本發(fā)明涉及一種葵花籽蛋白的超聲提取方法，屬于生物技術(shù)天然物質(zhì)提取技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

葵花籽是菊科草本植物向日葵的種子。向日葵又名丈菊、向陽花、葵花。可供食用和油用?？ㄗ迅缓伙柡椭舅?、多種維生素和微量元素；葵花籽含豐富的脂肪油，其中有多量亞油酸，尚有磷脂，β谷固醇等甾醇；又含蛋白質(zhì)、糖類和檸檬酸、酒石酸、綠原酸等有機(jī)酸及胡蘿卜素等。

眾多研究報(bào)道了葵花籽中含有葵花原花青素、葵花籽油和葵花籽蛋白等多種生物活性物質(zhì)及其提取分離方法，并有多家工廠進(jìn)行了葵花原花青素和葵花籽油的批量生產(chǎn)。

但現(xiàn)有報(bào)道和應(yīng)用的提取分離方法都是針對其中某一物質(zhì)的，即都是以葵花籽為原料，從中提取或是原花青素、或是葵花籽油、或是蛋白質(zhì)，造成了資源的浪費(fèi)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種葵花蛋白的超聲提取方法，解決現(xiàn)有從葵花籽中提取蛋白質(zhì)時(shí)存在的資源浪費(fèi)、提取率不高等不足。

本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種葵花籽蛋白的提取方法，其工藝步驟為：

(1)提取原花青素：

將葵花籽原料進(jìn)行處理和清洗，再將葵花籽置于溫度為45-50℃、濃度 為30％的乙醇水溶液浸提10-20小時(shí)，過濾得到葵花籽和原花青素提取物溶液，備用；將原花青素提取物溶液經(jīng)蒸發(fā)濃縮、柱層析吸附分離及洗脫，收集洗脫后的原花青素提取物進(jìn)行干燥處理后獲得原花青素產(chǎn)品；

(2)提取葵花籽油：

將上述過濾得到的葵花籽經(jīng)過破碎、軟化、炒坯、壓餅、壓榨工藝處理，得到葵花籽油和壓榨后的葵花籽殘?jiān)瑝赫ズ蟮目ㄗ褮堅(jiān)鼈溆?，壓榨處理后得到的葵花籽油?jīng)過純化精煉處理后獲得葵花籽油產(chǎn)品；

(3)提取葵花籽蛋白：

A、將上述壓榨后的葵花籽殘?jiān)糜趐H值為7.8-8.3、溫度為40-42℃的堿性溶液中浸提8-12小時(shí)，料液比為1:8；超聲處理4小時(shí)，超聲功率為5W，時(shí)間為20min；

B、完成上述浸提過程后，再將該堿性提取液中加入鹽酸溶液并調(diào)節(jié)pH值為3.3-3.6，繼續(xù)在溫度為40-42℃條件下浸泡6-12小時(shí)，同樣浸泡期間每隔1小時(shí)充分?jǐn)嚢枰淮?，靜置沉淀后，棄除底層沉淀物，收集上層浸提液備用；

C、將上述浸提液加入氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為4.1-4.2，靜置6-12小時(shí)，析出沉淀，采用濾紙抽濾方式進(jìn)行分離并收集沉淀后，再將該提取液加入氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6.8-6.9，靜置6-12小時(shí)，析出沉淀，同樣采用濾紙抽濾方式進(jìn)行分離并收集沉淀，將兩次收集的沉淀合并后，置于溫度為40-50℃的烘干箱中干燥后獲得葵花籽蛋白產(chǎn)品。

本發(fā)明的有益效果是：

(1)本發(fā)明建立了從同一批葵花籽原料中，先提取原花青素，再提取 葵花籽油，最后再提取蛋白質(zhì)的工藝技術(shù)方法，即先用乙醇溶液浸提法從整?？ㄗ阎蟹蛛x提取葵花原花青素，再將該批葵花籽用壓榨法分離提取葵花籽油，最后將提取了原花青素和葵花籽油的葵花籽殘?jiān)盟釅A二次溶解沉淀法分離提取葵花籽蛋白。

(2)同目前的其他提取方法比較，本發(fā)明充分利用了葵花籽資源，同一批葵花籽原料可以同時(shí)獲得三種產(chǎn)品，葵花籽資源利用率高，且在其提取工藝中，前一物質(zhì)的提取不僅不影響后一物質(zhì)的提取，還有利于后一物質(zhì)的提取，簡化了提取步驟，具有節(jié)約資源、工藝簡便、減少成本、提高效率、增加效益等諸多優(yōu)點(diǎn)。

(3)本發(fā)明建立了用酸堿二次溶解沉淀法進(jìn)行葵花籽蛋白的提取，提取率可達(dá)到90％以上，提高了葵花籽蛋白的提取效率。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：

一種葵花籽蛋白的提取方法，采用葵花籽為原料，其工藝步驟為：

(1)提取原花青素：

采用葵花渣加工處理器將葵花籽原料進(jìn)行處理和清洗，再將葵花籽置于溫度為45℃、濃度為30％的乙醇水溶液浸提10小時(shí)，過濾得到葵花籽和原花青素提取物溶液，葵花籽備用；

將原花青素提取物溶液經(jīng)蒸發(fā)濃縮、柱層析吸附分離及洗脫，收集洗脫后的原花青素提取物進(jìn)行干燥處理后獲得原花青素產(chǎn)品；

(2)提取葵花籽油：

將上述過濾得到的葵花籽經(jīng)過破碎、軟化、炒坯、壓餅、壓榨工藝處 理，得到葵花籽油和壓榨后的葵花籽殘?jiān)?，壓榨后的葵花籽殘?jiān)鼈溆?，壓榨處理后得到的葵花籽油?jīng)過純化精煉處理后獲得葵花籽油產(chǎn)品；

(3)提取葵花籽蛋白：

A、將上述壓榨后的葵花籽殘?jiān)?jīng)105℃恒溫干燥后，用凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量為11.8％，取干燥后的葵花籽殘?jiān)?00g，將其置于pH值為7.8、溫度為40℃、溶液體積為2L的氫氧化鈉溶液中浸提12小時(shí)；超聲處理4小時(shí)，超聲功率為5W，時(shí)間為20min；

B、完成上述浸提過程后，再將該氫氧化鈉提取液中加入鹽酸溶液并調(diào)節(jié)pH值為3.3，繼續(xù)在溫度為40℃條件下浸泡10小時(shí)，同樣浸泡期間每隔1小時(shí)充分?jǐn)嚢枰淮危o置沉淀后，棄除底層沉淀物，收集上層浸提液備用；

C、將上述浸提液加入氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為4.1，靜置10小時(shí)，析出沉淀，采用濾紙抽濾方式進(jìn)行分離并收集沉淀后，再將該提取液加入氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6.8，靜置10小時(shí)，析出沉淀，同樣采用濾紙抽濾方式進(jìn)行分離并收集沉淀，將兩次收集的沉淀合并后，置于溫度為45℃的烘干箱中干燥后獲得葵花籽蛋白產(chǎn)品。

實(shí)施例2：

一種葵花籽蛋白的提取方法，采用葵花籽為原料，其工藝步驟為：

(1)提取原花青素：

采用葵花渣加工處理器將葵花籽原料進(jìn)行處理和清洗，再將葵花籽置于溫度為48℃、濃度為30％的乙醇水溶液浸提15小時(shí)，過濾得到葵花籽和原花青素提取物溶液，葵花籽備用；

將原花青素提取物溶液經(jīng)蒸發(fā)濃縮、柱層析吸附分離及洗脫，收集洗脫后的原花青素提取物進(jìn)行干燥處理后獲得原花青素產(chǎn)品；

(2)提取葵花籽油：

將上述過濾得到的葵花籽經(jīng)過破碎、軟化、炒坯、壓餅、壓榨工藝處理，得到葵花籽油和壓榨后的葵花籽殘?jiān)?，壓榨后的葵花籽殘?jiān)鼈溆茫瑝赫ヌ幚砗蟮玫降目ㄗ延徒?jīng)過純化精煉處理后獲得葵花籽油產(chǎn)品；

(3)提取葵花籽蛋白：

A、將上述壓榨后的葵花籽殘?jiān)?jīng)105℃恒溫干燥后，取干燥后的葵花籽殘?jiān)?00g，將其置于pH值為8.0、溫度為41℃、溶液體積為5L的氫氧化鈉溶液中浸提8小時(shí)；超聲處理4小時(shí)，超聲功率為5W，時(shí)間為20min；

B、完成上述浸提過程后，再將該氫氧化鈉提取液中加入鹽酸溶液并調(diào)節(jié)pH值為3.5，繼續(xù)在溫度為41℃條件下浸泡8小時(shí)，同樣浸泡期間每隔1小時(shí)充分?jǐn)嚢枰淮?，靜置沉淀后，棄除底層沉淀物，收集上層浸提液備用；

C、將上述浸提液加入氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為4.1，靜置10小時(shí)，析出沉淀，采用濾紙抽濾方式進(jìn)行分離并收集沉淀后，再將該提取液加入氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6.8，靜置10小時(shí)，析出沉淀，同樣采用濾紙抽濾方式進(jìn)行分離并收集沉淀，將兩次收集的沉淀合并后，置于溫度為45℃的烘干箱中干燥后獲得葵花籽蛋白產(chǎn)品。

實(shí)施例3：

一種葵花籽蛋白的提取方法，采用葵花籽為原料，其工藝步驟為：

(1)提取原花青素：

采用葵花渣加工處理器將葵花籽原料進(jìn)行處理和清洗，再將葵花籽置 于溫度為50℃、濃度為30％的乙醇水溶液浸提20小時(shí)，過濾得到葵花籽和原花青素提取物溶液，葵花籽備用；

將原花青素提取物溶液經(jīng)蒸發(fā)濃縮、柱層析吸附分離及洗脫，收集洗脫后的原花青素提取物進(jìn)行干燥處理后獲得原花青素產(chǎn)品；

(2)提取葵花籽油：

將上述過濾得到的葵花籽經(jīng)過破碎、軟化、炒坯、壓餅、壓榨工藝處理，得到葵花籽油和壓榨后的葵花籽殘?jiān)?，壓榨后的葵花籽殘?jiān)鼈溆?，壓榨處理后得到的葵花籽油?jīng)過純化精煉處理后獲得葵花籽油產(chǎn)品；

(3)提取葵花籽蛋白：

A、將上述壓榨后的葵花籽殘?jiān)?jīng)105℃恒溫干燥后，取干燥后的葵花籽殘?jiān)?kg，將其置于pH值為8.3、溫度為42℃、溶液體積為10L的堿性溶液中浸提10小時(shí)；超聲處理4小時(shí)，超聲功率為5W，時(shí)間為20min；

B、完成上述浸提過程后，再將該堿性提取液中加入鹽酸溶液并調(diào)節(jié)pH值為3.6，繼續(xù)在溫度為42℃條件下浸泡12小時(shí)，同樣浸泡期間每隔1小時(shí)充分?jǐn)嚢枰淮?，靜置沉淀后，棄除底層沉淀物，收集上層浸提液備用；

C、將上述浸提液加入氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為4.2，靜置12小時(shí)，析出沉淀，采用濾紙抽濾方式進(jìn)行分離并收集沉淀后，再將該提取液加入氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6.9，靜置12小時(shí)，析出沉淀，同樣采用濾紙抽濾方式進(jìn)行分離并收集沉淀，將兩次收集的沉淀合并后，置于溫度為45℃的烘干箱中干燥后獲得葵花籽蛋白產(chǎn)品。