本發(fā)明涉及植物生物
技術(shù)領(lǐng)域：
，更具體地說涉及一種促進羅漢果ugt1基因表達的方法。
背景技術(shù)：
：羅漢果甜苷v屬于葫蘆烷型四環(huán)三萜類物質(zhì)，本課題組前期根據(jù)羅漢果轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，已推導(dǎo)出甜苷v可能的生物合成途徑。羅漢果甜苷v生物合成的前體物質(zhì)是異戊烯二磷酸(ipp)和3,3-二甲基烯內(nèi)基焦磷酸(dmapp)，二者是通過甲羥戊酸(mva)和甲基赤蘚糖醇磷酸化(mep)兩條途徑形成，mva途徑發(fā)生在胞質(zhì)中，mep途徑發(fā)生在質(zhì)體中。來源于上述兩途徑的ipp或dmapp經(jīng)牻牛兒基焦磷酸合酶(gps)催化形成牻牛兒基焦磷酸(gpp)，ipp與gpp在法呢基焦磷酸合酶(fps)的催化作用下進而形成法呢基焦磷酸(fpp)，然后經(jīng)角鯊烯合酶(ss)、角鯊烯環(huán)氧化酶(se)的催化形成2,3-氧化角鯊烯，葫蘆二烯醇合酶(cs)進一步催化形成葫蘆二烯醇，最后在cyp450酶和葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(ugt)的作用下，形成羅漢果甜苷v。異戊二烯類物質(zhì)的產(chǎn)生受到限速酶活性的嚴(yán)格調(diào)控，一直被認(rèn)為在其生物合成途徑中起著重要的調(diào)控作用。作為異戊二烯途徑中的限速酶，ugt基因的表達對羅漢果甜苷v的生物合成起著決定性作用。過表達ugt基因，可以促進羅漢果甜苷v的積累；相反，如果抑制ugt基因的表達，羅漢果甜苷v的產(chǎn)量將顯著降低。然而，ugt基因是個超基因家族，本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，ugt1可能參與羅漢果甜苷v的合成途徑?，F(xiàn)有技術(shù)中未見有促進羅漢果ugt1基因表達的報道。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的一個目的是解決至少上述問題，并提供至少后面將說明的優(yōu)點。本發(fā)明還有一個目的是提供一種促進羅漢果ugt1基因的表達方法，其通過含有茉莉酸甲酯的培養(yǎng)基培養(yǎng)，并在栽培過程中噴灑含有茉莉酸甲酯的乙醇溶液，可促進羅漢果中ugt1基因的表達，從而促進羅漢果甜苷v的生物合成，提高其產(chǎn)量。為了實現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點，提供了一種促進羅漢果ugt1基因表達的方法，包括以下步驟：步驟一、將羅漢果組培苗置于茉莉酸甲酯濃度為50～400μmol/l的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到羅漢果幼苗；步驟二、在栽培步驟一中得到的羅漢果幼苗過程中，施加茉莉酸甲酯濃度為50～400μmol/l的乙醇溶液。優(yōu)選的是，所述的促進羅漢果ugt1基因表達的方法，步驟一中培養(yǎng)基還包括：ms、1～2mg/l的6-ba、0.2～0.5mg/l的iba、3～4g/l的瓊脂、20～40g/l的蔗糖、0.5～2g/l的活性炭。優(yōu)選的是，所述的促進羅漢果ugt1基因表達的方法，步驟一中羅漢果組培苗的培養(yǎng)方法為：于相對濕度為60～66％，光照強度為1200～1500lux，光照時間為8h/d，溫度為23±2℃條件下培養(yǎng)30d。優(yōu)選的是，所述的促進羅漢果ugt1基因表達的方法，步驟二中在羅漢果栽培過程中，在羅漢果授粉后20～30d后，每天噴灑三次茉莉酸甲酯濃度為50～400μmol/l的乙醇溶液，每株每次噴灑200～300g，連續(xù)噴灑5d。優(yōu)選的是，所述的促進羅漢果ugt1基因表達的方法，步驟二中在羅漢果栽培過程中，在羅漢果授粉后10～20d之間，每5d天采用注射的方式將茉莉酸甲酯濃度為50～400μmol/l的乙醇溶液在注射入羅漢果植株的主莖中，每次注射量為1～3ml。優(yōu)選的是，所述的促進羅漢果ugt1基因表達的方法，步驟二中還包括在羅漢果栽培前，在待栽培土壤表面按3000～4000kg/畝施加營養(yǎng)土，并翻耕均勻；所述營養(yǎng)土的制備方法包括以下步驟：a、取重量份為10～20份的泥炭、5～10份的河沙、1～2份的珍珠巖混合，向其中加入重量份為20～30份的水、1～3份的碳酸鈉、4～6份的氫氧化鈉，于溫度為40～80℃下攪拌4～8h，冷卻至室溫，然后再加入重量份為0.1～0.5份的硫酸鋁、1～2份的聚丙酰胺，調(diào)節(jié)ph為1～2，繼續(xù)攪拌1～2h，過濾，烘干，粉碎至200～500目，得到第一混合物；b、將重量份為1～2份的聚乙二醇、0.5～1份的聚乙烯醇、15～20份的水于溫度為85～100℃下攪拌溶解，得到第一混合液；c、將第一混合物、爐渣灰、花生殼粉、木屑、腐殖土、草木灰、骨粉、堅果殼粉、腐殖酸混合均勻，然后表面均勻噴灑第一混合液即得營養(yǎng)土；其中，第一混合物、爐渣灰、花生殼粉、木屑、腐殖土、草木灰、骨粉、堅果殼粉、腐殖酸、第一混合液的質(zhì)量比為20:5～10:0.1～0.5:0.5～1:2～5:1～2:0.1～0.5:0.1～0.2:1～2:0.05～0.1。本發(fā)明至少包括以下有益效果：1、本發(fā)明通過在將羅漢果組培苗置于含有茉莉酸甲酯的培養(yǎng)基中培養(yǎng)和栽培羅漢果過程中施加茉莉酸甲酯，短期內(nèi)快速誘導(dǎo)羅漢果甜苷v生物合成途徑中關(guān)鍵酶基因ugt1的高表達，從而促進羅漢果甜苷v的生物合成，為提高羅漢果甜苷v含量的積累打下堅實基礎(chǔ)。2、在羅漢果授粉后通過注射方式向羅漢果植株注射茉莉酸甲酯溶液，以注射方式通過一定壓力把茉莉酸甲酯溶液壓到植株的各個部位，使羅漢果植株在短時間內(nèi)吸收茉莉酸甲酯溶液，短期內(nèi)加快ugt1的高表達，從而促進羅漢果甜苷v含量的提高。3、本發(fā)明在羅漢果栽培前在待栽培土壤表面施加營養(yǎng)土，先將泥炭、河沙、珍珠巖用碳酸鈉、氫氧化鈉處理后，再用硫酸鋁、聚丙酰胺處理，調(diào)節(jié)ph，過濾、烘干、粉碎得到的第一混合物，第一混合物施加在土壤中可以使改善土壤結(jié)構(gòu)激活土壤中的被固化的營養(yǎng)物質(zhì)，同時保持土壤保水透氣功能以羅漢果疏松潤濕的土壤環(huán)境；同時在營養(yǎng)土中加入爐渣灰、花生殼粉、木屑、腐殖土、草木灰、骨粉、堅果殼粉、腐殖酸這些物質(zhì)一方面可以為羅漢果生長提供營養(yǎng)物質(zhì)，另一面這些物質(zhì)均為疏松狀，加入土壤中可進一步提高土壤的保水效果；在營養(yǎng)土表面噴灑聚乙二醇、聚乙烯醇溶液，聚乙二醇、聚乙烯醇中的羥基，通過氫鍵粘附在土壤表面減少土壤的固化，增加土壤的孔隙，促進羅漢果的生長，進而使ugt1的高表達，從而促進羅漢果甜苷v含量的提高。本發(fā)明的其它優(yōu)點、目標(biāo)和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對本發(fā)明的研究和實踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。具體實施方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步的詳細(xì)說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書文字能夠據(jù)以實施。需要說明的是，下述實施方案中所述實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法，所述試劑和材料，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑獲得。實施例1一種促進羅漢果ugt1基因表達的方法，包括以下步驟：步驟一、將羅漢果組培苗置于茉莉酸甲酯濃度為50μmol/l的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到羅漢果幼苗；步驟二、在栽培步驟一中得到的羅漢果幼苗過程中，施加茉莉酸甲酯濃度為50μmol/l的乙醇溶液。所述步驟一中培養(yǎng)基還包括：ms、1mg/l的6-ba、0.2mg/l的iba、3g/l的瓊脂、20g/l的蔗糖、0.5g/l的活性炭；其中，6-ba為6-芐氨基腺嘌呤，iba為吲哚丁酸。所述步驟一中羅漢果組培苗的培養(yǎng)方法為：于相對濕度為60％，光照強度為1200lux，光照時間為8h/d，溫度為21℃條件下培養(yǎng)30d。所述步驟二中在羅漢果栽培過程中，在羅漢果授粉后20d后，每天噴灑三次茉莉酸甲酯濃度為50μmol/l的乙醇溶液，每株每次噴灑200g，連續(xù)噴灑5d。實施例2一種促進羅漢果ugt1基因表達的方法，包括以下步驟：步驟一、將羅漢果組培苗置于茉莉酸甲酯濃度為250μmol/l的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到羅漢果幼苗；步驟二、在栽培步驟一中得到的羅漢果幼苗過程中，施加茉莉酸甲酯濃度為200μmol/l的乙醇溶液。所述步驟一中培養(yǎng)基還包括：ms、1.5mg/l的6-ba、0.3mg/l的iba、3.5g/l的瓊脂、30g/l的蔗糖、1g/l的活性炭；其中，6-ba為6-芐氨基腺嘌呤，iba為吲哚丁酸。所述步驟一中羅漢果組培苗的培養(yǎng)方法為：于相對濕度為63％，光照強度為1400lux，光照時間為8h/d，溫度為23℃條件下培養(yǎng)30d。所述步驟二中在羅漢果栽培過程中，在羅漢果授粉后25d后，每天噴灑三次茉莉酸甲酯濃度為200μmol/l的乙醇溶液，每株每次噴灑250g，連續(xù)噴灑5d。實施例3一種促進羅漢果ugt1基因表達的方法，包括以下步驟：步驟一、將羅漢果組培苗置于茉莉酸甲酯濃度為400μmol/l的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到羅漢果幼苗；步驟二、在栽培步驟一中得到的羅漢果幼苗過程中，施加茉莉酸甲酯濃度為400μmol/l的乙醇溶液。所述步驟一中培養(yǎng)基還包括：ms、2mg/l的6-ba、0.5mg/l的iba、4g/l的瓊脂、40g/l的蔗糖、2g/l的活性炭；其中，6-ba為6-芐氨基腺嘌呤，iba為吲哚丁酸。所述步驟一中羅漢果組培苗的培養(yǎng)方法為：于相對濕度為66％，光照強度為1500lux，光照時間為8h/d，溫度為25℃條件下培養(yǎng)30d。所述步驟二中在羅漢果栽培過程中，在羅漢果授粉后30d后，每天噴灑三次茉莉酸甲酯濃度為400μmol/l的乙醇溶液，每株每次噴灑300g，連續(xù)噴灑5d。實施例4一種促進羅漢果ugt1基因表達的方法，包括以下步驟：步驟一、將羅漢果組培苗置于茉莉酸甲酯濃度為50μmol/l的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到羅漢果幼苗；步驟二、在栽培步驟一中得到的羅漢果幼苗過程中，施加茉莉酸甲酯濃度為50μmol/l的乙醇溶液。所述步驟一中培養(yǎng)基還包括：ms、1mg/l的6-ba、0.2mg/l的iba、3g/l的瓊脂、20g/l的蔗糖、0.5g/l的活性炭；其中，6-ba為6-芐氨基腺嘌呤，iba為吲哚丁酸。所述步驟一中羅漢果組培苗的培養(yǎng)方法為：于相對濕度為60％，光照強度為1200lux，光照時間為8h/d，溫度為21℃條件下培養(yǎng)30d。所述步驟二中在羅漢果栽培過程中，在羅漢果授粉后20d后，每天噴灑三次茉莉酸甲酯濃度為50μmol/l的乙醇溶液，每株每次噴灑200g，連續(xù)噴灑5d。所述步驟二中在羅漢果栽培過程中，在羅漢果授粉后10～20d之間，即在授粉后第15d授粉后第20d采用注射的方式將茉莉酸甲酯濃度為50μmol/l的乙醇溶液在注射入羅漢果植株的主莖中，注射量為1ml。所述步驟二中還包括在羅漢果栽培前，在待栽培土壤表面按3000kg/畝施加營養(yǎng)土，并翻耕均勻；所述營養(yǎng)土的制備方法包括以下步驟：a、取重量份為10份的泥炭、5份的河沙、1份的珍珠巖混合，向其中加入重量份為20份的水、1份的碳酸鈉、4份的氫氧化鈉，于溫度為40℃下攪拌4h，冷卻至室溫，然后再加入重量份為0.1份的硫酸鋁、1份的聚丙酰胺，調(diào)節(jié)ph為1，繼續(xù)攪拌1h，過濾，烘干，粉碎至200目，得到第一混合物；b、將重量份為1份的聚乙二醇、0.5份的聚乙烯醇、15份的水于溫度為85℃下攪拌溶解，得到第一混合液；c、將第一混合物、爐渣灰、花生殼粉、木屑、腐殖土、草木灰、骨粉、堅果殼粉、腐殖酸混合均勻，然后表面均勻噴灑第一混合液即得營養(yǎng)土；其中，第一混合物、爐渣灰、花生殼粉、木屑、腐殖土、草木灰、骨粉、堅果殼粉、腐殖酸、第一混合液的質(zhì)量比為20:5:0.1:0.5:2:1:0.1:0.1:1:0.05。實施例5一種促進羅漢果ugt1基因表達的方法，包括以下步驟：步驟一、將羅漢果組培苗置于茉莉酸甲酯濃度為250μmol/l的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到羅漢果幼苗；步驟二、在栽培步驟一中得到的羅漢果幼苗過程中，施加茉莉酸甲酯濃度為200μmol/l的乙醇溶液。所述步驟一中培養(yǎng)基還包括：ms、1.5mg/l的6-ba、0.3mg/l的iba、3.5g/l的瓊脂、30g/l的蔗糖、1g/l的活性炭；其中，6-ba為6-芐氨基腺嘌呤，iba為吲哚丁酸。所述步驟一中羅漢果組培苗的培養(yǎng)方法為：于相對濕度為63％，光照強度為1400lux，光照時間為8h/d，溫度為23℃條件下培養(yǎng)30d。所述步驟二中在羅漢果栽培過程中，在羅漢果授粉后25d后，每天噴灑三次茉莉酸甲酯濃度為200μmol/l的乙醇溶液，每株每次噴灑250g，連續(xù)噴灑5d。所述步驟二中在羅漢果栽培過程中，在羅漢果授粉后10～20d之間，即在授粉后第15d授粉后第20d采用注射的方式將茉莉酸甲酯濃度為200μmol/l的乙醇溶液在注射入羅漢果植株的主莖中，注射量為2ml。所述步驟二中還包括在羅漢果栽培前，在待栽培土壤表面按3500kg/畝施加營養(yǎng)土，并翻耕均勻；所述營養(yǎng)土的制備方法包括以下步驟：a、取重量份為15份的泥炭、7份的河沙、1.5份的珍珠巖混合，向其中加入重量份為25份的水、2份的碳酸鈉、5份的氫氧化鈉，于溫度為60℃下攪拌6h，冷卻至室溫，然后再加入重量份為0.3份的硫酸鋁、1.5份的聚丙酰胺，調(diào)節(jié)ph為1.5，繼續(xù)攪拌1.5h，過濾，烘干，粉碎至300目，得到第一混合物；b、將重量份為1.5份的聚乙二醇、0.7份的聚乙烯醇、18份的水于溫度為90℃下攪拌溶解，得到第一混合液；c、將第一混合物、爐渣灰、花生殼粉、木屑、腐殖土、草木灰、骨粉、堅果殼粉、腐殖酸混合均勻，然后表面均勻噴灑第一混合液即得營養(yǎng)土；其中，第一混合物、爐渣灰、花生殼粉、木屑、腐殖土、草木灰、骨粉、堅果殼粉、腐殖酸、第一混合液的質(zhì)量比為20:7:0.3:0.7:3.5:1.5:0.3:0.15:1.5:0.08。實施例6一種促進羅漢果ugt1基因表達的方法，包括以下步驟：步驟一、將羅漢果組培苗置于茉莉酸甲酯濃度為400μmol/l的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到羅漢果幼苗；步驟二、在栽培步驟一中得到的羅漢果幼苗過程中，施加茉莉酸甲酯濃度為400μmol/l的乙醇溶液。所述步驟一中培養(yǎng)基還包括：ms、2mg/l的6-ba、0.5mg/l的iba、4g/l的瓊脂、40g/l的蔗糖、2g/l的活性炭；其中，6-ba為6-芐氨基腺嘌呤，iba為吲哚丁酸。所述步驟一中羅漢果組培苗的培養(yǎng)方法為：于相對濕度為66％，光照強度為1500lux，光照時間為8h/d，溫度為25℃條件下培養(yǎng)30d。所述步驟二中在羅漢果栽培過程中，在羅漢果授粉后30d后，每天噴灑三次茉莉酸甲酯濃度為400μmol/l的乙醇溶液，每株每次噴灑300g，連續(xù)噴灑5d。所述步驟二中在羅漢果栽培過程中，在羅漢果授粉后10～20d之間，即在授粉后第15d授粉后第20d采用注射的方式將茉莉酸甲酯濃度為400μmol/l的乙醇溶液在注射入羅漢果植株的主莖中，注射量為3ml。所述步驟二中還包括在羅漢果栽培前，在待栽培土壤表面按3000～4000kg/畝施加營養(yǎng)土，并翻耕均勻；所述營養(yǎng)土的制備方法包括以下步驟：a、取重量份為20份的泥炭、10份的河沙、2份的珍珠巖混合，向其中加入重量份為30份的水、3份的碳酸鈉、6份的氫氧化鈉，于溫度為80℃下攪拌8h，冷卻至室溫，然后再加入重量份為0.5份的硫酸鋁、2份的聚丙酰胺，調(diào)節(jié)ph為2，繼續(xù)攪拌2h，過濾，烘干，粉碎至500目，得到第一混合物；b、將重量份為2份的聚乙二醇、1份的聚乙烯醇、20份的水于溫度為100℃下攪拌溶解，得到第一混合液；c、將第一混合物、爐渣灰、花生殼粉、木屑、腐殖土、草木灰、骨粉、堅果殼粉、腐殖酸混合均勻，然后表面均勻噴灑第一混合液即得營養(yǎng)土；其中，第一混合物、爐渣灰、花生殼粉、木屑、腐殖土、草木灰、骨粉、堅果殼粉、腐殖酸、第一混合液的質(zhì)量比為20:10:0.5:1:5:2:0.5:0.2:2:0.1。對比例1一種羅漢果種植方法，包括以下步驟：步驟一、將羅漢果組培苗置于培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到羅漢果幼苗；步驟二、在栽培步驟一中得到的羅漢果幼苗，得到羅漢果果實；所述步驟一中培養(yǎng)基包括：ms、1mg/l的6-ba、0.2mg/l的iba、3g/l的瓊脂、20g/l的蔗糖、0.5g/l的活性炭；其中，6-ba為6-芐氨基腺嘌呤，iba為吲哚丁酸。所述步驟一中羅漢果組培苗的培養(yǎng)方法為：于相對濕度為60％，光照強度為1200lux，光照時間為8h/d，溫度為21℃條件下培養(yǎng)30d。對比例2一種羅漢果種植方法，包括以下步驟：步驟一、將羅漢果組培苗置于培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到羅漢果幼苗；步驟二、在栽培步驟一中得到的羅漢果幼苗，得到羅漢果果實；所述步驟一中培養(yǎng)基包括：ms、1mg/l的6-ba、0.2mg/l的iba、3g/l的瓊脂、20g/l的蔗糖、0.5g/l的活性炭；其中，6-ba為6-芐氨基腺嘌呤，iba為吲哚丁酸。所述步驟一中羅漢果組培苗的培養(yǎng)方法為：于相對濕度為60％，光照強度為1200lux，光照時間為8h/d，溫度為21℃條件下培養(yǎng)30d。所述步驟二中還包括在羅漢果栽培前，在待栽培土壤表面按3000kg/畝施加營養(yǎng)土，并翻耕均勻；所述營養(yǎng)土的制備方法包括以下步驟：a、取重量份為10份的泥炭、5份的河沙、1份的珍珠巖混合，向其中加入重量份為20份的水、1份的碳酸鈉、4份的氫氧化鈉，于溫度為40℃下攪拌4h，冷卻至室溫，然后再加入重量份為0.1份的硫酸鋁、1份的聚丙酰胺，調(diào)節(jié)ph為1，繼續(xù)攪拌1h，過濾，烘干，粉碎至200目，得到第一混合物；b、將重量份為1份的聚乙二醇、0.5份的聚乙烯醇、15份的水于溫度為85℃下攪拌溶解，得到第一混合液；c、將第一混合物、爐渣灰、花生殼粉、木屑、腐殖土、草木灰、骨粉、堅果殼粉、腐殖酸混合均勻，然后表面均勻噴灑第一混合液即得營養(yǎng)土；其中，第一混合物、爐渣灰、花生殼粉、木屑、腐殖土、草木灰、骨粉、堅果殼粉、腐殖酸、第一混合液的質(zhì)量比為20:5:0.1:0.5:2:1:0.1:0.1:1:0.05。采用上述實施例1～6、對比例1～2方法得到的羅漢果果實，針對ugt1基因表達量以及甜苷v含量進行測定，具體方法以及結(jié)果如下。1、ugt1基因表達量測定方法：利用abi7500實時熒光定量pcr儀，采用qrt-pcr檢測ugt1基因的表達，具體步驟如下：步驟一、采集羅漢果果實，挑取果肉，切成2-4mm小塊并分別用錫箔紙包好，立即置于液氮中速凍，保存于-80℃?zhèn)溆谩２襟E二、先采用改良trizol法提取羅漢果果實總rna；步驟三、將rna反轉(zhuǎn)錄為cdna的反應(yīng)體系為rna10.0μl，primescriptrtenzymemixi1.0μl，rtprimermix1.0μl，5×primescriptbuffer24.0μl，rnasefreedh2o4.0μl；反應(yīng)條件為37℃(15min)→85℃(5s)→4℃；步驟四、采用primerpremier5.0軟件設(shè)計引物，由生工生物工程(上海)股份有限公司合成，其中，ugt1引物序列為：fp：cgctggtcacaaccttacat，rp：tccaaaacccacggcat；內(nèi)參基因用ubq5，序列為fp：ataaaagacccagcaccacattc，rp：cccttgccgactacaacatcc；步驟五、qrt-pcr反應(yīng)體系(20μl)為sybrpremixextaqii(tlirnasehplus)(2×)10.0μl，pcrforwardprimer(10μm)0.8μl，pcrreverseprimer(10μm)0.8μl，roxreferencedyeofdyeii(50×)0.4μl，template2.0μl，dh2o6.0μl。反應(yīng)條件為95℃(30s)，接著進行40個cycles[95℃(5s)，95℃(34s)]。2、羅漢果甜苷v含量的測定：采用高效液相色譜法測定羅漢果中羅漢果甜苷v的含量。實施例1～6、對比例1～2得到的羅漢果果實ugt1基因表達量和甜苷v含量的測量結(jié)果如表1所示，其中實驗數(shù)據(jù)均為上述每一個實施方案得到的20棵羅漢果果樹上任選其中5棵中得到的羅漢果果實進行平行試驗得到的。表1不同實施例羅漢果ugt1基因表達量和甜苷v含量實施例甜苷v含量/(w/w％)ugt1基因表達量實施例12.1613.8實施例22.2814.6實施例32.3815.9實施例43.0522.1實施例53.1223.6實施例63.3425.3對比例10.821.2對比例21.215.2從表1中可以看出實施例1～6的羅漢果果實ugt1基因表達量和甜苷v含量均高于對比例1～2。因此可以推斷將羅漢果組培苗置于含有茉莉酸甲酯的培養(yǎng)基中培養(yǎng)和栽培羅漢果過程中施加茉莉酸甲酯，可促進基因ugt1的高表達，從而促進羅漢果甜苷v的生物合成，提高羅漢果甜苷v含量。進一步第從對比例1和對比例2可以看出在羅漢羅待栽培的土壤表面施加營養(yǎng)土可促進羅漢果的生長，進而使ugt1的高表達，從而促進羅漢果甜苷v含量的提高。盡管本發(fā)明的實施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列運用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)和這里示出與描述的實施例。當(dāng)前第1頁12