一種棕點(diǎn)石斑魚(yú)與清水石斑魚(yú)的人工雜交育種方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種棕點(diǎn)石斑魚(yú)與清水石斑魚(yú)的人工雜交育種方法。
【背景技術(shù)】
[0002]棕點(diǎn)石斑魚(yú)(學(xué)名:Epinephelus fuscoguttatus)，隸屬解形目、飽科、石斑魚(yú)屬，又稱(chēng)老虎斑、褐點(diǎn)石斑魚(yú)，分布于紅海、印度洋非洲東岸至太平洋波利尼西亞、北達(dá)琉球群島、南至澳大利亞、臺(tái)灣島以及南海諸島、澎湖列島等海域等，棲息深度1-60米，體長(zhǎng)可達(dá)120厘米，屬于暖水性近岸及珊瑚礁魚(yú)類(lèi)，生活在水質(zhì)清澈的珊瑚礁、瀉湖。肉食性，以魚(yú)類(lèi)、頭足類(lèi)、甲殼類(lèi)為食，可做為食用魚(yú)、養(yǎng)殖魚(yú)及觀賞魚(yú)。棕點(diǎn)石斑魚(yú)攝食兇猛、生長(zhǎng)快，廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖生產(chǎn)。
[0003]清水石斑魚(yú)(EpinepheIus polyphekad1n)，是飽科石斑魚(yú)屬的一種，分布于紅海、非洲東海岸的法屬波利尼西亞、日本南部、澳大利亞的昆士蘭州南部、豪勛爵島等海域，清水石斑魚(yú)屬暖水性中下層魚(yú)類(lèi)。成魚(yú)全身為褐色。尾鰭后緣圓形。棲息于近海底層。目前，還沒(méi)有用于人工養(yǎng)殖。清水石斑魚(yú)有生長(zhǎng)快、肉質(zhì)鮮甜爽口、容易烹調(diào)的特點(diǎn)。
[0004]為獲得兼具二種親本特點(diǎn)的雜交子一代，提供一種棕點(diǎn)石斑魚(yú)與清水石斑魚(yú)人工雜交育種的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的問(wèn)題是，針對(duì)自然物種在經(jīng)濟(jì)性狀上的不足，設(shè)計(jì)出一種石斑魚(yú)的種間雜交、得到兼具二親本優(yōu)勢(shì)的批量仔魚(yú)的方法，用于規(guī)?；B(yǎng)殖生產(chǎn)。
[0006]本發(fā)明為解決其問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是:
[0007]—種棕點(diǎn)石斑魚(yú)與清水石斑魚(yú)的人工雜交育種方法，包括以下步驟:
[0008](I)親本選擇
[0009]a.雌性親本:選擇5齡以上、體型正常、無(wú)病害、活力強(qiáng)的健康棕點(diǎn)石斑魚(yú)作為雌性親本；
[0010]b.雄性親本:選擇5齡以上、體型正常、無(wú)病害、活力強(qiáng)的健康清水石斑魚(yú)作為雄性親本；
[0011](2)親本的培育
[0012]a.采用池塘控溫培育親本，根據(jù)二種親本性腺發(fā)育對(duì)水溫的要求不同，二種親本分別在不同池塘進(jìn)行培育，保證二種親本的性腺發(fā)育在時(shí)間上達(dá)到同步成熟；
[0013]b.棕點(diǎn)石斑魚(yú)親魚(yú)培育池塘的規(guī)格及水溫控制:培育親本的池塘為露天池塘，取自然水溫，池塘面積I畝，水深3 — 3.5m，設(shè)進(jìn)、排水口各I個(gè)，培育密度200 — 300尾/畝，雌雄比例1:1，當(dāng)春季水溫上升至24°C開(kāi)始進(jìn)入強(qiáng)化培育；
[0014]c.清水石斑魚(yú)親魚(yú)培育池塘的規(guī)格及水溫控制:培育親本的池塘須加蓋保溫棚，春季水溫較同期的露天池塘水溫高出2°C左右，池塘面積I畝，水深3 — 3.5m，設(shè)進(jìn)、排水口各I個(gè)，培育密度150 — 200尾/畝，雌雄比例1:1;春季水溫上升至26°C開(kāi)始進(jìn)入強(qiáng)化培育；
[0015]d.日常培育的飼料種類(lèi)與投喂量:二種親本都以小魷魚(yú)、藍(lán)圓鰺、鮐魚(yú)作為主要飼料，適合的飼料魚(yú)塊長(zhǎng)6 — 8cm、寬4一6cm，每天投喂飼料I次，下午投喂，每次投喂量控制在魚(yú)體重的2% — 2.5% ；
[0016]e.強(qiáng)化培育的飼料種類(lèi)與投喂量:春季水溫上升，當(dāng)露天池塘的水溫上升至24°C時(shí)，加蓋保溫棚的池塘水溫上升至26°C左右，二種親同時(shí)進(jìn)入強(qiáng)化培育階段，二種親本都以小魷魚(yú)、藍(lán)圓鰺、鮐魚(yú)作為飼料，每個(gè)魚(yú)塊飼料中塞入維生素E軟膠囊I粒(50mg)投喂，每天投喂I次，日投喂量為親魚(yú)體重的2 — 3%，實(shí)際投喂量受天氣、水溫等條件影響而有增減；
[0017](3)親魚(yú)性腺發(fā)育程度的檢查和判斷
[0018]a.對(duì)親本進(jìn)行強(qiáng)化培育二周后，每周從親魚(yú)群體中挑選部分個(gè)體進(jìn)行一次成熟度檢查；
[0019]b.棕點(diǎn)石斑魚(yú)雌性親本的檢查:從棕點(diǎn)石斑魚(yú)群體中選擇雌性個(gè)體，置于平臺(tái)上實(shí)施檢查，外觀上腹部隆起，生殖孔微紅，即可初步判定為達(dá)到性成熟；
[0020]c.清水石斑魚(yú)雄性親本的檢查:從清水石斑魚(yú)群體中選擇雄性個(gè)體，置于平臺(tái)上實(shí)施檢查，在魚(yú)腹部，用手從魚(yú)腹部向生殖孔方向推擠，能擠出白色精液的個(gè)體即已經(jīng)達(dá)到性成熟；
[0021](4)人工受精
[0022]a.采精:取清水石斑魚(yú)成熟的雄性個(gè)體，用干毛巾將魚(yú)腹部擦干，酒精棉球?qū)ι晨紫?，用手在魚(yú)體腹部，從前向生殖孔方向推擠，任乳白色的精液從生殖孔流出，用1ml注射器，將精液吸取，一尾成熟的雄性個(gè)體可取得精液3 — 8ml，注入試管中，備用；
[0023]b.擠卵:用濕毛巾將棕點(diǎn)石斑魚(yú)魚(yú)體包裹，暴露生殖孔，操作者戴上乳膠手套，用手指插入魚(yú)的生殖孔，將生殖孔打開(kāi)，然后用手在魚(yú)腹部從前向生殖孔方向推擠，成熟卵子即可流出，在生殖孔下方用盆接住流出的卵子；
[0024]c.人工授精:向盛有卵子的盆內(nèi)加入干凈海水，I千克卵子加入海水10L，一邊加水一邊輕輕攪動(dòng)，同時(shí)加入經(jīng)過(guò)海水稀釋的清水石斑魚(yú)精液，加入量為每千克卵子1ml，精卵混勻之后靜置3 — 5min，之后用干凈的海水沖洗受精卵3 — 4遍；
[0025](5)受精卵的孵化
[0026]準(zhǔn)備一個(gè)容積500L、底部設(shè)有排水閥的孵化桶，在孵化桶內(nèi)放置氣石充氣，將經(jīng)過(guò)步驟(4)處理過(guò)的受精卵放入孵化桶中孵化，受精卵孵化條件為水溫25 — 30°C，鹽度28 —33，pH7.8?8.5，孵化密度為250 — 300萬(wàn)粒受精卵/m3，孵化過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)其中有死卵或未受精卵要及時(shí)排除，每2小時(shí)換水一次，每次換水量為孵化桶容積的一半，以保持孵化桶內(nèi)海水的清新；
[0027](6)受精卵的包裝運(yùn)輸
[0028]a.雜種受精卵經(jīng)孵化8小時(shí)左右，胚胎發(fā)育至原腸期，即可將受精卵包裝、運(yùn)輸至育苗場(chǎng)，受精卵在孵化24 — 26小時(shí)后，即可孵出仔魚(yú)，用于人工育苗；
[0029]b.包裝運(yùn)輸方法是用尼龍袋充氧運(yùn)輸法，一只70cm X 40cm的尼龍袋，裝上過(guò)濾海水5 — 8L，約占尼龍袋容積的1/4，放入受精卵100g，排除袋內(nèi)空氣，充進(jìn)氧氣并扎緊袋口，再用紙箱或泡沫塑料箱包裝好，立即裝上運(yùn)輸工具。
[0030]在本發(fā)明中，所述步驟(4)a中，將取出的精液注入試管，密封，4°C暫存，備用，暫存的精液在一周內(nèi)仍有授精能力。
[0031]在本發(fā)明中，所述步驟(4)b中，對(duì)成熟雌性棕點(diǎn)石斑魚(yú)合適的擠卵時(shí)機(jī)是農(nóng)歷初一至初六，人工授精操作的當(dāng)天下午，提前從培育池塘中起捕棕點(diǎn)石斑魚(yú)親魚(yú)，選擇出雌性親魚(yú)，暫養(yǎng)于水泥池中，于20:00 — 24:00實(shí)施人工授精。
[0032]在本發(fā)明中，所述步驟(4)c中，清水石斑魚(yú)精液較濃密，須用海水稀釋后使用，稀釋的方法是:將備用的精液取出Iml，注入燒杯，加入91m海水，晃動(dòng)燒杯，將精液與海水快速混均，立即加入到已經(jīng)加入海水的卵子中，從精子加入海水稀釋至將稀釋后的精液加入卵子中，全過(guò)程在I分鐘內(nèi)完成。
[0033]在本發(fā)明中，雜種魚(yú)的受精卵在24— 25°C度水溫條件下，胚胎發(fā)育時(shí)間約24 —26h，如果預(yù)計(jì)到達(dá)目的地之前仔魚(yú)可能在運(yùn)輸過(guò)程中孵化出仔魚(yú)，則不能使用受精卵運(yùn)輸?shù)姆绞剑瑧?yīng)改為運(yùn)輸仔魚(yú)。
[0034]在本發(fā)明中，所述步驟(6)中，運(yùn)輸受精卵，氣溫高時(shí)，包裝箱中可加上適量冰袋降溫，適宜的運(yùn)輸溫度為24 — 25°C度。
[0035]綜上所述，本發(fā)明為一種石斑魚(yú)屬間雜交育種方法，本發(fā)明的有益效果:
[0036](I)清水石斑魚(yú)目前未用于人工養(yǎng)殖，本發(fā)明選擇棕點(diǎn)石斑魚(yú)作為雌性親本、清水