個試管中接入羊肚菌菌絲，置于23°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，直至生長成母種；
母種的制作時試管中接入的羊肚菌菌絲的制作方法具體為:采收新鮮的羊肚菌你子實體，并將子實體切成2mm的菌塊，讓將菌塊放置于PDA培養(yǎng)基上，將PDA培養(yǎng)基置于23°C的培養(yǎng)箱中，8天后即獲得羊肚菌菌絲；
(2)原種的制作及培養(yǎng)；
原種的培養(yǎng)料按質量份數(shù)計包括以下組分，玉米:60份，小麥:55份，稻谷:20份；玉米、小麥、稻谷均選用顆粒飽滿、無蟲蛀、無霉變的玉米、小麥、稻谷并除塵備用；
原種的培養(yǎng)料的制作工藝流程為:稱量-浸泡-煮料-瀝干-分裝-封口-滅菌-無菌檢驗-接種-培養(yǎng)，其中:
稱量，分別稱取選用的玉米、小麥、稻谷；
浸泡，將玉米、小麥、稻谷分別進行浸泡，玉米浸泡34h，且每隔5h換一次水，小麥浸泡4h，稻谷浸泡2h ；
煮料，將浸泡好的玉米、小麥、稻谷分別置于鍋中加熱水煮，直至玉米、小麥、稻谷的種皮剛破裂，然后撈出，瀝干去多余的水分；
分裝，將瀝干后的玉米、小麥、稻谷裝入10ml的廣口瓶中，每瓶裝入量折合干重為
40g ；
封口，將分裝好的廣口瓶用1cmXlOcm的聚丙烯雙層膜封住瓶孔，在聚丙烯雙層膜對著廣口瓶瓶口位置剪開一個直徑為1.5cm的孔，并用兩層牛皮紙封住，用線繩固定封口 ；滅菌，將封口后的廣口瓶在120°C下滅菌20h，然后采用冷空氣冷卻；
無菌檢驗，將滅菌過后的培養(yǎng)料置于恒溫箱中培養(yǎng)I天，若無菌生長則滅菌徹底可使用；若有菌生長，滅菌不徹底，從新滅菌直至無菌檢驗成功；
接種，在無菌條件下，將制備好的母種按每瓶接種量為3g接種到培養(yǎng)料的試管中，將接好的菌種置于23°C下恒溫培養(yǎng)；
(3)羊肚菌菌種的制作及培養(yǎng)；
按質量份數(shù)計選用玉米芯:78份，小麥粒子:15份，木肩:15份，過磷酸鈣:2份，尿素:2份，作為羊肚菌菌種的培養(yǎng)料，將培養(yǎng)料中的玉米芯、小麥粒子、木肩、過磷酸鈣、尿素攪拌均勻，保持含水量75%，然后裝入聚丙烯袋中封口 ；
將封口的聚丙烯袋放入滅菌鍋內滅菌，常壓下100°C保存lh，取出冷卻至室溫； 將裝有羊肚菌菌種培養(yǎng)料的聚丙烯袋和原種培養(yǎng)料一并置于接種箱中，并密封lh，將原種接入到裝有羊肚菌菌種培養(yǎng)料的聚丙烯袋中，并送入培養(yǎng)室，控制培養(yǎng)室的溫度為23°C，培養(yǎng)15天獲得羊肚菌栽培菌種。
[0014]實施例3
本實施例提供一種羊肚菌菌種的制備工藝，該制備工藝菌體包括以下步驟:
(1)母種的制作及培養(yǎng)；
按質量份數(shù)計母種培養(yǎng)基由55份的土豆，8份的瓊脂，0.8份的維生素B劑7份的葡萄糖組成，將土豆、瓊脂、維生素B及葡萄糖全部放入1500ml的水中加熱，直至加入水中的瓊脂全部煮化即得到母種培養(yǎng)基待用；
用250ml的試管取制作出的母種培養(yǎng)基150ml，用棉花塞住試管開口端，將試管放在130°C下的高壓滅菌鍋內滅菌lh，然后自然冷卻至室溫，將試過放入密封的無菌接種箱中，每個試管中接入羊肚菌菌絲，置于20°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，直至生長成母種；
母種的制作時試管中接入的羊肚菌菌絲的制作方法具體為:采收新鮮的羊肚菌你子實體，并將子實體切成2mm的菌塊，讓將菌塊放置于PDA培養(yǎng)基上，將PDA培養(yǎng)基置于21 °C的培養(yǎng)箱中，7天后即獲得羊肚菌菌絲；
(2)原種的制作及培養(yǎng)；
原種的培養(yǎng)料按質量份數(shù)計包括以下組分，玉米:60份，小麥:60份，稻谷:15份；玉米、小麥、稻谷均選用顆粒飽滿、無蟲蛀、無霉變的玉米、小麥、稻谷并除塵備用；
原種的培養(yǎng)料的制作工藝流程為:稱量-浸泡-煮料-瀝干-分裝-封口-滅菌-無菌檢驗-接種-培養(yǎng)，其中:
稱量，分別稱取選用的玉米、小麥、稻谷；
浸泡，將玉米、小麥、稻谷分別進行浸泡，玉米浸泡32h，且每隔5h換一次水，小麥浸泡4h，稻谷浸泡3h ；
煮料，將浸泡好的玉米、小麥、稻谷分別置于鍋中加熱水煮，直至玉米、小麥、稻谷的種皮剛破裂，然后撈出，瀝干去多余的水分；
分裝，將瀝干后的玉米、小麥、稻谷裝入10ml的廣口瓶中，每瓶裝入量折合干重為
38g ；
封口，將分裝好的廣口瓶用1cmXlOcm的聚丙烯雙層膜封住瓶孔，在聚丙烯雙層膜對著廣口瓶瓶口位置剪開一個直徑為1.5cm的孔，并用兩層牛皮紙封住，用線繩固定封口 ；滅菌，將封口后的廣口瓶在130°C下滅菌25h，然后采用冷空氣冷卻；
無菌檢驗，將滅菌過后的培養(yǎng)料置于恒溫箱中培養(yǎng)3天，若無菌生長則滅菌徹底可使用；若有菌生長，滅菌不徹底，從新滅菌直至無菌檢驗成功；
接種，在無菌條件下，將制備好的母種按每瓶接種量為4g接種到培養(yǎng)料的試管中，將接好的菌種置于24°C下恒溫培養(yǎng)；
(3)羊肚菌菌種的制作及培養(yǎng)；
按質量份數(shù)計選用玉米芯:78份，小麥粒子:10份，木肩:12份，過磷酸鈣:3份，尿素:2份，作為羊肚菌菌種的培養(yǎng)料，將培養(yǎng)料中的玉米芯、小麥粒子、木肩、過磷酸鈣、尿素攪拌均勻，保持含水量為78%，然后裝入聚丙烯袋中封口 ；
將封口的聚丙烯袋放入滅菌鍋內滅菌，常壓下105°C保存3h，取出冷卻至室溫； 將裝有羊肚菌菌種培養(yǎng)料的聚丙烯袋和原種培養(yǎng)料一并置于接種箱中，并密封0.8h，將原種接入到裝有羊肚菌菌種培養(yǎng)料的聚丙烯袋中，并送入培養(yǎng)室，控制培養(yǎng)室的溫度為21°C，培養(yǎng)13天獲得羊肚菌栽培菌種。
[0015]除上述實施例外，本發(fā)明還可以有其他實施方式。凡采用等同替換或等效變換形成的技術方案，均落在本發(fā)明要求的保護范圍。
【主權項】
1.一種羊肚菌菌種的制備工藝，其特征在于，該制備工藝菌體包括以下步驟: (1)母種的制作及培養(yǎng)； 按質量份數(shù)計母種培養(yǎng)基由50-60份的土豆，8-14份的瓊脂，0.5-0.8份的維生素B劑5-7份的葡萄糖組成，將土豆、瓊脂、維生素B及葡萄糖全部放入1500ml的水中加熱，直至加入水中的瓊脂全部煮化即得到母種培養(yǎng)基待用； 用250ml的試管取制作出的母種培養(yǎng)基150ml，用棉花塞住試管開口端，將所述的試管放在115-130°C下的高壓滅菌鍋內滅菌l_2h，然后自然冷卻至室溫，將所述試過放入密封的無菌接種箱中，每個試管中接入羊肚菌菌絲，置于20-23?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，直至生長成母種； (2)原種的制作及培養(yǎng)； 原種的培養(yǎng)料按質量份數(shù)計包括以下組分，玉米:60-75份，小麥:50-60份，稻谷:15-20 份； 原種的培養(yǎng)料的制作工藝流程為:稱量-浸泡-煮料-瀝干-分裝-封口-滅菌-無菌檢驗-接種-培養(yǎng)，其中: 稱量，分別稱取選用的玉米、小麥、稻谷； 浸泡，將玉米、小麥、稻谷分別進行浸泡，玉米浸泡30-34h，且每隔5h換一次水，小麥浸泡3-4h，稻谷浸泡l-3h ； 煮料，將浸泡好的玉米、小麥、稻谷分別置于鍋中加熱水煮，直至玉米、小麥、稻谷的種皮剛破裂，然后撈出，瀝干去多余的水分； 分裝，將瀝干后的玉米、小麥、稻谷裝入10ml的廣口瓶中，每瓶裝入量折合干重為35-40g ； 封口，將分裝好的廣口瓶用1cmXlOcm的聚丙烯雙層膜封住瓶孔，在聚丙烯雙層膜對著廣口瓶瓶口位置剪開一個直徑為1.5cm的孔，并用兩層牛皮紙封住，用線繩固定封口 ；滅菌，將封口后的廣口瓶在120-130°C下滅菌20-25h，然后采用冷空氣冷卻； 無菌檢驗，將滅菌過后的培養(yǎng)料置于恒溫箱中培養(yǎng)1-3天，若無菌生長則滅菌徹底可使用；若有菌生長，滅菌不徹底，從新滅菌直至無菌檢驗成功； 接種，在無菌條件下，將制備好的母種按每瓶接種量為2-4g接種到培養(yǎng)料的試管中，將接好的菌種置于23-25°C下恒溫培養(yǎng)； (3)羊肚菌菌種的制作及培養(yǎng)； 按質量份數(shù)計選用玉米芯:75-80份，小麥粒子:10-15份，木肩:10-15份，過磷酸鈣:1-3份，尿素:1-2份，作為羊肚菌菌種的培養(yǎng)料，將培養(yǎng)料中的玉米芯、小麥粒子、木肩、過磷酸鈣、尿素攪拌均勻，保持含水量為75-80%，然后裝入聚丙烯袋中封口 ； 將封口的聚丙烯袋放入滅菌鍋內滅菌，常壓下100-108°C保存l_3h，取出冷卻至室溫； 將裝有羊肚菌菌種培養(yǎng)料的聚丙烯袋和原種培養(yǎng)料一并置于接種箱中，并密封0.5-lh，將原種接入到裝有羊肚菌菌種培養(yǎng)料的聚丙烯袋中，并送入培養(yǎng)室，控制培養(yǎng)室的溫度為20-23°C，培養(yǎng)13-15天獲得羊肚菌栽培菌種。
2.根據(jù)權利要求1所述的羊肚菌菌種的制備工藝，其特征在于:所述原種培養(yǎng)料中的玉米、小麥、稻谷均選用顆粒飽滿、無蟲蛀、無霉變的玉米、小麥、稻谷并除塵備用。
3.根據(jù)權利要求1所述的羊肚菌菌種的制備工藝，其特征在于:步驟(I)在母種的制作時試管中接入的羊肚菌菌絲的制作方法具體為:采收新鮮的羊肚菌你子實體，并將子實體切成l-2mm的菌塊，讓將菌塊放置于PDA培養(yǎng)基上，將所述的PDA培養(yǎng)基置于20_23°C的培養(yǎng)箱中，5-8天后即獲得羊肚菌菌絲。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種羊肚菌菌種的制備工藝，該制備工藝菌體包括以下步驟：母種的制作及培養(yǎng)-原種的制作及培養(yǎng)-羊肚菌菌種的制作及培養(yǎng)；本發(fā)明制備工藝，操作簡單易行，成本低，制備出的菌種菌絲生長快，菌絲粗壯濃密，提高了羊肚菌種植的存活率和產量。
【IPC分類】C05G3-00, A01G1-04
【公開號】CN104838883
【申請?zhí)枴緾N201510192817
【發(fā)明人】王明義, 黃名珠
【申請人】吳中區(qū)胥口精益生物醫(yī)藥研究所
【公開日】2015年8月19日
【申請日】2015年4月22日...