本公開內(nèi)容涉及通過給予本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物，在小兒受試者中調(diào)節(jié)5-羥色胺受體表達的方法。本公開內(nèi)容的一些實施方案涉及通過給予本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物，在小兒受試者中加強或促進有益菌的濃度的增加，例如乳酸桿菌(lactobacillus)和雙歧桿菌(bifidobacterium)菌種。還通過提供本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物，提供在小兒受試者中減少便秘的方法。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含含有聚葡萄糖和寡聚半乳糖的益生元共混物和乳鐵蛋白，其中前述組分可表現(xiàn)為相加和/或協(xié)同的有益作用。

背景技術(shù)：

乳鐵蛋白，一種鐵-結(jié)合糖蛋白，是存在于人乳中的主要的多功能劑之一。它具有以可逆的方式結(jié)合兩個鐵分子的能力并可促進腸道內(nèi)鐵的吸收。此外，乳鐵蛋白已被證明是既抑菌又殺菌的，且它有助于預(yù)防人，特別是小兒受試者的腸道感染。另外地，人乳鐵蛋白似乎對腹瀉病的癥狀具有積極的作用。

而且，嬰兒腸道微生物群(microflora)在出生后最初的幾周內(nèi)迅速建立，并且它對嬰兒的免疫系統(tǒng)具有很大的影響。這種腸道集群的性質(zhì)最初由早期暴露于環(huán)境的微生物源和由嬰兒的總體健康狀況確定。無論是用母乳喂養(yǎng)嬰兒還是用配方-喂養(yǎng)嬰兒也對腸道菌群具有很強的影響。

腸道生態(tài)系統(tǒng)的飲食成分中和微生物群中的相互作用都是非常復(fù)雜的。因此，當(dāng)這樣的成分作為配方-喂養(yǎng)的嬰兒的飲食中的補充劑提供時，嬰兒配方或其它小兒營養(yǎng)組合物的基質(zhì)則可影響益生元的有效性。此外，用于配方基質(zhì)的脂質(zhì)和蛋白的類型和濃度也可調(diào)節(jié)腸道微生物叢(microbiota)。

最近，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，合并益生元，特別是聚葡萄糖(polydextrose,pdx)和寡聚半乳糖(galacto-oligosaccharides,gos)，和乳鐵蛋白可能導(dǎo)致某些獨特的益處。因此，向小兒受試者提供含有這樣的組合的營養(yǎng)組合物將是有益的。

本發(fā)明的公開

簡言之，在一個實施方案中，本公開內(nèi)容涉及在小兒受試者中調(diào)節(jié)5-羥色胺受體表達，調(diào)節(jié)腸道微生物叢，例如增加有益的細(xì)菌的濃度，和/或調(diào)節(jié)心理壓力的方法，該方法包括給予小兒受試者一種包含益生元，特別是聚葡萄糖(pdx)和寡聚半乳糖(gos),和來自非-人來源的乳鐵蛋白的營養(yǎng)組合物。在一些實施方案中，本公開內(nèi)容涉及一種通過給予本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物，減少目標(biāo)受試者的便秘發(fā)生率的方法。

在某些實施方案中，營養(yǎng)組合物還包含源自牛奶的富集的脂質(zhì)部分(enrichedlipidfraction)。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物可包含源自牛奶的包含乳脂球的富集的脂質(zhì)部分。乳脂球的加入提供給嬰兒富集的脂肪和脂質(zhì)的來源，其可被小兒受試者更充分地消化。

在某些實施方案中，富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球可包含飽和脂肪酸、反式脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸、膽固醇、奇鏈脂肪酸“obcfa”、支鏈脂肪酸“bcfa”、共軛亞油酸“cla”、磷脂，或乳脂球膜蛋白，及其混合物。

要理解的是，前面的一般性描述和下面的詳細(xì)描述二者呈現(xiàn)本公開內(nèi)容的實施方案，并意欲提供用于理解如所要求保護的本公開內(nèi)容的性質(zhì)和特征的概觀或框架。說明書用于解釋要求保護的主題的原理和操作。本公開內(nèi)容的其它和進一步的特征和優(yōu)點在閱讀以下公開內(nèi)容后對于本領(lǐng)域技術(shù)人員將是容易地顯而易見的。

附圖簡述

圖1說明喂食對照飲食小鼠對比補充有g(shù)os和pdx的飲食小鼠的腦組織(尤其是吻側(cè)、中區(qū)和尾區(qū))中相對5ht1amrna水平。

圖2說明喂食對照飲食的小鼠，喂食補充有乳鐵蛋白飲食的小鼠，喂食補充有g(shù)os和pdx飲食的小鼠，和喂食補充有g(shù)os、pdx和乳鐵蛋白飲食的小鼠的糞便中乳酸桿菌菌種的量。

圖3說明在喂食對照飲食的小鼠，喂食補充有乳鐵蛋白飲食的小鼠，喂食補充有g(shù)os和pdx飲食的小鼠，和喂食補充有g(shù)os、pdx和乳鐵蛋白飲食的小鼠的糞便中鼠李糖乳酸桿菌(lactobacillusrhamnosus)的量。

圖4說明在壓力后和在非壓力情形下，在喂食對照飲食的小鼠，喂食補充有乳鐵蛋白飲食的小鼠，喂食補充有g(shù)os和pdx飲食的小鼠，和喂食補充有g(shù)os、pdx和乳鐵蛋白飲食的小鼠中存在的血漿hsp70量。

圖5說明在喂食對照飲食的小鼠，喂食補充有乳鐵蛋白飲食的小鼠，喂食補充有g(shù)os和pdx的飲食的小鼠，和喂食補充有g(shù)os、pdx，和乳鐵蛋白的飲食的小鼠中被認(rèn)為電擊誘發(fā)的冷凍的冷凍百分率(焦慮試驗)。

圖6說明在喂食對照飲食的小鼠，喂食補充有乳鐵蛋白飲食的小鼠，喂食補充有g(shù)os和pdx飲食的小鼠，和喂食補充有g(shù)os、pdx和乳鐵蛋白飲食的小鼠中的逃避潛伏期(escapelatency)的百分率。

實施本發(fā)明的最佳方式

現(xiàn)在將詳細(xì)地提及本公開內(nèi)容的實施方案，下文闡述了其一個或多個實例。各個實例通過解釋本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物來提供，并且不是限制。實際上，對于本領(lǐng)域技術(shù)人員將是顯而易見的是，可在不偏離本公開內(nèi)容的范圍的情況下對本公開內(nèi)容的教導(dǎo)進行各種修改和變動。例如，作為一個實施方案的一部分說明或描述的特征，可以與另一個實施方案一起使用以產(chǎn)生再進一步的實施方案。

因此，需要的是，本公開內(nèi)容涵蓋落入隨附權(quán)利要求書及其等同內(nèi)容的范圍的這類修改和變動。本公開內(nèi)容的其它目的、特征和方面公開于下面的詳細(xì)描述中，或從下面的詳細(xì)描述來看是顯而易見的。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員要了解，本論述只是示例性實施方案的描述，并無意限制本公開內(nèi)容的更寬泛的方面。

本公開內(nèi)容總體上涉及適合于給予小兒受試者的營養(yǎng)組合物。此外，本公開內(nèi)容涉及通過給予本文公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物，在小兒受試者中調(diào)節(jié)5-羥色胺受體表達，促進有益菌在胃腸道中的生長和濃集，減少便秘，和/或促進抗壓能力的方法。

“營養(yǎng)組合物”意指滿足受試者的營養(yǎng)需要的至少一部分的物質(zhì)或制劑。術(shù)語“營養(yǎng)品”、“營養(yǎng)配方”、“腸內(nèi)營養(yǎng)品”和“營養(yǎng)補劑”在整個公開內(nèi)容中用作營養(yǎng)組合物的非限制性實例。而且，“營養(yǎng)組合物”可指液體劑、粉末、凝膠劑、糊劑、固體劑、濃縮劑、混懸劑或即用形式的腸內(nèi)配方、口服配方、嬰兒配方、小兒受試者配方、兒童配方、成長乳和/或成人配方。

術(shù)語“腸內(nèi)”意指可通過胃腸道或消化道或在胃腸道或消化道內(nèi)傳遞的?！澳c內(nèi)給予”包括經(jīng)口喂食、胃內(nèi)喂食、經(jīng)幽門給予或任何其它進入消化道的給予?！敖o予”比“腸內(nèi)給予”更廣義并包括胃腸外給予或使物質(zhì)吸收進入受試者體內(nèi)的任何其它給予途徑。

“小兒受試者”意指年齡不足13歲的人。在一些實施方案中，小兒受試者是指介于出生和8歲之間的人受試者。在其它實施方案中，小兒受試者是指介于1到6歲之間的人類受試者。在再進一步的實施方案中，小兒受試者是指介于6到12歲之間的人類受試者。術(shù)語“小兒受試者”可指如下所述的嬰兒(早產(chǎn)或足月)和/或兒童。

“嬰兒”意指年齡范圍從出生至不滿1歲的人類受試者并包括從0至12個月的矯正年齡的嬰兒。短語“矯正年齡”意指嬰兒的實足年齡減去嬰兒早產(chǎn)的時間的量。因此，如果懷胎已達足月，則矯正年齡是該嬰兒的年齡。術(shù)語嬰兒包括低出生體重嬰兒、非常低出生體重嬰兒、極低出生體重嬰兒和早產(chǎn)嬰兒?！霸绠a(chǎn)兒”意指在妊娠的第37周結(jié)束前出生的嬰兒?！巴砥谠绠a(chǎn)兒”是指妊娠的第34周和第36周之間的嬰兒形式。“足月”意指在妊娠的第37周結(jié)束后出生的嬰兒。“低出生體重嬰兒”意指出生體重少于2500克(大約5磅，8盎司)的嬰兒?！胺浅５统錾w重嬰兒”意指出生體重少于1500克(大約3磅，4盎司)的嬰兒?！皹O低出生體重嬰兒”意指出生體重少于1000克(大約2磅，3盎司)的嬰兒。

“兒童”意指年齡范圍從12個月至13歲的受試者。在一些實施方案中，兒童是年齡介于1和12歲之間的受試者。在其它實施方案中，術(shù)語“兒童(children/child)”是指介于1和約6歲之間或介于約7和約12歲之間的受試者。在其它實施方案中，術(shù)語“兒童”是指介于12個月和約13歲之間的任何年齡范圍。

“兒童的營養(yǎng)制品”指滿足兒童的至少一部分營養(yǎng)需要的組合物。成長乳是兒童的營養(yǎng)制品的實例。

術(shù)語“水解度”指肽鍵被水解方法破壞的程度。蛋白質(zhì)水解度(為了表征營養(yǎng)組合物的水解蛋白組分的目的)由制劑領(lǐng)域普通技術(shù)人員通過定量所選擇的制劑的蛋白質(zhì)組分的氨基氮與總氮比例(an/tn)容易地測定。氨基氮組分通過用于測定氨基氮含量的usp滴定方法定量，而總氮組分通過tecatorkjeldahl方法測定，所有這些都是對于分析化學(xué)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言熟知的方法。

術(shù)語“部分水解的”意指具有大于0%但少于約50%的水解度。

術(shù)語“廣泛水解的”意指具有大于或等于約50%的水解度。

術(shù)語“無蛋白的”意指含不可測量的量的蛋白，如通過標(biāo)準(zhǔn)蛋白檢測方法如十二烷基(月桂基)硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sds-page)或尺寸排阻色譜法測量的。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物基本上不含蛋白，其中“基本上不含”如下文所定義。

“嬰兒配方”意指滿足嬰兒的至少部分營養(yǎng)需求的組合物。在美國，21c.f.r.第100、106和107章闡述的聯(lián)邦法規(guī)規(guī)定了嬰兒配方的內(nèi)含物。這些法規(guī)限定盡力模擬人母乳的營養(yǎng)和其它性質(zhì)的大量營養(yǎng)物、維生素、礦物質(zhì)和其它成分水平。

術(shù)語“成長乳”是指一大類營養(yǎng)組合物，其預(yù)期用作不同膳食的一部分，以支持年齡介于約1和約6歲之間的兒童的正常成長和發(fā)育。

“乳-基”指包含至少一種已經(jīng)從哺乳動物的乳腺中吸出或提取的組分。在一些實施方案中，乳-基營養(yǎng)組合物包含源自馴養(yǎng)的有蹄類動物、反芻動物或其它哺乳動物的乳的組分或其任何組合。而且，“乳-基營養(yǎng)組合物”可指包含本領(lǐng)域已知的任何源自乳的或乳-基產(chǎn)品的任何組合物。

“乳”指一種已經(jīng)從哺乳動物的乳腺中吸出或提取的組分。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含源自馴養(yǎng)的有蹄類動物、反芻動物或其它哺乳動物的乳的組分或其任何組合。

“分級分離(fractionation)過程”包括其中一定量的混合物被分成許多較小量(稱為部分(fraction))的任何過程。所述部分可以在組成上不同于所述混合物和其它部分兩者。分級分離過程的實例包括但不限于，熔融分級分離(meltfractionation)、溶劑分級分離、超臨界流體分級分離和/或其組合。

“脂肪球”指一種由磷脂和其它膜和/或血清蛋白環(huán)繞的小質(zhì)量脂肪，其中脂肪本身可以是任何植物或動物脂肪的組合。

“營養(yǎng)完全的”意指可用作營養(yǎng)的唯一來源的組合物，其可供應(yīng)基本上所有每日必需量的維生素、礦物質(zhì)和/或痕量元素與蛋白質(zhì)、碳水化合物和脂質(zhì)的組合。實際上，“營養(yǎng)完全的”描述了提供支持受試者的正常生長和發(fā)育所需的足量碳水化合物、脂質(zhì)、必需脂肪酸、蛋白質(zhì)、必需氨基酸、條件必需氨基酸、維生素、礦物質(zhì)和能量的營養(yǎng)組合物。

因此，按定義，對早產(chǎn)嬰兒是“營養(yǎng)完全的”營養(yǎng)組合物會提供早產(chǎn)嬰兒生長所需要的質(zhì)量上和數(shù)量上足量的碳水化合物、脂質(zhì)、必需脂肪酸、蛋白質(zhì)、必需氨基酸、條件必需氨基酸、維生素、礦物質(zhì)和能量。

按定義，對足月嬰兒是“營養(yǎng)完全的”營養(yǎng)組合物會提供足月嬰兒生長所需要的質(zhì)量上和數(shù)量上足量的所有碳水化合物、脂質(zhì)、必需脂肪酸、蛋白質(zhì)、必需氨基酸、條件必需氨基酸、維生素、礦物質(zhì)和能量。

按定義，對兒童是“營養(yǎng)完全的”營養(yǎng)組合物會提供兒童生長所需要的質(zhì)量上和數(shù)量上足量的所有碳水化合物、脂質(zhì)、必需脂肪酸、蛋白質(zhì)、必需氨基酸、條件必需氨基酸、維生素、礦物質(zhì)和能量。

當(dāng)應(yīng)用于營養(yǎng)物時，術(shù)語“必需的”是指機體不能以足以用于正常生長和維持健康的量合成因此必須通過膳食供應(yīng)的任何營養(yǎng)物。術(shù)語“條件必需的”在應(yīng)用于營養(yǎng)物時意指在一定條件下必須通過膳食供應(yīng)的營養(yǎng)物，所述條件是在機體無法獲得足量的前體化合物用于發(fā)生內(nèi)源合成。

“益生菌”意指對宿主的健康發(fā)揮有益作用的具有低致病性或無致病性的微生物。

術(shù)語“滅活的益生菌”意指這樣的益生菌，其中所提及的益生菌的代謝活性或繁殖能力已經(jīng)減少或被破壞。然而，“滅活的益生菌”在細(xì)胞水平上仍然保留其細(xì)胞結(jié)構(gòu)或其它與細(xì)胞有關(guān)的結(jié)構(gòu)，例如外泌多糖和至少一部分其生物二醇-蛋白和dna/rna結(jié)構(gòu)。如本文所用的，術(shù)語“滅活的”與“無活力的”同義。

“益生元”意指不易消化的食物成分，其通過選擇性地刺激消化道中一種或有限數(shù)量的可改善宿主健康的細(xì)菌的生長和/或活動而有益地影響宿主。

“支鏈脂肪酸”(“bcfa”)意指包含從碳鏈分支的碳成分的脂肪酸。典型地，分支是烷基分支，特別是甲基，但乙基和丙基分支也是已知的。與同等的直鏈脂肪酸比較，加入甲基分支會降低熔點。這包括在碳鏈上具有偶數(shù)個碳原子數(shù)的支鏈脂肪酸。這些例子可以是十四烷酸、十六烷酸的異構(gòu)體。

“奇數(shù)支鏈脂肪酸”(“obcfa”)是具有奇數(shù)個碳原子數(shù)且在碳鏈上具有一個或多個烷基分支的bcfa的子集。牛奶中發(fā)現(xiàn)的主要奇數(shù)支鏈脂肪酸包括，但不限于，十四烷酸、十五烷酸、十六烷酸和十七烷酸的異構(gòu)體。為了本公開內(nèi)容的目的，術(shù)語“bcfa”包括支鏈脂肪酸和奇數(shù)支鏈脂肪酸二者。

“反式-脂肪酸”意指具有反式-異構(gòu)體的不飽和脂肪。反式-脂肪可以是單不飽和或多不飽和的。反式指連接于雙鍵包含的碳原子的兩個氫原子的排列。在反式排列中，氫在所述鍵的對側(cè)。因此反式-脂肪酸是在反式幾何構(gòu)型中含有一個或多個雙鍵的脂質(zhì)分子。

“磷脂”意指含有甘油二酯、磷酸酯基團和簡單的有機分子的有機分子。磷脂的例子包括但不限于，磷脂酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰肌醇磷酸、磷脂酰肌醇二磷酸和磷脂酰肌醇三磷酸、神經(jīng)酰胺磷酸膽堿、神經(jīng)酰胺磷酰乙醇胺和神經(jīng)酰胺磷酰甘油。該定義還包鞘磷脂、糖脂和神經(jīng)節(jié)苷脂。

“植物營養(yǎng)素”意指意指天然存在于植物中的化學(xué)化合物。植物營養(yǎng)素可以包括在任何源自植物的物質(zhì)或提取物中。術(shù)語“植物營養(yǎng)素”包含由植物產(chǎn)生的幾大類化合物，例如，多酚化合物、花青苷、原花青素和黃烷-3-醇(即兒茶素、表兒茶素)，并可以源自，例如，果實、種子或茶提取物。此外，術(shù)語植物營養(yǎng)素包括所有的類胡蘿卜素、植物甾醇、硫醇和其它源自植物的化合物。然而，作為技術(shù)人員會理解，除了蛋白質(zhì)、纖維或其它源自植物的組分外，植物提取物還可包括植物營養(yǎng)素，例如多酚類。因此，例如，除了其它源自植物的物質(zhì)外，蘋果或葡萄籽提取物還可包括有益的植物營養(yǎng)素組分，例如多酚類。

“β-葡聚糖”意指所有的β-葡聚糖，包括特殊類型的β-葡聚糖，例如β-1,3-葡聚糖或β-1,3;1,6-葡聚糖。然而，β-1,3;1,6-葡聚糖是一種類型的β-1,3-葡聚糖。因此，術(shù)語“β-1,3-葡聚糖”包括β-1,3;1,6-葡聚糖。

“果膠”意指任何天然-存在的寡糖或多糖，其包含可在植物的細(xì)胞壁中發(fā)現(xiàn)的半乳糖醛酸。具有各種物理和化學(xué)性質(zhì)的不同種類和等級的果膠是本領(lǐng)域已知的。事實上，果膠的結(jié)構(gòu)可在植物之間、組織之間和甚至在單細(xì)胞壁內(nèi)顯著地變化。一般來說，果膠是由帶負(fù)電荷的酸性糖(半乳糖醛酸)組成，并且一些酸性基團呈甲酯基團的形式。果膠的酯化程度是用甲醇酯化的連接于吡喃半乳糖基糖醛酸(galactopyranosyluronicacid)單位的羧基的百分率的量度。

具有酯化程度少于50%(即，少于50%的羧基被甲基化以形成甲酯基團)的果膠被分類為低-酯、低甲氧基或低甲基化(“l(fā)m”)果膠，而具有50%或更大的酯化程度(即，超過50%的羧基被甲基化)的那些被分類為高-酯、高甲氧基或高甲基化(“hm”)果膠。極低(“vl”)果膠，一種低甲基化果膠的亞組，具有少于約15%的酯化程度。

如本文所用的，“來自非-人來源的乳鐵蛋白”意指由除人母乳之外來源產(chǎn)生或從除人類母乳之外來源獲得的乳鐵蛋白。例如，用于本公開內(nèi)容的乳鐵蛋白包括由遺傳修飾的生物體產(chǎn)生的人乳鐵蛋白以及非人乳鐵蛋白。如本文所用的術(shù)語“生物體”，指任何連續(xù)的生命系統(tǒng)，如動物、植物、真菌或微生物。

如本文所用的，“非人乳鐵蛋白”意指具有不同于人乳鐵蛋白的氨基酸序列的氨基酸序列的乳鐵蛋白。

“病原體”意指引起疾病狀態(tài)或病理學(xué)綜合征的生物體。病原體的實例可包括細(xì)菌、病毒、寄生蟲、真菌、微生物或其組合。

“調(diào)節(jié)”或“調(diào)整”意指使受到修飾、控制和/或調(diào)節(jié)影響。在一些實施方案中，術(shù)語“調(diào)節(jié)”意指顯示對特定組分的水平/量的增加或刺激作用。在其它實施方案中，“調(diào)節(jié)”意指顯示對一種特定組分的水平/量的減少或抑制作用。

如本文所用的所有百分比、份數(shù)和比例均基于總制劑的重量計，除非另外指明。

“每日”給予的所有指定的量可以在24小時周期的過程內(nèi)給予的1個單位劑量、單份量或二個或更多個劑量或份量遞送。

本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物可基本上不含任何本文所述的任選的或選擇的成分，條件是其余的營養(yǎng)組合物仍含有本文所述的所有必需成分或特征。在本上下文中，并且除非另外指明，否則術(shù)語“基本上不含”意指所選的組合物可含有小于功能量的任選成分，通常小于0.1%重量，并且還包括0%重量的所述任選或選擇的成分。

本公開內(nèi)容對單數(shù)特性或限制的所有提及應(yīng)包括相應(yīng)的復(fù)數(shù)特征或限制，并且反之亦然，除非在作出提及的上下文中另外指明或明確暗示與之相反。

可以任何順序進行本文所采用的方法或過程步驟的所有組合，除非在作出提及的組合的上下文中另有指明或明確暗示與之相反。

本公開內(nèi)容的方法和組合物(包括其組分)，可包含本文所述實施方案的必需要素和限制以及本文或別處描述的可用于營養(yǎng)組合物的任何額外或任選的成分、組分或限制；由本文所述實施方案的必需要素和限制以及本文或別處描述的可用于營養(yǎng)組合物的任何額外或任選的成分、組分或限制組成；或基本由它們組成。

本文所用的術(shù)語“約”應(yīng)解釋為是指任何范圍的端點所指定的兩個數(shù)字。對范圍的任何提及應(yīng)視為對該范圍內(nèi)的任何子集提供依據(jù)。

本公開內(nèi)容涉及包含含有g(shù)os和pdx的益生元組分和來自非-人來源的乳鐵蛋白的營養(yǎng)組合物，涉及其用途，和涉及包括給予那些營養(yǎng)組合物的方法。本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物支持人類小兒受試者，如嬰兒(早產(chǎn)和/或足月)或兒童的整體健康和發(fā)育。

腸道微生物群在大多數(shù)胃腸道功能的出生后發(fā)育中起著至關(guān)重要的作用。因此，本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物支持胃腸健康和發(fā)育。而且，健康腸道微生物群支持足夠的腸-腦通信，影響腦功能并且因此影響心理壓力反應(yīng)，導(dǎo)致改良的行為。一起給予本公開內(nèi)容的組合物通過在胃腸系統(tǒng)中增加有益的細(xì)菌和/或減少病原體的粘附，可調(diào)節(jié)小兒受試者的腸道微生物群。因此，在一些實施方案中，本公開內(nèi)容涉及調(diào)節(jié)心理壓力反應(yīng)的方法。而在某些實施方案中，所公開的組合具有支持胃腸道發(fā)育的相加和/或協(xié)同的有益作用。在某些實施方案中，本公開內(nèi)容涉及在小兒受試者中支持認(rèn)知發(fā)展和腦功能以及胃腸道健康和/或發(fā)育的方法。該方法包括將益生元特別是pdx和gos和來自非-人來源的乳鐵蛋白一起給予小兒受試者。

而且，在早期生命期間，嬰兒和兒童經(jīng)歷許多因例如，不斷變化的環(huán)境或處于饑餓或疲勞下所致的有壓力的情況。因此，應(yīng)激激素釋放，這可在小兒受試者中負(fù)面地影響腦發(fā)育和/或引起其它長期有害的作用。而本公開的營養(yǎng)組合物則可在小兒受試者中減輕或抑制心理壓力和/或調(diào)節(jié)血漿應(yīng)激激素(stresshormone)水平，從而進一步促進健康的腦和認(rèn)知的增長和發(fā)展。

事實上，防御壓力-誘導(dǎo)的焦慮和抑郁-樣行為的重要的神經(jīng)機制是增加5-ht1a受體表達和功能。在生理學(xué)上，5-ht1a是5-ht家族受體的一種亞型，其結(jié)合內(nèi)生神經(jīng)遞質(zhì)血清素。5-ht1a是一種介導(dǎo)抑制性神經(jīng)傳遞的g蛋白-偶聯(lián)受體。因此，調(diào)節(jié)5-ht1a的功能可在目標(biāo)個體中提供額外的認(rèn)知和行為益處。

因此，在一些實施方案中，本公開內(nèi)容包括在小兒受試者中調(diào)節(jié)5-ht1a受體表達的方法，其包括給予受試者有效量的本文公開的營養(yǎng)組合物。此外，在一些實施方案中，本公開內(nèi)容包括在小兒受試者中增進抗壓能力的方法，其包括給予受試者有效量的本文公開的營養(yǎng)組合物。在其它實施方案中，本公開內(nèi)容涉及一種通過給予受試者有效量的組合物，在小兒受試者中調(diào)節(jié)5-羥色胺回路和/或調(diào)節(jié)情緒的方法。

在嬰兒中，不成熟的腸道經(jīng)常導(dǎo)致胃腸道癥狀，這影響他們的營養(yǎng)狀況，以及對他們的整體健康造成的后果。因此,在一些實施方案中，本公開內(nèi)容涉及一種促進胃腸道(gitract)有益菌的發(fā)展或增加胃腸道有益菌的濃度的方法，其可提供認(rèn)知益處。例如，乳酸桿菌菌種和/或雙歧桿菌菌種的量的增加，可在目標(biāo)受試者中促進壓力抵抗。而且，觀察到有益的細(xì)菌的增加，而無需通過營養(yǎng)補充將這些額外的細(xì)菌引入胃腸道。

本文公開的營養(yǎng)組合物的營養(yǎng)物的獨特的組合被認(rèn)為能夠為嬰兒和兒童提供新的和預(yù)料不到的腦-相關(guān)益處。而且，這種營養(yǎng)組合物的益處被認(rèn)為是在嬰兒期間獲得的，并且隨著兒童及其大腦不斷生長和發(fā)育將它包括作為多樣化的飲食的一部分而獲得。

營養(yǎng)組合物中營養(yǎng)物的組合以提供前述益處的協(xié)同方式合并。例如，將乳鐵蛋白與包含pdx和gos的益生元一起提供可協(xié)同地增加胃腸道中特定的有益細(xì)菌的菌種，包括乳酸桿菌菌種(包含鼠李糖乳酸桿菌)和雙歧桿菌菌種。增加胃腸道中這些有益菌的濃度可提供進一步的健康益處，例如減輕焦慮-樣行為和壓力-引起的炎癥反應(yīng)。此外，有益菌的增加可減少目標(biāo)受試者的便秘。

在某些實施方案中，營養(yǎng)組合物也可含有一種或多種益生元(也稱為益生元組分)。益生元發(fā)揮健康益處，其可包括，但不限于，一種或有限數(shù)目的有益的腸道菌的生長和/或活性的選擇性刺激，攝入的益生菌微生物的生長和/或活性的刺激，腸道病原體的選擇性減少，和對腸道短鏈脂肪酸概況的有利的影響。這樣的益生元可以是天然-存在的、合成的或通過生物體和/或植物的基因操作開發(fā)的，無論這種新的來源是現(xiàn)在已知的還是以后開發(fā)的?？捎糜诒竟_內(nèi)容的益生元可包括寡糖、多糖，和含有果糖、木糖、大豆、半乳糖、葡萄糖和甘露糖的其它益生元。

更具體地說，可用于本公開內(nèi)容的益生元可包括聚葡萄糖、聚葡萄糖粉、乳果糖、乳果寡糖(lactosucrose)、棉子糖、寡聚葡萄糖、菊糖、寡聚果糖、寡聚異麥芽糖、大豆寡糖、乳果寡糖、寡聚木糖、寡聚殼糖、寡聚甘露糖、寡聚阿拉伯糖、寡聚唾液酸糖、寡聚巖藻糖、寡聚半乳糖和龍膽寡糖。

在一個實施方案中，存在于營養(yǎng)組合物中的益生元的總量可以是從約1.0g/l-約10.0g/l的組合物。更優(yōu)選地，存在于營養(yǎng)組合物中的益生元的總量可以是從約2.0g/l和約8.0g/l的組合物。在一些實施方案中，存在于營養(yǎng)組合物中的益生元的總量可以是從約0.01g/100kcal-約1.5g/100kcal.在某些實施方案中，存在于營養(yǎng)組合物中的益生元的總量可以是從約0.15g/100kcal-約1.5g/100kcal。而且，營養(yǎng)組合物可包含含有pdx的益生元組分。在一些實施方案中，益生元組分包含至少20%w/wpdx、gos或其混合物。

在一個實施方案中，營養(yǎng)組合物中pdx的量可以在從約0.015g/100kcal-約1.5g/100kcal的范圍內(nèi)。在另一個實施方案中，聚葡萄糖的量在從約0.2g/100kcal-約0.6g/100kcal的范圍內(nèi)。在一些實施方案中，pdx可以足以提供約1.0g/l和10.0g/l之間的量包括在營養(yǎng)組合物中。在另一個實施方案中，營養(yǎng)組合物含有pdx的量在約2.0g/l和8.0g/l之間。而在還有的其它實施方案中，營養(yǎng)組合物中pdx的量可以是從約0.05g/100kcal-約1.5g/100kcal。

益生元組分也包含gos。在一個實施方案中，營養(yǎng)組合物中g(shù)os的量可以是從約0.015g/100kcal-約1.0g/100kcal。在另一個實施方案中，營養(yǎng)組合物中g(shù)os的量可以是從約0.2g/100kcal-約0.5g/100kcal。

在本發(fā)明的具體實施方案中，pdx與gos組合給予。

在具體實施方案中，gos和pdx以至少約0.015g/100kcal或約0.015g/100kcal-約1.5g/100kcal的總量補充到營養(yǎng)組合物中。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物可包含從約0.1-約1.0g/100kcal的總量的gos和pdx。

如所注意的，乳鐵蛋白也包括在本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物中。乳鐵蛋白是約80kd的單鏈多肽，其依據(jù)種類含有1-4個聚糖。不同種類的乳鐵蛋白的3-d結(jié)構(gòu)是極其相似的，但并不相同。每個乳鐵蛋白包含兩個同源葉，分別稱為n-和c-葉，指分子的n-末端和c-末端部分。每個葉進一步由兩個亞-葉或結(jié)構(gòu)域組成，形成裂縫，其中鐵離子(fe³⁺)以協(xié)同合作的方式與碳酸(氫)根((bi)carbonate)陰離子緊緊地結(jié)合。這些結(jié)構(gòu)域分別被稱為n1、n2、c1和c2。乳鐵蛋白的n-末端具有強陽離子肽區(qū)域，其負(fù)責(zé)許多重要的結(jié)合特性。乳鐵蛋白具有非常高的等電點(~pi9)并且它的陽離子性質(zhì)在其防御細(xì)菌、病毒和真菌的病原體的能力中起著主要作用。在乳鐵蛋白的n-末端區(qū)域內(nèi)存在若干陽離子氨基酸殘基簇，其介導(dǎo)乳鐵蛋白抗廣泛范圍的微生物的生物活性。例如，人乳鐵蛋白的n-末端殘基1-47(牛乳鐵蛋白的1-48)對乳鐵蛋白的鐵-獨立性生物活性是至關(guān)重要的。在人乳鐵蛋白中，殘基2-5(rrrr)和28-31(rkvr)是在對乳鐵蛋白的抗微生物活性特別重要的n-末端中富含精氨酸的陽離子結(jié)構(gòu)域。n-末端中的類似的區(qū)域存在于牛乳鐵蛋白中(殘基17-42；fkcrrwqwrmkklgapsitcvrrafa)。

來自不同的宿主種類的乳鐵蛋白在它們的氨基酸序列中可以變化，但是通常具有相對高的等電點，伴有在內(nèi)部葉的末端區(qū)域的帶正電荷的氨基酸。用于本公開內(nèi)容的合適的非人乳鐵蛋白包括，但不限于，與人乳鐵蛋白的氨基酸序列具有至少48%同源性的那些。例如，牛乳鐵蛋白(“blf”)具有這樣的氨基酸組成，其具有與人乳鐵蛋白約70%序列同源性。在一些實施方案中，非人乳鐵蛋白具有與人乳鐵蛋白至少55%的同源性，而在一些實施方案中，為至少65%同源性。用于本公開內(nèi)容的可接受的非人乳鐵蛋白包括，但不限于，blf、豬乳鐵蛋白、馬乳鐵蛋白、水牛乳鐵蛋白、山羊乳鐵蛋白、鼠乳鐵蛋白和駱駝乳鐵蛋白。

在一個實施方案中，乳鐵蛋白以至少約15mg/100kcal的量存在于營養(yǎng)組合物。在某些實施方案中，營養(yǎng)組合物可包括每100kcal約15和約300mg之間的乳鐵蛋白。在另一個其中營養(yǎng)組合物是嬰兒配方的實施方案中，營養(yǎng)組合物可包含每100kcal約60mg-約150mg乳鐵蛋白的量的乳鐵蛋白；在又另一個實施方案中，營養(yǎng)組合物可包含每100kcal約60mg-約100mg的乳鐵蛋白。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物可包含每毫升配方約0.5mg-約1.5mg的量的乳鐵蛋白。在替代人乳的營養(yǎng)組合物中，乳鐵蛋白可以每毫升配方約0.6mg-約1.3mg的量存在。在某些實施方案中，營養(yǎng)組合物可包含每升約0.1和約2克之間的乳鐵蛋白。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含每升配方約0.6和約1.5克之間的乳鐵蛋白。

用于某些實施方案的blf可以是從全脂乳和/或具有低的體細(xì)胞計數(shù)的乳分離的任何blf，其中“低的體細(xì)胞計數(shù)”指少于200,000個細(xì)胞/ml的體細(xì)胞計數(shù)。舉例來說，合適的blf可從新西蘭morrinsville的tatuaco-operativedairyco.ltd.，從荷蘭amersfoort的frieslandcampinadomo，或從新西蘭auckland的fonterraco-operativegrouplimited獲得。

用于本公開內(nèi)容的乳鐵蛋白可以，例如，從非人動物的乳中分離或通過經(jīng)遺傳修飾的生物體生產(chǎn)。例如，在美國專利號4,791,193（其通過引用以其全文結(jié)合到本文中）中，okonogi等人公開制備高純度的牛乳鐵蛋白的方法。一般來說，所公開的方法包括三個步驟。首先使原料乳材料與弱酸性陽離子交換劑接觸以吸附乳鐵蛋白，接著進行洗滌以除去未吸附的物質(zhì)的第二個步驟。隨后進行解吸步驟，其中乳鐵蛋白被取出以產(chǎn)生純化的牛乳鐵蛋白。其它方法可包括如在美國專利號7,368,141、5,849,885、5,919,913和5,861,491中描述的步驟，所述專利的本公開內(nèi)容都通過引用以其全文結(jié)合到本文中。

在某些實施方案中，用于本公開內(nèi)容的乳鐵蛋白可通過用于從乳源分離蛋白的膨脹床吸附(“eba”)方法提供。eba，有時也稱為穩(wěn)定的流化床吸附，是從乳源分離乳蛋白，如乳鐵蛋白的方法，該方法包括建立包含顆粒基質(zhì)的膨脹床吸附柱，將乳源施加于所述基質(zhì)，并用包含約0.3-約2.0m氯化鈉的洗脫緩沖液從基質(zhì)洗脫乳鐵蛋白。任何哺乳動物乳源可用于本方法，而在具體實施方案中，乳源是牛乳來源。在一些實施方案中，乳源包括全脂乳、減脂乳、脫脂乳、乳清、酪蛋白、或其混合物。

在具體實施方案中，目標(biāo)蛋白是乳鐵蛋白，而其它乳蛋白，如乳過氧化物酶或乳白蛋白，也可被分離。在一些實施方案中，該方法包括以下步驟：建立包含顆?；|(zhì)的膨脹床吸附柱，將乳源施加于基質(zhì)，并用約0.3-約2.0m氯化鈉從基質(zhì)洗脫乳鐵蛋白。在其它實施方案中，乳鐵蛋白用約0.5-約1.0m氯化鈉洗脫，而在另外的實施方案中，乳鐵蛋白用約0.7-約0.9m氯化鈉洗脫。

膨脹床吸附柱可以是本領(lǐng)域任何已知的，例如描述于美國專利號7,812,138、6,620,326和6,977,046中的那些，所述專利的公開內(nèi)容藉此通過引用結(jié)合到本文中。在一些實施方案中，將乳源以膨脹模式施加于柱，并以膨脹或填充模式進行洗脫。在具體實施方案中，洗脫以膨脹模式進行。例如，膨脹模式的膨脹比例可以是約1-約3，或約1.3-約1.7。eba技術(shù)在國際申請公布號wo92/00799、wo02/18237、wo97/17132中進一步描述，所述申請藉此通過引用以其全文結(jié)合到本文中。

乳鐵蛋白的等電點是大約8.9。分離乳鐵蛋白的現(xiàn)在有技術(shù)eba方法使用200mm氫氧化鈉作為洗脫緩沖液。因此，系統(tǒng)的ph升至12以上，而乳鐵蛋白的結(jié)構(gòu)和生物活性可因不可逆的結(jié)構(gòu)改變而受損(comprised)?，F(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)氯化鈉溶液可用作從eba基質(zhì)分離乳鐵蛋白的洗脫緩沖液。在某些實施方案中，氯化鈉具有約0.3m-約2.0m的濃度。在其它實施方案中，乳鐵蛋白洗脫緩沖液具有約0.3m-約1.5m，或約0.5m-約1.0m的氯化鈉濃度。

本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物還含有l(wèi)cpufas源；特別是包含二十二碳六烯酸的lcpufas源。其它合適的lcpufas包括，但不限于，α-亞油酸、γ-亞油酸、亞油酸、亞麻酸、二十碳五烯酸(epa)和花生四烯酸(ara)。

在一個實施方案中，尤其如果營養(yǎng)組合物是嬰兒配方，則營養(yǎng)組合物用dha和ara兩者補充。在該實施方案中，ara:dha的重量比可介于約1:3和約9:1之間。在具體的實施方案中，ara:dha的比例為約1:2-約4:1。

營養(yǎng)組合物中長鏈多不飽和脂肪酸的量有利地為至少約5mg/100kcal，且可從約5mg/100kcal至約100mg/100kcal，更優(yōu)選從約10mg/100kcal至約50mg/100kcal變化。

可采用本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，營養(yǎng)組合物用含有dha和/或ara的油補充。例如，可通過替換正常存在于組合物中等量的油(例如高油酸向日葵油)，將dha和ara加入組合物中。作為另一實例，含有dha和ara的油可添加到所述組合物中，即通過替代無dha和ara的組合物中正常存在的相等量的總體脂肪混合物的其余部分。

如果使用，dha和/或ara源可為本領(lǐng)域已知的任何源，例如海洋油、魚油、單細(xì)胞油、蛋黃脂質(zhì)和腦脂質(zhì)。在一些實施方案中，dha和ara來源于單細(xì)胞martek油、dhasco^?和arasco^?，或其變體(variation)。dha和ara可呈天然形式，條件是剩余的lcpufa源不對嬰兒產(chǎn)生任何實質(zhì)有害作用?；蛘撸琩ha和ara可以以精制形式使用。

在一個實施方案中，dha和ara源為如美國專利號5,374,567、5,550,156和5,397,591中教導(dǎo)的單細(xì)胞油，所述專利的公開內(nèi)容通過引用以其整體結(jié)合到本文中。然而，本公開內(nèi)容不只限于這樣的油。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物可包含源自乳的富集的脂質(zhì)部分。源自乳的富集的脂質(zhì)部分可通過任何數(shù)目的分級分離技術(shù)產(chǎn)生。這些技術(shù)包括但不限于熔融分級分離、有機溶劑分級分離、超臨界流體分級分離及其任何變化和組合。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物可包含源自乳的含有乳脂球的富集的脂質(zhì)部分。

在某些實施方案中，加入富集的脂質(zhì)部分或包含乳脂球的富集的脂質(zhì)部分可提供飽和脂肪酸、反式脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸、obcfa、bcfa、cla、膽固醇、磷脂和/或乳脂球膜蛋白的來源給營養(yǎng)組合物。

乳脂球可具有至少約2μm的平均直徑(體積-表面積平均直徑)。在一些實施方案中，平均直徑是在約2μm-約13μm的范圍內(nèi)。在其它實施方案中，乳脂球可介于從約2.5μm至約10μm的范圍內(nèi)。在另外的其它實施方案中，乳脂球的平均直徑可介于從約3μm至約6μm的范圍內(nèi)。乳脂球的比表面積，在某些實施方案中，是少于3.5m²/g，而在其它實施方案中是在約0.9m²/g-約3m²/g之間。不受任何特定理論的束縛，相信前述尺寸的乳脂球更容易接近脂酶，因而導(dǎo)致更好的消化脂質(zhì)。

在一些實施方案中，富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球含有飽和脂肪酸。飽和脂肪酸可以約0.1g/100kcal-約8.0g/100kcal的濃度存在。在某些實施方案中，飽和脂肪酸可以約0.5g/100kcal-約2.0g/100kcal存在。在還有的其它實施方案中，飽和脂肪酸可以約3.5g/100kcal-約6.9g/100kcal存在。

適合于被包含的飽和脂肪酸的例子包括，但不限于，丁酸、戊酸、己酸、辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、二十二烷酸、木質(zhì)素酸(alignoceric)、十四碳酸、十六碳酸、棕櫚酸和十八碳酸，和/或其組合及混合物。

另外地，在一些實施方案中，富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球可包含月桂酸。月桂酸，也稱為十二烷酸，是具有12-碳原子鏈的飽和脂肪酸并被認(rèn)為是目前在人類母乳中找到的主要抗病毒和抗細(xì)菌物質(zhì)之一。乳脂球可富含在sn-1、sn-2和/或sn-3的任一位置包含月桂酸的甘油三酯。不受任何特定理論的束縛，認(rèn)為當(dāng)攝入富集的脂質(zhì)部分時，口腔舌脂酶和胰脂肪酶將甘油三酯水解成包含單月桂酸和游離月桂酸的甘油酯混合物。

月桂酸在乳脂球中的濃度從80mg/100ml至800mg/100ml之間變化。乳脂球中單月桂酸的濃度可以是在20mg/100ml-300mg/100ml進食范圍內(nèi)。在一些實施方案中，范圍是60mg/100ml-130mg/100ml。

在某些實施方案中，富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球可含有反式脂肪酸。乳脂球中包含的反式脂肪酸可以是單不飽和或多不飽和反式脂肪酸。在一些實施方案中，反式脂肪酸可以約0.2g/100kcal-約7.0g/100kcal的量存在。在其它實施方案中，反式脂肪酸可以約3.4g/100kcal-約5.2g/100kcal的量存在。在還有的其它實施方案中，反式脂肪酸可以約1.2g/100kcal-約4.3g/100kcal的量存在。

包含的反式脂肪酸的實例包括，但不限于，十八碳烯酸或反油酸及其混合物。此外，當(dāng)攝入時，哺乳動物將十八碳烯酸轉(zhuǎn)化為瘤胃酸(rumenicacid)，其是顯示抗癌特性的共軛亞油酸。另外地，富含十八碳烯酸的飲食可幫助降低總膽固醇、ldl膽固醇和甘油三酯水平。

在一些實施方案中，富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球可含有obcfa。在某些實施方案中，obcfa可以約0.3g/100kcal-約6.1g/100kcal的量存在。在其它實施方案中，obcfa可以約2.2g/100kcal-約4.3g/100kcal的量存在。在又另一個實施方案中，obcfa可以約3.5g/100kcal-約5.7g/100kcal的量存在。在還有的其它實施方案中，乳脂球包含至少一種obcfa。

典型地，嬰兒可在子宮內(nèi)和從哺乳期的母親的母乳吸收obcfa。因此，優(yōu)選將在人乳中鑒定的obcfa納入到營養(yǎng)組合物的乳脂球中。將obcfa加入嬰兒或兒童的配方，以使這樣的配方反映人乳的組成和功能并促進整體健康和良好狀態(tài)。

在一些實施方案中，富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球可包含bcfa。在一些實施方案中，bcfa以從約0.2g/100kcal至約5.82g/100kcal的濃度存在。在另一個實施方案中，bcfa以約2.3g/100kcal-約4.2g/100kcal的量存在。在又另一個實施方案中，bcfa以約4.2g/100kcal-約5.82g/100kcal的量存在。在還有的其它實施方案中，乳脂球包含至少一種bcfa。

優(yōu)選將人乳中鑒定的bcfa納入營養(yǎng)組合物中。將bcfa加入嬰兒或兒童配方，以使這樣的配方反映人乳的組成和功能并促進整體健康和良好狀態(tài)。

在某些實施方案中，富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球可包含cla。在一些實施方案中，cla可以約0.4g/100kcal-約2.5g/100kcal的濃度存在。在其它實施方案中，cla可以約0.8g/100kcal-約1.2g/100kcal存在。在還有的其它實施方案中，cla可以約1.2g/100kcal-約2.3g/100kcal存在。在再有的其它實施方案中，乳脂球包含至少一種cla。

優(yōu)選將人乳中鑒定的cla納入營養(yǎng)組合物中。通常，嬰兒從哺乳期的母親的人乳吸收cla。將cla加入嬰兒或兒童配方，以使這樣的配方反映人乳的組成和功能并促進整體健康和良好狀態(tài)。

對于營養(yǎng)組合物，乳脂球中存在的cla的實例包括，但不限于，順式-9,反式-11cla、反式-10,順式-12cla、順式-9,反式-12十八烷二烯酸及其混合物。

在一些實施方案中，本公開內(nèi)容的富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球包含單不飽和脂肪酸。富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球可被配制為包含約0.8g/100kcal-約2.5g/100kcal的單不飽和脂肪酸。在其它實施方案中，乳脂球可包含約1.2g/100kcal-約1.8g/100kcal的單不飽和脂肪酸。

合適的單不飽和脂肪酸的實例包括，但不限于，棕櫚烯酸、順式-十八碳烯酸、油酸及其混合物。

在某些實施方案中，本公開內(nèi)容的富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球包含約2.3g/100kcal-約4.4g/100kcal的多不飽和脂肪酸。在其它實施方案中，多不飽和脂肪酸以約2.7g/100kcal-約3.5g/100kcal存在。在又另一個實施方案中，多不飽和脂肪酸以約2.4g/100kcal-約3.3g/100kcal存在。

在一些實施方案中，本公開內(nèi)容的富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球包含多不飽和脂肪酸，例如亞油酸、亞麻酸、十八碳三烯酸、花生四烯酸(ara)、二十碳四烯酸,二十碳五烯酸(epa)、二十二碳五烯酸(dpa)和二十二碳六烯酸(dha)。多不飽和脂肪酸是前列腺素和類花生酸的前體，其已知提供許多健康益處，包括，抗-炎癥反應(yīng)、膽固醇吸收和增加支氣管功能。

在一些實施方案中，本公開內(nèi)容的富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球也可包含約100mg/100kcal-約400mg/100kcal的膽固醇。在另一個實施方案中，膽固醇以約200mg/100kcal-約300mg/100kcal存在。類似于人乳和牛奶，包括在乳脂球中的膽固醇可存在于乳脂球的外雙層膜中，以提供乳脂球膜的穩(wěn)定性。

在一些實施方案中，本公開內(nèi)容的富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球包含約50mg/100kcal-約200mg/100kcal的磷脂。在其它實施方案中，磷脂以約75mg/100kcal-約150mg/100kcal存在。在還有的其它實施方案中，磷脂以約100mg/100kcal-約250mg/100kcal的濃度存在。

在某些實施方案中、磷脂可摻入到乳脂球中以通過提供磷脂膜或雙層磷脂膜穩(wěn)定乳脂球。因此,在一些實施方案中，可按比在人乳中發(fā)現(xiàn)的那些更高量的磷脂配制乳脂球。

人乳脂質(zhì)的磷脂組成，作為總磷脂的重量百分比，是磷脂酰膽堿(“pc”)24.9%、磷脂酰乙醇胺(“pe”)27.7%、磷脂酰絲氨酸(“ps”)9.3%、磷脂酰肌醇(“pi”)5.4%和鞘磷脂(“spgm”)32.4%，(harzer,g.etal.,am.j.clin.nutr.,vol.37,pp.612-621(1983))。因此，在一個實施方案中，乳脂球包含pc、pe、ps、pi、spgm，及其混合物的一或多種。此外，包括在乳脂球中的磷脂組成可被配制為通過摻入所需的磷脂提供某些健康益處。

在某些實施方案中，本公開內(nèi)容的富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球包含乳脂球膜蛋白。在一些實施方案中，乳脂球膜蛋白以約50mg/100kcal-約500mg/100kcal存在。

在一些實施方案中，半乳糖脂可包括在本公開內(nèi)容的富集的脂質(zhì)部分和/或乳脂球中。為了本公開內(nèi)容的目的，“半乳糖脂”指其糖基為半乳糖的任何糖脂。更具體地說，半乳糖脂與鞘糖脂的不同之處在于它們在其組成中不含氮。半乳糖脂在支持腦發(fā)育和整個神經(jīng)健康中起著重要的作用。另外地，在一些實施方案中，半乳糖脂、半乳糖腦苷和硫苷脂分別組成約23%和4%的總髓磷脂脂質(zhì)含量，因此可摻入到乳脂球中。

在一些實施方案中，本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物可包含至少一種蛋白源，所述蛋白源頭是指除乳鐵蛋白之外的。蛋白源可以是本領(lǐng)域使用的任何來源，例如，脫脂乳、乳清蛋白、酪蛋白、大豆蛋白、水解蛋白、氨基酸等?？捎糜趯嵤┍竟_內(nèi)容的牛乳蛋白源包括，但不限于，乳蛋白粉末、乳蛋白濃縮物、乳蛋白分離物、脫脂乳固體、脫脂乳、脫脂無水乳、乳清蛋白、乳清蛋白分離物、乳清蛋白濃縮物、甜乳清、酸乳清、酪蛋白、酸酪蛋白、酪蛋白酸鹽(如酪蛋白酸鈉、酪蛋白酸鈉鈣、酪蛋白酸鈣)，及其任何組合。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物的蛋白作為完整蛋白提供。在其它實施方案中，蛋白作為完整蛋白和水解蛋白二者的組合提供。在某些實施方案中，蛋白可被部分水解或廣泛水解。在還有的其它實施方案中，蛋白源包含氨基酸。在又另一個實施方案中，蛋白源可補充有含谷氨酰胺的肽。在另一個實施方案中，蛋白組分包含廣泛水解蛋白。在又另一個實施方案中，營養(yǎng)組合物的蛋白組分基本由廣泛水解蛋白組成，以最大限度地減少食物過敏的發(fā)生。在又另一個實施方案中，蛋白源可補充有含谷氨酰胺的肽。

因此，在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物的蛋白組分包含部分或者廣泛水解的蛋白，例如來自牛乳的蛋白質(zhì)。水解蛋白可以用酶處理以分解一些或大多數(shù)引起不良癥狀的蛋白質(zhì)，目的是減少過敏反應(yīng)、不耐性和致敏。此外，蛋白質(zhì)可以通過本領(lǐng)域已知的任何方法水解。

術(shù)語“蛋白水解產(chǎn)物”或“水解蛋白”本文可互換使用并指水解蛋白，其中水解度可以是約20%-約80%，或約30%-約80%，或甚至約40%-約60%。

當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)的肽鍵通過酶促水解破壞時，每個肽鍵破壞釋出一個氨基，引起氨基氮的增加。應(yīng)該注意到，即使未水解蛋白會含有一些暴露的氨基。水解蛋白也會具有與未水解蛋白(從該未水解蛋白形成水解蛋白)不同的分子量分布。水解蛋白的功能和營養(yǎng)性質(zhì)可受不同大小的肽影響。分子量分布型通常是通過列出特定范圍的分子量(以道爾頓計)部分(例如，2,000-5,000道爾頓，大于5,000道爾頓)的百分比重量給出的。

在特定的實施方案中，營養(yǎng)組合物是不含蛋白質(zhì)的并含有游離氨基酸作為蛋白等同物源。在此實施方案中，氨基酸可包含，但不限于，組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、蘇氨酸、色氨酸、纈氨酸、丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、脯氨酸、絲氨酸、肉毒堿、牛磺酸及其混合物。在一些實施方案中，氨基酸可以是支鏈氨基酸。在其它實施方案中，小的氨基酸肽可以作為營養(yǎng)組合物的蛋白質(zhì)組分被包括在內(nèi)。這樣的小氨基酸肽可以是天然存在的或合成的。游離氨基酸在營養(yǎng)組合物中的量可以從約1至約5g/100kcal變化。在一個實施方案中，100%的游離氨基酸具有少于500道爾頓的分子量。在此實施方案中，營養(yǎng)制劑可以是低變應(yīng)原的。

在一個實施方案中，蛋白質(zhì)源包含從約40%至約85%的乳清蛋白和從約15%至約60%的酪蛋白。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含約1g-約7g蛋白和/或蛋白等同物源/100kcal。在其它實施方案中，營養(yǎng)組合物包含約3.5g和約4.5g之間的蛋白或蛋白等同物源/100kcal。

而且，本公開的營養(yǎng)組合物可包含至少一種淀粉或淀粉組分。淀粉是由兩個不同的聚合物部分組成的碳水化合物：直鏈淀粉和支鏈淀粉。直鏈淀粉是由α-1,4連接的葡萄糖單元組成的線性部分。支鏈淀粉具有與直鏈淀粉相同的結(jié)構(gòu)，但一些葡萄糖單元以α-1,6鍵化合，產(chǎn)生分支結(jié)構(gòu)。淀粉一般含有17-24%的直鏈淀粉和76-83%的支鏈淀粉。還發(fā)展出了特殊遺傳種類的植物，其產(chǎn)生具有不尋常的直鏈淀粉與支鏈淀粉的比例的淀粉。一些植物產(chǎn)生不含直鏈淀粉的淀粉。這些突變體在胚乳和花粉中產(chǎn)生淀粉粒，所述淀粉粒用碘染成紅色并含有幾乎100%的支鏈淀粉。這樣的產(chǎn)生支鏈淀粉的植物主要是蠟質(zhì)性玉米、蠟質(zhì)性高粱和蠟質(zhì)性稻米淀粉。

在加熱、剪切和酸性條件下的淀粉性能可以經(jīng)化學(xué)改性改變或改進。改性通常通過引入化學(xué)取代基實現(xiàn)。例如，在高溫或高剪切下的粘性可通過與二-或多官能團試劑，例如磷酰氯交聯(lián)而增加或穩(wěn)定。

在一些情況下，本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物包含至少一種經(jīng)膠質(zhì)化和/或預(yù)膠質(zhì)化的淀粉。如本領(lǐng)域已知，當(dāng)聚合物分子在其長度的一部分上相互作用時發(fā)生膠質(zhì)化以形成俘獲溶劑和/或溶質(zhì)分子的網(wǎng)絡(luò)。此外，當(dāng)果膠分子由于共溶質(zhì)(cosolute)分子的競爭性水合作用而失去水合的一些水時形成凝膠。影響膠質(zhì)化發(fā)生的因素包括ph、共溶質(zhì)的濃度、陽離子的濃度和類型、溫度和果膠濃度。特別地，lm果膠會僅僅在二價陽離子，例如鈣離子的存在下成凝膠。此外在lm果膠中，具有最低酯化程度的那些具有最高的膠凝溫度和對用于交叉橋接(crossbridging)的二價陽離子的最大需要。

與此同時，淀粉的預(yù)膠質(zhì)化是預(yù)煮淀粉以產(chǎn)生在冷水中水合和溶脹的物質(zhì)的過程。然后干燥預(yù)煮的淀粉，例如通過轉(zhuǎn)鼓式干燥或噴霧干燥。此外，本公開內(nèi)容的淀粉可經(jīng)化學(xué)改性以進一步擴展其最終特性的范圍。本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物可包含至少一種預(yù)膠質(zhì)化淀粉。

天然淀粉顆粒是不溶于水的，但當(dāng)在水中加熱時，當(dāng)存在足夠的熱能以克服淀粉分子的鍵合力時，天然淀粉顆粒開始溶脹。隨著繼續(xù)加熱，顆粒溶脹至其原始體積的許多倍。這些溶脹的顆粒之間的摩擦力是對淀粉糊粘性作出貢獻的主要因素。

本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物可包含天然或改性淀粉，例如，蠟質(zhì)性玉米淀粉、蠟質(zhì)性稻米淀粉、玉米淀粉、稻米淀粉、馬鈴薯淀粉、木薯淀粉、小麥淀粉或其任何混合物。一般地，普通玉米淀粉包含約25%的直鏈淀粉，而蠟質(zhì)性玉米淀粉幾乎完全由支鏈淀粉組成。同時，馬鈴薯淀粉一般包含約20%的直鏈淀粉，稻米淀粉包含約20:80的直鏈淀粉:支鏈淀粉比例，和蠟質(zhì)性稻米淀粉僅包含約2%的直鏈淀粉。此外，木薯淀粉一般包含約15%-約18%的直鏈淀粉，而小麥淀粉具有約25%的直鏈淀粉含量。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含膠質(zhì)化和/或預(yù)膠質(zhì)化蠟質(zhì)性玉米淀粉。在其它實施方案中，營養(yǎng)組合物包含膠質(zhì)化和/或預(yù)膠質(zhì)化木薯淀粉。其它膠質(zhì)化和/或預(yù)膠質(zhì)化淀粉，如稻米淀粉或馬鈴薯淀粉也可使用。

此外，本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物包含至少一種果膠源。果膠源可包含本領(lǐng)域已知的任何種類或等級的果膠。在一些實施方案中，果膠具有少于50%的酯化程度并被分類為低甲基化(“l(fā)m”)果膠。在一些實施方案中，果膠具有大于或等于50%的酯化程度和被分類為高-酯或高甲基化(“hm”)果膠。在還有的其它實施方案中，果膠為極低(“vl”)果膠，其具有少于約15%的酯化程度。此外，本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物可包含lm果膠、hm果膠、vl果膠或其任何混合物。營養(yǎng)組合物可包括可溶于水的果膠。此外如本領(lǐng)域已知的，果膠溶液的溶解性和粘性與分子量、酯化程度、果膠制劑的濃度以及相反離子的ph和存在有關(guān)。

而且，果膠具有形成凝膠的獨特能力。一般來說，在類似的條件下，果膠的膠凝程度、膠凝溫度和凝膠強度彼此成比例，且各自一般與果膠的分子量成比例和與酯化程度成反比。例如，當(dāng)果膠溶液的ph降低時，羧酸基團的離子化受到抑制，而結(jié)果是失去其電荷，糖分子在其整個長度上不互相排斥。因此，多糖分子可在其長度的一部分上關(guān)聯(lián)以形成凝膠。但具有增加的甲基化程度的果膠會在稍微更高的ph下膠凝，因為它們在任何給定ph下具有較少的羧酸根陰離子(j.n.bemiller，對果膠的介紹：結(jié)構(gòu)和特性(introductiontopectins:structureandproperties),果膠的化學(xué)和功能(chemistryandfunctionofpectins)；第1章；1986)。

營養(yǎng)組合物可包含與果膠和/或膠質(zhì)化果膠一起的膠質(zhì)化淀粉和/或預(yù)膠質(zhì)化淀粉。雖然不希望受到這種或任何其它理論的束縛，相信與淀粉顆粒一起使用果膠，例如lm果膠(其是大分子量的水狀膠體)，提供增加流體基質(zhì)中分子內(nèi)摩擦力的協(xié)同作用。果膠的羧基也可與存在于營養(yǎng)組合物中的鈣離子相互作用，因而導(dǎo)致粘性的增加，因為果膠的羧基與鈣離子，并且還與存在于營養(yǎng)組合物中的肽形成弱的凝膠結(jié)構(gòu)。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含分別介于約12:1和20:1之間的比例的淀粉:果膠。在其它實施方案中，所述淀粉與果膠的比例是約17:1。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物可包含約0.05和約2.0%w/w之間的果膠。在一特定的實施方案中，營養(yǎng)組合物可包含約0.5%w/w的果膠。

本文使用的果膠通常具有8,000道爾頓或更大的峰分子量。本公開內(nèi)容的果膠具有優(yōu)選的介于8,000和約500,000之間，更優(yōu)選介于約10,000和約200,000之間和最優(yōu)選介于約15,000和約100,000道爾頓之間的峰分子量。在一些實施方案中，本公開內(nèi)容的果膠可以是水解果膠。在某些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含具有分子量少于完整或未改性果膠的分子量的水解果膠。本公開內(nèi)容的水解果膠可通過本領(lǐng)域已知的任何方法制備用以減少分子量。所述方法的實例為化學(xué)水解、酶促水解和機械剪切。減少分子量的優(yōu)選的方法是通過在升高的溫度下進行堿性或中性水解。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含部分水解果膠。在某些實施方案中，部分水解果膠具有少于完整或未改性果膠的分子量但超過3,300道爾頓的分子量。

營養(yǎng)組合物可含有至少一種酸性多糖。酸性多糖，例如帶負(fù)電荷的果膠，可誘導(dǎo)對受試者的胃腸道中的病原體的抗-粘附作用。事實上，衍生自果膠的非人乳酸性寡糖能夠與上皮表面相互作用且已知抑制病原體在上皮表面上的附著。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含至少一種果膠-衍生的酸性寡糖。果膠-衍生的酸性寡糖(paos)由酶促果膠分解(pectinolysis)產(chǎn)生，和paos的大小取決于所用的酶和反應(yīng)的持續(xù)時間。在這樣的實施方案中，paos可有益地影響受試者的糞便粘性、排便頻率、糞便ph和/或喂養(yǎng)耐受性。本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物可包含約2gpaos每升的配方和約6gpaos每升的配方。在一個實施方案中，營養(yǎng)組合物包含約0.2gpaos/dl，相當(dāng)于人乳中的酸性寡糖濃度(fanaroetal.,“得自果膠水解產(chǎn)物的作為嬰兒配方的新組分的酸性寡糖：對腸道微生物群、糞便特征和ph的影響(acidicoligosaccharidesfrompectinhydrolysateasnewcomponentforinfantformulae:effectonintestinalflora,stoolcharacteristics,andph)”,journalofpediatricgastroenterologyandnutrition,41:186-190,2005年8月)。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含至多約20%w/w的淀粉和果膠的混合物。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含至多約19%的淀粉和至多約1%的果膠。在其它實施方案中，營養(yǎng)組合物包含至多約15%的淀粉和至多約5%的果膠。在還有的其它實施方案中，營養(yǎng)組合物包含至多約18%的淀粉和至多約2%的果膠。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含約0.05%w/w和約20%w/w之間的淀粉和果膠的混合物。其它實施方案包含約0.05%和約19%w/w之間的淀粉和約0.05%和約1%w/w之間的果膠。此外，營養(yǎng)組合物可包含約0.05%和約15%w/w之間的淀粉和約0.05%和約5%w/w之間的果膠。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含至少一種另外的碳水化合物源，即是說，除了前述淀粉組分外提供的碳水化合物組分。另外的碳水化合物源可以是本領(lǐng)域使用的任何來源，例如，乳糖、葡萄糖、果糖、玉米糖漿固體、麥芽糊精、蔗糖、淀粉、稻米糖漿固體等。營養(yǎng)組合物中的另外的碳水化合物組分的量通常可在約5g和約25g/100kcal之間變化。在一些實施方案中，碳水化合物的量在約6g和約22g/100kcal之間。在其它實施方案中，碳水化合物的量在約12g和約14g/100kcal之間。在一些實施方案中，玉米糖漿固體是優(yōu)選的。然而，水解的、部分水解的和/或廣泛水解的碳水化合物由于它們的易消化性，對于包含在營養(yǎng)組合物中可以是合乎需要的。特別地，水解碳水化合物不太可能含有致敏的抗原表位。

適用于本文的碳水化合物材料的非限制性實例包括來源于玉米、木薯、稻米或馬鈴薯的水解或完整的、天然或化學(xué)改性的淀粉(蠟質(zhì)性或非-蠟質(zhì)性形式)。合適的碳水化合物的非限制性實例包括表征為水解玉米淀粉、麥芽糖糊精、麥芽糖、玉米糖漿、右旋糖、玉米糖漿固體、葡萄糖和各種其它葡萄糖聚合物及其組合的各種水解淀粉。其它合適的碳水化合物的非限制性實例包括通常稱為蔗糖、乳糖、果糖、高果糖玉米糖漿、不消化的寡糖(例如寡聚果糖)及其組合的那些。

在一個具體的實施方案中，營養(yǎng)組合物的另外的碳水化合物組分包含100%乳糖。在另一個實施方案中，另外的碳水化合物組分包含介于約0%和60%之間的乳糖。在另一個實施方案中，另外的碳水化合物組分包含介于約15%和55%之間的乳糖。在又另一個實施方案中，另外的碳水化合物組分包含介于約20%和30%之間的乳糖。在這些實施方案中，剩余的碳水化合物源可以是本領(lǐng)域已知的任何碳水化合物。在一個實施方案中，碳水化合物組分包含約25%乳糖和約75%玉米糖漿固體。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含唾液酸。唾液酸是超過50個成員的9-碳糖家族，其全部都是神經(jīng)氨酸(neuroaminicacid)的衍生物。在人類中發(fā)現(xiàn)的主要唾液酸家族是來自n-乙酰神經(jīng)氨酸亞家族。唾液酸存在于乳中，如牛乳和羊乳中。在哺乳動物中，與其它體細(xì)胞膜比較，神經(jīng)元細(xì)胞膜具有最高濃度的唾液酸。唾液酸殘基也是神經(jīng)節(jié)苷脂的組分。

如果包括在營養(yǎng)組合物中，唾液酸可以約0.5mg/100kcal-約45mg/100kcal的量存在。在一些實施方案中，唾液酸可以約5mg/100kcal-約30mg/100kcal的量存在。在還有的其它實施方案中，唾液酸可以約10mg/100kcal-約25mg/100kcal的量存在。

在一個實施方案中，營養(yǎng)組合物可含有一種或多種益生菌。本領(lǐng)域已知的任何益生菌可以是這個實施方案中可接受的。在具體的實施方案中，益生菌可以選自任何乳酸桿菌菌種(lactobacillusspecies)、鼠李糖乳酸桿菌gg(lgg)(atccnumber53103)、雙歧桿菌菌種(bifidobacteriumspecies)、長雙歧桿菌(bifidobacteriumlongum)bb536(bl999,atcc:baa-999)、長雙歧桿菌(bifidobacteriumlongum)ah1206(ncimb:41382)、短雙歧桿菌(bifidobacteriumbreve)ah1205(ncimb:41387)、嬰兒雙岐桿菌(bifidobacteriuminfantis)35624(ncimb:41003)和動物雙歧桿菌產(chǎn)乳酸亞種bb-12(bifidobacteriumanimalissubsp.lactisbb-12)(dsmno.10140)或其任何組合。

如果包括在組合物中，益生菌的量可以從每100kcal約1x10⁴至約1.5x10¹²cfu的益生菌變化。在一些實施方案中，益生菌的量可以從每100kcal約1x10⁶至約1x10⁹cfu的益生菌變化。在某些其它實施方案中，益生菌的量可從每100kcal約1x10⁷cfu/100kcal至約1x10⁸cfu的益生菌變化。

在一個實施方案中，益生菌可以是有活力的或無活力的。如本文所用的，術(shù)語“有活力的”是指活的微生物體。術(shù)語“無活力的”或“無活力的益生菌”意指無生命的益生菌微生物、其細(xì)胞組成和/或其代謝物。這樣的無活力的益生菌可以被熱殺死或以別的方式滅活，但它們保留有利地影響宿主健康的能力。可用于本公開內(nèi)容的益生菌可以是天然-存在的、合成的或通過生物體的基因操作開發(fā)的，無論這樣的來源是現(xiàn)在已知的還是以后開發(fā)的。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物可包括包含益生菌細(xì)胞等同物的來源，其指等同于相等數(shù)目的活細(xì)胞的無活力、不復(fù)制的益生菌的水平。術(shù)語“不復(fù)制”要理解為從相同量的復(fù)制細(xì)菌(cfu/g)獲得的不復(fù)制微生物的量，包括滅活的益生菌、dna片段、細(xì)胞壁或胞質(zhì)化合物。換言之，非-存活的、不復(fù)制生物體的量以cfu來表示，就如所有的微生物都是活的，而不管它們是否是死的、不復(fù)制、滅活的、破碎的等。在無活力的益生菌包含在營養(yǎng)組合物中時，益生菌細(xì)胞等同物的量可從約1x10⁴至約1.5x10¹⁰益生菌細(xì)胞等同物/100kcal變化。在一些實施方案中，益生菌細(xì)胞等同物的量可以是從約1x10⁶至約1x10⁹益生菌細(xì)胞等同物/100kcal營養(yǎng)組合物。在某些其它實施方案中，益生菌細(xì)胞等同物的量可以從約1x10⁷-約1x10⁸益生菌細(xì)胞等同物/100kcal營養(yǎng)組合物變化。

在一些實施方案中，摻入營養(yǎng)組合物的益生菌來源可包含有活力的菌落形成單元和無活力的細(xì)胞-等同物二者。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含來自益生菌間歇培養(yǎng)過程指數(shù)增長期后期的培養(yǎng)上清液。不希望受到理論的束縛，相信培養(yǎng)上清液的活性可歸因于如發(fā)現(xiàn)的在益生菌分批培養(yǎng)的指數(shù)(或“對數(shù)”)期的后階段釋放到培養(yǎng)基中的組分(包括蛋白質(zhì)材料，和可能包括(外泌)多糖材料)的混合物。本文所用的術(shù)語“培養(yǎng)上清液”包括在培養(yǎng)基中存在的組分的混合物。在細(xì)菌的分批培養(yǎng)中公認(rèn)的階段是技術(shù)人員已知的。這些是“滯后”、“對數(shù)”(“對數(shù)的”或“指數(shù)的”)、“靜止”和“死亡”(或“對數(shù)下降”)期。在活菌存在的所有階段中，細(xì)菌從培養(yǎng)基中代謝營養(yǎng)物，并將材料分泌(施加、釋放)到培養(yǎng)基中。在生長階段的給定的時間點分泌的材料的組成一般是不可預(yù)測的。

在一個實施方案中，培養(yǎng)上清液可通過包括以下步驟的方法獲得：(a)使用批方法，使益生菌例如lgg在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；(b)收獲在培養(yǎng)步驟的指數(shù)生長期晚期的培養(yǎng)上清液，該期參照批-培養(yǎng)過程的滯后期和靜止期之間的后半段時間限定；(c)任選地從上清液除去低分子量成分以保留5-6千道爾頓(kda)以上分子量的成分；(d)從培養(yǎng)上清液除去液體內(nèi)容物以獲得組合物。

培養(yǎng)上清液可包含從指數(shù)期晚期收獲的分泌材料。指數(shù)期晚期發(fā)生在中期指數(shù)期(其為指數(shù)期持續(xù)時間的中段時間，因此提及指數(shù)期晚期為滯后期和靜止期之間的后半段時間)之后的時間。特別是，本文使用術(shù)語“指數(shù)期晚期”是指lgg批-培養(yǎng)過程的滯后期和靜止期之間時間的后四分之一部分。在一些實施方案中，培養(yǎng)上清液在指數(shù)期持續(xù)時間的75%-85%的時間點收獲，且可以在指數(shù)期中流逝時間的約5/6時收獲。

如記錄，本公開的營養(yǎng)組合物可包含β-葡聚糖源。葡聚糖是多糖，具體而言是葡萄糖的聚合物，其是天然存在的并且可存在于細(xì)菌、酵母、真菌和植物的細(xì)胞壁中。β葡聚糖(β-葡聚糖)本身是不同子集的葡萄糖聚合物，其由通過β-型糖苷鍵連接在一起以形成復(fù)雜的碳水化合物的葡萄糖單體鏈構(gòu)成。

β-1,3-葡聚糖是純化自例如酵母、蕈類、細(xì)菌、藻類或谷類的碳水化合物聚合物(stoneba,clarkeae.(1-3)-β-葡聚糖的化學(xué)和生物學(xué)(chemistryandbiologyof(1-3)-beta-glucans).london:portlandpressltd;1993)。β-1,3-葡聚糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)取決于β-1,3-葡聚糖的來源。而且，各種物理化學(xué)參數(shù)，例如溶解度、主要結(jié)構(gòu)、分子量和分支，在β-1,3-葡聚糖的生物活性中起作用(yadomaet.,真菌β-1,3-葡聚糖的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)活性(structureandbiologicalactivitiesoffungalbeta-1,3-glucans).yakugakuzasshi.2000;120:413-431)。

β-1,3-葡聚糖是天然存在的多糖，含或不含β-1,6-葡萄糖側(cè)鏈，其存在于各種植物、酵母、真菌和細(xì)菌的細(xì)胞壁中。β-1,3;1,6-葡聚糖是含有具有在(1,6)位連接的側(cè)鏈并帶有(1,3)鍵的葡萄糖單元的葡聚糖。β-1,3;1,6葡聚糖是共享結(jié)構(gòu)共性的一組異源葡萄糖聚合物，包括通過β-1,3鍵連接的直鏈葡萄糖單元骨架與從該骨架延伸的β-1,6-連接的葡萄糖分支。雖然這是本發(fā)明所述β-葡聚糖類別的基本結(jié)構(gòu)，但可能存在一些變化。例如，某些酵母β-葡聚糖具有從β(1,6)分支延伸出的額外的β(1,3)分支區(qū)域，這進一步增加了其相應(yīng)結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性。

來源于面包酵母、釀酒酵母(saccharomycescerevisiae)的β-葡聚糖由在1和3位連接的d-葡萄糖分子鏈組成，其具有在1和6位上連接的葡萄糖側(cè)鏈。酵母來源的β-葡聚糖是不溶性纖維樣復(fù)合糖，具有如下普遍結(jié)構(gòu)：帶有β-1,3骨架的葡萄糖單元直鏈，所述骨架中間散布著長度一般為6-8個葡萄糖單元的β-1,6側(cè)鏈。更具體地說，來源于面包酵母的β-葡聚糖是聚-(1,6)-β-d吡喃葡糖基-(1,3)-β-d吡喃葡萄糖。

此外，β-葡聚糖在小兒受試者中耐受性良好，不產(chǎn)生或引起過量產(chǎn)氣、腹脹、胃氣脹或腹瀉。將β-葡聚糖添加至用于小兒受試者的營養(yǎng)組合物中，例如嬰兒配方、成長乳或另一個兒童營養(yǎng)制品，會通過提高針對侵入的病原體的抗性來改善受試者的免疫應(yīng)答，并因此維持或改善整體健康。

本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物包含β-葡聚糖。在一些實施方案中，β-葡聚糖是β-1,3;1,6-葡聚糖。在一些實施方案中，β-1,3;1,6-葡聚糖衍生自面包酵母(baker’syeast)。營養(yǎng)組合物可包含完全葡聚糖顆粒β-葡聚糖、顆粒β-葡聚糖、pgg-葡聚糖(聚-1,6-β-d-吡喃葡萄糖基-1,3-β-d-吡喃葡萄糖)或其任何混合物。

在一些實施方案中，存在于組合物中的β-葡聚糖的量在每100g組合物約0.010和約0.080g每100g之間。在其它實施方案中，營養(yǎng)組合物包含每份飲食約10和約30mg之間的β-葡聚糖。在另一個實施方案中，營養(yǎng)組合物包含每8液量盎司(236.6ml)份飲食約5和約30mg之間的β-葡聚糖。在其它實施方案中，營養(yǎng)組合物包含足以提供每天約15mg和約90mgβ-葡聚糖的量的β-葡聚糖。營養(yǎng)組合物可以多個劑量遞送，以達到一整天遞送給受試者目標(biāo)量的β-葡聚糖。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物中的β-葡聚糖的量在每100kcal約3mg和約17mg之間。在另一個實施方案中，β-葡聚糖的量在每100kcal約6mg和約17mg之間。

還可以足以供應(yīng)受試者每日營養(yǎng)需要的量將一種或多種維生素和/或礦物質(zhì)加入營養(yǎng)組合物中。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員要了解，維生素和礦物質(zhì)需要會根據(jù)例如兒童的年齡而變化。例如，嬰兒可具有與年齡介于1歲和13歲之間的兒童不同的維生素和礦物質(zhì)需要。因此，實施方案無意將營養(yǎng)組合物限于具體的年齡組，而是提供一系列的可接受的維生素和礦物質(zhì)組分。

營養(yǎng)組合物可任選地包括但不限于下列維生素或其衍生物的一種或多種：維生素b1(硫胺、焦磷酸硫胺，tpp、三磷酸硫胺，ttp、鹽酸硫胺、一硝酸硫胺)、維生素b2(核黃素、黃素單核苷酸，fmn、黃素腺嘌呤二核苷酸，fad、乳黃素、卵黃素)、維生素b3(尼克酸、煙酸、煙酰胺、尼克酰胺、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，nad、煙酸單核苷酸，nicmn、吡啶-3-甲酸)、維生素b3-前體色氨酸、維生素b6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺、鹽酸吡哆醇)、泛酸(泛酸鹽、泛醇)、葉酸鹽(葉酸(folicacid)、葉酸(folacin)、蝶酰谷氨酸)、維生素b12(鈷胺素、甲基鈷胺素、脫氧腺苷鈷胺素、氰鈷胺、羥鈷胺素、腺苷鈷胺素)、生物素、維生素c(抗壞血酸)、維生素a(視黃醇、視黃醇乙酸酯、視黃醇棕櫚酸酯、含有其它長鏈脂肪酸的視黃酯、視黃醛、視黃酸、視黃醇酯)、維生素d(鈣化醇、膽鈣化醇、維生素d3、1,25,-二羥維生素d)、維生素e(α-生育酚、α-生育酚乙酸酯、α-生育酚琥珀酸酯、α-生育酚煙酸酯、α-生育酚)、維生素k(維生素k1、葉綠醌、萘醌、維生素k2、甲基萘醌-7、維生素k3、甲基萘醌-4、甲萘醌、甲基萘醌-8、甲基萘醌-8h、甲基萘醌-9、甲基萘醌-9h、甲基萘醌-10、甲基萘醌-11、甲基萘醌-12、甲基萘醌-13)、膽堿、肌醇、β-胡蘿卜素及其任何組合。

此外，營養(yǎng)組合物可以任選地包括但不限于，下列礦物質(zhì)或其衍生物的一種或幾種：硼、鈣、醋酸鈣、葡萄糖酸鈣、氯化鈣、乳酸鈣、磷酸鈣、硫酸鈣、氯化物、鉻、氯化鉻、吡啶甲酸鉻(chromiumpicolonate)、銅、硫酸銅(coppersulfate)、葡萄糖酸銅、硫酸銅(cupricsulfate)、氟化物、鐵、羰基鐵、三價鐵、富馬酸亞鐵、正磷酸鐵、鐵研制劑(irontrituration)、多糖鐵、碘化物、碘、鎂、碳酸鎂、氫氧化鎂、氧化鎂、硬脂酸鎂、硫酸鎂、錳、鉬、磷、鉀、磷酸鉀、碘化鉀、氯化鉀、醋酸鉀、硒、硫、鈉、多庫酯鈉、氯化鈉、硒酸鈉、鉬酸鈉、鋅、氧化鋅、硫酸鋅及其混合物。礦物質(zhì)化合物的非限制性示例性衍生物包括任何礦物質(zhì)化合物的鹽、堿性鹽、酯和螯合物。

礦物質(zhì)可以以鹽例如磷酸鈣、甘油磷酸鈣、檸檬酸鈉、氯化鉀、磷酸鉀、磷酸鎂、硫酸亞鐵、硫酸鋅、硫酸銅、硫酸鎂和亞硒酸鈉的形式添加至營養(yǎng)組合物中?？商砑颖绢I(lǐng)域已知的額外的維生素和礦物質(zhì)。

在一個實施方案中，營養(yǎng)組合物每份可包含任何給定的國家的最大飲食推薦量的約10和約50%之間或一組國家的平均飲食推薦量的約10和約50%之間的維生素a、c和e、鋅、鐵、碘、硒和膽堿。在另一個實施方案中，兒童營養(yǎng)組合物每份可供給任何給定的國家的最大飲食推薦量的約10-30%或一組國家的平均飲食推薦量的約10-30%的維生素b族。在又另一個實施方案中，兒童營養(yǎng)產(chǎn)品中的維生素d、鈣、鎂、磷和鉀的水平可與乳中存在的平均水平一致。在其它實施方案中，兒童營養(yǎng)組合物中的其它營養(yǎng)物每份可以以任何給定國家的最大飲食推薦量的約20%或一組國家的平均飲食推薦量的約20%存在。

本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物可以任選地包括下列調(diào)味劑中的一種或多種，其包括但不限于：調(diào)味提取物、揮發(fā)油類、可可或巧克力調(diào)味劑、花生醬調(diào)味劑、餅干屑、香草或任何可市售獲得的調(diào)味劑。有用的調(diào)味劑的實例包括，但不限于，純茴香提取物、仿香蕉提取物、仿櫻桃提取物、巧克力提取物、純檸檬提取物、純橙子提取物、純薄荷提取物、蜂蜜、仿菠蘿提取物、仿朗姆酒(imitationrum)提取物、仿草莓提取物或香草提取物；或揮發(fā)油類，例如蜂蜜花油、月桂油、香檸檬油、柏木油、櫻桃油、肉桂油、丁香油或薄荷油；花生醬、巧克力調(diào)味劑、香草餅干屑、奶油硬糖、太妃糖，及其混合物。調(diào)味劑的量可變化很大，這取決于使用的調(diào)味劑?？梢勒毡绢I(lǐng)域已知的，選擇調(diào)味劑的類型和量。

本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物可以任選地包括一種或多種可添加用于穩(wěn)定最終產(chǎn)品的乳化劑。合適的乳化劑的實例包括但不限于，卵磷脂(例如來自蛋或大豆)、α乳清蛋白和/或甘油單酯和甘油二酯，及其混合物。其它乳化劑對于技術(shù)人員是容易地顯而易見的，合適乳化劑的選擇將部分取決于配方和終產(chǎn)品。

本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物可以任選地包含一種或多種也可添加以延長產(chǎn)品貨架期的防腐劑。合適的防腐劑包括但不限于，山梨酸鉀、山梨酸鈉、苯甲酸鉀、苯甲酸鈉、edta鈣二鈉，及其混合物。

本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物可以任選地包含一種或多種穩(wěn)定劑。用于實施本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物的合適的穩(wěn)定劑包括但不限于，阿拉伯樹膠、茄替膠、刺梧桐膠、西黃蓍膠、瓊脂、帚叉藻聚糖、瓜爾豆膠、結(jié)冷膠、槐豆膠、果膠、低甲氧基果膠、明膠、微晶纖維素、cmc(羧甲基纖維素鈉)、甲基纖維素羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、datem(甘油單酯和甘油二酯的二乙酰酒石酸酯)、葡聚糖、角叉菜膠，及其混合物。

所公開的營養(yǎng)組合物可以本領(lǐng)域已知的任何形式提供，例如粉劑、凝膠劑、混懸劑、糊劑、固體劑、液體劑、液體濃縮物、可復(fù)溶奶粉代用品或即用制品。在某些實施方案中，營養(yǎng)組合物可包含營養(yǎng)補劑、兒童營養(yǎng)制品、嬰兒配方、人乳強化劑、成長乳或設(shè)計用于嬰兒或小兒受試者的任何其它的營養(yǎng)組合物。本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物包括例如可口服攝入的促進健康的物質(zhì)，包括例如食品、飲料、片劑、膠囊劑和粉劑。而且，可使本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物標(biāo)準(zhǔn)化至特定的含熱量，其可作為即用制品提供，或它可以濃縮形式提供。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物可呈粉末形式，其粒徑范圍為5μm-1500μm，更優(yōu)選范圍為10μm-300μm。

如果營養(yǎng)組合物呈即用制品的形式，營養(yǎng)組合物的重量克分子滲透濃度可介于約約100和約1100mosm/kg水，更通常在約200-約700mosm/kg水之間。

本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物的合適脂肪或脂質(zhì)源可以是本領(lǐng)域任何已知的或使用的，包括但不限于，動物來源，例如，乳脂肪、黃油、黃油脂肪、蛋黃脂質(zhì)；海洋來源，例如魚油、海產(chǎn)油、單細(xì)胞油；蔬菜和植物油，例如玉米油、低芥酸菜子油(canolaoil)、向日葵油、大豆油、棕櫚油精油、椰子油、高油酸向日葵油、月見草油、菜籽油、橄欖油、亞麻仁(亞麻籽)油、棉籽油、高油酸紅花油、棕櫚硬脂精、棕櫚仁油、小麥胚芽油；中鏈甘油三酯油和脂肪酸的乳液和酯；及其任何組合。

本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物可提供礦物質(zhì)，部分或全部的營養(yǎng)支持。組合物可以是營養(yǎng)補充劑或膳食替代品。組合物可以，但不必是營養(yǎng)完全的。在一實施方案中，本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物是營養(yǎng)完全的并含有合適類型和量的脂質(zhì)、碳水化合物、蛋白質(zhì)、維生素和礦物質(zhì)。脂質(zhì)或脂肪的量通?？蓮募s1至約7g/100kcal變化。蛋白質(zhì)的量通常可從約1-約7g/100kcal變化。碳水化合物的量通?？蓮募s6-約22g/100kcal變化。

本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物還可包含至少一種另外的植物營養(yǎng)素，即是說，除了上文描述的果膠和/或淀粉組分外的另一種植物營養(yǎng)素組分。在人乳中鑒定的植物營養(yǎng)素，或其衍生物、共軛形式或前體，優(yōu)選地包含在營養(yǎng)組合物中。典型地，類胡蘿卜素和多酚的膳食來源被養(yǎng)育的母親所吸收并保留在乳汁中，使得它們可為養(yǎng)育嬰兒時利用。加入這些植物營養(yǎng)素至嬰兒或兒童的配方，以使這樣的配方反映人乳的組成和功能并促進總體健康和良好狀態(tài)。

例如，在一些實施方案中，本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物可在每份膳食8液量盎司(236.6ml)中包含介于約80和約300mg之間的花青苷，介于約100和約600mg之間的原花青素，介于約50和約500mg之間的黃烷-3-醇，或其任何組合或混合物。在其它實施方案中，營養(yǎng)組合物包含蘋果提取物、葡萄籽提取物或其組合或混合物。而且，營養(yǎng)組合物的至少一種植物營養(yǎng)素可衍生自任何單一的果實、葡萄籽和/或蘋果或茶提取物或它們的共混物。

為了本公開內(nèi)容的目的，可將天然、純化的、包囊的和/或化學(xué)或酶促-改性形式的額外植物營養(yǎng)素加入到營養(yǎng)組合物中，以遞送所需感官和穩(wěn)定性特性。在包囊的情況下，合乎需要的是，封囊的植物營養(yǎng)素抵抗水的溶解但在抵達小腸時釋放。這可通過應(yīng)用腸溶衣實現(xiàn)，所述腸溶衣有例如交聯(lián)藻酸鹽等。

適合于營養(yǎng)組合物的另外的植物營養(yǎng)素的實例包括，但不限于，花青苷、原花青素、黃烷-3-醇(即兒茶素、表兒茶素等)、黃烷酮、類黃酮、異類黃酮、茋類(stilbenoids)(即白藜蘆醇等)原花青素、花青苷、白藜蘆醇、槲皮素、姜黃素和/或其任何混合物，以及純化的或天然形式的植物營養(yǎng)素的任何可能的組合。某些組分，特別是營養(yǎng)組合物的植物-基組分可提供植物營養(yǎng)素的來源。

某些量的植物營養(yǎng)素可以固有地呈已知成分存在，例如天然油，其通常用來制備用于小兒受試者的營養(yǎng)組合物。這些固有的植物營養(yǎng)素可以是但不必認(rèn)為是本公開內(nèi)容描述的植物營養(yǎng)素組分的一部分。在一些實施方案中，如本文描述的植物營養(yǎng)素濃度和比率基于加入的和固有的植物營養(yǎng)素源計算。在其它實施方案中，如本文描述的植物營養(yǎng)素濃度和比率僅基于加入的植物營養(yǎng)素源計算。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含花青苷，例如，橙皮(aurantinidin)、矢車菊色素、飛燕草色素、歐天芥菜色素(europinidin)、木樨黃定(luteolinidin)、天竺葵色素、錦葵色素、芍藥素(peonidin)、矮牽牛花色素(petunidin)和玫瑰色素(rosinidin)的糖苷。適用于營養(yǎng)組合物的這些和其它花青苷存在于多種植物源中?；ㄇ嘬湛梢匝苌詥我恢参镌椿蛑参镌吹慕M合。適用于本發(fā)明組合物的富含花青苷的植物的非限制性實例包括：漿果(巴西莓(acai)、葡萄、越桔、藍(lán)莓、越橘(lingonberry)、黑加侖子、阿龍尼亞苦味果、黑莓、覆盆子、櫻桃、紅加侖子、蔓越莓、紅莓苔子、野生黃莓、歐洲越橘(whorleberry)、花楸漿果)、紫玉米、紫薯、紫蘿卜、紅甜薯、紅卷心菜、茄子。

在一些實施方案中，本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物包含原花青素，其包括但不限于黃烷-3-醇和具有在2-11范圍內(nèi)的聚合度的黃烷-3-醇的聚合物(例如，兒茶素、表兒茶素)。這樣的化合物可以衍生自單一植物源或植物源的組合。適用于本發(fā)明營養(yǎng)組合物的富含原花青素的植物源的非限制性實例包括：葡萄、葡萄皮、葡萄籽、綠茶、紅茶、蘋果、松樹皮，肉桂，可可，越橘(bilberry)、蔓越莓、黑加侖阿龍尼亞苦味果。

適用于本發(fā)明營養(yǎng)組合物的黃烷-3-醇的非限制性實例包括兒茶酸、表兒茶酸、沒食子兒茶酸、表沒食子兒茶酸、表兒茶素沒食子酸酯、表兒茶素-3-沒食子酸酯、表沒食子兒茶素和沒食子酸酯。富含合適的黃烷-3-醇的植物包括，但不限于，茶、紅葡萄、可可、綠茶、杏和蘋果。

某些多酚化合物，特別是黃烷-3-醇，可通過增加腦血流(這與增加和持續(xù)不變的腦能量/營養(yǎng)物遞送以及新神經(jīng)元的形成有關(guān))，改進人類受試者的學(xué)習(xí)和記憶。多酚也可提供神經(jīng)保護作用且可增加大腦突觸發(fā)生和抗氧化能力，從而支持年幼兒童的最佳腦發(fā)育。

用于營養(yǎng)組合物的優(yōu)選的黃烷-3-醇源包括至少一種蘋果提取物、至少一種葡萄籽提取物或其混合物。對于蘋果提取物，黃烷-3-醇被分解成以4%-20%的范圍存在的單體和以80%-96%的范圍存在的聚合物。對于葡萄籽提取物，黃烷-3-醇被分解成總黃烷-3-醇和總多酚含量的單體(約46%)和聚合物(約54%)。聚合物黃烷-3-醇的優(yōu)選的聚合度在介于約2和11之間的范圍內(nèi)。而且，蘋果和葡萄籽提取物可含有兒茶素、表兒茶素、表沒食子兒茶素、表兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、聚合物原花青素、茋類(即白藜蘆醇)、黃酮醇(即槲皮素,楊梅酮)，或其任何混合物。富含黃烷-3-醇的植物源包括，但不限于蘋果、葡萄籽、葡萄、葡萄皮、茶(綠茶或紅茶)、松樹皮、肉桂、可可、越橘(bilberry)、蔓越莓、黑加侖、阿龍尼亞苦味果。

如果給予小兒受試者營養(yǎng)組合物，可以給予范圍介于每日約0.01mg和約450mg之間的量的黃烷-3-醇(包括單體黃烷-3-醇、聚合黃烷-3-醇或其組合)。在一些情況下，給予嬰兒或兒童的黃烷-3-醇的量可在每日從約0.01mg至約170mg，每日從約50至約450mg，或每日從約100mg至約300mg的范圍內(nèi)。

在本公開內(nèi)容的實施方案中，黃烷-3-醇以范圍從約0.4至約3.8mg/g營養(yǎng)組合物(約9-約90mg/100kcal)的量存在于營養(yǎng)組合物中。在另一個實施方案中，黃烷-3-醇以范圍從約0.8至約2.5mg/g營養(yǎng)組合物(約20-約60mg/100kcal)的量存在。

在一些實施方案中，本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物包含黃烷酮。合適的黃烷酮的非限制性實例包括紫鉚亭、圣草酚、橙皮素(hesperetin)、橙皮苷、高北美圣草素、異櫻花素、柚苷配基、柚皮素(naringin)、喬松素(pinocembrin)、枸橘素(poncirin)、櫻花素(sakuranetin)、櫻花甙(sakuranin)、steurbin。富含黃烷酮的植物源包括，但不限于橙子、橘子、葡萄柚、檸檬、酸橙。營養(yǎng)組合物可經(jīng)配制以遞送介于每日約0.01和約150mg之間的黃烷酮。

此外，營養(yǎng)組合物還可包含黃酮醇?？梢允褂脕碜灾参锘蛟孱愄崛∥锏狞S酮醇。黃酮醇，例如ishrhametin、山柰酚(kaempferol)、楊梅酮、槲皮素，可以足夠遞送給受試者介于每日約0.01和150mg之間的量包含在營養(yǎng)組合物中。

營養(yǎng)組合物的植物營養(yǎng)素組分還可包含已在人乳中鑒定出的植物營養(yǎng)素，包括但不限于柚苷配基、橙皮素、花青苷、槲皮素、山柰酚、表兒茶素、表沒食子兒茶素、表兒茶素-沒食子酸酯、表沒食子兒茶素-沒食子酸酯或其任何組合。在某些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含介于約50和約2000nmol/l之間的表兒茶素，介于約40和約2000nmol/l之間的表兒茶素沒食子酸酯，介于約100和約4000nmol/l之間的表沒食子兒茶素沒食子酸酯，介于約50和約2000nmol/l之間的柚苷配基，介于約5和約500nmol/l之間的山柰酚，介于約40和約4000nmol/l之間的橙皮素，介于約25和約2000nmol/l之間的花青苷，介于約25和約500nmol/l之間的槲皮素，或其混合物。而且，營養(yǎng)組合物可包含植物營養(yǎng)素或其母體化合物的代謝產(chǎn)物，或它可包含其它類型的膳食植物營養(yǎng)素，例如芥子油苷或蘿卜硫素。

在某些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含類胡蘿卜素，例如葉黃素、玉米黃素、蝦青素、番茄紅素、β-胡蘿卜素、α-胡蘿卜素、γ-胡蘿卜素和/或β-玉米黃質(zhì)。富含類胡蘿卜素的植物源包括，但不限于獼猴桃、葡萄、柑桔(citrus)、西紅柿、西瓜、番木瓜和其它紅色水果，或深綠色蔬菜，如羽衣甘藍(lán)，菠菜，蘿卜青菜(turnipgreens)、寬葉羽衣甘藍(lán)、羅馬生菜(romainlettuce)、西蘭花、綠皮密生西葫蘆(zucchini)、豌豆和布魯塞爾豆芽、菠菜、胡蘿卜。

人不能合成類胡蘿卜素，但在人類母乳中已鑒定出超過34種類胡蘿卜素，包括某些類胡蘿卜素的異構(gòu)體和代謝產(chǎn)物。除了它們在母乳中的存在，膳食類胡蘿卜素，例如α和β-胡蘿卜素、番茄紅素、葉黃素、玉米黃素、蝦青素和隱黃質(zhì)還存在于喂乳母親和母乳喂養(yǎng)的嬰兒的血清中。類胡蘿卜素一般被報道改善細(xì)胞與細(xì)胞之間的通信，促進免疫功能，支持健康的呼吸器官衛(wèi)生，保護皮膚免于uv光的損害，并且與某些類型癌癥和所有引起死亡率的風(fēng)險降低相關(guān)。而且，膳食來源的類胡蘿卜素和/或多酚由人受試者吸收，在母乳中積聚和保留，使得它們可為養(yǎng)育嬰兒利用。因此，加入植物營養(yǎng)素至嬰兒配方或兒童的產(chǎn)品中將使配方更接近人乳的組成和功能。

類黃酮，總體上，也可被包括在營養(yǎng)組合物中，因為類黃酮不能由人類合成。然而，來自植物或藻類提取物的類黃酮可以單體、二聚體和/或聚合物的形式使用。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物包含與哺乳期的頭3個月期間人乳類似水平的單體形式的類黃酮。雖然類黃酮糖苷配基(單體)已在人乳樣品中鑒定出，共軛形式的類黃酮和/或它們的代謝產(chǎn)物也可以用于營養(yǎng)組合物中。類黃酮可以下形式加入：游離的、葡糖苷酸、甲基葡糖苷酸、硫酸酯和甲基硫酸酯。

營養(yǎng)組合物還可包含異類黃酮和/或異黃酮。實例包括，但不限于，木黃酮(染料木黃酮)、黃豆苷元(黃豆苷)、黃豆黃素(glycitein)、鷹嘴豆素a(biochanina)、刺芒柄花素(formononetin)、考邁斯托醇(coumestrol)、德鳶尾素(irilone)、二羥四氫黃酮(orobol)、假靛黃素(pseudobaptigenin)、三尖葉豬異黃酮a和b(anagyroidisoflavonea和b)、毛蕊異黃酮(calycosin)、黃豆黃素、鳶尾苷元(irigenin)、5-o-甲基木黃酮、紅車軸草素(pratensein)、櫻黃素(prunetin)、ψ-頂生配質(zhì)(psi-tectorigenin)、凹豬屎豆堿(retusin)、鳶尾黃素(tectorigenin)、鳶尾定(iridin)、芒柄花苷(ononin)、葛根素、鳶尾苷(tectoridin)、大魚藤異黃酮(derrubone)、羽扇豆異黃酮(luteone)、0,5,7,4'三羥基-6-異戊烯基異黃酮(wighteone)、貓尾草異黃酮(alpinumisoflavone)、吡喃異黃酮(barbigerone)、二-o-甲基貓尾草異黃酮和4'-甲基-貓尾草異黃酮。富含異類黃酮的植物源包括，但不限于，大豆、補骨脂、野葛、羽扇豆、蠶豆、鷹嘴豆(chickpea)、紫花苜蓿、豆莢和花生。營養(yǎng)組合物可經(jīng)配制以遞送介于每日約0.01和約150mg之間的異黃酮和/或異類黃酮。

在一個實施方案中，本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物包含有效量的膽堿。膽堿是細(xì)胞正常功能必需的營養(yǎng)物。它是膜磷脂的前體，且它加速乙酰膽堿，一種涉及記憶存儲的神經(jīng)遞質(zhì)的合成和釋放。而且，雖然不希望受到這種或任何其它理論的束縛，相信膳食膽堿和二十二碳六烯酸(dha)協(xié)同作用促進磷脂酰膽堿的生物合成并因此幫助促進人類受試者中的突觸發(fā)生。此外，膽堿和dha可表現(xiàn)出促進樹突棘形成的協(xié)同作用，這在建立的突觸連接的維持中是重要的。在一些實施方案中，本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物包含有效量的膽堿，其是約20mg膽堿每8液量盎司(236.6ml)每份飲食-約100mg每8液量盎司(236.6ml)每份飲食。

此外，在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物是營養(yǎng)完全的，含有為受試者營養(yǎng)物的唯一來源的合適類型和量的脂質(zhì)、碳水化合物、蛋白質(zhì)、維生素和礦物質(zhì)。事實上，營養(yǎng)組合物可任選地包含任何數(shù)目的蛋白質(zhì)、肽、氨基酸、脂肪酸、益生菌和/或它們的代謝副產(chǎn)物、益生元、碳水化合物和任何其它營養(yǎng)物或可提供給受試者許多營養(yǎng)和生理學(xué)益處的其它化合物。此外，本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物可包含香料、增味劑、甜味劑、色素、維生素、礦物質(zhì)、治療成分、功能食物成分、食物成分、加工成分或其組合。

本公開內(nèi)容還提供用于給受試者提供營養(yǎng)支持的方法。該方法包括給予受試者有效量的本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物。

營養(yǎng)組合物可直接排入受試者的腸道。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物被直接排入腸道。在一些實施方案中，組合物可以是配制為在臨床醫(yī)師的監(jiān)督下被消耗或經(jīng)腸內(nèi)給予并可打算用于疾病或病況，例如腹腔疾病和/或食物過敏的特定膳食管理，對于這些疾病或病況的獨特營養(yǎng)需求，基于公認(rèn)的科學(xué)原理，通過醫(yī)學(xué)評價確定。

本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物不限于包含本文特別列出的營養(yǎng)物的組合物。為了滿足營養(yǎng)需要的目的和/或以優(yōu)化受試者的營養(yǎng)狀況，任何營養(yǎng)物可以作為組合物的一部分遞送。

在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物可以遞送給從出生直至符合足月妊娠時間的嬰兒。在一些實施方案中，營養(yǎng)組合物可以遞送給嬰兒直至至少約3個月的矯正年齡。在另一個實施方案中，營養(yǎng)組合物可以遞送給受試者，只要改正營養(yǎng)缺乏是必須的。在又另一個實施方案中，營養(yǎng)組合物可以遞送給嬰兒從出生直至至少約6月的矯正年齡。在又另一個實施方案中，營養(yǎng)組合物可以是遞送給嬰兒從出生直至至少約1歲的矯正年齡。

本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物可被標(biāo)準(zhǔn)化為特定的卡路里含量，它可以作為即用制品提供，或可以作為濃縮的形式提供。

在一些實施方案中，本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物是成長乳。成長乳為預(yù)期用于1歲以上年齡(通常1-3歲年齡、4-6歲年齡或1-6歲年齡)兒童的強化型乳基飲料。它們不是醫(yī)用食品，且無意作為膳食替代品或補充劑以解決特定的營養(yǎng)缺乏。取而代之的是，設(shè)計成長乳以期用作不同膳食的補充，為兒童獲得所有的必需維生素和礦物質(zhì)、大量營養(yǎng)物加其它功能性膳食組分(例如具有聲稱的促進健康性質(zhì)的非必需營養(yǎng)物)的持續(xù)的每日攝取量提供額外的保障。

依據(jù)本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物的確切組成可在市場之間變化，這取決于地方法規(guī)和目標(biāo)人群的膳食攝入量信息。在一些實施方案中，依據(jù)本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物由乳蛋白源組成，例如全脂乳或脫脂乳，加上實現(xiàn)所需感官特性的添加的糖和甜味劑，以及添加的維生素和礦物質(zhì)。脂肪組合物通常源自乳原材料。可設(shè)計總蛋白質(zhì)的指標(biāo)以與人乳、牛乳或下限值(lowervalue)的相符。通常確定總的碳水化合物的指標(biāo)以提供盡可能少的添加糖(例如蔗糖或果糖)以實現(xiàn)可接受的味道。通常，以符合地方性牛乳的營養(yǎng)組成(nutrientcontribution)的水平添加維生素a、鈣和維生素d。此外，在一些實施方案中，可以提供膳食參考攝入量(dri)的約20%或每日值(dv)的約20%/份飲食的水平，添加維生素和礦物質(zhì)。而且，營養(yǎng)值可根據(jù)已鑒定出的預(yù)期人群的營養(yǎng)需求、原料基值和地區(qū)法規(guī)在市場間可變化。

在某些實施方案中，營養(yǎng)組合物是低變應(yīng)原的。在其它實施方案中，營養(yǎng)組合物是猶太教食品。在再進一步的實施方案中，營養(yǎng)組合物是非-遺傳修飾的產(chǎn)品。在一個實施方案中，營養(yǎng)制劑是無蔗糖的。營養(yǎng)組合物也可以是無乳糖的。在其它實施方案中，營養(yǎng)組合物不含有任何中-鏈甘油三酯油。在一些實施方案中，組合物不存在角叉菜膠。在其它實施方案中，營養(yǎng)組合物不含所有樹膠。

在一些實施方案中，本公開內(nèi)容涉及用于小兒受試者，例如嬰兒或兒童的階段性的營養(yǎng)喂養(yǎng)方案，其包括多個不同的依據(jù)本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物。各個營養(yǎng)組合物包含水解蛋白、至少一種預(yù)膠質(zhì)化淀粉和至少一種果膠。在某些實施方案中，喂養(yǎng)方案的營養(yǎng)組合物還可包含長鏈多不飽和脂肪酸源、至少一種益生元、鐵源、β-葡聚糖源、維生素或礦物質(zhì)、葉黃素、玉米黃質(zhì)或上文描述的任何其它成分。本文描述的營養(yǎng)組合物可以每日一次給予或在一整天的過程中通過幾次給予。

提供實施例以舉例說明本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物的一些實施方案，但不應(yīng)被解釋為對其進行任何限制。在考慮了本文公開的營養(yǎng)組合物或方法的說明或?qū)嵺`后，在本文權(quán)利要求書的范圍內(nèi)的其它實施方案對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言將是顯而易見的。打算將說明書，與實施例一起，視為僅僅是示例性的，本公開內(nèi)容的范圍和精神由接著實施例的權(quán)利要求書指定。

實施例1

這個實施例說明一個依據(jù)本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物的實施方案。

實施例2

這個實施例說明另一個依據(jù)本公開內(nèi)容的營養(yǎng)組合物的實施方案。

實施例3

實施例3說明gos和pdx對促進年幼fisher大鼠(juvenilefisherrats)的抗壓能力的影響，并提示腸道細(xì)菌的組成可調(diào)節(jié)5-羥色胺回路。

防御壓力-誘導(dǎo)的焦慮和抑郁-樣行為的重要的神經(jīng)機制是增加中縫背核(dorsalraphenucleus)(特別是吻側(cè)drn)中5-ht1a受體表達和功能。包含gos和pdx的益生元飲食在小鼠中產(chǎn)生抗壓力行為作用。

實施例3測試在幼稚期間開始的飲食gos和pdx是否會產(chǎn)生腦血清素受體的改變。年幼fisher大鼠(juvenilefisherrats)(pnd24，n=9/grp)被喂食包含gos/pdx(各7.0g/k)的飲食持續(xù)4周或者9周。然后使大鼠隨便暴露于無法逃避的尾部電擊壓力(is;1001.5ma尾部電擊；可靠地產(chǎn)生焦慮-樣行為的應(yīng)激源)或者在它們的居住的籠子中保持安靜。

gos/pdx處理增加5-ht1a受體在中縫背核(drn)，一個涉及調(diào)節(jié)焦慮的腦區(qū)中的mrna表達(見圖1)。這些結(jié)果顯示，gos/pdx促進年幼fisher大鼠(juvenilefisherrats)的抗壓能力的影響，并提示腸道細(xì)菌可調(diào)節(jié)5-羥色胺回路(調(diào)節(jié)情緒)。

實施例4

實施例4解決影響多達30%兒童的便秘問題。在這個雙盲、隨機的對照試驗中，對健康的1-4歲齡兒童喂食3份/天的基于牛奶的、用微量營養(yǎng)物、二十二碳六烯酸、酵母β-葡聚糖和益生元聚葡萄糖(pdx)和寡聚半乳糖(gos)強化的較大嬰兒配方(follow-upformula)(ff；n=125)或未強化的基于牛奶的飲料(c；n=131)28周。如果3個以下癥狀的至少2個存在至少連續(xù)2周：存在硬便、排便困難或痛苦，和超過72小時的時間間隔沒有排便，則兒童被考慮為有便秘。滿足這些標(biāo)準(zhǔn)的兒童在研究準(zhǔn)入時按年齡分類(12-24個月或25-48個月)并使用費希爾精確檢驗(fisher’sexacttest)比較。

在25-48個月齡類別的158個兒童中的24個(15%)滿足便秘的標(biāo)準(zhǔn)。在這個年齡類別中，與對照組比較，ff組的較少兒童在研究結(jié)束時仍有便秘(見表1)。雖然差異沒有統(tǒng)計學(xué)上的意義(p=0.27)，但這最可能是由于在各個配方組中滿足便秘標(biāo)準(zhǔn)的參與者的數(shù)量小。這些結(jié)果提示飲食修改例如加入益生元纖維pdx和gos可減輕兒童的功能性便秘。

表1.研究結(jié)束時的便秘狀況

研究結(jié)束時的便秘狀況

實施例5

實施例5聚焦于gos/pdx和/或乳鐵蛋白(lac)對在大鼠中的有益的微生物叢、焦慮-樣行為和壓力-引起的炎癥反應(yīng)的效果。概括地說，包含gos/pdx的飲食或gos/pdx的組合加lac的飲食在得自大鼠的糞便樣本中顯著地增加乳酸桿菌菌種(lactobacillusspp.)和提升雙歧桿菌菌種(bifidobacteriumspp.)。同樣的飲食也防御由壓力暴露產(chǎn)生的焦慮-樣行為。

這個試驗測試了gos和pdx或gos/pdx的組合加lac是否會減輕由應(yīng)激源暴露產(chǎn)生的焦慮和抑郁-樣行為。幼稚fisher大鼠(juvenilefisherrats)(pnd24,n=9/grp)被喂食包含gos/pdx(各7.0g/kg)或gos/pdx加lac(2.6g/kg)的飲食。在喂食飲食4周后收集糞便樣本，并接種到乳酸桿菌菌種和雙歧桿菌菌種特異性培養(yǎng)基中。乳酸桿菌-特異性m-rtlv瓊脂(改變的-鼠李糖-2,3,5-三苯基四唑鎓氯化物-lbs-萬古霉素瓊脂)被用作選擇性培養(yǎng)基，以區(qū)分乳酸桿菌菌種。雙歧桿菌菌種使用包含加強梭狀芽孢桿菌瓊脂(reinforcedclostridialagar)作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基和多粘菌素、卡那霉素和萘啶酸(nalidixicacid)作為選擇性藥物的雙歧桿菌選擇性瓊脂(bifidobacteriumselectiveagar)(bifido,anaerobesystems)檢測。還加入碘醋酸酯和2,3,5--三苯基四唑鎓氯化物的區(qū)分化合物。圖1和2顯示在從喂食gos/pdx或gos/pdx與lac組合的大鼠收集的糞便樣本中乳酸桿菌菌種和鼠李糖乳酸桿菌的菌落形成單位(cfu)的顯著增加(見圖2和3)。

然后使大鼠暴露于無法逃避的尾部電擊壓力(is;1001.5ma尾部電擊；可靠地產(chǎn)生焦慮-樣行為的應(yīng)激源)或者在它們的居住的籠子中保持安靜(hcc)。隨后，在24h后，使用電擊誘發(fā)的冷凍和穿梭箱逃避試驗，測試大鼠的焦慮/抑郁-樣行為。在is結(jié)束后立即從小鼠亞組收集血漿樣本。炎性分子hsp72通常經(jīng)應(yīng)激源暴露增加。如在圖4中所示，喂食gos/pdx的大鼠顯示出減少壓力-誘導(dǎo)的hsp72反應(yīng)的趨勢。

焦慮/抑郁-樣行為分析：簡言之，在8分鐘探索期后，對大鼠給予兩次足部電擊(0.7ma)。冷凍，一種恐懼的行為測量，通過10秒采樣步驟經(jīng)20分鐘評分。先前的暴露于壓力僅在對照飲食大鼠中產(chǎn)生夸張的恐懼(焦慮)(圖3)。用gos/pdx和/或lac處理的大鼠受到保護免于由100is產(chǎn)生的夸張的恐懼(p=0.04)。在對冷凍評分20分鐘后，接受25次足電擊的大鼠，有可能穿越兩次通過穿梭箱的門逃生(fr-2偶然性)。先前的暴露于壓力僅在對照飲食大鼠中產(chǎn)生fr-2逃避潛伏期的缺陷。用gos/pdx和/或lac處理的大鼠受到保護免于由100is產(chǎn)生的穿梭箱逃避缺陷(見圖5；p=0.04；也見圖6)。

總之，喂食gos/pdx或gos/pdx加乳鐵蛋白增加腸道內(nèi)的乳酸桿菌菌種并防止由壓力暴露產(chǎn)生的焦慮-樣行為的行為后果。

本說明書引用的所有參考文獻，包括而不限于所有的論文、出版物、專利、專利申請、簡報、教科書、報告、手稿、小冊子、書籍、互聯(lián)網(wǎng)帖子、雜志文章、期刊等，藉此通過引用以其整體結(jié)合到本說明書中。本文的參考文獻的討論僅僅意在概括其作者所做出的斷言，并非承認(rèn)任何參考文獻構(gòu)成先有技術(shù)。申請人保留對所引用的參考文獻的準(zhǔn)確性和相關(guān)性提出異議的權(quán)利。

雖然使用特定術(shù)語、裝置和方法描述本公開內(nèi)容的實施方案，但是這類描述只用于說明目的。所用詞匯是描述詞匯而不是限制詞匯。要了解，在不偏離隨附權(quán)利要求書中闡述的本公開內(nèi)容的精神和范圍的情況下，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可進行變動和改變。另外，應(yīng)了解，不同實施方案的方面可全部或部分互換。例如，在舉例說明依據(jù)那些方法制備的市售滅菌液體營養(yǎng)補劑的生產(chǎn)方法的同時，考慮其它的應(yīng)用。因此，隨附權(quán)利要求書的精神和范圍不應(yīng)限于其中所含版本的描述。