，并選擇合適篩選壓力水平濃度的粗毒素提取液作為粳稻花藥培養(yǎng)粗毒 素選擇壓； (3) 雜交育種獲得三交Fl雜交種：將大田種植篩選的抗稻曲病秈稻抗源與廣親和材料 秈粳架橋獲得雜交種Fl，選取雜交種Fl的花藥再與待改良粳稻品種/系雜交獲取雜交種三 交Fl; (4) 對三交Fl雜交種進(jìn)行排秈培養(yǎng)基花藥培養(yǎng)：三交Fl雜交種正季播種，選取健壯主 穗花藥進(jìn)行排秈培養(yǎng)基花藥誘導(dǎo)培養(yǎng)，獲得花藥愈傷組織，并挑選直徑0. 4?0. 8cm的花藥 愈傷組織接種于添加了選擇壓濃度粗毒素的分化培養(yǎng)基，在溫度27?29°C、光14h/暗IOh 的條件下培養(yǎng)，獲得花培幼苗，待花培苗長至2cm之后轉(zhuǎn)接于生根培養(yǎng)基進(jìn)行繼代培養(yǎng)，待 花培苗長至8cm后移栽至周轉(zhuǎn)箱壯苗，10?15天后移栽入大田； (5) 花培苗單株收種獲得花培家系，進(jìn)一步農(nóng)藝性狀、稻曲病抗性篩選獲得改良的粳稻 新品系：大田種植花培苗，單株收種獲得稻曲病抗性改良的粳稻花培家系若干，不同花培家 系進(jìn)一步大田播種，以待改良粳稻品種/系親本為對照，篩選獲得農(nóng)藝形狀良好且稻曲病 抗性得到改良的粳稻新品系。
[0013] 所述步驟（1)中的農(nóng)藝性狀良好的粳稻品種/系是指產(chǎn)量高、米質(zhì)優(yōu)良、稻曲病抗 性有待改良以及株高不宜過高、生育期早熟或中熟的粳稻品種/系；抗稻曲病秈稻抗源是 指廣量尚、米質(zhì)優(yōu)良、尚抗稻曲病的軸稻品種/系。
[0014] 所述步驟（1)中選取的農(nóng)藝性狀良好的粳稻品種/系進(jìn)行排秈培養(yǎng)基的誘導(dǎo)培養(yǎng) 的過程如下： (1.1)取材與預(yù)處理：將選取的農(nóng)藝性狀良好的粳稻品種/系大田常規(guī)栽培，取葉枕距 為5?7cm、穗色呈淡黃綠色、花藥淡黃色且長度約為穎殼的1/3?1/2、孕穗不裂開的健壯 主穗為供試材料，保留2?3張葉片，75%酒精擦拭表面后，用濕毛巾包裹且外套塑料袋，置 4°C下低溫預(yù)處理3天； (1. 2)接種：預(yù)處理后，將含主穗的稻苞剪下，然后將該稻苞浸泡于75%的酒精中處理 3?4min，接著將該稻苞轉(zhuǎn)移于超凈工作臺中剝離主穗，進(jìn)一步剝?nèi)⌒∷霝榇笮【鶆虻男?支梗，接下來用消毒過的紗布包裹小支梗后用濃度為〇. 1%的升汞滅菌l〇min，無菌水漂洗 3?4次，打開紗布晾干，最后用消毒過的剪刀剪開花藥上部，抖藥法接種花藥于排秈培養(yǎng) 基； (1. 3)誘導(dǎo)培養(yǎng)：將排秈培養(yǎng)基置于24?26°C的黑暗環(huán)境中誘導(dǎo)愈傷組織，30?40天 后在花藥的邊緣出現(xiàn)白-淡黃色的無定型細(xì)胞團(tuán)，并在花藥接種培養(yǎng)50天后統(tǒng)計(jì)花藥愈傷 組織誘導(dǎo)率，選定花藥愈傷組織誘導(dǎo)率高于25%的農(nóng)藝性狀良好的粳稻品種/系作為待改 良梗稻品種/系。
[0015] 所述步驟（1. 2)中的稻苞是指稻苞頂枕距為7cm至穗下節(jié)間上部0. 5cm的區(qū)域內(nèi) 剪材獲得的部分，且剝?nèi)〉男≈ЧＩ匣ㄋ帞?shù)量為15?25粒。
[0016] 所述步驟（1. 2)中的排秈培養(yǎng)基配方為：N6大量元素+N6微量元素+N6有機(jī)質(zhì) +2mg/L2, 4-D+O. 5mg/LNAA+0. 5mg/L水解蛋白+5%蔗糖+0? 8%植物凝膠，排秈培養(yǎng)基的pH值 為 5. 8〇
[0017] 所述步驟（2)中的粗毒素耐性濃度鑒定過程如下： (2. 1)粗毒素的制備：將混合稻曲病菌接種于平面擴(kuò)繁培養(yǎng)基上擴(kuò)繁，待長出菌絲體并 產(chǎn)生孢子后轉(zhuǎn)接到PDA液體培養(yǎng)基中擴(kuò)繁，28°C避光振蕩培養(yǎng)20天后用無菌紗布濾去菌， 培養(yǎng)濾液經(jīng)3000rpm離心15min后，取上清液在121°C高壓濕熱滅菌20min制成粗提液，所 獲無菌濾液為稻曲病菌粗毒素； (2. 2)對選取的待改良粳稻品種/系進(jìn)行粗毒素耐力濃度鑒定：分別在分化培養(yǎng)基中 加入一定梯度濃度的粗毒素提取液，然后將步驟（1)中選定的待改良粳稻品種/系誘導(dǎo)培 養(yǎng)的花藥愈傷組織轉(zhuǎn)移進(jìn)分化培養(yǎng)基，誘導(dǎo)培養(yǎng)30?40天后統(tǒng)計(jì)愈傷組織分化率，并選擇 合適篩選壓力水平濃度的粗毒素提取液作為三交Fl雜交種花藥培養(yǎng)粗毒素選擇壓濃度。
[0018] 所述步驟（2. 2)中的合適篩選壓力水平濃度是指選定的待改良粳稻品種/系誘導(dǎo) 培養(yǎng)的花藥愈傷組織在含有粗毒素的分化培養(yǎng)基中的分化率為〇. 8%?1. 2%時(shí)的粗毒素濃 度。
[0019] 所述步驟（2. 1)中的平面擴(kuò)繁培養(yǎng)基配方為：酵母膏2. 5g/L+可溶性淀粉10g/L+ 瓊脂粉16g/L，pH值為6. 0 ;PDA液體培養(yǎng)基配方為馬鈴薯200g/L+葡萄糖20g/L+瓊脂17g/ L，pH值為6. 5 ;所述步驟（2. 2)中的分化培養(yǎng)基配方為：MS基本培養(yǎng)基+2mg/L6-BA+0. 2mg/ LNAA+梯度濃度粗毒素提取液，分化培養(yǎng)基的pH值為6. 0。
[0020] 所述步驟（4)中的三交Fl雜交種的花藥愈傷組織誘導(dǎo)率低于3%時(shí)，需將三交Fl 雜交種與粳稻親本回交獲得BClFl雜交種，BClFl雜交種正季播種，選取健壯主穗重新進(jìn) 行排秈培養(yǎng)基花藥誘導(dǎo)培養(yǎng)，直至獲得誘導(dǎo)率不低于3%的花藥愈傷組織，挑選直徑0. 4? 0. 8cm的花藥愈傷組織接種于添加粗毒素選擇壓的分化培養(yǎng)基，在溫度27?29°C、光14h/ 暗IOh的條件下培養(yǎng)，獲得花培幼苗，待花培苗長至2cm之后轉(zhuǎn)接于生根培養(yǎng)基進(jìn)行繼代培 養(yǎng)，待花培苗長至8cm后移栽至周轉(zhuǎn)箱壯苗，10?15天后移栽入大田。
[0021] 所述步驟（4)中的排秈培養(yǎng)基配方為：N6大量元素+N6微量元素+N6有機(jī)質(zhì)+2mg/ L2, 4-D+O. 5mg/LNAA+0. 5mg/L水解蛋白+5%蔗糖+0? 8%植物凝膠，排秈培養(yǎng)基的pH值為 5. 8 ;分化培養(yǎng)基配方為：MS無機(jī)鹽+MS有機(jī)物+蔗糖3%+瓊脂0. 7%+KT2. 0mg/L+NAA0. 5mg/ L+水解蛋白lg/L+合適篩選壓力水平濃度的粗毒素提取液，分化培養(yǎng)基的pH值為5. 8 ;生 根培養(yǎng)基配方為：l/2Ms大量+Ms微量+Ms有機(jī)物+蔗糖3%+瓊脂0. 8%，生根培養(yǎng)基的pH 值為5. 8。
[0022] 本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)有如下優(yōu)點(diǎn)： 本發(fā)明的育種方法與常規(guī)育種方法相比，能夠?qū)⒍i稻稻曲病抗性特定而高效地導(dǎo)入粳 稻，大大減少了篩選工作量，3年左右即可完成育種，顯著縮短常規(guī)抗稻曲病育種周期；與 分子技術(shù)育種相比，又具有操作門檻相對較低、花費(fèi)較少且育種周期縮短的優(yōu)點(diǎn)，具有較大 的育種應(yīng)用價(jià)值。
【附圖說明】
[0023] 附圖1為本發(fā)明的育種方法技術(shù)路線圖。
【具體實(shí)施方式】
[0024] 下面結(jié)合附圖1與實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
[0025] 如圖1的技術(shù)路線圖所示：一種秈稻稻曲病抗性高效導(dǎo)入粳稻的育種方法，該育 種方法的步驟如下： (1)選取待改良粳稻品種/系和抗稻曲病秈稻抗源： 選取農(nóng)藝性狀良好的粳稻品種/系，因?yàn)槎i粳交雜種Fl代通常具有株高偏高、生育期 超親晚熟的特點(diǎn)，故該農(nóng)藝性狀良好的粳稻品種/系是指產(chǎn)量高、米質(zhì)優(yōu)良、稻曲病抗性有 待改良的以及株高不宜過高、生育期早熟或中熟的粳稻品種/系；然后對選取的粳稻品種/ 系進(jìn)行排秈培養(yǎng)基的誘導(dǎo)培養(yǎng)，以檢驗(yàn)該粳稻品種/系是否適用于排秈培養(yǎng)基中進(jìn)行花藥 誘導(dǎo)愈傷組織，誘導(dǎo)培養(yǎng)的過程如下：（I. 1)取材與預(yù)處理：將選取的農(nóng)藝性狀良好的粳稻 品種/系大田常規(guī)栽培，取葉枕距為5?7cm、穗色呈淡黃綠色、花藥淡黃色且長度約為穎殼 的1/3?1/