一種防治煙草花葉病毒病的植物源殺菌劑及制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種植物源農(nóng)藥，尤其涉及一種由細(xì)辛、丁香、藜蘆、瑞香狼毒四種植 物中提取活性成分混合后制備的植物源殺菌劑，以及該殺菌劑的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 由植物病毒引起的病毒病，是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的一類重要病害，煙草花葉病毒（TMV)每 年造成的經(jīng)濟(jì)損失就超過1億美元。由于病毒在植物細(xì)胞內(nèi)絕對寄生，其復(fù)制所需的能量、 物質(zhì)、場所完全由寄主細(xì)胞提供，加之植物沒有完整的免疫代謝系統(tǒng)，這使得植物病毒病的 防治更加困難，并且目前所使用的化學(xué)抗病毒劑只能在一定程度上起到延緩或減輕病毒病 癥狀的作用，不能根除病毒，對植物病毒病治療效果甚微，因此植物病毒病的防治一直是植 物病害及病毒學(xué)研宄的難點(diǎn)和熱點(diǎn)問題。
[0003] 植物源農(nóng)藥以其獨(dú)特的優(yōu)勢，成為天然抗病毒活性物質(zhì)研宄的主要來源，也使發(fā) 展新型植物源抗病毒類植物源農(nóng)藥己越來越受到人們重視。我國從80年代后期至今，許多 學(xué)者做了大量的工作，到目前發(fā)現(xiàn)含有植物病毒抑制物質(zhì)的植物有幾十種，但均未成為商 品。
[0004] 目前，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中防治病毒病主要還是通過選育抗病品種、種子消毒、加強(qiáng)田間管 理(農(nóng)事操作和傳播媒介)等措施。常用的一些化學(xué)藥劑效果不佳，還容易帶來環(huán)境污染、易 產(chǎn)生抗藥性等弊端。鑒于此，本發(fā)明從植物中提取有效成分，按不同比例制成防治煙草花葉 病毒病的藥劑，從而為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)更好的服務(wù)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種防治煙草花葉病毒病的植物源殺菌劑，本 發(fā)明的植物源殺菌劑具有高效、低毒、低殘留、與環(huán)境和協(xié)、提高寄主免疫力的特點(diǎn)。本發(fā)明 還公開了該植物源殺菌劑的制備方法。
[0006]本發(fā)明防治煙草花葉病毒病的植物源殺菌劑由細(xì)辛Miq)全株、丁香（5知7於? 花蕾、藜蘆（Kerat??? L)全株、和瑞香狼毒 (SteWera L.)根四種植物的混合提取物以及助劑和溶劑制成。
[0007] 本發(fā)明防治煙草花葉病毒病的植物源殺菌劑的制備方法包括如下步驟： (1) 將細(xì)辛全株、丁香花蕾、藜蘆全株、瑞香狼毒根四種植物不同部位分別烘干、粉碎通 過20-40目篩，備用； (2) 將（1)制備的原料按質(zhì)量份分別稱取細(xì)辛1 一 3、丁香3 - 12、藜蘆5 - 8、瑞香 狼毒6 - 15,混合均勻后倒入提取罐，加入4-7倍原料質(zhì)量份的有機(jī)溶劑，攪拌中加熱至 40-60°C，回流提取4-6小時或恒溫浸提5-8小時，備處理； (3)將（2)制備的提取液減壓濃縮后得到膏狀物，備用； (4)將（3)制備的膏狀物質(zhì)量1-3倍的助劑與膏狀物混合均勻后，再加入膏狀物質(zhì)量 100-300倍的20%乙醇溶液或水，制成防治煙草花葉病毒病的植物源殺菌劑。
[0008] 所述的有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇或丙酮的一種或幾種有機(jī)溶劑的混合液。
[0009]所述的助劑為吐溫類，如吐溫80。
[0010] 所述的植物細(xì)辛（Asar腫Miq)為馬兜鈴科、細(xì)辛屬多年生草本；是我 國特有的傳統(tǒng)中藥。中醫(yī)用于治療風(fēng)寒頭痛、關(guān)節(jié)疼痛、鼻塞及口腔糜爛等。細(xì)辛所含的 揮發(fā)油對黃曲霉（5/7.)、黑曲霉（5/7.)、白色念珠菌（t/a 5/7.)、傷寒桿菌（免辦5/7.)有抑菌作用；對黑斑病菌（^teraaria /7a/?ar)、疫病菌 (/%_7(〇/7力從cactora?)和番前灰霉病菌ciflerea)等植物病原真菌均有較好 的抗菌效果。
[0011] 丁香（aro?a (ictt?)為桃金娘科植物丁香（ Thunb)的干燥花蕾，又稱公丁香。丁香味辛性溫，用于治療脾胃虛寒、呃逆嘔吐、食少吐瀉、 心腹冷痛和腎虛陽瘺；丁香含揮發(fā)油（即丁香油)，油中主要成分為丁香酚，具有消炎、殺菌、 驅(qū)蟲、鎮(zhèn)痛等功效，尤其以丁香花蕾為原料提取的揮發(fā)油其效果更加突出。
[0012] 藜蘆（Veratrum nigrum L)屬多年生草本植物。別名大葉蘆，山蔥。性味辛、苦， 寒；有毒。其主要活性成分為生物堿，如藜蘆堿等，有催吐，祛痰，殺蟲抑菌的功能。
[0013] 瑞香狼毒（SteJrJrera cAaffiaej'as?? L.)屬瑞香科狼毒屬植物。以根入藥，含有黃 酮類化合物、香豆素類化合物、二萜類物質(zhì)和木脂體類成分等，其主要活性成分為狼毒素， 屬黃酮類物質(zhì)，具有殺蟲抑菌作用。
[0014] 本發(fā)明的防治煙草花葉病毒病的植物源殺菌劑的藥效試驗(yàn) 1、室內(nèi)盆栽藥效實(shí)驗(yàn) I. 1供試殺菌劑的制備 (1) 將細(xì)辛全株、丁香花蕾、藜蘆全株、瑞香狼毒根四種植物不同部位分別烘干、粉碎通 過30目篩，備用； (2) 將（1)制備的原料按質(zhì)量份分別稱取細(xì)辛2、丁香8、藜蘆6、瑞香狼毒10,混合均 勻后倒入提取罐，加入5倍原料質(zhì)量份的乙醇，熱回流提取5小時，備處理； (3) 將（2)制備的提取液，減壓濃縮后得到膏狀物，備用； (4) 將（3)制備的植物提膏狀物加入膏狀物質(zhì)量2倍的吐溫80,混合均勻后，再加入膏 狀物質(zhì)量300倍的凈水，制成防治煙草花葉病毒病的植物源殺菌劑。
[0015] 試驗(yàn)方法 保護(hù)作用試驗(yàn)選擇5-6葉期，長勢一致、健壯的植株供試。試驗(yàn)以施藥后Id接種TMV 的番茄苗為處理組，分別用供試藥劑300倍液進(jìn)行噴霧以及灌根，只接種不施藥的番茄苗 為空白對照組。TMV接種濃度為1:20 (W/V)。接種后14d、30d檢查番茄葉片上的枯斑數(shù)， 計(jì)算抑制率。每處理20株苗，試驗(yàn)重復(fù)3次。
[0016] 治療作用試驗(yàn)以接種TMV后施藥的為處理組，以只接種不施藥對照組。接種毒 源TMV，接種濃度為1:20 (W/V)，接種后5d進(jìn)行藥劑處理。處理為供試藥劑300倍液噴霧 和灌根，分別于用藥后14d、30d檢查番茄新生葉片上的枯斑數(shù)，計(jì)算抑制率。每處理20株 苗，試驗(yàn)重復(fù)3次。
[0017] 抑制率=(對照平均枯斑數(shù)-處理平均枯斑數(shù)）/對照平均枯斑數(shù)X 100 1. 3結(jié)果與分析 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下表1、表2。
[0018] 表1本發(fā)明殺菌劑對番茄病毒病保護(hù)作用測定結(jié)果
從表1和2可以看出，在保護(hù)作用中，以不同方式處理后，其14天對TMV的抑制效果都 在90%以上；而在治療作用中，以灌根方式更為有效，30天后的抑率仍有86. 97%。
[0019]保護(hù)作用是指噴藥后對病害發(fā)生情況影響，而治療作用是指作物感染病毒后藥物 對其的治療作用，從本實(shí)驗(yàn)來看地，保護(hù)作用在14天時比較明顯，治療作用以灌根方式更 為有效，這也表明本藥劑對TMV有很好的抑制作用，且持效期較長，可達(dá)30天左右。
[0020] 、田間藥效實(shí)驗(yàn) 2. 1試驗(yàn)方法 試驗(yàn)在山西省晉中市太谷縣山西農(nóng)業(yè)大學(xué)進(jìn)行，小區(qū)試驗(yàn)隨機(jī)區(qū)組排列，小區(qū)面積100 m2。試驗(yàn)田為連作露地番茄，管理水平一般，番茄花葉病毒病中度發(fā)生。試驗(yàn)于2014年6 月18號開始處理，將上述制備好的藥劑稀釋300倍，采用田間小區(qū)試驗(yàn)方法進(jìn)行噴霧和噴 霧加灌根處理，并設(shè)化學(xué)藥劑對照和清水