命等指標(biāo)，并按以下公式計(jì)算滅活率。結(jié)果見(jiàn)表2。
[0044]
[0045] 表2不同濃度、消毒時(shí)間對(duì)蘇云金芽孢桿菌芽孢的消毒效果
[0046]
[0047]
[0048] 注：表中數(shù)值單位為cfu/皿。表中+表示同行中不同消毒時(shí)間處理的平均值與消 毒前平均值相比，差異顯著，P < 〇. 05 表示與消毒前相比，差異極顯著，P < 0. 01。
[0049] 由表2可知，氣體二氧化氯對(duì)Bt芽孢的殺滅作用與氣體濃度和殺菌時(shí)間有關(guān)。當(dāng) 加液量為10mL(130. 50mg/m3)時(shí)，消毒2h殺菌率可達(dá)到89. 38%;加液量為30mL(391. 50mg/ m3)時(shí)，消毒0. 5h可達(dá)到92. 02%，2h可達(dá)到100% ;而加液量為60mL(783. 00mg/m3)時(shí)，消 毒15min可達(dá)到94. 07%，lh可達(dá)到100%。
[0050] 實(shí)施例3對(duì)白僵菌分生孢子懸液的的消毒效果
[0051] 蠶體添毒法。取1 X 107個(gè)/mL的白僵菌分生孢子懸液50mL，將各組五齡起蠶浸入 分生孢子懸液1~3s，待蠶體完全浸濕后立即取出晾干，在20~25°C，自然濕度條件下飼 養(yǎng)，其中對(duì)照組直接飼養(yǎng)，試驗(yàn)組在飼喂桑葉時(shí)分別以消毒機(jī)加藥液10mL、20mL、30mL后于 lm3密閉空間消毒不同時(shí)間1次，之后正常飼養(yǎng)，在飼養(yǎng)過(guò)程中收集死亡的蠶體，并根據(jù)外觀 特征和顯微鏡鏡檢確定死亡原因。飼養(yǎng)結(jié)束后調(diào)查幼蟲生命率、死籠繭率、蟲蛹統(tǒng)一生命、 帶毒率等指標(biāo)，并計(jì)算滅活率。結(jié)果見(jiàn)表3。
[0052] 表3不同濃度、消毒時(shí)間對(duì)白僵菌分生孢子的消毒效果
[0053]
[0054]
[0055] 注：表中數(shù)值單位為cfu/皿。表中+表示同行中不同消毒時(shí)間處理的平均值與消 毒前平均值相比，差異顯著，P < 〇. 05 表示與消毒前相比，差異極顯著，P < 0. 01。
[0056] 由表3可知，氣體二氧化氯對(duì)Bb分生孢子的殺滅作用與氣體濃度和殺菌時(shí)間有 關(guān)。當(dāng)加液量為10mL(130. 50mg/m3)時(shí)，消毒lh殺菌率可達(dá)到98. 75%，2h可達(dá)到100% ; 加液量為30mL(391. 50mg/m3)時(shí)，消毒0. 5h可達(dá)到94. 64%，2h可達(dá)到100% ;而加液量為 60mL(783. 00mg/m3)時(shí)，消毒15min可達(dá)到92. 33%，2h可達(dá)到100%。表明在低濃度時(shí)，通 過(guò)延長(zhǎng)消毒時(shí)間可增強(qiáng)殺菌效果，高濃度時(shí)短時(shí)間消毒對(duì)Bb分生孢子也有很好的殺滅作 用。
[0057] 實(shí)施例4對(duì)家蠶核型多角體的消毒效果
[0058] 方法同實(shí)施例2,其中病原懸液為1 X 107個(gè)/mL多角體懸液，消毒效果如表4。
[0059] 表4不同濃度、消毒時(shí)間對(duì)NPB的滅活率（％ )
[0060]
[0061]
[0062] 注：表中表示無(wú)這一項(xiàng)。
[0063] 由表4可知，氣體二氧化氯對(duì)NPB的殺滅作用不明顯，這可能與病毒多角體外殼結(jié) 構(gòu)有關(guān)。一般強(qiáng)堿性的消毒劑可使病毒多角體外殼迅速溶解，使病毒粒子裸露，從而容易殺 滅病毒，而實(shí)驗(yàn)中對(duì)二氧化氯的活化液的pH測(cè)試為酸性，因此對(duì)BmNPB的消毒效果不明顯。
[0064] 實(shí)施例5對(duì)家蠶微孢子蟲孢子消毒效果的調(diào)查
[0065] 方法同實(shí)施例2,其中病原懸液為1 X 107個(gè)/mL家蠶微孢子蟲孢子懸液。消毒效 果如表5。
[0066] 表5不同濃度、消毒時(shí)間對(duì)N. b的滅活率（％ )
[0067]
[0068] 注：表中表示無(wú)這一項(xiàng)。
[0069] 由表5可知，氣體二氧化氯對(duì)N. b的殺滅作用隨著氣體濃度的增大而增高。 783.00mg/m3消毒lh，殺滅率即可達(dá)到100%。
[0070] 實(shí)施例6對(duì)桑葉的空氣消毒
[0071] 參照奚小艷等（2012)的方法作改進(jìn)。首先找一片面積較大的新鮮桑葉，均分為4 小片，其中1片作為對(duì)照組，不作消毒處理，直接采樣、培養(yǎng)；其他3片分別在自制lm 3密室 內(nèi)以不同濃度二氧化氯氣體分別消毒30min、60min和120min，并于消毒結(jié)束后采樣、培養(yǎng)。 培養(yǎng)結(jié)束，計(jì)算殺菌率。
[0072] 采樣方法是將無(wú)菌棉用400 y L無(wú)菌水濕潤(rùn)，在桑葉表面9cm2 (3cmX 3cm)范圍內(nèi) 來(lái)回涂抹，將采樣后的棉花放入裝有2mL無(wú)菌水的試管中，搖勻后，取100 y L涂于無(wú)菌培養(yǎng) 皿，37°C培養(yǎng)24h，觀察計(jì)數(shù)，并下式換算為單位面積物體表面的菌落總數(shù)。
[0073]
[0074] 結(jié)果見(jiàn)表6~7。
[0075] 表6加液10mL對(duì)桑葉的消毒效果
[0076]
[0077] 注：表中#表示同行中不同消毒時(shí)間處理后的平均值與消毒前的平均值相比，差 異極顯著，P< 0. 01。
[0078] 表7加液20mL對(duì)桑葉的消毒效果
[0079]
[0080] 注：表中$表示同行中不同消毒時(shí)間處理后的平均值與消毒前的平均值相比，差異 顯著，P< 0. 05T表示與消毒前的平均值相比，差異極顯著，P< 0. 01。
[0081] 如表6~7所示，氣體二氧化氯對(duì)桑葉表面微生物有一定的殺滅效果。當(dāng)加液量 為10mL時(shí)，消毒lh，對(duì)細(xì)菌和真菌的殺菌率分別達(dá)到了 97. 87%和97. 26% ;當(dāng)增大加液量 為20mL時(shí)，消毒0. 5h對(duì)細(xì)菌和真菌的殺菌率分別達(dá)到了 85. 90%和96. 04%。
[0082] 實(shí)施例7對(duì)五齡蠶的毒性試驗(yàn)
[0083] 分別在兩個(gè)不同的養(yǎng)蠶室進(jìn)行了消毒效果的測(cè)試，蠶室體積均為63. 65m3，每個(gè) 蠶室分別飼養(yǎng)了約八千頭蠶，其中試驗(yàn)組從二齡起蠶每天以消毒機(jī)加液50mL(約10. 26mg/ m3)在喂桑時(shí)消毒0.5h，至五齡起蠶時(shí)，每天以加液120mL(約24. 60mg/m3)在喂桑時(shí)消毒 0. 5h至上蔟結(jié)繭（每天均在中午喂桑時(shí)消毒0. 5h-次）。對(duì)照組則正常飼養(yǎng)，不作氣體二 氧化氯空氣消毒。在飼養(yǎng)過(guò)程中，觀察記錄有無(wú)氣體二氧化氯中毒死亡蠶，試驗(yàn)結(jié)束后用T 檢驗(yàn)比較試驗(yàn)組與對(duì)照組間蠶斤繭個(gè)數(shù)、全繭量、繭層量、繭層率的顯著性差異。
[0084] 表8二氧化氯空氣消毒對(duì)家蠶生長(zhǎng)指標(biāo)和繭質(zhì)的影響
[0085]
[0087] 由上表可知，試驗(yàn)組500g繭個(gè)數(shù)增加，與對(duì)照組存在極顯著性差異（P< 0.01); 而蟲蛹統(tǒng)一生命率、全繭量、繭層量、繭層率等指標(biāo)則與對(duì)照組之間的差異不顯著。表明以 10. 26mg/m3濃度對(duì)二齡起蠶每天在喂桑時(shí)消毒0. 5h，至五齡起蠶時(shí)，以24. 60mg/m 3濃度在 喂桑時(shí)消毒〇.5h至上蔟結(jié)繭，對(duì)家蠶生長(zhǎng)發(fā)育和繭質(zhì)的影響不大，應(yīng)用于生產(chǎn)是安全的。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種蠶用氣體消毒劑，其特征在于，是由二氧化氯藥液和檸檬酸液按照1:1的體積 比組成的原料經(jīng)反應(yīng)產(chǎn)生的含有二氧化氯的氣體。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述蠶用氣體消毒劑，其特征在于，所述二氧化氯藥液的濃度為1~ 4% ;所述梓檬酸液的濃度為6~15%。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述蠶用氣體消毒劑，其特征在于，所述二氧化氯藥液的濃度為2% ; 所述檸檬酸液的濃度為8%。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述蠶用氣體消毒劑，其特征在于，所述含有二氧化氯的氣體中二 氧化氯的濃度為21. 75~87. OO mg/m3。5. 權(quán)利要求1至4所述蠶用氣體消毒劑在對(duì)桑葉、蠶體、蠶座、養(yǎng)蠶環(huán)境和/或蠶室空 氣的消毒或制備消毒制劑方面的應(yīng)用。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述蠶用氣體消毒劑應(yīng)用于對(duì)桑葉、蠶 體、蠶座、養(yǎng)蠶環(huán)境和蠶室空氣的消毒方面時(shí)，含有二氧化氯的氣體中二氧化氯的濃度為 65. 25 mg/m3〇7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述蠶用氣體消毒劑應(yīng)用于對(duì)蠶室空氣 的消毒方面時(shí)，含有二氧化氯的氣體中二氧化氯的濃度為21.75 mg/ m3,消毒0.5 h。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述蠶用氣體消毒劑應(yīng)用于對(duì)桑葉消毒 方面時(shí)，含有二氧化氯的氣體中二氧化氯的濃度為87. 00 mg/m3,消毒lh，殺滅桑葉表面的 微生物。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述微生物為蘇云金芽孢桿菌、白僵菌分 生孢子、微孢子蟲孢子或核型多角體。10. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用包括以下步驟：51. 在二氧化氯反應(yīng)器中，將二氧化氯藥液、檸檬酸液按1:1的體積比例分別加入二氧 化氯反應(yīng)器對(duì)應(yīng)的加液口，加完后封蓋，待其充分反應(yīng)產(chǎn)生二氧化氯氣體；52. 將二氧化氯反應(yīng)器放置在蠶室中，消毒時(shí)打開二氧化氯反應(yīng)器的出氣口，將二氧化 氯氣體釋放，進(jìn)行消毒。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種蠶用氣體消毒劑及其應(yīng)用。所述蠶用氣體消毒劑是由二氧化氯藥液和檸檬酸液按照1:1的體積比組成的原料經(jīng)反應(yīng)產(chǎn)生的含有二氧化氯的氣體。本發(fā)明氣體消毒劑具有擴(kuò)散速度快、分布均勻、穿透性強(qiáng)、消毒后無(wú)殘留等特點(diǎn)，使用氣體二氧化氯藥液和檸檬酸溶液組合在一起進(jìn)行養(yǎng)蠶生產(chǎn)中的養(yǎng)蠶環(huán)境空氣消毒，簡(jiǎn)單方便，可以快速地產(chǎn)生一種含有二氧化氯的氣體并使其分散到需要消毒的空間，包括一些狹小的空隙，同時(shí)實(shí)現(xiàn)對(duì)桑葉、蠶體、蠶座和環(huán)境、空氣的全方位消毒，消毒效率將大大提高。使用本發(fā)明氣體消毒劑可有效控制養(yǎng)蠶環(huán)境中病原微生物，預(yù)防家蠶傳染性病害的發(fā)生和流行，具有高效、安全、廣譜、無(wú)毒副作用的消毒殺菌作用。
【IPC分類】A01N59/00, A01P3/00, A01P1/00
【公開號(hào)】CN105053001
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510444565
【發(fā)明人】劉吉平, 曹榮昌
【申請(qǐng)人】華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2015年11月18日
【申請(qǐng)日】2015年7月24日