食時間，并選用活體豐年蟲作為開口餌料，同時通過搭配投喂配合飼料，實現(xiàn)泥鰍仔魚由攝食豐年蟲餌料到攝食配合飼料的轉變，提高仔魚培育的成活率，降低生產成本；
（4）本方法通過在泥鰍仔魚培育水體中添加一定量的食鹽，降低水體細菌滋生，減少仔魚疾病發(fā)生，提高仔魚培育成活率。
具體實施方式
下面結合具體實施方式對本發(fā)明做進一步的描述。
實施例1：
（1）親本量：雌鰍1000尾、雄鰍1200尾，隨機選取35尾逐個雌鰍編號稱重，并解剖將卵巢稱重。計算出雌鰍的平均體重為29.5g，根據(jù)體重與懷卵量的測定數(shù)據(jù)建立回歸方程：y=119.26x1.2923（r2=0.9883），推算出每kg雌鰍的懷卵量為89.8萬粒。
（2）親鰍注射催產劑之前，使用濃度為200mg/l的間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽（ms-222）將親鰍麻醉，然后注射催產劑，每尾雌鰍催產劑用量為：絨毛膜促性腺激素（hcg）125iu、促黃體素釋放性腺激素（lrh-a2）0.3ug和馬來酸地歐酮（dom）0.2mg，雄鰍劑量減半。親鰍注射催產劑后放入產卵池，水深控制在50~80cm范圍內，在水溫為21.0~22.5℃時，催產劑注射后的效應時間為15h，親鰍達到效應時間開始產卵受精至6h后，將親鰍捕出，隨機取35尾雌鰍進行解剖，并將卵巢稱重，計算出雌鰍產卵率為65.5%。同時隨機取卵粒樣品，3次重復，在受精卵胚胎發(fā)育的原腸中期階段，用肉眼觀察卵，卵內卵黃與卵膜分界明顯的為受精卵，計數(shù)受精卵數(shù)量，計算受精率為98.2%。
（3）將受精卵收集后放入網(wǎng)箱，采用靜水網(wǎng)箱孵化方式進行孵化。網(wǎng)箱底部用系有重物，防止網(wǎng)箱底部上浮，網(wǎng)箱水深為15cm，箱底須完全脫離孵化池底，有利于網(wǎng)箱內外水體交流。在水溫為21.0~22.8℃時，受精卵經(jīng)過31h后孵出仔魚，將仔魚收集轉入水泥池，水深控制在20~30cm范圍內。與此同時，隨機取受精卵樣品，計數(shù)受精卵數(shù)量并單獨進行孵化，3次重復，待仔魚孵出后計數(shù)孵出的仔魚數(shù)量，計算出仔魚的孵化率為97.8%。
（4）在仔魚孵出后30h內，開始培育豐年蟲。豐年蟲孵出后，用于投喂泥鰍仔魚。
（5）仔魚開口攝食后投喂豐年蟲，投喂密度為10ind/ml，連續(xù)投喂5d，5d后逐步減少豐年蟲的投喂量，同時增加配合飼料（蛋白含量為45%）的投喂量，至第15d之后，只投喂配合飼料，仔魚培育期間水體的鹽度為1‰，仔魚培育至45d，體長達到4~7cm，這時候可以轉入養(yǎng)殖池塘飼養(yǎng)或苗種出售。與此同時，隨機取初孵仔魚樣品并計數(shù)，在泥鰍仔魚培育池中設置小型網(wǎng)箱進行培育，5次重復，培育期末計數(shù)存活的仔魚，仔魚培育成活率為82.4%。
（6）根據(jù)泥鰍苗種產量估算公式：苗種產量（尾）=雌鰍總重×相對懷卵量×產卵率×受精率×孵化率×仔魚培育成活率，計算出苗種產量=29.5kg×89.8萬粒/kg×65.5%×98.2%×97.8%×82.4%=1373.1萬尾。
以上經(jīng)過實際生產應用，1000尾雌鰍和1200尾雄鰍配組，雌鰍總重29.5kg，可實現(xiàn)泥鰍仔魚的產量約1370萬尾。
實施例2：
（1）親本量：雌鰍1000尾、雄鰍1400尾，隨機選取35尾逐個雌鰍編號稱重，并解剖將卵巢稱重。計算出雌鰍的平均體重為34.3g，根據(jù)體重與懷卵量的測定數(shù)據(jù)建立回歸方程：y=67.23x1.4022（r2=0.9436），推算出每kg雌鰍的懷卵量為108.2萬粒。
（2）親鰍注射催產劑之前，使用濃度為220mg/l的間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽（ms-222）將親鰍麻醉，然后注射催產劑，每尾雌鰍催產劑用量為：絨毛膜促性腺激素（hcg）125iu、促黃體素釋放性腺激素（lrh-a2）0.3ug和馬來酸地歐酮（dom）0.2mg，雄鰍劑量減半。親鰍注射催產劑后放入產卵池，水深控制在50~80cm范圍內，水溫為23.5~25.5℃時，催產劑注射后的效應時間為12h，親鰍達到效應時間開始產卵受精5h后，將親鰍捕出，隨機取35尾雌鰍進行解剖，并將卵巢稱重，計算出雌鰍產卵率為58.8%。同時隨機取卵粒樣品，3次重復，在受精卵胚胎發(fā)育的原腸中期階段，用肉眼觀察卵，卵內卵黃與卵膜分界明顯的為受精卵，計數(shù)受精卵數(shù)量，計算受精率為98.6%。
（3）將受精卵收集后放入網(wǎng)箱，采用靜水網(wǎng)箱孵化方式進行孵化。網(wǎng)箱底部用系有重物，防止網(wǎng)箱底部上浮，網(wǎng)箱水深控制在20cm，箱底須完全脫離孵化池底，有利于網(wǎng)箱內外水體交流。在水溫為23.5~26.0℃時，受精卵經(jīng)過26h后孵出仔魚，將仔魚收集轉入水泥池，水深為30cm。與此同時，隨機取受精卵樣品，計數(shù)受精卵數(shù)量并單獨進行孵化，3次重復，待仔魚孵出后計數(shù)孵出的仔魚數(shù)量，計算出仔魚的孵化率為95.7%。
（4）在仔魚孵出后24h內，開始培育豐年蟲。豐年蟲孵出后用于投喂泥鰍仔魚。
（5）仔魚開口攝食后投喂豐年蟲，投喂密度為15ind/ml，連續(xù)投喂5d，5d后逐步減少豐年蟲的投喂量，同時增加配合飼料（蛋白含量為42%）的投喂量，至第15d之后，只投喂配合飼料，仔魚培育期間水體的鹽度為2‰，仔魚培育至40d，體長達到4~7cm，這時候可以轉入養(yǎng)殖池塘飼養(yǎng)或苗種出售。與此同時，隨機取初孵仔魚樣品并計數(shù)，在泥鰍仔魚培育池中設置小型網(wǎng)箱進行培育，5次重復，培育期末計數(shù)存活的仔魚，仔魚培育成活率為81.2%。
（6）根據(jù)泥鰍苗種產量估算公式：苗種產量=雌鰍總重×相對懷卵量×產卵率×受精率×孵化率×仔魚培育成活率，計算出苗種產量=34.4kg×108.2萬粒/kg×58.8%×98.6%×95.7%×81.2%=1676.9萬尾。
以上經(jīng)過實際生產應用，1000尾雌鰍和1400尾雄鰍配組，雌鰍總重34.4kg，可實現(xiàn)泥鰍仔魚的產量約1670萬尾。