015]增殖繼代培養(yǎng)基配制:將25g蔗糖、9g瓊脂加入IL蒸餾水中攪拌滅菌，滅菌后待其冷卻至55°C左右，在無(wú)菌條件下，將3g羧化殼聚糖、30mg抗生素、10mg惡霉靈、300mg烏洛托品、700mg霜霉威鹽酸鹽加入并充分混勻；在無(wú)菌條件下，再將900mg MS+6_BA、600mg NAA,3.5g CCC、500mg維生素B1、500mg維生素B2、300mg維生素B6、150mg維生素Bg加入并充分混勻；
選擇健壯的植物組織外植體，將外植體在無(wú)菌條件下接種至初代培養(yǎng)基中，按照常規(guī)植物組培的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)30天后，將形成的大量愈傷組織和芽在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移至增殖繼代培養(yǎng)基中，按照常規(guī)植物組培的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)45天后，即可獲得大量的健壯芽苗。
[0016]按照本發(fā)明的植物抗菌培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)與常規(guī)培養(yǎng)基相比，本發(fā)明的培養(yǎng)基在植物組織初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)中污染率分別為0.005%、0%，而常規(guī)培養(yǎng)基的污染率為5.9%、5.7%;生芽率與生根率，本發(fā)明的植物抗菌培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)是常規(guī)培養(yǎng)基的2.9倍和3.4倍。
[0017]實(shí)施例三
初代培養(yǎng)基配制:將30g蔗糖、1g瓊脂加入IL蒸餾水中攪拌滅菌，滅菌后待其冷卻至55°C左右，在無(wú)菌條件下，將4g羧化殼聚糖、40mg抗生素、150mg惡霉靈、400mg烏洛托品、800mg霜霉威鹽酸鹽加入并充分混勻；在無(wú)菌條件下，再將4g MS+6-BA、800mg NAA、700mg IAA,200mg氯化鋅、100mg維生素B1、800mg維生素B6加入并充分混勻，即制得初代培養(yǎng)基。
[0018]增殖繼代培養(yǎng)基配置:將30g蔗糖、1g瓊脂加入IL蒸餾水中攪拌滅菌，滅菌后待其冷卻至55°C左右，在無(wú)菌條件下，將4g羧化殼聚糖、40mg抗生素、150mg惡霉靈、400mg烏洛托品、800mg霜霉威鹽酸鹽加入并充分混勻;在無(wú)菌條件下，再將100mg MS+6_BA、700mg NAA、4g CCC、600mg維生素B1、600mg維生素B2、400mg維生素B6、200mg維生素Bg加入并充分混勾；
選擇健壯的植物組織外植體，將外植體在無(wú)菌條件下接種至初代培養(yǎng)基中，按照常規(guī)植物組培的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)30天后，將形成的大量愈傷組織和芽在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移至增殖繼代培養(yǎng)基中，按照常規(guī)植物組培的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)45天后，即可獲得大量的健壯芽苗。
[0019]按照本發(fā)明的植物抗菌培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)與常規(guī)培養(yǎng)基相比，本發(fā)明的培養(yǎng)基在植物組織初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)中污染率分別為0%、0%，而常規(guī)培養(yǎng)基的污染率為5.3%、5.1%;生芽率與生根率，本發(fā)明的植物抗菌培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)是常規(guī)培養(yǎng)基的2.8倍和2.9倍。
[0020]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡依本發(fā)明申請(qǐng)專(zhuān)利范圍所做的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種植物組培抗菌培養(yǎng)基，其特征在于:由初代培養(yǎng)基和增殖繼代培養(yǎng)基組成； 初代培養(yǎng)基含有以下按質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)的組分:羧化殼聚糖0.2%?0.4%、抗生素0.002%?0.004%、惡霉靈0.005%?0.015%、烏洛托品0.02%?0.04%、霜霉威鹽酸鹽0.06%?0.08%、MS+6-BA 0.3%?0.4%、萘乙酸0.06%?0.08%、生長(zhǎng)素 0.05%?0.07 %； 增殖繼代培養(yǎng)基含有以下按質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)的組分:羧化殼聚糖0.2%?0.4%、抗生素0.002%?0.004%、惡霉靈0.005%?0.015%、烏洛托品0.02%?0.04%、霜霉威鹽酸鹽0.06%?0.08%、MS+6-BA 0.08%?0.1%、萘乙酸0.05%?0.07%、矮壯素 0.3%?0.4 %。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物組培抗菌培養(yǎng)基，其特征在于:由初代培養(yǎng)基和增殖繼代培養(yǎng)基組成； 初代培養(yǎng)基由以下按質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)的組分組成: 蔗糖2%?3%、瓊脂0.8%?I.0%、羧化殼聚糖0.2%?0.4%、抗生素0.002%?0.004%、惡霉靈0.005%?0.015%、烏洛托品0.02%?0.04%、霜霉威鹽酸鹽0.06%?0.08%、MS+6_BA 0.3%?0.4%、萘乙酸0.06%?0.08%、生長(zhǎng)素0.05%?0.07 %、氯化鋅0.01%?0.02%、維生素Bi0.05%?0.10%、維生素B6 0.06%?0.08%，余量為蒸餾水；以上各原料質(zhì)量百分?jǐn)?shù)之和為100%； 增殖繼代培養(yǎng)基由以下按質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)的組分組成: 蔗糖2%?3%、瓊脂0.8%?I.0%、羧化殼聚糖0.2%?0.4%、抗生素0.002%?0.004%、惡霉靈0.005%?0.015%、烏洛托品0.02%?0.04%、霜霉威鹽酸鹽0.06%?0.08%、MS+6_BA 0.08%?0.1%、萘乙酸0.05%?0.07%、矮壯素0.3%?0.4 %、維生素Bi 0.04%?0.06%、維生素B20.04%?0.06%、維生素B6 0.02%?0.04%、維生素B9 0.01%?0.02%，余量為蒸餾水；以上各原料質(zhì)量百分?jǐn)?shù)之和為100%。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的植物組培抗菌培養(yǎng)基，其特征在于:所述的抗生素為兩性霉素B和青霉素按質(zhì)量比1:1組成的混合物。4.一種制備如權(quán)利要求2所述的植物組培抗菌培養(yǎng)基的方法，其特征在于: 初代培養(yǎng)基的配制方法為: 將蔗糖、瓊脂加入蒸餾水中攪拌滅菌，滅菌后待其冷卻至50-60°C，在無(wú)菌條件下，將羧化殼聚糖、抗生素、惡霉靈、烏洛托品、霜霉威鹽酸鹽加入并充分混勻，在無(wú)菌條件下，再將MS+6-BA、萘乙酸、生長(zhǎng)素、氯化鋅、維生素仏、維生素B6加入并充分混勻，制得初代培養(yǎng)基； 增殖繼代培養(yǎng)基的制備方法為: 將蔗糖、瓊脂加入蒸餾水中攪拌滅菌，滅菌后待其冷卻至50-60°C，在無(wú)菌條件下，將羧化殼聚糖、抗生素、惡霉靈、烏洛托品、霜霉威鹽酸鹽加入并充分混勻，在無(wú)菌條件下，再將MS+6-BA、萘乙酸、矮壯素、維生素B1、維生素B2、維生素B6和維生素B9加入并充分混勻，制得增殖繼代培養(yǎng)基。5.—種如權(quán)利要求1或2所述的植物組培抗菌培養(yǎng)基的使用方法，其特征在于:選擇健壯的植物組織外植體，將外植體在無(wú)菌條件下接種至初代培養(yǎng)基中，按照常規(guī)植物組培的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)30天后，將形成的愈傷組織和芽在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移至增殖繼代培養(yǎng)基中，按照常規(guī)植物組培的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)45天后，獲得健壯芽苗。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)一種植物組培抗菌培養(yǎng)基及其制備方法，初代培養(yǎng)基含有羧化殼聚糖、抗生素、惡霉靈、烏洛托品、霜霉威鹽酸鹽、MS+6-BA（6-芐基嘌呤）、萘乙酸、生長(zhǎng)素等；增殖繼代培養(yǎng)基含有羧化殼聚糖、抗生素、惡霉靈、烏洛托品、霜霉威鹽酸鹽、MS+6-BA、萘乙酸和矮壯素等。本發(fā)明通過(guò)在初代培養(yǎng)基和增殖繼代培養(yǎng)基中添加抗菌劑，降低了植物組織初代培養(yǎng)、組織繼代培養(yǎng)過(guò)程中的污染率，提高植物組培的生芽率和生根率，提高經(jīng)濟(jì)效益。
【IPC分類(lèi)】A01H4/00
【公開(kāi)號(hào)】CN105532482
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610140530
【發(fā)明人】張玉華, 樊仲書(shū), 王海斌, 樊昌華, 孔祥海, 樊君早, 陳曉婷
【申請(qǐng)人】龍巖市禾康生物科技有限公司
【公開(kāi)日】2016年5月4日
【申請(qǐng)日】2016年3月14日