一種撒瓦那柏初代組培方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種撒瓦那柏初代組培方法，屬于苗木繁殖技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 撒瓦納柏是一種四季均為黃色的新引進(jìn)的彩葉植物，由于枝條流線形，色彩鮮明， 日本早己在園林中大量應(yīng)用，而我國(guó)在園林綠化中還沒(méi)有見(jiàn)到。撒瓦納一般采用種子播種、 扦插方法繁殖，但種子繁殖容易發(fā)生變異，扦插繁殖的穗源較少，不能快速大量繁殖，所以 用組織培養(yǎng)的方法是撒瓦納柏快繁新途徑。
[0003]目前，在撒瓦納柏的初代組織培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基、激素種類和濃度都很重要，但 是現(xiàn)有技術(shù)中的選擇都不夠合理，導(dǎo)致形成分枝過(guò)少，易出現(xiàn)玻璃花、褐化等現(xiàn)象。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 發(fā)明目的：為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種撒瓦那柏初代組培方法。
[0005] 技術(shù)方案：為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明公開(kāi)了一種撒瓦那柏初代組培方法，包 括以下步驟：
[0006] (1)培養(yǎng)基的配制：選擇基礎(chǔ)培養(yǎng)基，加入蔗糖和瓊脂，再加入6-芐氨基腺嘌呤 (6-BA)或者萘乙酸，調(diào)節(jié)pH值，滅菌，即得；
[0007] (2)外植體處理：選擇不帶芽的外植體，清洗，消毒；
[0008] (3)接種培養(yǎng)：將步驟⑵所得外植體舊傷口剪去，插入步驟⑴所得培養(yǎng)基中， 置于培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)。
[0009] 作為優(yōu)選，所述步驟（1)中基礎(chǔ)培養(yǎng)基為MS、1/2MS(1/2MS培養(yǎng)基中大量元素為MS 培養(yǎng)基的一半）、B5或者WPM培養(yǎng)基。
[0010] 作為另一種優(yōu)選，所述步驟（1)中蔗糖和瓊脂的濃度分別為30g/L和7g/L。
[0011] 作為另一種優(yōu)選，所述步驟（1)中6-芐氨基腺嘌呤或者萘乙酸的濃度均為 0. 05-lmg/L〇
[0012] 作為另一種優(yōu)選，所述步驟（1)中pH值為5. 8~6.0,滅菌條件為：121°C高壓下 滅菌25min〇
[0013] 作為另一種優(yōu)選，所述步驟（2)中清洗方法為：先用洗衣粉浸泡干凈后，再用純水 沖洗2小時(shí)。
[0014] 作為另一種優(yōu)選，所述步驟（2)中消毒方法為：先用75%酒精處理30秒，再用 〇. 1%的升汞浸泡5-8min，最后用無(wú)菌水沖洗5次，殘留的水分用無(wú)菌濾紙吸取。
[0015] 作為另一種優(yōu)選，所述步驟（3)中培養(yǎng)室的培養(yǎng)條件為：光照16h/d，光照度為 20001x，溫度控制在（25±2)°C。
[0016] 技術(shù)效果：相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明方法不僅具有現(xiàn)有技術(shù)中組培繁殖的優(yōu)勢(shì)，還 通過(guò)特定的培養(yǎng)基、激素種類和濃度，與其它處理方法相結(jié)合，能夠顯著降低撒瓦那柏的污 染率，提高其成活率，使撒瓦納柏能順利形成更多分枝，不會(huì)出現(xiàn)玻璃化、褐化等現(xiàn)象。
【附圖說(shuō)明】
[0017] 圖1為不同的培養(yǎng)基對(duì)初代培養(yǎng)效果的影響；
[0018] 圖2為不同濃度的6-BA對(duì)初代培養(yǎng)效果的影響（橫坐標(biāo)中1、2、3、4分別為Omg/ L、0.05mg/L、0.1mg/L、lmg/L);
[0019] 圖3為不同濃度的NAA對(duì)初代培養(yǎng)效果的影響（橫坐標(biāo)中1、2、3、4分別為Omg/L、 0.05mg/L、0.1mg/L、lmg/L);
【具體實(shí)施方式】 [0020] 實(shí)施例1
[0021] (1)培養(yǎng)基的配制：選擇MS培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，加入蔗糖和瓊脂，濃度分別為 30g/L和7g/L，再加入6-芐氨基腺嘌呤（6-BA)，其濃度為0. 05mg/L，調(diào)節(jié)pH值為5. 8~ 6. 0,121°C高壓下滅菌25min，即得；
[0022] (2)外植體處理：選擇不帶芽的外植體，先用洗衣粉浸泡干凈后，再用純水沖洗2 小時(shí)，然后用75%酒精處理30秒，再用0. 1 %的升汞浸泡5min，最后用無(wú)菌水沖洗5次，殘 留的水分用無(wú)菌濾紙吸取；
[0023] (3)接種培養(yǎng)：將步驟⑵所得外植體舊傷口剪去，插入步驟⑴所得培養(yǎng)基中， 置于培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：光照16h/d，光照度為20001x，溫度控制在（25±2)°C。
[0024] 實(shí)施例2 :
[0025] (1)培養(yǎng)基的配制：選擇B5培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，加入蔗糖和瓊脂，濃度分別為 30g/L和7g/L，再加入6-芐氨基腺嘌呤，其濃度為lmg/L，調(diào)節(jié)pH值為5. 8~6. 0,121°C高 壓下滅菌25min，即得；
[0026] (2)外植體處理：選擇不帶芽的外植體，先用洗衣粉浸泡干凈后，再用純水沖洗2 小時(shí)，然后用75%酒精處理30秒，再用0. 1 %的升汞浸泡8min，最后用無(wú)菌水沖洗5次，殘 留的水分用無(wú)菌濾紙吸?。?br>[0027] (3)接種培養(yǎng)：將步驟⑵所得外植體舊傷口剪去，插入步驟⑴所得培養(yǎng)基中， 置于培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：光照16h/d，光照度為20001x，溫度控制在（25±2)°C。
[0028] 實(shí)施例3 :
[0029] (1)培養(yǎng)基的配制：選擇1/2MS培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，加入蔗糖和瓊脂，濃度分 別為30g/L和7g/L，再加入萘乙酸，其濃度為0. 05mg/L，調(diào)節(jié)pH值為5. 8~6. 0,121°C高壓 下滅菌25min，即得；
[0030] (2)外植體處理：選擇不帶芽的外植體，先用洗衣粉浸泡干凈后，再用純水沖洗2 小時(shí)，然后用75%酒精處理30秒，再用0. 1 %的升萊浸泡6min，最后用無(wú)菌水沖洗5次，殘 留的水分用無(wú)菌濾紙吸取；
[0031] (3)接種培養(yǎng)：將步驟（2)所得外植體舊傷口剪去，插入步驟（1)所得培養(yǎng)基中， 置于培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：光照16h/d，光照度為20001x，溫度控制在（25±2)°C。
[0032] 實(shí)施例4 :
[0033](1)培養(yǎng)基的配制：選擇1/2MS培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，加入蔗糖和瓊脂，濃度分 別為30g/L和7g/L，再加入萘乙酸，其濃度為0. 05mg/L，調(diào)節(jié)pH值為5. 8~6. 0,121°C高壓 下滅菌25min，即得；
[0034] (2)外植體處理：選擇不帶芽的外植體，先用洗衣粉浸泡干凈后，再用純水沖洗2 小時(shí)，然后用75%酒精處理30秒，再用0. 1 %的升汞浸泡5min，最后用無(wú)菌水沖洗5次，殘 留的水分用無(wú)菌濾紙吸?。?br>[0035] (3)接種培養(yǎng)：將步驟⑵所得外植體舊傷口剪去，插入步驟⑴所得培養(yǎng)基中， 置于培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：光照16h/d，光照度為20001x，溫度控制在（25±2)°C。
[0036] 實(shí)施例5 :
[0037] (1)培養(yǎng)基的配制：選擇1/2MS