一種雞胚蛋性別鑒定方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及生物技術領域，具體說是一種雞胚蛋性別鑒定方法。尤指基于尿囊液中雌激素含量的雞胚蛋性別鑒定的方法，所述雌激素為雌二醇E2或雌激素硫酸鹽El。
【背景技術】
[0002]雞的性別與其生產(chǎn)力息息相關。在商品雞蛋生產(chǎn)中，母雞作為唯一的生產(chǎn)工具，而公雞不具備生產(chǎn)能力要被淘汰。在受精蛋的生產(chǎn)中，而公雞只作為受精蛋的生產(chǎn)工具之一，數(shù)量極少，只有雞總數(shù)量的3%，其余公雞也要被淘汰。在商品肉雞生產(chǎn)中，由于公雞比母雞需要的飼料少，生產(chǎn)母雞肉雞的成本要比公雞高5%以上，大型的肉雞廠會將小母雞淘汰。據(jù)統(tǒng)計，僅在2001年，德國有9200萬只雛雞被殺，在美國和歐盟則更達到了驚人的2.82億和2.26億只。在中國，對北京周邊蛋雞場的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，很多具有孵化能力的蛋雞場在小公雞出雛后即出售，大部分作為生產(chǎn)原料被宰殺。受精的發(fā)生先于蛋殼的形成，且在雞育種上并不能控制性別的偏向。因此，如何在雞胚發(fā)育階段對其進行性別鑒定，并根據(jù)生產(chǎn)需要對不同性別雛雞進行重新配置和合理處理，不僅可以極大的提高養(yǎng)雞業(yè)的生產(chǎn)效益，同時還可以有效避免倫理問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]針對現(xiàn)有技術中存在的缺陷，本發(fā)明的目的在于提供一種雞胚蛋性別鑒定方法，在雞胚發(fā)育階段對其進行性別鑒定，以達到提高生產(chǎn)效益。
[0004]為達到以上目的，本發(fā)明采取的技術方案是:
[0005]—種雞胚蛋性別鑒定方法，其特征在于:基于尿囊液中雌激素含量對雞胚蛋性別進行鑒定，包括如下步驟:
[0006]步驟I，雞胚蛋尿囊液采集；
[0007]步驟2，尿囊液的預處理；
[0008]步驟3，尿囊液中雌激素濃度檢測；
[0009]步驟4，根據(jù)尿囊液中雌激素濃度判斷雞胚蛋性別；
[0010]所述雌激素為雌二醇E2或雌激素硫酸鹽El。
[0011]在上述技術方案的基礎上，步驟I的具體步驟為:
[0012]步驟1.1，在種雞蛋進行孵化8到17天后，在室溫條件下選取雞胚蛋進行表面消毒，
[0013]步驟1.2，將雞胚蛋長軸固定在水平方向并靜置10到20分鐘，
[0014]步驟1.3，對雞胚蛋表面進行鉆孔，
[0015]步驟1.4，負壓抽取尿囊液:使用靠負壓的抽取裝置從孔中扎入蛋殼，扎入深度保持在5毫米以內(nèi)，抽取液體的量不超過5毫升，抽取到的液體即為雞胚蛋尿囊液，
[0016]步驟1.5，抽取完成后再次對蛋孔處消毒，用滴管抽取融化為液體的石蠟滴涂在蛋孔處，待石錯冷卻后將蛋孔完全堵住。
[0017]在上述技術方案的基礎上，步驟1.1中，所述室溫指溫度大于15°C，小于40°C。
[0018]在上述技術方案的基礎上，步驟1.1中，孵化8到17天的雞胚蛋用75%醫(yī)用酒精或1:2500的高錳酸鉀溶液進行表面消毒。
[0019]在上述技術方案的基礎上，步驟1.3中，對雞胚蛋表面進行鉆孔時，對于雞胚蛋長軸豎直與短軸豎直孵化兩種孵化方式，鉆孔位置不同:
[0020]對于雞胚蛋長軸豎直孵化，步驟1.2后，選擇距離最高點15到25mm的長軸上小頭位置的點，將雞胚蛋位置保持不動，用光源從蛋底部向上照射，用微型鉆避開血管進行豎直鉆孔，鉆孔完成后進行消毒并將蛋沿長軸順時針旋轉45度，再次消毒同樣采用75%醫(yī)用酒精或1:2500的高錳酸鉀溶液；
[0021]對于雞胚蛋短軸豎直孵化，步驟1.2后，選擇距離最高點8到15mm的長軸上大頭位置的點，將雞胚蛋位置保持不動，用光源從蛋底部向上照射，用微型鉆避開血管與氣室進行豎直鉆孔，鉆孔完成后進行消毒并將蛋沿長軸順時針旋轉45度，再次消毒同樣采用75%醫(yī)用酒精或1:2500的高錳酸鉀溶液。
[0022]在上述技術方案的基礎上，步驟1.3中，所述微型鉆鉆頭直徑為0.5毫米的鉆頭。
[0023]在上述技術方案的基礎上，步驟1.4中，所述靠負壓的抽取裝置為注射器，且所用針頭直徑為0.45毫米或0.5毫米。
[0024]在上述技術方案的基礎上，步驟2的具體步驟為:
[0025]步驟2.1，將采集到的尿囊液注入無菌離心管中，使用每分鐘2000到3000轉轉速的離心機離心20分鐘，
[0026]步驟2.2，仔細收集離心處理后的上清液，收集過程中如有沉淀形成，應該再次按步驟2.1進行離心處理；
[0027]采用光源照射避開血管鉆孔的方法能省略步驟2，對不采取避開血管鉆孔的方法必須進行步驟2。
[0028]在上述技術方案的基礎上，步驟2.1中所述無菌離心管為1.5毫升或2毫升的無菌離心管。
[0029]在上述技術方案的基礎上，步驟3所述尿囊液中雌激素濃度檢測采用酶聯(lián)免疫分析法、放射免疫分析法、時間分辨焚光免疫分析法、拉曼光譜分析法、液相色譜分析法中的任意一種。
[0030]在上述技術方案的基礎上，判別雞胚蛋性別的依據(jù)是尿囊液中雌激素的濃度，將尿囊液中雌激素濃度在閾值以上的雞胚蛋判斷為雌胚，濃度在閾值以下的雞胚蛋判斷為雄胚。
[0031]在上述技術方案的基礎上，判斷雞胚蛋性別的尿囊液中的雌二醇E2濃度的閾值為 109.9pg/ml，
[0032]判斷雞胚蛋性別的尿囊液中的雌激素硫酸鹽El濃度的閾值為380.6pg/ml。
[0033]本發(fā)明所述的雞胚蛋性別鑒定方法，在雞胚發(fā)育階段對其進行性別鑒定，以達到提高生產(chǎn)效益。本發(fā)明使得在雞胚發(fā)育階段進行性別鑒定得以實現(xiàn)。
[0034]11.如權利要求1所述的雞胚蛋性別鑒定方法，其特征在于步驟4的具體步驟為:判別雞胚蛋性別的依據(jù)是尿囊液中雌激素的濃度，將尿囊液中雌激素濃度在閾值以上的雞胚蛋判斷為雌胚，濃度在閾值以下的雞胚蛋判斷為雄胚。
[0035]12.如權利要求11所述的雞胚蛋性別鑒定方法，其特征在于:
[0036]判斷雞胚蛋性別的尿囊液中的雌二醇E2濃度的閾值為109.9pg/ml，
[0037]判斷雞胚蛋性別的尿囊液中的雌激素硫酸鹽El濃度的閾值為380.6pg/ml。
【附圖說明】
[0038]本發(fā)明有如下附圖:
[0039]圖1本發(fā)明的流程圖。
【具體實施方式】
[0040]以下結合附圖對本發(fā)明作進一步詳細說明。
[0041]如圖1所示，本發(fā)明所述的雞胚蛋性別鑒定方法，具體說是基于尿囊液中雌激素含量對雞胚蛋性別進行鑒定，包括如下步驟:
[0042]步驟I，雞胚蛋尿囊液采集；
[0043]步驟2，尿囊液的預處理；
[0044]步驟3，尿囊液中雌激素濃度檢測；
[0045]步驟4，根據(jù)尿囊液中雌激素濃度判斷雞胚蛋性別；
[0046]所述雌激素為雌二醇E2或雌激素硫酸鹽El。
[0047]本發(fā)明所述的雞胚蛋性別鑒定方法，將雞胚蛋尿囊液中雌激素濃度在閾值以上的雞胚蛋判斷為雌胚，濃度在閾值以下的雞胚蛋判斷為雄胚。
[0048]在上述技術方案的基礎上，步驟I的具體步驟為:
[0049]步驟1.1，選取孵化8到17天的雞胚蛋:在種雞蛋進行孵化8到17天后，在室溫條件下選取雞胚蛋進行表面消毒，
[0050]步驟1.2，將雞胚蛋長軸固定在水平方向并靜置10到20分鐘，
[0051]步驟1.3，對雞胚蛋表面進行鉆孔，
[0052]步驟1.4，負壓抽取尿囊液:使用靠負壓的抽取裝置(例如消毒注射器)從孔中扎入蛋殼，扎入深度保持在5毫米以內(nèi)，抽取液體的量不超過5毫升，優(yōu)選緩慢抽取I到1.5毫升液體，抽取到的液體即為雞胚蛋尿囊液，
[0053]步驟1.5，抽取完成后再次對蛋孔處消毒，用滴管抽取融化為液體的石蠟滴涂在蛋孔處，待石錯冷卻后將蛋孔完全堵住。
[0054]更進一步，對【步驟1.1】、【步驟1.3】、【步驟1.5】中打孔前、打孔后、封口前都進行消毒，與不消毒進行對比試驗:
[0055]1、對100個受精打孔樣本