一種大花序桉的組培快繁方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及按樹栽培技術(shù)領(lǐng)域，特別是設(shè)及一種大花序按的組培快繁方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 按樹原產(chǎn)澳大利亞，是桃金娘科（Mytaceae)按樹屬（Eucalyptus)、杯果木屬 (Ango地ora)、傘房屬(Corymbia)3個(gè)屬樹種的統(tǒng)稱。共有1039個(gè)種、亞種和變種，大花序按 屬于按樹的一個(gè)種。因?yàn)樘烊环植荚诎拇罄麃喞ァ捞m州，故又名昆±蘭按。
[0003] 按樹由于生長(zhǎng)速度快，用途廣泛，經(jīng)濟(jì)效益高，目前已經(jīng)成為世界公認(rèn)的Ξ大人工 林樹種之一。按樹在我國(guó)的引種栽培和發(fā)展非常迅速，對(duì)中國(guó)林業(yè)的發(fā)展發(fā)揮了突出的作 用。到2013年，中國(guó)按樹人工林面積達(dá)440萬(wàn)公頃，占我國(guó)森林面積的2.2%，但提供了占全國(guó) 木材總量25%的木材。為緩解我國(guó)木材資源短缺，解決木材供需矛盾，維護(hù)我國(guó)生態(tài)安全發(fā) 揮了十分重要作用。
[0004] 但目前我國(guó)按樹木材的利用方式，主要是造紙和纖維板，而作為高檔實(shí)木材被忽 視。隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，對(duì)木材的需求越來(lái)越大。據(jù)有關(guān)資料顯示，2007年國(guó)內(nèi)林木產(chǎn)品 折算的木材消費(fèi)總量約3.71億立方米，但國(guó)內(nèi)可供給量只有2.02億立方米，實(shí)際消費(fèi)缺口 超過(guò)1億立方米。而且木材消費(fèi)呈剛性增長(zhǎng)，預(yù)計(jì)到2020年，我國(guó)木材消費(fèi)總量達(dá)到4.57-4.77億立方米，木材供應(yīng)缺口將長(zhǎng)期保持在1-1.5億立方米。木材供求矛盾十分突出，每年 有40%W上木材需要從國(guó)外進(jìn)口，因此，發(fā)展替代天然林實(shí)木材的按樹速生豐產(chǎn)林就顯得十 分迫切。
[000引大花序按是一種頂端優(yōu)勢(shì)強(qiáng)，自然整枝良好，干形通直的常綠高大喬木，樹高可達(dá) 35-45m，其木材呈黃褐色，沉重堅(jiān)固，非常耐久，是很好的銀材，有按樹中的"紅木"之稱。該 樹種耐干旱貧瘡，抗病蟲能力強(qiáng)，后期生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)非常明顯，是商品經(jīng)營(yíng)大徑材的優(yōu)良樹種。
[0006] 我國(guó)引種大花序按始于1972年，在廣東、廣西、海南、福建、四川都做了引種試驗(yàn)。 特別在1982-1989年間，通過(guò)中澳技術(shù)合作一一東口按樹示范林項(xiàng)目實(shí)施，東口林場(chǎng)引種了 大花序按11個(gè)種源，建立了種源試驗(yàn)。到現(xiàn)在，樹高達(dá)30-35m，平均胸徑達(dá)到30-42畑1，樹干 通直，生長(zhǎng)良好，適合東口地區(qū)種植。
[0007] 大花序按生長(zhǎng)迅速，后期生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)明顯，輪伐周期比尾葉按、尾巨按稍長(zhǎng)，在12-15 年，在實(shí)施國(guó)家木材戰(zhàn)略儲(chǔ)備林建設(shè)中，具有極重要的地位。同時(shí)也為解決速生按的大量木 材生產(chǎn)和保障生態(tài)安全的矛盾創(chuàng)造了條件。因?yàn)槲簿薨吹人儇S林在快速發(fā)展中，由于單純 追求經(jīng)濟(jì)效益的超短輪伐期利用，結(jié)果出現(xiàn)造林中樹種單一，全部為短周期工業(yè)用材林，林 分單純，全為純林，林地生物多樣性不夠豐富，產(chǎn)品用途單一，全部用于紙漿材和人造板，實(shí) 木利用的樹種很少，存在森林生態(tài)功能不夠強(qiáng)，抵抗病蟲害能力弱等問(wèn)題。發(fā)展大花序按正 好彌補(bǔ)了尾巨按等樹種的不足。
[0008] 大花序按的優(yōu)越性非常明確，可是，因?yàn)楝F(xiàn)在的存量很少，而且開花結(jié)實(shí)量不多， 要擴(kuò)大種植，種子要依靠進(jìn)口，價(jià)格昂貴，種子播種后發(fā)芽率低，遠(yuǎn)低于尾葉按，加上實(shí)生苗 造林后遺傳分化明顯，進(jìn)而制約了規(guī)模推廣種植。同時(shí)，采用無(wú)性繁殖方式獲得苗木，大花 序按是一種難生根樹種，桿插繁殖生根困難，生根率幾乎為零，因此，種苗問(wèn)題已成為發(fā)展 大花序按的突出瓶頸。
[0009] 為打破運(yùn)一制約瓶頸，利用組培快繁方法是最有效的途徑。
[0010] 我國(guó)在20世紀(jì)70年代開展按樹組培研究，至今，在尾葉按、巨按、赤按、園角按及其 雜交子代的組培繁育上，取得了長(zhǎng)足的進(jìn)步，已大規(guī)模應(yīng)用于工廠化生產(chǎn)苗木造林。對(duì)于大 花序按組培育苗，有不少學(xué)者進(jìn)行了嘗試，取得一定進(jìn)展，但由于各學(xué)者的研究結(jié)果不同， 許多問(wèn)題都有待進(jìn)一步研究和解決。最關(guān)鍵的是，至今未見到有建立大花序按組培無(wú)性系 林分的報(bào)道。
[0011] 廣西國(guó)有東口林場(chǎng)立足于推廣引種馴化成功的大花序按種源，選取優(yōu)良家系的優(yōu) 良單株，重視外植體的選擇，直接用優(yōu)樹伐倒后的萌芽條作為外植體，由芽器官離體誘導(dǎo)無(wú) 菌芽的途徑獲得無(wú)菌快繁體系，不經(jīng)過(guò)愈傷組織途徑，沒(méi)有經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程。運(yùn)樣的組培苗 造林后能夠保持母樹的優(yōu)良性狀，造林后林相整齊，生長(zhǎng)量高，是目前最佳的林木組培方 式，目前，大花序按組培育苗技術(shù)取得突破性進(jìn)展，建立了大田種植的組培無(wú)性系苗木。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 本發(fā)明的目的在于提供一種采用引種馴化后適合本地生長(zhǎng)的大花序按優(yōu)良種源/ 家系的優(yōu)良單株，伐倒后萌芽條作外殖體，不經(jīng)過(guò)愈傷組織途徑，直接由芽器官離體誘導(dǎo)無(wú) 菌芽進(jìn)行組織培養(yǎng)，快速獲得大量的再生植株的大花序按的組培快繁方法，使用該方法得 到的無(wú)菌繁殖體系，生長(zhǎng)穩(wěn)定，重復(fù)性良好，可反復(fù)多代規(guī)模擴(kuò)繁，用無(wú)菌芽作生根培養(yǎng)，總 的生根率達(dá)到72.8%W上，已具備推廣價(jià)值，生根小苗移植后成活率高達(dá)78%，苗木生長(zhǎng)正 常，再生植株大田種植后，生長(zhǎng)健壯，能保持優(yōu)樹的優(yōu)良遺傳性狀。
[0013] 為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，采取如下技術(shù)方案： 一種大花序按的組培快繁方法，是采用大花序按優(yōu)良家系的優(yōu)良單株，對(duì)其進(jìn)行伐粧 萌芽，利用萌芽作為外殖體，通過(guò)帶芽莖段離體誘導(dǎo)無(wú)菌芽，經(jīng)過(guò)對(duì)無(wú)菌芽的繼代增殖培 養(yǎng)、生根培養(yǎng)和生根苗移栽，獲得再生植株； 該方法的具體步驟如下： (1) 在澳大利亞引種的家系試驗(yàn)林中，經(jīng)測(cè)試對(duì)比，選擇出適合本地生長(zhǎng)的大花序按優(yōu) 良家系； (2) 在大花序按優(yōu)良家系中，通過(guò)測(cè)量胸徑、樹高、蓄積、連年生長(zhǎng)量、木材材性W及干 形指標(biāo)，綜合對(duì)比后選擇出優(yōu)良單株； (3) 將優(yōu)良單株在離地面15-20cm高度處伐倒，促萌芽，當(dāng)萌芽條長(zhǎng)到12-18cm時(shí)，剪取 萌芽條，用水浸泡基部帶回實(shí)驗(yàn)室備用； (4) 萌芽條修剪去葉片、葉柄，用自來(lái)水流水沖洗3-5min，再用飽和洗衣粉溶液洗涂 lOmin，用純凈水清洗干凈； 巧)在超凈工作臺(tái)上，將萌芽條剪去嫩梢段和基部老化部分，留半木質(zhì)化莖段，切成長(zhǎng) 2-3cm，保留有1-2個(gè)潛伏芽的切段做消毒材料； (6)將待消毒材料置于高壓滅菌處理過(guò)的無(wú)菌瓶中，用75%酒精溶液浸泡15-17S，無(wú)菌 水清洗3-5次，洗去殘留酒精，再用0. l%Hg化2溶液浸泡并適當(dāng)攬拌，7-9min后倒去Hg化2溶液 至專用收集罐中，用無(wú)菌水清洗材料5-6次； (7) 用綴子夾取清洗好的莖段，放置在滅菌的接種碟上，用滅菌過(guò)的濾紙吸干表面水 分，切去葉柄和莖段的兩端，接種到無(wú)菌芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，全暗培養(yǎng)8-12天后，在溫度26±2 °C，光照12h/d，光照強(qiáng)度1500-2000 lux條件下培養(yǎng)15-25天； (8) 外殖體萌芽后，側(cè)芽和不定芽不斷生長(zhǎng)，萌芽15-20天后，選取沒(méi)有污染的無(wú)菌芽， 切割后轉(zhuǎn)入繼代增殖培養(yǎng)基上，在溫度26±2°C，光照強(qiáng)度2000-25001UX條件下，培養(yǎng)18-23 天，W促進(jìn)叢芽增殖和生長(zhǎng)，在增殖培養(yǎng)基上反復(fù)繼代培養(yǎng)，無(wú)菌芽苗數(shù)量不斷增多； (9) 當(dāng)繼代培養(yǎng)的芽苗長(zhǎng)到2-3cm，并有3-4對(duì)葉片時(shí)，切取芽苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基上培 養(yǎng)，溫度28-30°C，光照強(qiáng)度1200-15001UX，培養(yǎng)6-10天，當(dāng)切口冒出短根或根點(diǎn)，出根率達(dá) 到30-40%時(shí)，移瓶至溫度28-35°C，光照強(qiáng)度3000-50001UX的自然光下培養(yǎng)15-20天； (10) 生根齊全，苗高3-4cm的生根瓶苗，洗去瓊脂，移栽至用KMn化消毒過(guò)的黃屯、±和賠 石做基質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)杯或羥基質(zhì)育苗杯上，黃屯、上和賠石的比例為5:1，培養(yǎng)60-80天，得到再生 植株； (11) 將具有發(fā)育不完全根，苗高1.5-2.0cm的生根瓶苗，洗去瓊脂，移栽到用KMn化消毒 過(guò)的黃屯、±+賠石+河沙按照4:1:1做基質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)杯，移栽前用481'1生根