以長出來，4-5天白色菌絲長 成，呈小的圓形菌群，直徑在5mm左右是正常的。
[0060] 2)移植：移植的操作步驟：1、將移植器在酒精燈上消毒，消毒距離要長一些，手拿 的手柄也要進(jìn)行消毒。
[0061] 2、去掉培養(yǎng)皿上的封口條，選擇生長較好的菌群進(jìn)行移植
[0062] 3、打開培養(yǎng)皿用消過毒的移植器在選擇的生長較好的菌群上刮一下，移植器上就 帶上菌種
[0063] 4、將移植器伸入試管內(nèi)，在斜面培養(yǎng)基上由內(nèi)向外呈"Z"字型均勻涂抹完整
[0064] 5、移植完成后將試管口和試管塞在酒精燈上過一下，消下毒。
[0065] 6、將試管塞塞上，外面用報(bào)紙包好并用線扎好。寫明菌種編號(hào)和移植的日期
[0066] 7、放入生化培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)，約5-7天左右試管內(nèi)的斜面培養(yǎng)基上長滿菌絲
[0067] 8、大約再過10天左右，菌絲就長的較為厚實(shí)
[0068] 9、放入5°C冰箱，冷藏20-25天左右，然后才能用于復(fù)壯接種使用。
[0069] 將培養(yǎng)皿中生長較好的蠶蟲草菌種移植到試管的斜面培養(yǎng)基（培養(yǎng)基和步驟1) 中的培養(yǎng)基相同）上進(jìn)行培養(yǎng)；
[0070] 3)復(fù)壯：將試管中斜面培養(yǎng)基上的蠶蟲草菌種配制成菌液注射到蠶體，注射量是 2 ±0. 2微升/條蠶，促使菌種活性增強(qiáng)；
[0071] 菌液的制備方法為：
[0072] 1)對(duì)研缽進(jìn)行消毒滅菌；
[0073] 2)對(duì)藥匙及其手柄進(jìn)行消毒；
[0074] 3)將藥匙手柄伸入試管內(nèi)將菌種刮干凈；
[0075] 4)將菌種刮到研缽內(nèi)研磨，然后加入無菌水，再研磨一下；
[0076] 5)取濾紙放在菌液液面上，用滴管吸取菌液，置于無菌瓶中；
[0077] 6)最后，倒水在試管中，將試管中的碎菌種沖洗下來，研磨后再吸??；
[0078] 7)加水--研磨--吸取重復(fù)操作，期間應(yīng)將絮狀物過濾干凈；
[0079] 8)最后按照濃度要求補(bǔ)充無菌水到無菌瓶中；
[0080] 9)吸取無菌瓶中的菌液置入離心管中，菌液制作完成可以使用。
[0081] 菌液的保存溫度為4±0. 5°C ;菌液的濃度為：蠶蟲草菌種的質(zhì)量占9~12%。
[0082] 4)將家蠶蠶體上生長的成熟的蠶蟲草子實(shí)體按照上述步驟1)~3)重新進(jìn)行分離 和移植操作。
[0083] 所述蠶體為雄性家蠶的活體；蠶體的生長期要求為第四次眠期結(jié)束成為五齡蠶后 (第四次蛻皮結(jié)束后），并開始活動(dòng)吃桑葉。
[0084] 本發(fā)明以雄性家蠶幼蟲為寄主人工栽培蠶蟲草，利用雄性家蠶幼蟲栽培蟲草較蠶 蛹所需工時(shí)短、節(jié)省勞動(dòng)力、成本低。前期研宄表明，蠶蟲草的活性成分蟲草酸和蟲草素的 含量均高于蛹蟲草和天然冬蟲夏草，且蠶蟲草形態(tài)比蛹蟲草更接近天然蟲草，因此蠶蟲草 具有更為廣闊的開發(fā)利用價(jià)值，蠶蟲草的規(guī)?；a(chǎn)可以取得顯著的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。
【具體實(shí)施方式】
[0085] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本技術(shù)方案進(jìn)一步說明如下：
[0086] 1、蠶蟲草菌種的選用：
[0087] 高品質(zhì)的蟲草產(chǎn)品應(yīng)該至少保證兩點(diǎn)：菌種的純正性以及足夠高的蟲草素、蟲草 多糖、腺苷、蟲草酸等有效成分含量。本技術(shù)方案選用的菌種為麥角菌目，麥角菌科，蟲草 屬，蠶蟲草菌，采用本菌種作為母種。
[0088] 2、蠶蟲草母種的培養(yǎng)：
[0089] 蠶蟲草母種的培養(yǎng)方法，包括步驟：
[0090] 1)分離：將成熟的蠶蟲草子實(shí)體進(jìn)行分離操作，在培養(yǎng)皿中培養(yǎng)；
[0091] 培養(yǎng)基采用的是固體培養(yǎng)基，配方為：
[0092] l、200g 土豆加水煮20分鐘得到的過濾液；
[0093] 2、葡萄糖 20g;
[0094] 3、瓊脂 20g ;
[0095] 4、蛋白胨 2g;
[0096] 5、磷酸二氫鉀Ig ;
[0097] 6、硫酸鎂0.38;
[0098] 7、加水定容于1000ml，
[0099] 蠶蟲草菌種分離的操作步驟是：1、挑選生長旺盛的、較長較粗的菌種較多的蠶蟲 草子實(shí)體進(jìn)行分離
[0100] 2、用鑷子和小剪刀剪下子實(shí)體放入無菌的培養(yǎng)皿中
[0101] 3、先用70% -75%酒精浸泡剪下來的子實(shí)體進(jìn)行消毒
[0102] 4、再用0. 1%升汞浸泡消毒，升汞可回收重復(fù)利用
[0103] 5、消毒完成后用無菌水沖洗三遍，使消毒劑不殘留
[0104] 6、將剪下來的一小段子實(shí)體從中間再分開，分為三小丁
[0105] 7、一個(gè)培養(yǎng)皿中放三個(gè)小丁，呈三角分布放置剪下的菌種
[0106] 8、蓋上培養(yǎng)皿，寫上菌種編號(hào)和日期，用密封條封好裝入保鮮袋
[0107] 9、將培養(yǎng)皿連同保鮮袋一起放入生化培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)，溫度設(shè)定為23°C，濕度因 為是在密封的培養(yǎng)皿中所以不進(jìn)行控制。一般2天時(shí)間菌絲可以長出來，4-5天白色菌絲長 成，呈小的圓形菌群，直徑在5mm左右是正常的。
[0108] 2)移植：移植的操作步驟：1、將移植器在酒精燈上消毒，消毒距離要長一些，手拿 的手柄也要進(jìn)行消毒。
[0109] 2、去掉培養(yǎng)皿上的封口條，選擇生長較好的菌群進(jìn)行移植
[0110] 3、打開培養(yǎng)皿用消過毒的移植器在選擇的生長較好的菌群上刮一下，移植器上就 帶上菌種
[0111] 4、將移植器伸入試管內(nèi)，在斜面培養(yǎng)基上由內(nèi)向外呈"Z"字型均勻涂抹完整
[0112] 5、移植完成后將試管口和試管塞在酒精燈上過一下，消下毒。
[0113] 6、將試管塞塞上，外面用報(bào)紙包好并用線扎好。寫明菌種編號(hào)和移植的日期
[0114] 7、放入生化培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)，約5-7天左右試管內(nèi)的斜面培養(yǎng)基上長滿菌絲
[0115] 8、大約再過10天左右，菌絲就長的較為厚實(shí)
[0116] 9、放入5°C冰箱，冷藏20-25天左右，然后才能用于復(fù)壯接種使用。
[0117] 將培養(yǎng)皿中生長較好的蠶蟲草菌種移植到試管的斜面培養(yǎng)基（培養(yǎng)基和步驟1) 中的培養(yǎng)基相同）上進(jìn)行培養(yǎng)；
[0118] 3)復(fù)壯：將試管中斜面培養(yǎng)基上的蠶蟲草菌種配制成菌液注射到蠶體，注射量是 2 ±0. 2微升/條蠶，促使菌種活性增強(qiáng)；
[0119] 菌液的制備方法為：
[0120] 1)對(duì)研缽進(jìn)行消毒滅菌；
[0121] 2)對(duì)藥匙及其手柄進(jìn)行消毒；
[0122] 3)將藥匙手柄伸入試管內(nèi)將菌種刮干凈；
[0123] 4)將菌種刮到研缽內(nèi)研磨，然后加入無菌水，再研磨一下；
[0124] 5)取濾紙放在菌液液面上，用滴管吸取菌液，置于無菌瓶中；
[0125] 6)最后，倒水在試管中，將試管中的碎菌種沖洗下來，研磨后再吸??；
[0126] 7)加水一一研磨一一吸取重復(fù)操作，期間應(yīng)將絮狀物過濾干凈；
[0127] 8)最后按照濃度要求補(bǔ)充無菌水到無菌瓶中；
[0128] 9)吸取無菌瓶中的菌液置入離心管中，菌液制作完成可以使用。
[0129] 菌液的保存溫度為4±0. 5°C ;菌液的濃度為：蠶蟲草菌種的質(zhì)量占9~12%。
[0130] 4)將家蠶蠶體上生長的成熟的蠶蟲草子實(shí)體按照上述步驟1)~3)重新進(jìn)行分離 和移植操作。
[0131] 所述蠶體為雄性家蠶的活體；蠶體的生長期要求為第四次眠期結(jié)束成為五齡蠶后 (第四次蛻皮結(jié)束后），開始活動(dòng)吃桑葉。
[0132] 母種培養(yǎng)基對(duì)菌種