秋楓胚性愈傷成苗的快速繁殖方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物繁殖技術領域，具體涉及一種秋楓胚性愈傷成苗的快速繁殖方 法。
【背景技術】
[0002] 秋楓，別名重陽木，系高大喬木，其古樸端莊、樹冠龐大、枝葉濃密，是良好的行道 和庭園綠化樹種。此外，秋楓根系發(fā)達，抗風力強，可營造為防護林。秋楓全身是寶，木材紋 理直，較堅硬，耐久用，可作建筑家具橋梁等用；果肉可釀酒；種子含油量高，可榨油供工業(yè) 用；根及樹皮可用于風濕骨痛；葉可用于食道癌、胃癌、傳染性肝炎、小兒疳積、肺炎、咽喉 炎、瘡瘍等。
[0003] 目前，秋楓都是采用種子進行繁殖，但種子一年只有一次，且要隨采隨播才能提高 發(fā)芽率，種子繁殖已不能滿足市場的需求。組織培養(yǎng)是一種植株快速繁殖技術，但采用組織 培養(yǎng)技術快速繁殖秋楓種苗還未見報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的一個目的是解決至少上述問題和/或缺陷，并提供至少后面將說明的優(yōu) 點。
[0005] 本發(fā)明還有一個目的是提供秋楓胚性愈傷成苗的快速繁殖方法，通過對秋楓進行 胚性愈傷誘導，在短時間內(nèi)培育出大量適合移栽的秋楓種苗，顯著提高了秋楓種苗的增殖 系數(shù)和種苗質(zhì)量，可實現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)，滿足市場上對秋楓種苗的需求。
[0006] 為了實現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點，提供了一種秋楓胚性愈傷成苗的快 速繁殖方法，包括以下步驟：
[0007]A、將秋楓種子用2 %的洗潔精水溶液浸泡5min后，線狀自來水沖洗15-20min，再 用添加了 2-3滴100mg/L吐溫20的0. 1%的升汞溶液浸泡消毒8-10min，無菌水沖洗3-5 次，最后用消毒濾紙去除所述秋楓種子表面水分，得消毒外植體；
[0008] B、將步驟A中得到的所述消毒外植體接種到第一培養(yǎng)基中，于22_26°C、光照條件 下培養(yǎng)35天，得無菌試管苗，其中，
[0009] 所述第一培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基，0. 1-0. 5mg/L赤霉素，30mg/L蔗糖和5mg/L瓊脂，
[0010] 所述光照條件為，光照強度15001UX，光照時間8-10h/天；
[0011] C、將步驟B中得到的所述無菌試管苗的子葉置于第二培養(yǎng)基中，于22-26°C、所述 光照條件下培養(yǎng)30天，得胚狀體，其中，
[0012]所述第二培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基，0? 5-2.Omg/LNAA，0? 1-0. 5mg/LKT，30mg/L蔗糖 和5mg/L瓊脂；
[0013] D、將步驟C中得到的所述胚狀體置于第三培養(yǎng)基中，于22_26°C，所述光照條件培 養(yǎng)30天，得完整帶根健壯植株，其中，
[0014]所述第三培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基，0?5-1. 5mg/L6-BA，0?1-0. 5mg/LNAA，30mg/L蔗 糖和5mg/L瓊脂；
[0015] E、在所述步驟D中獲得所述完整帶根健壯植株后，向所述第三培養(yǎng)基中加入少量 自來水，敞口放置2-4天后，將所述完整帶根植株取出，洗凈其根部培養(yǎng)基得幼苗，將所述 幼苗移栽到基質(zhì)中培養(yǎng)30天，再將其移栽到大田培養(yǎng)。
[0016] 優(yōu)選的是，所述的秋楓胚性愈傷成苗的快速繁殖方法，所述基質(zhì)，其包括：
[0017] 第一基質(zhì)層，其由15-20重量份稻殼、10-12重量份鋸末、5-8重量份草木灰和5-8 重量份珍珠巖經(jīng)高溫滅菌制得，其厚度為4-8cm;
[0018] 第二基質(zhì)層，其位于所述第一基質(zhì)層上方，其由20-25重量份黃壤土、15-20重量 份廢蜜液、10-15重量份豆渣、10-15重量份秸桿、5-10重量份廄肥和0. 3-0. 5份酵素菌經(jīng)發(fā) 酵制得，其厚度為5-lOcm;
[0019] 第三基質(zhì)層，其位于所述第二基質(zhì)層上方，其為厚度為l-2cm的細沙層。
[0020] 優(yōu)選的是，所述的秋楓胚性愈傷成苗的快速繁殖方法，所述基質(zhì)中培養(yǎng)的條件為 溫度25-28°C、濕度為70-80%、自然光照下培養(yǎng)。
[0021] 優(yōu)選的是，所述的秋楓胚性愈傷成苗的快速繁殖方法，所述第一培養(yǎng)基中的赤霉 素濃度為〇? 3mg/L。
[0022] 優(yōu)選的是，所述的秋楓胚性愈傷成苗的快速繁殖方法，所述第二培養(yǎng)基中的NAA濃度為lmg/L，KT濃度為0? 2mg/L。
[0023] 優(yōu)選的是，所述的秋楓胚性愈傷成苗的快速繁殖方法，所述第三培養(yǎng)基中6-BA濃 度為lmg/L，NAA濃度為 0? 3mg/L。
[0024] 本發(fā)明至少包括以下有益效果：
[0025] 第一、對秋楓進行胚性愈傷誘導，通過誘導其子葉，在短時間內(nèi)培育出大量適合移 栽的秋楓種苗，顯著提高了秋楓種苗的增殖系數(shù)和種苗質(zhì)量，可實現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)，滿足市場 上對秋楓種苗的需求；
[0026] 第二、在第一培養(yǎng)基中添加赤霉素可打破秋楓種子休眠，促使秋楓種子發(fā)芽、成 苗；在第二培養(yǎng)基中添加NAA和KT可降低組織培養(yǎng)中的消耗及成本；在第三培養(yǎng)基中添加 6-BA和NAA可有效促進葉和根的生長，獲得帶根完整植株，無需再單獨進行生根培養(yǎng)，直接 生根；
[0027] 第三、根據(jù)幼苗的生長特點和營養(yǎng)需要配制專用的培養(yǎng)基質(zhì)，幼苗在其上長勢好， 植株健壯，無病蟲害；
[0028] 第四、基質(zhì)中的第一基質(zhì)層由稻殼、鋸末、草木灰和珍珠巖經(jīng)殺菌制得，其疏松通 氣，吸水保水且不含病原菌；第二基質(zhì)層由黃壤土、廢蜜液、豆渣、秸桿、廄肥和酵素菌經(jīng)發(fā) 酵制得，其可為幼苗生長提供豐富的易于吸收的營養(yǎng)，發(fā)酵還可使第二基質(zhì)層中產(chǎn)生大量 的有益細菌，可增強幼苗的抗病蟲害能力；第三基質(zhì)層為細沙層，可減緩基質(zhì)中養(yǎng)分和水分 的散失；
[0029] 第五、采用本發(fā)明方案所得到的秋楓組培苗的繁殖系數(shù)高達50倍，組培苗的生根 率和移栽苗成活率均在95%以上，有效解決了秋楓工廠化育苗的問題。
[0030] 本發(fā)明的其他優(yōu)點、目標和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對本 發(fā)明的研究和實踐而為本領域的技術人員所理解。
【具體實施方式】
[0031] 下面結合實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明，以令本領域技術人員參照說明 書文字能夠據(jù)以實施。
[0032] 需要說明的是，下述實施例中所述實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法，所述 試劑和材料，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑獲得。
[0033] 實施例1 :
[0034] -種秋楓胚性愈傷成苗的快速繁殖方法，包括以下步驟：
[0035] A、將秋楓種子用2 %的洗潔精水溶液浸泡5min后，線狀自來水沖洗15min，再用添 加了 2滴100mg/L吐溫20的0. 1 %的升汞溶液浸泡消毒8min，無菌水沖洗3次，最后用消 毒濾紙去除所述秋楓種子表面水分，得消毒外植體；
[0036] B、將步驟A中得到的所述消毒外植體接種到第一培養(yǎng)基中，于22°C、光照條件下 培養(yǎng)35天，得無菌試管苗，其中，
[0037] 所述第一培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基，0.lmg/L赤霉素，30mg/L蔗糖和5mg/L瓊脂，
[0038] 所述光照條件為，光照強度15001ux，光照時間8h/天；
[0039] C、將步驟B中得到的所述無菌試管苗的子葉置于第二培養(yǎng)基中，于22°C、所述光 照條件下培養(yǎng)30天，得胚狀體，其中，
[0040] 所述第二培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基，0. 5mg/LNAA，0.lmg/LKT，30mg/L蔗糖和5mg/L 瓊脂；
[0041] D、將步驟C中得到的所述胚狀體置于第三培養(yǎng)基中，于22°C，所述光照條件培養(yǎng) 30天，得完整帶根健壯植株，其中，
[0042] 所述第三培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基，0? 5mg/L6-BA，0?lmg/LNAA，30mg/L蔗糖和5mg/ L瓊脂；
[0043] E、在所述步驟D中獲得所述完整帶根健壯植株后，向所述第三培養(yǎng)基中加入少量 自來水，敞口放置2天，待表面角質(zhì)形成后，將所述完整帶根植株取出，洗凈其根部培養(yǎng)基 得幼苗，將所述幼苗移栽到基質(zhì)中培養(yǎng)30天，再將其移栽到大田培養(yǎng)。
[0044] 所述的秋楓胚性愈傷成苗的快速繁殖方法，所述基質(zhì)，其包括：
[0045] 第一基質(zhì)層，其由15重量份稻殼、10重量份鋸末、5重量份草木灰和5重量份珍珠 巖經(jīng)高溫滅菌制得，其厚度為4cm;
[0046] 第二基質(zhì)層，其位于所述第一基質(zhì)層上方，其由20重量份黃壤土、15重量份廢蜜 液、10重量份豆渣、10重量份秸桿、5重量份廄肥和0. 3份酵素菌經(jīng)發(fā)酵制得，其厚度為 5cm；
[0047] 第三基質(zhì)層，其位于所述第二基質(zhì)層上方，其為厚度為Icm的細沙層。
[0048] 所述的秋楓胚性愈傷成苗的快速繁殖方法，所述基質(zhì)中培養(yǎng)的條件為溫度25°C、 濕度為70%、自然光照下培養(yǎng)。
[0049] 實施例2 :
[0050] -種秋楓胚性愈傷成苗的快速繁殖方法，包括以下步驟：
[0051 ] A、將秋楓種子用2 %的洗潔精水溶液浸泡5min后，線狀自來水沖洗18min，再用添 加了 2滴100mg/L吐溫20的0. 1 %的升汞溶液浸泡消毒9min，無菌水沖洗4次，最后用消 毒濾紙去除所述秋楓種子表面水分，得消毒外植體；
[0052] B、將步驟A中得到的所述消毒外植體接種到第一培養(yǎng)基中，于24°C、光照條件下 培養(yǎng)35天，得無菌試管苗，其中，
[0053] 所述第一培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基，0? 3mg/L赤霉素，30mg/L蔗糖和5mg/L瓊脂，
[0054] 所述光照條件為，光照強度15001ux，光照時間9h/天；
[0055] C、將步驟B中得到的所述無菌試管苗的子葉置于第二培養(yǎng)基中，于24°C、所述光 照條件下培養(yǎng)30天，得胚狀體，其中，
[0056] 所述第二培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基，I.Omg/LNAA，0? 2mg/LKT，30mg/L蔗糖和5mg/L 瓊脂；
[0057] D、將步驟C中得到的所述胚狀體置于第三培養(yǎng)基中，于24°C，所述光照條件培養(yǎng) 30天，得完整帶根健壯植株，其中，
[0058] 所述第三培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基，I.Omg/L6-BA，0? 3mg/LNAA，30mg/L蔗糖和5mg/ L瓊脂；
[0059] E、在所述步驟D中獲得所述完整帶根健壯植株后，向所述第三培養(yǎng)基中加入少量 自來水，敞口