本發(fā)明屬于植物種植
技術(shù)領(lǐng)域:
,涉及一種辣木種植方法,具體涉及一種富含sod的辣木種植方法。
背景技術(shù):
:辣木moringaoleiferalam.又稱鼓槌樹(drumsticktree),屬辣木科辣木屬多年生喬木。辣木是世界上最熱門的高營養(yǎng)多用途植物,其葉片和果莢中含多種氨基酸、豐富的維生素和礦物質(zhì),含鈣量是牛奶的4倍以上,含有跟大豆差不多的蛋白質(zhì),是一種高鈣植物產(chǎn)品。中國衛(wèi)生部2012年批準辣木葉為新資源食品。人們認為自由基(也稱游離基)與絕大部分疾病以及人體的衰老有關(guān)。由于自由基非?;顫姡瘜W(xué)反應(yīng)性極強,參與一系列的連鎖反應(yīng),能引起細胞生物膜上的脂質(zhì)過氧化,破壞了膜的結(jié)構(gòu)和功能。它能引起蛋白質(zhì)變性和交聯(lián),使體內(nèi)的許多酶及激素失去生物活性,機體的免疫能力、神經(jīng)反射能力、運動能力等系統(tǒng)活力降低,同時還能破壞核酸結(jié)構(gòu)和導(dǎo)致整個機體代謝失常等,能夠促使某些疾病的發(fā)生和機體的衰老。研究證明,sod能夠清除氧自由基。sod,英文名orgotein,是超氧化物歧化酶(superoxidedismutase)的簡稱,又名肝蛋白。sod被視為生命科技中具有神奇魔力的酶、人體內(nèi)的垃圾清道夫,能消除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)。由于現(xiàn)代生活壓力、環(huán)境污染、各種輻射等都會造成人體內(nèi)氧自由基大量形成,適當?shù)臄z入sod對人體健糠非常有益。目前也已經(jīng)有相關(guān)的補充保健品存在,但是一方面價格偏高,另一方面,對于越來越追求健糠的現(xiàn)代人,希望通過富含sod的食補來代替藥補,可以使營養(yǎng)更均衡,效果更明顯,也更容易堅持,并且成本很低。因此,食補是最佳的補充sod途徑之一。辣木于1940年從印度引入我國,較常食用的品種有以下三種:印度傳統(tǒng)辣木、印度改良辣木(印度t.n.農(nóng)業(yè)大學(xué)的改良種)和非洲辣木,目前在我國云南、海南、福建、廣東和廣西等地廣為引種栽培,其相關(guān)食品的開發(fā)已經(jīng)成為熱點。但是由于栽培和生長受地域和氣溫限制大,常規(guī)栽培產(chǎn)量低,退化快。目前較常食用的三種辣木的辣木葉雖然含有一定的sod,但相較于木瓜、刺梨等,辣木sod含量并不突出,而且由于品種和地域不同,辣木sod含量也差別很大?;谝陨显?,有必要研究提高辣木sod含量的種植方法?,F(xiàn)有技術(shù)尚無關(guān)于增強辣木中sod含量的培育或種植方法的相關(guān)報道。技術(shù)實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的是提供了一種富含sod的辣木種植方法,同時提供辣木粉加工方法。本發(fā)明的種植方法獲得的辣木葉加工成的辣木粉中sod的活性達到200u/mg以上。為了實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明的技術(shù)方案為:提供一種富含sod的辣木種植方法,其中,包括以下的步驟:(1)辣木組織培養(yǎng)a、外植體的選擇和處理:選擇均勻、飽滿的一年生辣木種子作為外植體,然后去除質(zhì)白翼,剝殼,依次用70~75%乙醇溶液處理30~50s,0.08~0.12%升汞溶液處理8~18min,之后無菌水沖洗2遍以上;b、種子發(fā)芽培養(yǎng):將處理過的種子接種于改良ms培養(yǎng)基上,培養(yǎng)基添加2.0~6.0g/lsod增量劑、2.0~3.0g/l瓊脂和20g/l蔗糖,調(diào)節(jié)ph5.8,在25~28℃溫度下進行發(fā)芽培育;c、不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng):當種子萌發(fā)后無菌苗長到3~5cm時,切去根及子葉,保留上胚軸作為不定芽材料,以改良ms+0.4~0.8mg/l6-ba+0.04~0.08mg/l6-naa為培養(yǎng)基,培養(yǎng)基添加2.0~6.0g/lsod增量劑、2.0~3.0g/l瓊脂和20g/l蔗糖,調(diào)節(jié)ph5.8,進行不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng);d、繼代增殖分化培養(yǎng):將不定芽切成1~3cm長的莖段,接入于改良ms培養(yǎng)基上,培養(yǎng)基添加2.0~6.0g/lsod增量劑、2.0~3.0g/l瓊脂和20g/l蔗糖,加入0.1~0.3mg/l6-ba和0.01~0.03mg/lnaa,調(diào)節(jié)ph5.8,進行繼代增殖分化培養(yǎng);e、生根培養(yǎng):將繼代增殖分化培養(yǎng)的3~5cm健壯叢生芽接種到改良ms+0.4~0.8mg/liaa+0.1~0.3mg/lnaa生根培養(yǎng)基上,培養(yǎng)基添加2.0~6.0g/lsod增量劑、2.0~3.0g/l瓊脂和20g/l蔗糖,調(diào)節(jié)ph5.8,進行生根培養(yǎng)至生根,出根20天后及時從培養(yǎng)基中移栽出來;所述改良ms是將ms中的大量元素含量降低1/2,微量元素含量增加2倍;(2)組培苗移栽管理:將已生根的組培苗移至室外練苗3~5天,于溫室大棚內(nèi)移栽到栽培基質(zhì)中,栽培基質(zhì)由河沙、珍珠巖、腐熟的辣木葉、泥炭土組成;(3)大田移栽:在苗長到19~22cm高時開始大田移栽及定植;選擇有灌溉條件、排水優(yōu)良、弱酸性至中性的沙壤土或壤土;種植前先搞通排灌水,平地起畦,山地開成梯田,每畦種植兩排,每畝定植700~900株,挖穴深35~45cm,每穴下500g腐熟農(nóng)家肥作為底肥,種植后回填土略斜壓實;(4)栽培管理:在幼苗種植后的前一個月定期澆水,保持土壤適度濕潤,定植一個月后,若有自然降雨,即可不再澆水,在干旱季節(jié)適當灌溉,在種植期間,不除草;當辣木苗長高至30~40cm時,噴施sod增量肥i號;所述sod增量肥i號包括edta絡(luò)合鋅6~30份、edta絡(luò)合錳6~30份、edta絡(luò)合銅6~30份、edta絡(luò)合鉬3~5份、edta絡(luò)合鎳3~5份、edta絡(luò)合鈦3~5份;(5)病蟲防治:采用物理防治和生物防治聯(lián)合使用;(6)定型修剪、整枝及施肥:a、辣木樹高度在1.5~1.8m,主莖直徑達2.0~3.0cm時,離地60cm處截干,培養(yǎng)3~4個一級分枝;收集截干時廢棄的辣木葉,備用;b、當一級分枝長到15~25cm時,噴施sod增量肥ii號;所述sod增量肥ii號包括氨基酸絡(luò)合鋅6~30份、氨基酸絡(luò)合錳6~30份、氨基酸絡(luò)合銅6~30份、氨基酸絡(luò)合鉬3~5份、氨基酸絡(luò)合鎳3~5份、氨基酸絡(luò)合鈦3~5份;c、當一級分枝長到60cm、直徑達≥2.0cm時,在離分枝處30cm高處再次截干,待二級分枝長至40~60cm時,進行摘心斷頂,每個一級分枝上選留3~4個二級分枝;收集截干時廢棄的辣木葉,備用;(7)每經(jīng)過10~20天,當二級分枝上的嫩牙生長至30~40cm時,便可采摘10~15cm長的嫩枝葉;(8)每次采摘鮮葉后的第三天,對辣木樹噴施sod增量肥iii;所述sod增量肥iii是由以下方法制備獲得:a、破碎:將新鮮成熟木瓜、刺梨進行破碎;b、辣木粉的制備:將兩次截干時廢棄的辣木葉經(jīng)自然晾曬或60℃以下低溫干燥,控制水分≤8.0%,然后采用超微粉碎進行破壁粉碎,過300~900目篩(粒度44~15μm);c、裝發(fā)酵罐:將50~80份水、0.5~10份紅糖、1~20份木瓜,1~20份刺梨、5~10份辣木粉,裝在發(fā)酵罐中攪拌均勻,密封;d、發(fā)酵:于25~28℃溫度發(fā)酵,發(fā)酵過程中,每天打開頂部閥門放氣10~20分鐘,發(fā)酵2~4個月,過濾,獲得sod增量肥iii。進一步地,所述sod增量劑,是由以下方法制備獲得:a、按重量比1:1稱取新鮮成熟木瓜和刺梨,清洗后粉碎打槳,加入重量4倍的ph值6.8、濃度為100mmol/l、含5mol/ledta和20mmol/l焦亞硫酸鈉的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖液,在常溫下不斷攪拌,浸提2小時,150目過濾,濾液經(jīng)連續(xù)離心30min,獲得上清液,用hcl調(diào)整其ph值至5.0,常溫下靜置30min后,經(jīng)連續(xù)離心30min,收集沉淀物,加入4倍重量的去離子水,攪拌溶解,得粗品溶液;b、粗品溶液加熱至45℃,用naoh溶液調(diào)整ph值至9.0,滴加粗品溶液總質(zhì)量0.02%的修飾保護劑月桂酰氯,不斷攪拌,保溫并維持粗酶液ph9.0不變,反應(yīng)1小時后,快速冷卻至30℃以下,離心去除沉淀物雜質(zhì),收集上清液,用hcl調(diào)整ph值至6.5,快速升溫至65℃,不斷攪拌,保溫反應(yīng)10分鐘后,快速冷卻至30℃以下,離心10min,收集上清液,得精品溶液;c、精品溶液加入其體積1.5倍的4℃以下預(yù)冷過的95%乙醇,邊加邊緩慢攪拌,于0~4℃下靜置10分鐘后,離心10min,收集sod精品沉淀,冷凍干燥,得sod增量劑。進一步地,所述腐熟的辣木葉是由辣木葉進行堆肥獲得。進一步地,所述栽培基質(zhì)由重量比1:1:1:1的河沙、珍珠巖、腐熟的辣木葉、泥炭土組成。進一步地,施用sod增量肥i號時配制成質(zhì)量百分比濃度為0.2%~2%的肥料水溶液,然后噴施,用量為每畝50~80kg。進一步地,施用sod增量肥ii號時配制成質(zhì)量百分比濃度為0.2%~2%的肥料水溶液,然后噴施,用量為每畝50~80kg。進一步地,施用sod增量肥iii時,每畝用原液稀釋30~100倍,噴施時要均勻地噴灑在樹干、葉片背面上。本發(fā)明富含sod的辣木種植方法具有以下的有益效果:1、本發(fā)明辣木苗長勢快,定干時間早,節(jié)約了大量的人力物力,辣木葉產(chǎn)量較多,全年能夠采摘辣木葉片次數(shù)8~15次。通過本發(fā)明方法種植辣木,育苗成功率高、成長速度快、長大后枝葉多,有利于促進辣木樹的良性生態(tài)發(fā)展,轉(zhuǎn)化更高經(jīng)濟價值,從而帶動辣木相關(guān)產(chǎn)業(yè)的健糠、快速發(fā)展。2、本發(fā)明辣木根系發(fā)達,耐貧瘠,只以農(nóng)家肥作為底肥即可。在生長過程中,不同階段實施各種專用栽培肥料,可以提高辣木sod生成量。3、根據(jù)金屬離子的不同,sod家族可以分為四種:cu/zn-sod、fe-sod、mn-sod和ni-sod,辣木sod為cu/zn-sod類型。微量元素鋅、錳、銅等是sod的重要組成成分,參與辣木生長階段sod的合成。適量的鎳、鉬、鈦能促進辣木葉片中sod的生成量及活性,還能增強辣木植株的抗逆性和抗衰老能力。在辣木各個生長期進行sod增量施肥,可增加植物體中sod酶的含量及活性,提高植物抗病蟲害和干旱的能力,保證了辣木植株的正常生長。4、辣木葉sod存在于辣木細胞質(zhì)和葉綠體中,外層由細胞壁包裹,采用傳統(tǒng)高效粉碎工藝的100~200目粉碎,sod幾乎檢測不出,需要破壁技術(shù)將sod釋放出來。本發(fā)明采用超微粉碎技術(shù)可以使辣木葉破壁,能在很短的時間內(nèi)將辣木葉粉碎成粒徑均勻的超微粉體,sod等有效成分得以完全釋放,再將含量高的sod辣木粉與紅糖、木瓜,刺梨攪拌均勻進行發(fā)酵獲得sod增量肥iii,sod增量肥iii直接被辣木葉和樹干吸收,更好地促進辣木生長。5、本發(fā)明富含sod的辣木種植方法,根據(jù)辣木的各期生長特點進行sod增量施肥設(shè)計,通過施用不同的肥料,以促使辣木生長過程中sod的合成,最終獲得高含量sod的辣木。經(jīng)檢測,采用本發(fā)明的種植獲得的辣木葉加工成辣木粉中sod的活性達到200u/mg以上。具體實施方式實施例1本發(fā)明富含sod的辣木種植方法,包括以下的步驟:(1)辣木組織培養(yǎng)a、外植體的選擇和處理:選擇均勻、飽滿的一年生辣木種子作為外植體,然后去除質(zhì)白翼,剝殼,依次用75%乙醇溶液處理40s,0.1%升汞溶液處理12min,之后無菌水沖洗4遍;b、種子發(fā)芽培養(yǎng):將處理過的種子接種于改良ms培養(yǎng)基上,培養(yǎng)基添加4.0g/lsod增量劑、2.6g/l瓊脂和20g/l蔗糖,調(diào)節(jié)ph5.8,在26℃溫度下進行發(fā)芽培育;c、不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng):當種子萌發(fā)后無菌苗長到3~5cm時,切去根及子葉,保留上胚軸作為不定芽材料,以改良ms+0.5mg/l6-ba+0.05mg/l6-naa為培養(yǎng)基,培養(yǎng)基添加4.0g/lsod增量劑、2.6g/l瓊脂和20g/l蔗糖,調(diào)節(jié)ph5.8,進行不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng);d、繼代增殖分化培養(yǎng):將不定芽切成1~3cm長的莖段,接入于改良ms培養(yǎng)基上,培養(yǎng)基添加4.0g/lsod增量劑、2.7g/l瓊脂和20g/l蔗糖,加入0.1mg/l6-ba和0.01mg/lnaa,調(diào)節(jié)ph5.8,進行繼代增殖分化培養(yǎng);e、生根培養(yǎng):將繼代增殖分化培養(yǎng)的3~5cm健壯叢生芽接種到改良ms+0.6mg/liaa+0.1mg/lnaa生根培養(yǎng)基上,培養(yǎng)基添加4.0g/lsod增量劑、2.65g/l瓊脂和20g/l蔗糖,調(diào)節(jié)ph5.8,進行生根培養(yǎng)至生根,出根20天后及時從培養(yǎng)基中移栽出來;所述改良ms是將ms中的大量元素含量降低1/2,微量元素含量增加2倍;(2)組培苗移栽管理:將已生根的組培苗移至室外練苗3天,于溫室大棚內(nèi)(空氣濕度>65%,夜晚達到85%)移栽到栽培基質(zhì)中,栽培基質(zhì)由重量比1:1:1:1的河沙、珍珠巖、腐熟的辣木葉、泥炭土組成;(3)大田移栽:在苗長到19~22cm高時開始大田移栽及定植;選擇有灌溉條件、排水優(yōu)良、弱酸性至中性的沙壤土或壤土;種植前先搞通排灌水,平地起畦,山地開成梯田,每畦種植兩排,每畝定植800株,挖穴深45cm,每穴下500g腐熟農(nóng)家肥作為底肥,種植后回填土略斜壓實;(4)栽培管理:在幼苗種植后的前一個月定期澆水,保持土壤適度濕潤,定植一個月后,若有自然降雨,即可不再澆水,在干旱季節(jié)適當灌溉,在種植期間,不除草;當辣木苗長高至30~40cm時,噴施sod增量肥i號,施用sod增量肥i號時配制成質(zhì)量百分比濃度為1.5%的肥料水溶液,然后噴施,用量為每畝60kg;所述sod增量肥i號包括edta絡(luò)合鋅25份、edta絡(luò)合錳25份、edta絡(luò)合銅25份、edta絡(luò)合鉬5份、edta絡(luò)合鎳5份、edta絡(luò)合鈦5份;(5)病蟲防治:采用物理防治和生物防治聯(lián)合使用;(6)定型修剪、整枝及施肥:a、辣木樹高度在1.5~1.8m,主莖直徑達2.0~3.0cm時,離地60cm處截干,培養(yǎng)3~4個一級分枝;收集截干時廢棄的辣木葉,備用;b、當一級分枝長到15~25cm時,噴施sod增量肥ii號;施用sod增量肥ii號時配制成質(zhì)量百分比濃度為1.5%的肥料水溶液,然后噴施,用量為每畝60kg;所述sod增量肥ii號包括氨基酸絡(luò)合鋅25份、氨基酸絡(luò)合錳25份、氨基酸絡(luò)合銅25份、氨基酸絡(luò)合鉬4份、氨基酸絡(luò)合鎳4份、氨基酸絡(luò)合鈦4份;c、當一級分枝長到60cm、直徑達≥2.0cm時,在離分枝處30cm高處再次截干,待二級分枝長至40~60cm時,進行摘心斷頂,每個一級分枝上選留3~4個二級分枝;收集截干時廢棄的辣木葉,備用;(7)每經(jīng)過10~20天,當二級分枝上的嫩牙生長至30~40cm時,便可采摘10~15cm長的嫩枝葉;(8)每次采摘鮮葉后的第三天,對辣木樹噴施sod增量肥iii,提高辣木葉sod生成;施用sod增量肥iii時,每畝用原液1.2kg稀釋到50kg,噴施時要均勻地噴灑在樹干、葉片背面上。所述sod增量肥iii是由以下方法制備獲得:a、破碎:將新鮮成熟木瓜、刺梨進行破碎;b、辣木粉的制備:將兩次截干時廢棄的辣木葉經(jīng)自然晾曬或60℃以下低溫干燥,控制水分≤8.0%,然后采用超微粉碎進行破壁粉碎,過900目篩;c、裝發(fā)酵罐:將70份水、6份紅糖、15份木瓜,15份刺梨、7份辣木粉,裝在發(fā)酵罐中攪拌均勻,密封;d、發(fā)酵:于25℃溫度發(fā)酵,發(fā)酵過程中,每天打開頂部閥門放氣10分鐘,發(fā)酵70天,過濾,獲得sod增量肥iii。經(jīng)按gb/t5009.171方法檢測,實施例1的方法種植得到的辣木葉加工成辣木粉中sod的活性為281u/mg。實施例2本發(fā)明富含sod的辣木種植方法,包括以下的步驟:(1)辣木組織培養(yǎng)a、外植體的選擇和處理:選擇均勻、飽滿的一年生辣木種子作為外植體,然后去除質(zhì)白翼,剝殼,依次用75%乙醇溶液處理50s,0.1%升汞溶液處理10min,之后無菌水沖洗5遍;b、種子發(fā)芽培養(yǎng):將處理過的種子接種于改良ms培養(yǎng)基上,培養(yǎng)基添加3.0g/lsod增量劑、2.2g/l瓊脂和20g/l蔗糖,調(diào)節(jié)ph5.8,在25℃溫度下進行發(fā)芽培育;c、不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng):當種子萌發(fā)后無菌苗長到3~5cm時,切去根及子葉,保留上胚軸作為不定芽材料,以改良ms+0.4mg/l6-ba+0.04mg/l6-naa為培養(yǎng)基,培養(yǎng)基添加3.0g/lsod增量劑、2.5g/l瓊脂和20g/l蔗糖,調(diào)節(jié)ph5.8,進行不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng);d、繼代增殖分化培養(yǎng):將不定芽切成1~3cm長的莖段,接入于改良ms培養(yǎng)基上,培養(yǎng)基添加3.0g/lsod增量劑、2.5g/l瓊脂和20g/l蔗糖,加入0.1mg/l6-ba和0.01mg/lnaa,調(diào)節(jié)ph5.8,進行繼代增殖分化培養(yǎng);e、生根培養(yǎng):將繼代增殖分化培養(yǎng)的3~5cm健壯叢生芽接種到改良ms+0.5mg/liaa+0.2mg/lnaa生根培養(yǎng)基上,培養(yǎng)基添加3.0g/lsod增量劑、2.5g/l瓊脂和20g/l蔗糖,調(diào)節(jié)ph5.8,進行生根培養(yǎng)至生根,出根20天后及時從培養(yǎng)基中移栽出來;所述改良ms是將ms中的大量元素含量降低1/2,微量元素含量增加2倍;(2)組培苗移栽管理:將已生根的組培苗移至室外練苗5天,于溫室大棚內(nèi)(空氣濕度>65%,夜晚達到85%)移栽到栽培基質(zhì)中,栽培基質(zhì)由重量比1:1:1:1的河沙、珍珠巖、腐熟的辣木葉、泥炭土組成;(3)大田移栽:在苗長到19~22cm高時開始大田移栽及定植;選擇有灌溉條件、排水優(yōu)良、弱酸性至中性的沙壤土或壤土;種植前先搞通排灌水,平地起畦,山地開成梯田,每畦種植兩排,每畝定植900株,挖穴深40cm,每穴下500g腐熟農(nóng)家肥作為底肥,種植后回填土略斜壓實;(4)栽培管理:在幼苗種植后的前一個月定期澆水,保持土壤適度濕潤,定植一個月后,若有自然降雨,即可不再澆水,在干旱季節(jié)適當灌溉,在種植期間,不除草;當辣木苗長高至30~40cm時,噴施sod增量肥i號,施用sod增量肥i號時配制成質(zhì)量百分比濃度為1.0%的肥料水溶液,然后噴施,用量為每畝50kg;所述sod增量肥i號包括edta絡(luò)合鋅15份、edta絡(luò)合錳15份、edta絡(luò)合銅15份、edta絡(luò)合鉬3份、edta絡(luò)合鎳3份、edta絡(luò)合鈦3份;(5)病蟲防治:采用物理防治和生物防治聯(lián)合使用;(6)定型修剪、整枝及施肥:a、辣木樹高度在1.5~1.8m,主莖直徑達2.0~3.0cm時,離地60cm處截干,培養(yǎng)3~4個一級分枝;收集截干時廢棄的辣木葉,備用;b、當一級分枝長到15~25cm時,噴施sod增量肥ii號;施用sod增量肥ii號時配制成質(zhì)量百分比濃度為1.0%的肥料水溶液,然后噴施,用量為每畝50kg;所述sod增量肥ii號包括氨基酸絡(luò)合鋅15份、氨基酸絡(luò)合錳15份、氨基酸絡(luò)合銅15份、氨基酸絡(luò)合鉬3份、氨基酸絡(luò)合鎳3份、氨基酸絡(luò)合鈦3份;c、當一級分枝長到60cm、直徑達≥2.0cm時,在離分枝處30cm高處再次截干,待二級分枝長至50cm時,進行摘心斷頂,每個一級分枝上選留3~4個二級分枝;收集截干時廢棄的辣木葉,備用;(7)每經(jīng)過10~20天,當二級分枝上的嫩牙生長至30~40cm時,便可采摘10~15cm長的嫩枝葉;(8)每次采摘鮮葉后的第三天,對辣木樹噴施sod增量肥iii,提高辣木葉sod生成;施用sod增量肥iii時,每畝用原液1.2kg稀釋到50kg,噴施時要均勻地噴灑在樹干、葉片背面上。所述sod增量肥iii是由以下方法制備獲得:a、破碎:將新鮮成熟木瓜、刺梨進行破碎;b、辣木粉的制備:將兩次截干時廢棄的辣木葉經(jīng)自然晾曬或60℃以下低溫干燥,控制水分≤8.0%,然后采用超微粉碎進行破壁粉碎,過900目篩;c、裝發(fā)酵罐:將70份水、4份紅糖、6份木瓜,6份刺梨、5份辣木粉,裝在發(fā)酵罐中攪拌均勻,密封;d、發(fā)酵:于26℃溫度發(fā)酵,發(fā)酵過程中,每天打開頂部閥門放氣20分鐘,發(fā)酵50天,過濾,獲得sod增量肥iii。經(jīng)按gb/t5009.171方法檢測,實施例2的方法種植得到的辣木葉加工成辣木粉中sod的活性為236u/mg。實施例3本發(fā)明富含sod的辣木種植方法,包括以下的步驟:(1)辣木組織培養(yǎng)a、外植體的選擇和處理:選擇均勻、飽滿的一年生辣木種子作為外植體,然后去除質(zhì)白翼,剝殼,依次用70%乙醇溶液處理30s,0.1%升汞溶液處理18min,之后無菌水沖洗3遍;b、種子發(fā)芽培養(yǎng):將處理過的種子接種于改良ms培養(yǎng)基上,培養(yǎng)基添加2.0g/lsod增量劑、2.0g/l瓊脂和20g/l蔗糖,調(diào)節(jié)ph5.8,在25℃溫度下進行發(fā)芽培育;c、不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng):當種子萌發(fā)后無菌苗長到3~5cm時,切去根及子葉,保留上胚軸作為不定芽材料。以改良ms+0.5mg/l6-ba+0.05mg/l6-naa為培養(yǎng)基,培養(yǎng)基添加2.0g/lsod增量劑、2.5g/l瓊脂和20g/l蔗糖,調(diào)節(jié)ph5.8,進行不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng);d、繼代增殖分化培養(yǎng):將不定芽切成1~3cm長的莖段,接入于改良ms培養(yǎng)基上,培養(yǎng)基添加2.0g/lsod增量劑、2.5g/l瓊脂和20g/l蔗糖,加入0.1mg/l6-ba和0.01mg/lnaa,調(diào)節(jié)ph5.8,進行繼代增殖分化培養(yǎng);e、生根培養(yǎng):將繼代增殖分化培養(yǎng)的3~5cm健壯叢生芽接種到改良ms+0.5mg/liaa+0.3mg/lnaa生根培養(yǎng)基上,培養(yǎng)基添加2.0g/lsod增量劑、2.5g/l瓊脂和20g/l蔗糖,調(diào)節(jié)ph5.8,進行生根培養(yǎng)至生根,出根20天后及時從培養(yǎng)基中移栽出來;所述改良ms是將ms中的大量元素含量降低1/2,微量元素含量增加2倍;(2)組培苗移栽管理:將已生根的組培苗移至室外練苗4天,于溫室大棚內(nèi)(空氣濕度>65%,夜晚達到85%)移栽到栽培基質(zhì)中,栽培基質(zhì)由重量比1:1:1:1的河沙、珍珠巖、腐熟的辣木葉、泥炭土組成;(3)大田移栽:在苗長到19~22cm高時開始大田移栽及定植;選擇有灌溉條件、排水優(yōu)良、弱酸性至中性的沙壤土或壤土;種植前先搞通排灌水,平地起畦,山地開成梯田,每畦種植兩排,每畝定植800株,挖穴深45cm,每穴下500g腐熟農(nóng)家肥作為底肥,種植后回填土略斜壓實;(4)栽培管理:在幼苗種植后的前一個月定期澆水,保持土壤適度濕潤,定植一個月后,若有自然降雨,即可不再澆水,在干旱季節(jié)適當灌溉,在種植期間,不除草;當辣木苗長高至30~40cm時,噴施sod增量肥i號,施用sod增量肥i號時配制成質(zhì)量百分比濃度為0.5%的肥料水溶液,然后噴施,用量為每畝60kg;所述sod增量肥i號包括edta絡(luò)合鋅20份、edta絡(luò)合錳20份、edta絡(luò)合銅20份、edta絡(luò)合鉬5份、edta絡(luò)合鎳5份、edta絡(luò)合鈦5份;(5)病蟲防治:采用物理防治和生物防治聯(lián)合使用;(6)定型修剪、整枝及施肥:a、辣木樹高度在1.5~1.8m,主莖直徑達2.0~3.0cm時,離地60cm處截干,培養(yǎng)3~4個一級分枝;收集截干時廢棄的辣木葉,備用;b、當一級分枝長到15~25cm時,噴施sod增量肥ii號;施用sod增量肥ii號時配制成質(zhì)量百分比濃度為0.5%的肥料水溶液,然后噴施,用量為每畝60kg;所述sod增量肥ii號包括氨基酸絡(luò)合鋅25份、氨基酸絡(luò)合錳25份、氨基酸絡(luò)合銅25份、氨基酸絡(luò)合鉬4份、氨基酸絡(luò)合鎳4份、氨基酸絡(luò)合鈦4份;c、當一級分枝長到60cm、直徑達≥2.0cm時,在離分枝處30cm高處再次截干,待二級分枝長至60cm時,進行摘心斷頂,每個一級分枝上選留3~4個二級分枝;收集截干時廢棄的辣木葉,備用;(7)每經(jīng)過10~20天,當二級分枝上的嫩牙生長至30~40cm時,便可采摘10~15cm長的嫩枝葉;(8)每次采摘鮮葉后的第三天,對辣木樹噴施sod增量肥iii,提高辣木葉sod生成;施用sod增量肥iii時,每畝用原液稀釋50倍,噴施時要均勻地噴灑在樹干、葉片背面上。所述sod增量肥iii是由以下方法制備獲得:b、破碎:將新鮮成熟木瓜、刺梨進行破碎;b、辣木粉的制備:將兩次截干時廢棄的辣木葉經(jīng)自然晾曬或60℃以下低溫干燥,控制水分≤8.0%,然后采用超微粉碎進行破壁粉碎,過900目篩;c、裝發(fā)酵罐:將80份水、8份紅糖、12份木瓜,12份刺梨、10份辣木粉,裝在發(fā)酵罐中攪拌均勻,密封;d、發(fā)酵:于28℃溫度發(fā)酵,發(fā)酵過程中,每天打開頂部閥門放氣10分鐘,發(fā)酵80天,過濾,獲得sod增量肥iii。經(jīng)按gb/t5009.171方法檢測,實施例3的方法種植得到的辣木葉加工成辣木粉中sod的活性為213u/mg。對比實施例1:一種辣木種植方法,包括以下的步驟:(1)辣木苗床準備:辣木苗床選擇靠近種植地,除去雜草、石塊等雜物,平整好土地,然后放入河沙,厚度20~25厘米,苗床上方架設(shè)40%左右的遮光網(wǎng)遮蔭,蔭棚高1.7米,長寬依苗床規(guī)模的實際地形而定;(2)辣木種子處理選擇均勻、飽滿的一年生辣木種子倒入已配好的1000~1200倍液多菌靈藥水中浸泡12~24小時;(3)辣木裝袋育苗:辣木育苗袋營養(yǎng)土要求肥沃、疏松,用凈土、栽培基質(zhì)由重量比1:1:1:1的河沙、珍珠巖、椰糠、泥炭土組成,營養(yǎng)袋規(guī)格12×17厘米,苗床宜作低墑,寬80厘米左右,裝袋要求緊、滿,將裝好營養(yǎng)土的營養(yǎng)袋排置于苗床上,袋間相互靠緊,播入沙床后一周左右,幼苗開始出土,當子葉剛展開時,移置到排置好的營養(yǎng)袋里,移袋時要非常小心,不能傷及幼苗的任何部位,栽好后盡快用800倍綠亨2號液或其它殺菌劑澆透;(4)辣木幼苗管理:辣木移栽成活后每15天澆一次800倍綠亨2號等殺菌劑,并隨時注意觀察蟲害,要經(jīng)常淋水,保持袋內(nèi)土壤濕潤,但水不宜太多,以防爛根。幼苗長至4~6片葉子時,即可除去遮蔭網(wǎng)煉苗;(5)大田移栽:在苗長到19~22cm高時開始大田移栽及定植;選擇有灌溉條件、排水優(yōu)良、弱酸性至中性的沙壤土或壤土;種植前先搞通排灌水,平地起畦,山地開成梯田,每畦種植兩排,每畝定植800株,挖穴深45cm,每穴下500g腐熟農(nóng)家肥作為底肥,種植后回填土略斜壓實;(6)栽培管理:在幼苗種植后的前一個月定期澆水,保持土壤適度濕潤,定植一個月后,若有自然降雨,即可不再澆水,在干旱季節(jié)適當灌溉,在種植期間,不除草;當辣木苗長高至30~40cm時,噴施sod增量肥i號,施用sod增量肥i號時配制成質(zhì)量百分比濃度為1.5%的肥料水溶液,然后噴施,用量為每畝60kg;所述sod增量肥i號包括edta絡(luò)合鋅25份、edta絡(luò)合錳25份、edta絡(luò)合銅25份、edta絡(luò)合鉬5份、edta絡(luò)合鎳5份、edta絡(luò)合鈦5份;(7)病蟲防治:采用物理防治和生物防治聯(lián)合使用;(8)定型修剪、整枝及施肥:a、辣木樹高度在1.5~1.8m,主莖直徑達2.0~3.0cm時,離地60cm處截干,培養(yǎng)3~4個一級分枝;收集截干時廢棄的辣木葉,備用;b、當一級分枝長到15~25cm時,噴施sod增量肥ii號;施用sod增量肥ii號時配制成質(zhì)量百分比濃度為1.5%的肥料水溶液,然后噴施,用量為每畝60kg;所述sod增量肥ii號包括氨基酸絡(luò)合鋅25份、氨基酸絡(luò)合錳25份、氨基酸絡(luò)合銅25份、氨基酸絡(luò)合鉬4份、氨基酸絡(luò)合鎳4份、氨基酸絡(luò)合鈦4份;c、當一級分枝長到60cm、直徑達≥2.0cm時,再次截干,待二級分枝長至40~60cm時,進行摘心斷頂,每個一級分枝上選留3~4個二級分枝;收集截干時廢棄的辣木葉,備用;(9)每經(jīng)過10~20天,當二級分枝上的嫩牙生長至30~40cm時,便可采摘10~15cm長的嫩枝葉;(10)每次采摘鮮葉后的第三天,對辣木樹噴施sod增量肥iii,提高辣木葉sod生成;施用sod增量肥iii時,每畝用原液1.2kg稀釋到50kg,噴施時要均勻地噴灑在樹干、葉片背面上。所述sod增量肥iii是由以下方法制備獲得:a、破碎:將新鮮成熟木瓜、刺梨進行破碎;b、辣木粉的制備:將兩次截干時廢棄的辣木葉經(jīng)自然晾曬或60℃以下低溫干燥,控制水分≤8.0%,然后采用超微粉碎進行破壁粉碎,過900目篩;c、裝發(fā)酵罐:將70份水、6份紅糖、15份木瓜,15份刺梨、7份辣木粉,裝在發(fā)酵罐中攪拌均勻,密封;d、發(fā)酵:于25℃溫度發(fā)酵,發(fā)酵過程中,每天打開頂部閥門放氣10分鐘,發(fā)酵70天,過濾,獲得sod增量肥iii。經(jīng)按gb/t5009.171方法檢測,對比實施例1的方法種植得到的辣木葉加工成辣木粉中sod的活性為188u/mg。對比實施例2:一種辣木種植方法,包括以下的步驟:(1)辣木苗床準備:辣木苗床選擇靠近種植地,除去雜草、石塊等雜物,平整好土地,然后放入河沙,厚度20~25厘米,苗床上方架設(shè)40%左右的遮光網(wǎng)遮蔭,蔭棚高1.7米,長寬依苗床規(guī)模的實際地形而定;(2)辣木種子處理:選擇均勻、飽滿的一年生辣木種子倒入已配好的1000~1200倍液多菌靈藥水中浸泡12~24小時;(3)辣木裝袋育苗:辣木育苗袋營養(yǎng)土要求肥沃、疏松,用凈土、栽培基質(zhì)由重量比1:1:1:1的河沙、珍珠巖、椰糠、泥炭土組成。營養(yǎng)袋規(guī)格12×17厘米,苗床宜作低墑,寬80厘米左右;裝袋要求緊、滿,將裝好營養(yǎng)土的營養(yǎng)袋排置于苗床上,袋間相互靠緊;播入沙床后一周左右,幼苗開始出土,當子葉剛展開時,移置到排置好的營養(yǎng)袋里,移袋時要非常小心,不能傷及幼苗的任何部位,栽好后盡快用800倍綠亨2號液或其它殺菌劑澆透;(4)辣木幼苗管理辣木移栽成活后每15天澆一次800倍綠亨2號等殺菌劑,并隨時注意觀察蟲害,要經(jīng)常淋水,保持袋內(nèi)土壤濕潤,但水不宜太多,以防爛根;幼苗長至4~6片葉子時,即可除去遮蔭網(wǎng)煉苗;(5)大田移栽:在苗長到19~22cm高時開始大田移栽及定植;選擇有灌溉條件、排水優(yōu)良、弱酸性至中性的沙壤土或壤土;種植前先搞通排灌水,平地起畦,山地開成梯田,每畦種植兩排,每畝定植800株,挖穴深45cm,每穴下500g腐熟農(nóng)家肥作為底肥,種植后回填土略斜壓實;(6)栽培管理:在幼苗種植后的前一個月定期澆水,保持土壤適度濕潤,定植一個月后,若有自然降雨,即可不再澆水,在干旱季節(jié)適當灌溉,在種植期間,不除草;(7)病蟲防治:采用物理防治和生物防治聯(lián)合使用;(8)定型修剪、整枝及施肥:a、辣木樹高度在1.5~1.8m,主莖直徑達2.0~3.0cm時,離地60cm處截干,培養(yǎng)3~4個一級分枝;b、當一級分枝長到60cm、直徑達≥2.0cm時,再次截干,待二級分枝長至60cm時,進行摘心斷頂,每個一級分枝上選留3~4個二級分枝;收集截干時廢棄的辣木葉,備用;(9)每經(jīng)過10~20天,當二級分枝上的嫩牙生長至30~40cm時,便可采摘10~15cm長的嫩枝葉;(10)每次采摘鮮葉后的第三天,對辣木樹噴施植物動力20031000倍葉面噴霧。經(jīng)按gb/t5009.171方法檢測,對比實施例2的方法種植得到的辣木葉加工成辣木粉中sod的活性為50u/mg。實驗過程及結(jié)果:1、取實施例1、實施例2、實施例3、對比實施例1和對比實施例2方法種植的鮮辣木葉,鮮辣木葉包括第一次截干收集的辣木葉、第二次截干收集的辣木葉和最后采摘鮮葉;將三次收集的辣木葉分別經(jīng)自然晾曬干燥,控制水分6.0%,然后采用超微粉碎進行破壁粉碎,過900目篩;按gb/t5009.171方法檢測sod活性含量,sod活性含量如表1所示:表1三種不同階段采摘的辣木葉sod活性含量(破壁粉碎)從表1的對比數(shù)據(jù)可以看出:1、實施例1與對比實施例1比較,表明實施組培技術(shù)并添加sod增量劑能夠顯著增加sod含量;2、對比實施例1與對比實施例2比較,表明在辣木栽培管理過程中,在辣木生長階段噴施sod增量肥i、sod增量肥ii和sod增量肥iii,能顯著增加辣木葉的sod活性含量;3、本發(fā)明在栽培管理過程中,在不同的階段添加sod增量劑、sod增量肥i、sod增量肥ii和sod增量肥iii,更能促進辣木葉的sod活性含量,使其辣木葉的sod含量不斷增加;4、將富含sod的辣木粉與木瓜、刺梨、紅糖混合進行發(fā)酵,獲得sod增量肥iii,最后階段噴施sod增量肥iii進一步的促進了辣木的生長,確保辣木富含sod。2、取實施例1、實施例2、實施例3、對比實施例1和對比實施例2方法種植的鮮辣木葉,分別在50℃條件下通風干燥,控制水分為6.0%,用傳統(tǒng)高效粉碎機進行100目、200目粉碎和用300目以上的超微粉碎,分別按gb/t5009.171方法檢測sod活性含量,sod活性含量如表3所示:表2辣木葉干粉sod活性含量(u/mg)100目200目325目900目實施例1420271281實施例2212233236實施例3216214213對比實施例1110160188對比實施例2034750從表2的對比數(shù)據(jù)可以得出,破壁粉碎對sod含量檢測影響顯著,采用傳統(tǒng)高效粉碎工藝的100~200目粉碎,sod幾乎檢測不出,需要破壁粉碎技術(shù)將sod釋放出來。以上所揭露的僅為本發(fā)明的較佳實施例而已,當然不能以此來限定本發(fā)明之權(quán)利范圍,因此依本發(fā)明權(quán)利要求所作的等同變化,仍屬于本發(fā)明所涵蓋的范圍。當前第1頁12