一種駱駝刺組織培養(yǎng)的快速誘導(dǎo)培養(yǎng)基裝置的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域,具體設(shè)及一種駱駝刺組織培養(yǎng)的快速誘導(dǎo)培養(yǎng)基 裝置。
【背景技術(shù)】
[000引駱駝刺(學(xué)名:A化agisparsifoliaSlap.)屬豆科、落葉草本,主要枝上多刺,葉 長(zhǎng)圓形,花粉紅色,6月開花,8月最盛,每朵花可開放20余天,結(jié)芙果,總狀花序,根系一般 長(zhǎng)達(dá)20米。從沙潭和戈壁深處吸取化下水份和營(yíng)養(yǎng),是一種自然牛長(zhǎng)的耐旱植物,因?yàn)檫\(yùn) 種植物莖上長(zhǎng)著剌狀的很堅(jiān)硬的小綠葉,故叫駱駝剌,是草本植物,是戈壁灘和沙漠中駱駝 唯一能吃的賴W生存的草,故又名駱駝草,主要分布在內(nèi)陸干旱地區(qū)。
[0003] 駱駝刺根系十分發(fā)達(dá),根系一般長(zhǎng)達(dá)20米,是地表上莖葉半徑的2倍甚至3倍, 運(yùn)在植物界是極其罕見的。因?yàn)槠涮厥獾纳硖匦裕谡T導(dǎo)培養(yǎng)基中如果加入常用生長(zhǎng)素 嗎I噪乙酸在低濃度無法快速促進(jìn)莖葉分化,在培養(yǎng)基的時(shí)間過長(zhǎng)容易感染細(xì)菌導(dǎo)致培養(yǎng)失 敗,如果加入常用生長(zhǎng)素嗎I噪乙酸的濃度過高,又抑制了根系的生長(zhǎng)發(fā)育,導(dǎo)致組織培養(yǎng)的 駱駝刺根系發(fā)育不全。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種駱駝刺組織培養(yǎng)的快速誘導(dǎo)培養(yǎng)基裝置。
[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題通過W下技術(shù)方案予W實(shí)現(xiàn): 一種駱駝刺組織培養(yǎng)的快速誘導(dǎo)培養(yǎng)基裝置,包括無菌箱和位于無菌箱內(nèi)的誘導(dǎo)培養(yǎng) 基,所述無菌箱包括正方體狀的上操作箱和固定在上操作箱底部的漏斗狀的下培育箱,上 操作箱底部設(shè)有操作臺(tái),操作臺(tái)的側(cè)部為一活動(dòng)板,上操作箱與下培育箱通過活動(dòng)板可連 通式隔斷,上操作箱設(shè)有=組操作口和一個(gè)進(jìn)料口,一組操作口包括有兩個(gè)操作孔,操作孔 上連接有手膠套,手膠套包括內(nèi)膠套層、棉層和外膠套層,棉層填充有厚度均勻的珍珠棉, 外膠套層緊貼外套在人手上,進(jìn)料口上連接有軟質(zhì)膠狀的進(jìn)料管,進(jìn)料管包括內(nèi)膠管層、 真空層和外膠管層,進(jìn)料管末端設(shè)有單向閥,下培育箱的底部為平臺(tái),下培育箱側(cè)部設(shè)有 一可自由開啟和閉合的小n,小口與下培育箱通過較鏈連接,小口四周包圍有密封膠;所 述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基中加入如下組份:特制固化劑、紅糖、6-節(jié)氨基腺嚷嶺、 4-氯-IAA、四環(huán)素、活性炭、植物提取物、木瓜汁配制而成,在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中的濃度分別為: 特制固化劑15-18g/L、紅糖20-25g/L、四環(huán)素25-45mg/l、6-節(jié)氨基腺嚷嶺2. 2-2. 6mg/l、 4-氯-IAA0. 3-0. 4mg/l、植物提取物 50-80mg/l、木瓜汁 60-80g/L、活性炭 3-4g/L。
[0006] 進(jìn)一步的,所述的特制固化劑:包括海藻酸鋼和紫馨提取物,其制備方法為,將新 鮮的紫馨進(jìn)行壓棒,收集漿汁,然后將漿汁真空干燥獲得凝固的塊狀物,再將塊狀物粉碎至 粒徑150-300目的粉狀,即為紫馨提取物;所述的特制固化劑為海藻酸鋼與紫馨提取物質(zhì) 量比2:3。
[0007] 進(jìn)一步的,所述的植物提取物提取于大葉格的氣生根,所述的植物提取物的提取 方法為收集大葉格氣生根,放入攬拌機(jī),并按照質(zhì)量體積比1:Ikg/L添入乙酸-乙醇水溶液 并進(jìn)行組織破碎,然后將破碎液過300目濾布后收集濾液,再將濾液真空干燥后收集獲得 的粉末即為所述的植物提取物,其中所述的乙酸-乙醇水溶液為質(zhì)量濃度為45%的乙醇和 質(zhì)量濃度為12%的乙酸按照1:2的體積比混合。
[0008] -種誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法,向1/2MS培養(yǎng)基中加入特制固化劑、紅糖、6-節(jié) 氨基腺嚷嶺、4-氯-IAA、四環(huán)素、活性炭;在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中的濃度分別為特制固化劑 15-18g/l、紅糖 20-25g/L、四環(huán)素 25-45mg/l、6-節(jié)氨基腺嚷嶺 2. 2-2. 6mg/l、4-氯-IAA 0. 3-0. 4mg/l、活性炭3-4g/L、植物提取物5〇-8〇111邑/1,并將其置于高壓蒸汽滅菌鍋中滅菌, 滅菌條件為113攝氏度,壓力103. 42kPa,時(shí)長(zhǎng)25-35min,最后再將木瓜汁加入其中。
[0009] 進(jìn)一步的,所述木瓜汁在添加前需要經(jīng)過68°C、時(shí)長(zhǎng)30min的加熱滅菌,加熱后將 其溫度急速冷卻到1-3°C,保持時(shí)長(zhǎng)為5-lOmin,然后即可按照濃度為60-80g/L添入誘導(dǎo)培 養(yǎng)基中。
[0010] 本發(fā)明具有如下有益效果: 本發(fā)明在無菌箱內(nèi),針對(duì)駱駝刺特殊的生長(zhǎng)和生理特性,特選海藻酸鋼和紫馨提取物 制備的固化劑。
[0011] 本發(fā)明進(jìn)一步在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加四環(huán)素,在培養(yǎng)過程中,可進(jìn)一步對(duì)外植體的 內(nèi)生菌產(chǎn)生明顯的抑制作用,可減少組培過程中的污染,而且還起到了促進(jìn)蔽芽萌發(fā),縮短 萌動(dòng)時(shí)間的效果。
[0012] 本發(fā)明進(jìn)一步在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加植物提取物,提取于大葉格氣生根的提取物配 合4-氯-IAA可有效均衡駱駝刺蔽芽、根和莖的生長(zhǎng),而且對(duì)蔽芽萌發(fā)和芽體發(fā)育有明顯的 促進(jìn)作用。
[0013] 應(yīng)用本發(fā)明的誘導(dǎo)培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)駱駝刺,成活率為98-99%,染菌率為 1. 7-2. 1%,培養(yǎng)基褐化程度較MS培養(yǎng)基低14-17%,萌動(dòng)時(shí)間縮短25-35%。
【附圖說明】
[0014] 利用附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明,但附圖中的實(shí)施例不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限 制。
[0015] 圖1是本發(fā)明的駱駝刺組織培養(yǎng)的快速誘導(dǎo)培養(yǎng)基裝置的結(jié)構(gòu)圖。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的說明。
[0017] 實(shí)施例: 一種駱駝刺組織培養(yǎng)的快速誘導(dǎo)培養(yǎng)基裝置,包括無菌箱和位于無菌箱內(nèi)的誘導(dǎo)培養(yǎng) 基,無菌箱包括正方體狀的上操作箱1和固定在上操作箱1底部的漏斗狀的下培育箱2,上 操作箱1底部設(shè)有操作臺(tái)9,操作臺(tái)9的側(cè)部為一活動(dòng)板10,上操作箱1與下培育箱2通過 活動(dòng)板10可連通式隔斷,上操作箱1設(shè)有=組操作口和一個(gè)進(jìn)料口,一組操作口包括有兩 個(gè)操作孔,操作孔上連接有手膠套,手膠套包括內(nèi)膠套層、棉層和外膠套層,棉層填充有厚 度均勻的珍珠棉,外膠套層緊貼外套在人手上,進(jìn)料口上連接有軟質(zhì)膠狀的進(jìn)料管5,進(jìn)料 管5包括內(nèi)膠管層、真空層和外膠管層,進(jìn)料管5末端設(shè)有單向閥,下培育箱2的底部為平 臺(tái)8,下培育箱2側(cè)部設(shè)有一可自由開啟和閉合的小口6,小口6與下培育箱2通過較鏈7 連接,小口6四周包圍有密封膠。
[0018] 本發(fā)明選用的1/2MS培養(yǎng)基成分及其用量(用量是指在1升1/2MS培養(yǎng)基中的用 量)如下表1: