[0023]取3個(gè)洗刷干凈的10000毫升的蒸餾水桶，每個(gè)瓶加入步驟I所述培養(yǎng)液5000-6000毫升，搖勻，取生長(zhǎng)旺盛、處于指數(shù)生長(zhǎng)期、無(wú)污染、純種的中華盒形藻，布氏雙尾藻，翼根管藻依次分別進(jìn)行接種，進(jìn)行單種培養(yǎng)。接種密度為中華盒形藻2-3萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，布氏雙尾藻4-6萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，翼根管藻圓篩藻3.5-5萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，搖勻，將此蒸餾水桶放進(jìn)微藻培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)。桶口處用一橡膠塞塞住，塞子上打上2個(gè)孔，孔的直徑為5毫米，插入長(zhǎng)短不等的2根玻璃管，玻璃管外徑5毫米，較長(zhǎng)的一根長(zhǎng)度為70-80厘米，用以充氣，較短的一根為排氣管，長(zhǎng)度為8-10厘米，兩端露出玻璃即可。長(zhǎng)玻璃管底部插入接近桶底，上端用較柔軟的塑料或乳膠管與空壓機(jī)相連，充入混合氣體，每個(gè)桶充氣量為3-5升/分鐘，混合氣體成分為Vs^: Ym-V廳氣=98%:1%:0.8%:0.2% (體積比)，連續(xù)不間斷充氣。微藻培養(yǎng)室內(nèi)空調(diào)控溫，節(jié)能燈照明，共培養(yǎng)9天，前3天溫度設(shè)為21-22°C，光照強(qiáng)度為3000-40001ux，第4-6天溫度設(shè)為23-25°C，光照強(qiáng)度6000_70001ux，第7-9天設(shè)為27_29°C和8000-lOOOOlux，第6天每個(gè)桶添加步驟I中所述新鮮培養(yǎng)液800毫升，以補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)鹽的消耗，第7天每個(gè)瓶添加蒸餾水500毫升，以補(bǔ)充因充氣造成的水分損耗并稀釋藻液，到第9天，中華盒形藻密度可達(dá)90萬(wàn)-120萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，布氏雙尾藻密度達(dá)50萬(wàn)-75萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，翼根管藻達(dá)65萬(wàn)-85萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，停止培養(yǎng)，準(zhǔn)備用此藻液投喂翡翠貽貝幼蟲。
[0024]步驟3翡翠貽貝幼蟲的培養(yǎng)
[0025]取I個(gè)圓柱形麥飯石桶，直徑70-80厘米，高65-75厘米，桶厚度2_3厘米，將翡翠貽貝D形幼蟲置于此桶中培養(yǎng)，敞口培養(yǎng)(即桶無(wú)需加蓋)，培養(yǎng)用水為磁化海水，加磁化海水至水深0.40-45米，室內(nèi)培養(yǎng)，空調(diào)控溫，節(jié)能燈照明，調(diào)節(jié)溫度至23-26°C，光照2000-30001UX，翡翠貽貝D形幼蟲放養(yǎng)密度為5-7個(gè)/毫升，按每個(gè)幼蟲每天投喂中華盒形藻10000-15000個(gè)，布氏雙尾藻2000-3000個(gè)，翼根管藻6000-8000個(gè)的量投喂3種藻液，分早中晚三次投喂，每次間隔8小時(shí)，以后隨著幼蟲生長(zhǎng)，體長(zhǎng)每增大一倍，投餌量也增大一倍，同時(shí)用空壓機(jī)不間斷充氣，充入混合氣體，混合氣體成分為Ve: Ym-Ymn= 97%:2%:0.5%:0.5%；充氣管末端連接一散氣石，充氣量為8-12升/分鐘。當(dāng)幼體發(fā)育至變態(tài)期時(shí)，有40%幼體出現(xiàn)眼點(diǎn)，即可投放附著基，用消毒后的20目的聚乙烯網(wǎng)片6-12片，分成3束吊掛在麥飯石桶中用作附著基，每天用虹吸管法換水一次，換水量為1/4-1/3，隨著幼體生長(zhǎng)，換水量也逐漸增加，至殼頂幼蟲后期換水量達(dá)80%;換水時(shí)用120目的篩絹過濾、阻擋，避免幼蟲隨水流逃逸;培養(yǎng)28-32天，稚貝殼高可達(dá)0.25厘米時(shí)，將網(wǎng)片上的苗洗刷下來，即可移入海洋培養(yǎng)或銷售。
[0026]所述聚乙烯網(wǎng)片采用的消毒劑為中草藥復(fù)合消毒劑0.4-0.7份。
[0027]其中中草藥復(fù)合消毒劑組成成分(重量份數(shù)比):紅背菜2-4份，魚腥草6-9份，柴胡5-8份，連錢草7-12份，白鮮皮10-15份，蒼術(shù)7-12份，地膚子8-15份，防風(fēng)5-7份，薄荷3-6份，板藍(lán)根0.5-0.9份，白芷10-14份，穿心蓮5-8份，沙棘2_6份，桑黃1-3份。
[0028]步驟I中所述NH4Cl，KH2P04，NaH⑶3，MgS04.7H20，(NH4)2SO^CaCl2.2H20，NaCl，Na2S13,CH3COONa,FeSO4,MnSO4.7H20,CoCl2.6H2O,NiCl2.6H2O，CH3CH2COONa化學(xué)藥品純度均需化學(xué)純級(jí)別;但尿素可以是普通農(nóng)用化肥級(jí)別；
[0029]步驟I中所述人尿制備方法:取尿液，自然發(fā)酵72小時(shí)；取一3000毫升三角燒瓶，加入發(fā)酵過的尿液1500暈升，加熱，煮沸4-5分鐘，冷卻，備用；
[0030]步驟I中所述鈦溶液制備方法(重量比):把0.7366份草酸鈦，溶解于100份蒸餾水中，加入5份氫氧化銨，使之成堿性，發(fā)生沉淀，用離心法將沉淀集中，用20份0.05mol/L的硫酸溶解即得；
[0031]步驟2所述三種微藻是中華盒形藻，布氏雙尾藻，翼根管藻；
[0032]步驟2中接種用中華盒形藻，布氏雙尾藻，翼根管藻預(yù)先進(jìn)行提純(本領(lǐng)域常規(guī)方法，只要實(shí)現(xiàn)提純即可，例如米氏提取法)，以確保接種時(shí)藻種為純種且處于生長(zhǎng)旺盛的指數(shù)生長(zhǎng)期；
[0033]步驟I和3所述磁化海水制備方法:取海水，脫脂棉過濾，加熱，煮沸3-5分鐘，冷卻，流經(jīng)磁化水器后，即為磁化水；磁化水器磁感應(yīng)強(qiáng)度為0.3T，流量為2-3t/h，流速為0.Ι-Ο.2m/s；
[0034]步驟I中各種營(yíng)養(yǎng)鹽要按配方中提供的順序加入，以免發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；
[0035]步驟2中所用橡膠塞、玻璃管均需洗刷干凈放在65-75°C烘箱中烘干后使用；
[0036]步驟I所述麥飯石粉制備方法:取麥飯石，粉碎機(jī)粉碎至面粉狀，顆?？赏ㄟ^10-120目篩絹即可;
[0037]步驟2所述接種過程需在無(wú)菌操作臺(tái)上進(jìn)行；
[0038]步驟3所述用聚乙烯網(wǎng)片消毒方法:將網(wǎng)片洗刷干凈，后放在5%孔雀石綠溶液中(重量比)浸泡12小時(shí)，后用煮沸冷卻海水沖洗干凈即可；
[0039]步驟3所述附著基，如果沒有聚乙烯網(wǎng)片，可用棕繩代替，用法和用量相同，但聚乙烯網(wǎng)片附著后培育成活率高且生長(zhǎng)快，出苗量更高，因此建議最好用聚乙烯網(wǎng)片附苗；
[0040]步驟3所述幼蟲培養(yǎng)期間水溫必須保持穩(wěn)定，日溫差不超過1°C，否則易造成幼體沉底死亡。
[0041]最后應(yīng)說明的是:以上實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案，而非對(duì)其限制;盡管參照前述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解:其依然可以對(duì)前述實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換;而這些修改或者替換，并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明實(shí)施例技術(shù)方案的精神和范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種用麥飯石桶高密度培養(yǎng)翡翠貽貝幼蟲的方法，其特征在于步驟如下: 步驟I三種餌料微藻培養(yǎng)液的配制； 所述三種餌料微藻是中華盒形藻與布氏雙尾藻與翼根管藻； 微藻培養(yǎng)液成分，按照重量份數(shù)比如下:人尿1-1.2份，NH4C10.1-0.2份，KH2PO40.02-.0.04 份，NaHCO30.8-1.2份，MgSO4.7H200.03-0.05 份，(NH4)2SO40.04-0.08 份，CaCl2.2Η200.05-0.08份，NaCl0.8-1.2份，Na2S130.04-0.06份，CH3C00Na，0.03-0.07份，F(xiàn)eSO40.06-0.09份，MnSO4.7H200.003-0.006份，CoCl2.6H200.007-0.009份，NiCl2.6H200.003-0.006份，CH3CH2COONa0.03-0.06份，尿素0.2-0.4份，鈦溶液0.5-0.8份，鹽酸硫胺素0.0001-0.002份，麥飯石粉0.2-0.5份，磁化海水1000份;三種餌料微藻(中華盒形藻，布氏雙尾藻，翼根管藻)培養(yǎng)液成分配方相同； 步驟2三種微藻的培養(yǎng)； 取3個(gè)洗刷干凈的10000毫升的蒸餾水桶，每個(gè)瓶加入步驟I所述培養(yǎng)液5000-6000毫升，搖勻，取生長(zhǎng)旺盛、處于指數(shù)生長(zhǎng)期、無(wú)污染、純種的中華盒形藻，布氏雙尾藻，翼根管藻依次分別進(jìn)行接種，進(jìn)行單種培養(yǎng);接種密度為中華盒形藻2-3萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，布氏雙尾藻.4-6萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，翼根管藻圓篩藻3.5-5萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，搖勻，將此蒸餾水桶放進(jìn)微藻培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng);桶口處用一橡膠塞塞住，塞子上打上2個(gè)孔，孔的直徑為5毫米，插入長(zhǎng)短不等的2根玻璃管，玻璃管外徑5毫米，較長(zhǎng)的一根長(zhǎng)度為70-80厘米，用以充氣，較短的一根為排氣管，長(zhǎng)度為8-10厘米;長(zhǎng)玻璃管底部插入接近桶底，上端用較柔軟的塑料或乳膠管與空壓機(jī)相連，充入混合氣體，每個(gè)桶充氣量為3-5升/分鐘，混合氣體成分為V鐵:Yttrmm'-v_=98 %:1%:0.8%:0.2% (體積比)，連續(xù)不間斷充氣;微藻培養(yǎng)室內(nèi)空調(diào)控溫，節(jié)能燈照明，共培養(yǎng)9天，前3天溫度設(shè)為21-22°c，光照強(qiáng)度為3000-40001UX，第4-6天溫度設(shè)為23-.250C，光照強(qiáng)度6000-70001ux，第7-9天設(shè)為27_29°C和8000_100001ux，第6天每個(gè)桶添加步驟I中所述新鮮培養(yǎng)液800毫升，以補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)鹽的消耗，第7天每個(gè)瓶添加蒸餾水500毫升，以補(bǔ)充因充氣造成的水分損耗并稀釋藻液，到第9天，中華盒形藻密度可達(dá)90萬(wàn)-120萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，布氏雙尾藻密度達(dá)50萬(wàn)-75萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，翼根管藻達(dá)65萬(wàn)-85萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，停止培養(yǎng)，準(zhǔn)備用此藻液投喂翡翠貽貝幼蟲； 步驟3翡翠貽貝幼蟲的培養(yǎng)； 取I個(gè)圓柱形麥飯石桶，直徑70-80厘米，高65-75厘米，桶厚度2-3厘米，將翡翠貽貝D形幼蟲置于此桶中培養(yǎng)，敞口培養(yǎng)(即桶無(wú)需加蓋)，培養(yǎng)用水為磁化海水，加磁化海水至水深.0.40-45米，室內(nèi)培養(yǎng)，空調(diào)控溫，節(jié)能燈照明，調(diào)節(jié)溫度至23-26°C，光照2000_30001ux，翡翠貽貝D形幼蟲放養(yǎng)密度為5-7個(gè)/毫升，按每個(gè)幼蟲每天投喂中華盒形藻10000-15000個(gè)，布氏雙尾藻2000-3000個(gè)，翼根管藻6000-8000個(gè)的量投喂3種藻液，分早中晚三次投喂，每次間隔8小時(shí)，以后隨著幼蟲的生長(zhǎng)，體長(zhǎng)每增大一倍，投餌量也增大一倍，同時(shí)用空壓機(jī)不間斷充氣，充入混合氣體，混合氣體成分為V空氣:V臭氧:v__氣=97 %:2%:0.5%:.0.5%；充氣管末端連接一散氣石，充氣量為8-12升/分鐘；當(dāng)幼體發(fā)育至變態(tài)期時(shí)，有40 %幼體出現(xiàn)眼點(diǎn)，即可投放附著基，用消毒后的20目的聚乙烯網(wǎng)片6-12片，分成3束吊掛在麥飯石桶中用作附著基，每天用虹吸管法換水一次，換水量為1/4-1/3，隨著幼體生長(zhǎng)，換水量也逐漸增加，至殼頂幼蟲后期換水量達(dá)80%;換水時(shí)用100目的篩絹過濾、阻擋，避免幼蟲隨水流逃逸;培養(yǎng)28-32天，稚貝殼高可達(dá)0.25厘米時(shí)，將網(wǎng)片上的苗洗刷下來，即能移入海洋培養(yǎng)或銷售，綜上即為本發(fā)明用麥飯石桶高密度培養(yǎng)翡翠貽貝幼蟲的方法。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用麥飯石桶高密度培養(yǎng)翡翠貽貝幼蟲的方法，屬水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域。技術(shù)核心是先在蒸餾水桶中用磁化海水培養(yǎng)翡翠貽貝幼蟲的餌料??中華盒形藻、布氏雙尾藻、翼根管藻，后在麥飯石桶中用磁化海水培養(yǎng)翡翠貽貝幼蟲并投喂中華盒形藻、布氏雙尾藻、翼根管藻。我的研究和實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與傳統(tǒng)技術(shù)相比，本發(fā)明微藻培養(yǎng)液配方科學(xué)合理，藻類生長(zhǎng)快，產(chǎn)量高，不易污染，操作方便，設(shè)備簡(jiǎn)單，用麥飯石桶和磁化海水培養(yǎng)翡翠貽貝幼蟲并投喂中華盒形藻、布氏雙尾藻、翼根管藻，幼蟲生長(zhǎng)快，體質(zhì)健壯、活潑，成活率提高120％。
【IPC分類】A01K61/00, A23K10/30, A23K50/80, A01K63/00, A01G33/00
【公開號(hào)】CN105724293
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610127343
【發(fā)明人】王培磊, 呂慎金
【申請(qǐng)人】臨沂大學(xué)
【公開日】2016年7月6日
【申請(qǐng)日】2016年3月8日