一種香石竹組培快繁方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)生物技術(shù)中植物組織培養(yǎng)的方法，具體地說，涉及一種香石竹組培快繁方法。
【背景技術(shù)】
[0002]香石竹(Di an thus caryopHyllus Z),又名康乃馨,為石竹科石竹屬多年生宿根草本花卉，憑借其生產(chǎn)性高，觀賞性好，耐貯運等優(yōu)點，成為當今世界上栽培最普遍的商品切花的主栽品種之一。這些年，香石竹憑借其獨有的特性，深受廣大消費者喜愛，被廣泛用于各類禮品裝飾、高檔花卉之中。1910年我國從荷蘭引種栽培，經(jīng)過長期的發(fā)展，我國己成為香石竹切花生產(chǎn)國大國之一。目前，上海、云南則成為我國香石竹種苗的繁育中心，主要從荷蘭、以色列、德國和法國引進香石竹品種母本苗，經(jīng)篩選，建立育苗體系，培育壯苗。除此之外，江蘇、浙江、北京、寧夏等地也有一定的香石竹生產(chǎn)面積，并向適栽區(qū)規(guī)?；l(fā)展。但我國目前的香石竹品種主要從國外引進，這種方式雖能跟上世界香石竹品種的流行趨勢，但生產(chǎn)成本高，常受制于人，所以我們還應(yīng)加強香石竹育種的研究開發(fā)，育出適合我國氣候條件、抗病抗逆、觀賞價值高的，具有我國自主知識產(chǎn)權(quán)的香石竹新品種。利用優(yōu)質(zhì)的種苗，標準化的栽培管理技術(shù)，生產(chǎn)出符合國際花卉市場標準的香石竹鮮切花，批量出口國外，參與到國際市場的競爭。
[0003]香石竹種苗的繁殖常用采用傳統(tǒng)的扦插方式，隨著繁殖代數(shù)的不斷增加，易在植株體內(nèi)積累病毒，從而降低香石竹的產(chǎn)量和品質(zhì)。為滿足生產(chǎn)過程中對香石竹品質(zhì)及品種多樣性的需求，通常采用組織培養(yǎng)技術(shù)進行種苗的快繁來滿足市場的需求，不僅能保持植物親本優(yōu)良性狀，在短期內(nèi)獲得大量優(yōu)質(zhì)種苗，而且也是有效克服病毒的重要措施。因此，本發(fā)明以香石竹側(cè)芽為外植體，通過不定芽誘導培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗移栽等過程成功獲得了香石竹離體再植株，建立香石竹組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)體系，以促進香石竹組培苗規(guī)模化生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供出一種香石竹組培快繁方法，本發(fā)明以香石竹側(cè)芽為外植體，通過不定芽誘導培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗移栽等過程成功獲得了香石竹離體再植株，建立香石竹組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)體系，從而實現(xiàn)了本發(fā)明的目的。
[0005]本發(fā)明的一種香石竹組培快繁方法，包括以下的步驟:
(I)誘導培養(yǎng):取生長健壯的側(cè)芽，去除葉片，在超凈工作臺上用75%酒精消毒30?60s,再0.1%升萊溶液消毒8?15min,最后用無菌水漂洗3?5次。消毒后，在雙目解剖鏡下，用解剖刀將外部的嫩葉莖基部完全剝?nèi)?，讓莖尖充分暴露，將莖尖切下，長度為0.3?0.5mm,帶有2?4個葉原基，切后迅速接種于誘導培養(yǎng)基進行不定芽誘導培養(yǎng)。接種后置于每天光照24小時，光照強度為1000?20001x，置于培養(yǎng)溫度為25?28°C，空氣相對濕度為75%?80%的條件下培養(yǎng)14天后統(tǒng)計污染率，30天后統(tǒng)計誘導率。
[0006](2)增殖培養(yǎng):將誘導所得到的長至2cm左右的叢生芽再分割成2?3個芽的芽叢接種到增殖培養(yǎng)基上進行繼代培養(yǎng)。接種后置于每天光照12?14小時，光照強度為1000?20001X，置于培養(yǎng)溫度為25?28°C，空氣相對濕度為75%?80%的條件下培養(yǎng)30天后統(tǒng)計增殖情況。
[0007](3)生根培養(yǎng):將芽增殖培養(yǎng)基中I?4cm長的正常生長的新芽切下并接種至生根培養(yǎng)基中進行誘導生根。接種后置于每天光照12?14小時，光照強度為2000?30001x，置于培養(yǎng)溫度為25?28°C，空氣相對濕度為75%?80%的條件下培養(yǎng)30天后統(tǒng)計生根情況。
[0008](4)煉苗移栽:將香石竹試管苗平均長出3?5條大于3cm長的健壯粗根后，將組培苗的瓶蓋打開，附上濕潤報紙，讓小苗適應(yīng)移栽后的溫度和環(huán)境變化，3?5天后將生長健壯的小苗用鑷子輕輕取出，在自來水中洗凈粘附在根上的培養(yǎng)基，將小苗移栽入已消毒好的由園土:泥炭土:腐殖質(zhì)=2:1:1混合成的基質(zhì)中，蓋上塑料薄膜，定時澆水，平均每3?5天澆水一次，注意空氣溫度的調(diào)控，移栽30天后統(tǒng)計成活率。
[0009]上述步驟(I)所述的誘導培養(yǎng)基為:改良MS (Mg和Fe加倍)+0.I?0.5mg/LNAA+1.0 ?2.0mg/L 6-BA+0.5 ?1.0mg/LKT+15 ?30g/L 蔗糖 +3.5 ?6.0g/L 瓊脂，pH 為5.4 ?5.8。
[0010]上述步驟(2)所述的增殖培養(yǎng)基為:MS+1.0?2.0mg/L TDZ+0.1?0.5mg/LΚΤ+0.1 ?0.5mg/LNAA+15 ?30g/L 蔗糖 +3.5 ?6.0g/L 瓊脂，pH 為 5.4 ?5.8。
[0011]上述步驟(3)所述的生根培養(yǎng)基為:l/2MS+0.1?1.0mg/LIBA+0.5?1.0%活性炭+15 ?30g/L 鹿糖 +3.5 ?6.0g/L 瓊脂，pH 為 5.4 ?5.8。
[0012]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比的有益效果是:香石竹種苗的繁殖常用采用傳統(tǒng)的扦插方式，隨著繁殖代數(shù)的不斷增加，易在植株體內(nèi)積累病毒，從而降低香石竹的產(chǎn)量和品質(zhì)。為滿足生產(chǎn)過程中對香石竹品質(zhì)及品種多樣性的需求，通常采用組織培養(yǎng)技術(shù)進行種苗的快繁來滿足市場的需求，不僅能保持植物親本優(yōu)良性狀，在短期內(nèi)獲得大量優(yōu)質(zhì)種苗，而且也是有效克服病毒的重要措施。因此，本發(fā)明以香石竹側(cè)芽為外植體，通過不定芽誘導培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗移栽等過程成功獲得了香石竹離體再植株，建立香石竹組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)體系，以促進香石竹組培苗規(guī)?；a(chǎn)。
【具體實施方式】
[0013]以下實施例是對本發(fā)明的進一步說明，不是對本發(fā)明的限制。
[0014]實施例1
(I)誘導培養(yǎng):取生長健壯的側(cè)芽，去除葉片，在超凈工作臺上用75%酒精消毒30s，再0.1%升汞溶液消毒8min,最后用無菌水漂洗3次。消毒后，在雙目解剖鏡下，用解剖刀將外部的嫩葉莖基部完全剝?nèi)ィ屒o尖充分暴露，將莖尖切下，長度為0.3?0.5mm,帶有2?4個葉原基，切后迅速接種于誘導培養(yǎng)基進行不定芽誘導培養(yǎng)。接種后置于每天光照24小時，光照強度為ΙΟΟΟΙχ，置于培養(yǎng)溫度為25°C，空氣相對濕度為75%的條件下培養(yǎng)14天后污染率3.9%，培養(yǎng)30天后誘導率為95.38%。所述的誘導培養(yǎng)基為:改良MS (Mg和Fe 加倍)+0.3mg/LNAA+l.5mg/L 6-BA+0.7mg/LKT+26g/L 蔗糖 +5.0g/L 瓊脂，pH 為 5.5。
[0015](2)增殖培養(yǎng):將誘導所得到的長至2cm左右的叢生芽再分割成2?3個芽的芽叢接種到增殖培養(yǎng)基上進行繼代培養(yǎng)。接種后置于每天光照12小時，光照強度為ΙΟΟΟΙχ，置于培養(yǎng)溫度為25°C，空氣相對濕度為75%的條件下培養(yǎng)30天后增殖系數(shù)為3.54。所述的增殖培養(yǎng)基為:MS+L 4mg/L TDZ+0.2mg/L KT+0.3mg/LNAA+25g/L 蔗糖 +4.5g/L 瓊脂，pH為 5.5。