、生長健壯、無污染的繼代培養(yǎng)的瓶苗作為生根培養(yǎng)的種苗，放到無菌的鉛墊板上用攝子鉗住愈傷組織，用剪刀把苗上的葉子剪掉，再按一芽一段剪斷，要求基部比頂部長，然后按照基部、莖段、頂芽分別均勻插到不同培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，每瓶接10株；
[0048]生根苗的培養(yǎng)前期:25°C，暗培養(yǎng)5d，濕度85% ;中期:28°C，光照1800LX，每天光照12h，濕度85% ;后期:25°C，光照1500LX，每天光照12匕濕度85%。1d后均可陸續(xù)生根；
[0049](6)煉苗:
[0050]組培生根苗長出約0.5cm長后，搬到大棚內(nèi)進行練苗；初搬到大棚前2d不能讓強光直射小苗；2?3d后把瓶蓋打開，開蓋后馬上噴水保濕以防萎蔫，噴水后用濕報紙蓋上。2d后把報紙適當掀開，但仍然要避免強光直射，1d后即可移栽；
[0051](7)移栽
[0052]①大棚采用生石灰粉進行地面消毒，大棚四壁及棚頂采用吡蟲啉、菊脂類農(nóng)藥、甲基托布津三種農(nóng)藥混合溶液噴灑；
[0053]②營養(yǎng)土裝杯用塘泥作培養(yǎng)基質(zhì)，裝入7cmX6cm的營養(yǎng)杯中，然后用500倍的多菌靈溶液淋透消毒；
[0054]③洗苗將選出來的正常苗放到水里，清洗粘附在基部的培養(yǎng)基，把洗好的苗放到500倍的多菌靈液中浸泡5s，再用800倍生根粉液浸泡15min。
[0055]④種植用勺子把泥土挖起來后，把處理好的苗基部放進坑里再把泥土蓋回來，立即淋透水，然后蓋上薄膜成小拱棚以保溫保濕。
[0056](8)大棚育苗
[0057]①殺菌成活前要對小苗進行殺菌，每個早上揭膜噴灑多菌靈水溶液，給小苗殺菌補水，以抑制雜菌滋生；
[0058]②保溫2月份室外氣溫低，需要大棚保溫，在大棚內(nèi)再搭小拱棚保溫；
[0059]③光照2月份陽光不是很強烈，但小苗受不了陽光的強烈照射，出太陽時要蓋遮陽網(wǎng)以防灼傷小苗。初期管理要特別細心、認真，隨時觀察天氣的變化和小苗的生長況狀，及時采取適當措施管理；
[0060]④揭膜小苗成活后便進入生長中期，溫度相對穩(wěn)定的白天，可以把膜揭開讓其逐步適應大棚內(nèi)環(huán)境，晚上再將膜蓋起來；而到天氣較溫暖時晚上也不需要蓋膜；
[0061]⑤施肥用多得富爾露，磷酸二氫鉀，復合肥等肥料進行追肥；
[0062](9)出棚
[0063]組培苗葉色濃綠、莖粗壯、高6cm以上時就可以開始出圃；用硬竹筐或塑料筐裝運。
[0064]實驗證明，本發(fā)明的羅漢果組培苗繁育方法在無菌的條件下，通過扦插技術(shù)培育出的組培苗，具有帶病少、繁殖快、適應性廣、當年種當年收獲且產(chǎn)量高的特點。
【主權(quán)項】
1.一種羅漢果組培苗繁育方法，其特征在于:該繁育方法包括以下步驟: (1)采集繁殖材料: 選擇在生長健壯、來花及時、易掛果、果大整齊的品種和單株上采集枝條； (2)消毒處理: 剪取約50cm的嫩梢，在組培室工作臺上用無菌水沖洗后浸入75%酒精溶液中消毒5s，然后浸入0.1 %升汞溶液中消毒lOmin，取出后再用無菌水沖洗干凈； (3)莖尖脫毒培養(yǎng): 配制培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基用MS+BA1.0mg/L+IAA0.lmg/L+瓊脂0.35% +蔗糖3%，pH值調(diào)至6，把配制好的培養(yǎng)基進行分裝，每瓶裝約2cm高，擰緊蓋子，高壓滅菌后讓其自然冷卻備用; 切取莖尖分生組織切取0.5?1_的莖尖分生組織，然后接種到培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)； (4)切段繼代培養(yǎng): 配制培養(yǎng)基繼代培養(yǎng)基用 MS+BA0.5mg/L+IAA0.lmg/L+IBA0.5mg/L ； 切段繼代培養(yǎng)當莖尖分生組織培養(yǎng)出的小苗長至6cm高時進行切段，每段帶一個節(jié)間約0.5cm，接種到繼代培養(yǎng)基上進行繼代培養(yǎng)。如此反復繼代5?6次，然后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基上誘導生根。培養(yǎng)室溫度為24?29°C，光照強度800?1200Lx，每天光照12h ； (5)誘導生根培養(yǎng): 配制培養(yǎng)基誘導生根培養(yǎng)基用MS+BA0.03mg/L+NAA0.3mg/L+0.01%活性炭； 接種挑選已培養(yǎng)了 20d以上、生長健壯、無污染的繼代培養(yǎng)的瓶苗作為生根培養(yǎng)的種苗，放到無菌的鉛墊板上用攝子鉗住愈傷組織，用剪刀把苗上的葉子剪掉，再按一芽一段剪斷，要求基部比頂部長，然后按照基部、莖段、頂芽分別均勻插到不同培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，每瓶接10株； 生根苗的培養(yǎng)前期:25°c，暗培養(yǎng)5d，濕度85% ;中期:28°C，光照1800LX，每天光照12h，濕度85% ;后期:25°C，光照1500LX，每天光照12h，濕度85%。1d后均可陸續(xù)生根； (6)煉苗: 組培生根苗長出約0.5cm長后，搬到大棚內(nèi)進行練苗；初搬到大棚前2d不能讓強光直射小苗；2?3d后把瓶蓋打開，開蓋后馬上噴水保濕以防萎蔫，噴水后用濕報紙蓋上。2d后把報紙適當掀開，但仍然要避免強光直射，1d后即可移栽； (7)移栽 ①大棚采用生石灰粉進行地面消毒，大棚四壁及棚頂采用吡蟲啉、菊脂類農(nóng)藥、甲基托布津三種農(nóng)藥混合溶液噴灑； ②營養(yǎng)土裝杯用塘泥作培養(yǎng)基質(zhì)，裝入7cmX6cm的營養(yǎng)杯中，然后用500倍的多菌靈溶液淋透消毒； ③洗苗將選出來的正常苗放到水里，清洗粘附在基部的培養(yǎng)基，把洗好的苗放到500倍的多菌靈液中浸泡5s，再用800倍生根粉液浸泡15min。 ④種植用勺子把泥土挖起來后，把處理好的苗基部放進坑里再把泥土蓋回來，立即淋透水，然后蓋上薄膜成小拱棚以保溫保濕。 (8)大棚育苗 ①殺菌成活前要對小苗進行殺菌，每個早上揭膜噴灑多菌靈水溶液，給小苗殺菌補水，以抑制雜菌滋生； ②保溫2月份室外氣溫低，需要大棚保溫，在大棚內(nèi)再搭小拱棚保溫； ③光照2月份陽光不是很強烈，但小苗受不了陽光的強烈照射，出太陽時要蓋遮陽網(wǎng)以防灼傷小苗。初期管理要特別細心、認真，隨時觀察天氣的變化和小苗的生長況狀，及時采取適當措施管理； ④揭膜小苗成活后便進入生長中期，溫度相對穩(wěn)定的白天，可以把膜揭開讓其逐步適應大棚內(nèi)環(huán)境，晚上再將膜蓋起來；而到天氣較溫暖時晚上也不需要蓋膜。 ⑤施肥用多得富爾露，磷酸二氫鉀，復合肥等肥料進行追肥。 (9)出棚 組培苗葉色濃綠、莖粗壯、高6cm以上時就可以開始出圃；用硬竹筐或塑料筐裝運。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種羅漢果組培苗繁育方法，該繁育方法包括以下步驟：（1）采集繁殖材料、(2)消毒處理、(3)莖尖脫毒培養(yǎng)、(4)切段繼代培養(yǎng)、(5)誘導生根培養(yǎng)、(6)移栽、(7)大棚育苗、(8)出棚；本發(fā)明的羅漢果組培苗繁育方法在無菌的條件下，通過扦插技術(shù)培育出組培苗，本發(fā)明組培苗種植有產(chǎn)量高，病害少的繁殖快、適應性廣、當年種當年收獲且產(chǎn)量高的特點，以往的種薯種植正逐漸被組培苗所替代。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN104920212
【申請?zhí)枴緾N201510290985
【發(fā)明人】農(nóng)守楓
【申請人】廣西大學
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2015年6月1日