本發(fā)明涉及微膠囊
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種活性肽微粒制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：許多提取自動植物的活性肽，如牡蠣多肽、鰹魚多肽、海參多肽等具有較強的生物活性，是理想的保健食品功能因子。但是，這些活性肽卻帶有消費者難以忍受的強烈異味，嚴(yán)重影響了顧客體驗感和長期服用的意愿。因此，亟需通過掩味技術(shù)改善這些活性肽的口感。添加輔料是通過干擾味蕾來減輕苦味，方法最簡單，成本低，但作用有限，對極苦和易水解的藥物效果不佳。而且，個體間由于味覺偏好的差異，對于矯味劑、芳香劑等輔料的掩味效果感受差異較大。包合技術(shù)目前的應(yīng)用很廣泛，藥物嵌入β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精分子內(nèi)部，通過范德華力起作用，降低藥物與味蕾接觸的量而達(dá)掩味目的，進(jìn)入體內(nèi)后藥物再從包合物中釋放出來發(fā)揮療效。該法制備方法簡單，可產(chǎn)業(yè)化，但應(yīng)用受限，如對藥物的性質(zhì)要求嚴(yán)格，藥物分子的原子數(shù)要大于5，如果有稠環(huán)，稠環(huán)數(shù)應(yīng)小于5，相對分子質(zhì)量在100～400之間，水中溶解度要小于10g/L，熔點低于250℃等。更為重要的一點是，包合技術(shù)是藥物與環(huán)糊精分子以1:1進(jìn)行包載，因此載藥量低，不適用于活性肽等單次服用劑量較大的保健食品的掩味。離子交換樹脂為含有可電離陽離子或陰離子基團(tuán)的高分子聚合物，分為強酸性陽離子(Ⅰ)、弱酸性陽離子(II)、強堿性陰離子(Ⅲ)、弱堿性陰離子交換樹脂(Ⅳ)四大類。Ⅰ能掩蓋堿性藥物的苦味(整個pH值范圍)，II僅適用于pH值在6.0以上環(huán)境，Ⅲ和Ⅳ則反之。藥物與帶相反電荷的樹脂形成復(fù)合物，在唾液pH值條件不易解離，且由于唾液量較少、離子濃度很低、制劑在口腔中僅作短暫停留，能夠大大減弱藥物不良臭味。但是，活性肽是混合物，組成復(fù)雜，同時存在帶正電、帶負(fù)電和不帶電的組分，因此難以通過離子樹脂結(jié)合的方法實現(xiàn)掩味。針對活性肽等保健食品單次服用量大的特點，微膠囊技術(shù)是改善活性肽口感的理想策略。微膠囊技術(shù)是將液體芯材通過壁材包裹起來形成微小顆粒的粉末化技術(shù)。將活性肽包載入微囊能夠減少或者避免口服后活性肽中異味物質(zhì)與味蕾的接觸，從而達(dá)到改善活性肽口感的效果。為了使活性肽的劑型更符合消費者的使用習(xí)慣，需要將活性肽制成沖劑，用熱水或溫水沖泡后服用。因此，所制備的載活性肽微粒制劑需要在較高溫度的水中能分散均勻，并且具備較佳的掩蓋氣味的效果。但是，現(xiàn)有較大多數(shù)的微膠囊技術(shù)工藝均無法同時解決上述問題。技術(shù)實現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明的目的在于一種活性肽微粒制劑及其制備方法，使得所述制備方法制備的活性肽微粒制劑能夠在較高溫度的水中分散均勻，并且具備較佳的掩蓋氣味的效果。為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種活性肽微粒制劑的制備方法，包括：向海藻酸鈉溶液中加入活性肽，得到活性肽與海藻酸鈉的混合溶液，然后通過微膠囊造粒儀滴加到殼聚糖和交聯(lián)劑的混合溶液或交聯(lián)劑溶液中，獲得活性肽微粒，凍干后獲得所述活性肽微粒制劑；其中，所述交聯(lián)劑為氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂組合?，F(xiàn)有以海藻酸鈉、殼聚糖以及氯化鈣為主要材料的微膠囊技術(shù)無法使活性肽沖劑在較高溫度下呈現(xiàn)較好分散性和較好氣味掩蓋效果的缺陷，本發(fā)明以三種適宜的交聯(lián)劑和優(yōu)化的配比，解決了上述問題。作為優(yōu)選，所述海藻酸鈉與活性肽的質(zhì)量比為(1:5)-(5:1)，在本發(fā)明具體實施方式中，海藻酸鈉與活性肽的質(zhì)量比為1:2、1:5或5:1；作為優(yōu)選，所述海藻酸鈉溶液為海藻酸鈉水溶液、海藻酸鈉的磷酸鹽緩沖液或海藻酸鈉的醋酸鹽緩沖液，海藻酸鈉質(zhì)量濃度為0.3-30％，優(yōu)選自粘度范圍為100～1000cp.s的海藻酸鈉，如300cp.s；在本發(fā)明具體實施方式中，所述海藻酸鈉質(zhì)量濃度為0.3％、1.5％、15％或30％，所述磷酸鹽緩沖液和醋酸鹽緩沖液pH值均為2-9。作為優(yōu)選，所述殼聚糖和交聯(lián)劑的混合溶液為殼聚糖和交聯(lián)劑的醋酸水溶液、殼聚糖和交聯(lián)劑的枸櫞酸水溶液、殼聚糖和交聯(lián)劑的水溶液、殼聚糖和交聯(lián)劑的磷酸鹽緩沖液或殼聚糖和交聯(lián)劑的醋酸鹽緩沖液，殼聚糖質(zhì)量濃度不超過30％，交聯(lián)劑質(zhì)量濃度為0.3-30％；更優(yōu)選地，所述醋酸水溶液或枸櫞酸水溶液各自的質(zhì)量濃度均為0.1-10％；在本發(fā)明的具體實施方式中，所述交聯(lián)劑的質(zhì)量濃度為1.5％；所述殼聚糖質(zhì)量濃度為1％，優(yōu)選自分子量10kD～1000kD的殼聚糖，如150kDa；所述磷酸鹽緩沖液和醋酸鹽緩沖液pH值均為2-9；所述醋酸水溶液或枸櫞酸水溶液各自的質(zhì)量濃度可選自1％。作為優(yōu)選，所述交聯(lián)劑溶液為交聯(lián)劑的醋酸水溶液、交聯(lián)劑的枸櫞酸水溶液、交聯(lián)劑的水溶液、交聯(lián)劑的磷酸鹽緩沖液或交聯(lián)劑的醋酸鹽緩沖液，交聯(lián)劑質(zhì)量濃度為0.3-30％；在本發(fā)明的具體實施方式中，所述交聯(lián)劑的質(zhì)量濃度為1.5％；所述磷酸鹽緩沖液和醋酸鹽緩沖液pH值均為2-9；所述醋酸水溶液或枸櫞酸水溶液各自的質(zhì)量濃度可選自1％。作為優(yōu)選，所述活性肽與海藻酸鈉的混合溶液與殼聚糖和交聯(lián)劑的混合溶液或交聯(lián)劑溶液的體積比為(1:10)-(5:1)，更優(yōu)選為(1:3)-(2:3)，在本發(fā)明的具體實施方式中為1:2、1:3或2:3。作為優(yōu)選，所述活性肽為牡蠣多肽、鰹魚多肽、膠原蛋白肽或海參多肽。作為優(yōu)選，所述氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂在交聯(lián)劑中的質(zhì)量比是(1.0-1.2)：(0.1-0.2)：(0.1-0.3)。作為優(yōu)選，所述氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂的質(zhì)量比為1.2:0.1:0.2。在采用微膠囊造粒儀造粒時，其各項設(shè)置參數(shù)可參考如下：頻率設(shè)置為100～1000Hz，電壓100～5000V，載氣壓力100～1000mbar，噴嘴孔徑300μm。在具體實施方式中，可具體選擇頻率設(shè)置為800Hz，電壓1000V，載氣壓力450mbar，噴嘴孔徑300μm。采用本發(fā)明所述制備方法制備的活性肽微粒制劑(沖劑)，在用開水或較高溫度的水沖泡后，呈現(xiàn)出較佳的分散性，并且對活性肽的異味掩蓋較好，而采用其他形式交聯(lián)劑的對照工藝在兩方面呈現(xiàn)出較差的效果。由此，本發(fā)明還提供了由本發(fā)明所述制備方法制備的活性肽微粒制劑。由以上技術(shù)方案可知，本發(fā)明通過適宜的交聯(lián)劑及其配比，使活性肽微膠囊沖劑在以較高溫度水沖泡時具有較佳的分散性，同時對活性肽的氣味掩蓋較好，有效解決了活性肽異味對消費者長期服用的影響和口感的問題。具體實施方式本發(fā)明公開了一種活性肽微粒制劑及其制備方法，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明所述活性肽微粒制劑及其制備方法和應(yīng)用已經(jīng)通過實施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本
發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對本文所述的產(chǎn)品和制備方法進(jìn)行改動或適當(dāng)變更與組合，來實現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。以下就本發(fā)明所提供的一種活性肽微粒制劑及其制備方法做進(jìn)一步說明。實施例1：制備本發(fā)明所述活性肽微粒制劑將海藻酸鈉(粘度300cp.s)加入純水中，攪拌溶解，得到海藻酸鈉的水溶液；其中所述海藻酸鈉水溶液質(zhì)量濃度為1.5％；在海藻酸銨水溶液中加入鰹魚肽粉末，攪拌，得到鰹魚肽與海藻酸鈉的混合溶液；其中，所述鰹魚肽與海藻酸鈉的混合溶液中海藻酸鈉與鰹魚肽的質(zhì)量比為1:2；在水中加入氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂作為交聯(lián)劑，攪拌，獲得交聯(lián)劑溶液；其中，所述氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂的質(zhì)量比為1.2：0.1：0.2；調(diào)節(jié)上述交聯(lián)劑溶液的pH至4.5；將鰹魚肽與海藻酸鈉的混合溶液100mL通過微膠囊造粒儀滴加至300mL交聯(lián)劑溶液中(兩者體積比為1:3)，交聯(lián)10min，制得鰹魚肽微粒；其中，設(shè)置微膠囊造粒儀的震動頻率為800Hz，電壓為1000V，載氣壓力為450mbar，噴嘴孔徑為300μm；將上述鰹魚肽微粒冷凍干燥得到活性肽微粒粉末。本實施例所得到的鰹魚肽微粒的形狀圓整，大小均一。使用四種不同來源的海藻酸鈉(國藥、青島雙成、青島明月和布奇公司)制備所得載鰹魚肽微粒的載藥量在8～19％之間，其中使用青島雙成來源的海藻酸鈉制備所得微粒的載藥量最高，為18.9％。實施例2：制備本發(fā)明所述活性肽微粒制劑將海藻酸鈉(粘度300cp.s)加入純水中，攪拌溶解，得到海藻酸鈉的水溶液；其中所述海藻酸鈉水溶液質(zhì)量濃度為1.5％；在海藻酸銨水溶液中加入鰹魚肽粉末，攪拌，得到鰹魚肽與海藻酸鈉的混合溶液；其中，所述鰹魚肽與海藻酸鈉的混合溶液中海藻酸鈉與鰹魚肽的質(zhì)量比為1:1；在水中加入氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂作為交聯(lián)劑，攪拌，獲得交聯(lián)劑溶液；其中，所述氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂的質(zhì)量比為1.0：0.2：0.3；調(diào)節(jié)上述交聯(lián)劑溶液的pH至4.5；將鰹魚肽與海藻酸鈉的混合溶液100mL通過微膠囊造粒儀滴加至300mL交聯(lián)劑溶液中(兩者體積比為1:3)，交聯(lián)10min，制得鰹魚肽微粒；其中，設(shè)置微膠囊造粒儀的震動頻率為800Hz，電壓為1000V，載氣壓力為450mbar，噴嘴孔徑為300μm；將上述鰹魚肽微粒冷凍干燥得到活性肽微粒粉末。本實施例所得到的鰹魚肽微粒的形狀圓整，大小均一，載藥量在20％左右。實施例3：制備本發(fā)明所述活性肽微粒制劑將海藻酸鈉(粘度300cp.s)加入純水中，攪拌溶解，得到海藻酸鈉的水溶液；其中所述海藻酸鈉水溶液質(zhì)量濃度為1.5％；在海藻酸銨水溶液中加入鰹魚肽粉末，攪拌，得到鰹魚肽與海藻酸鈉的混合溶液；其中，所述鰹魚肽與海藻酸鈉的混合溶液中海藻酸鈉與鰹魚肽的質(zhì)量比為1:2；將殼聚糖(分子量150kDa)加入1％質(zhì)量濃度的醋酸水溶液中，攪拌溶解，得到殼聚糖的醋酸水溶液；其中殼聚糖質(zhì)量濃度為1％；在上述殼聚糖的醋酸水溶液中加入氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂，攪拌，得到交聯(lián)劑與殼聚糖的混合溶液；其中，所述氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂的質(zhì)量比為1.3：0.1：0.1；調(diào)節(jié)上述殼聚糖與交聯(lián)劑的混合溶液的pH至4.5；將鰹魚肽與海藻酸鈉的混合溶液200mL通過微膠囊造粒儀滴加至400mL交聯(lián)劑與殼聚糖的混合溶液中(兩者體積比為1:2)，交聯(lián)10min，制得鰹魚肽微粒；其中，設(shè)置微膠囊造粒儀的震動頻率為800Hz，電壓為1000V，載氣壓力為450mbar，噴嘴孔徑為300μm；將上述鰹魚肽微粒冷凍干燥得到活性肽微粒粉末。本實施例所得到的鰹魚肽微粒的形狀圓整，大小均一，載藥量在20％左右。實施例4：制備本發(fā)明所述活性肽微粒制劑將海藻酸鈉(粘度300cp.s)加入pH＝2.0磷酸鹽緩沖液中，攪拌溶解，得到海藻酸鈉的磷酸鹽緩沖溶液；其中所述海藻酸鈉磷酸鹽緩沖溶液質(zhì)量濃度為0.3％；在海藻酸鈉磷酸鹽緩沖溶液中加入鰹魚肽粉末，攪拌，得到鰹魚肽與海藻酸鈉的混合溶液；其中，所述鰹魚肽與海藻酸鈉的混合溶液中海藻酸鈉與鰹魚肽的質(zhì)量比為1:5；將殼聚糖(分子量150kDa)加入1％質(zhì)量濃度的醋酸水溶液中，攪拌溶解，得到殼聚糖的醋酸水溶液；其中殼聚糖質(zhì)量濃度為1％；在上述殼聚糖的醋酸水溶液中加入氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂，攪拌，得到交聯(lián)劑與殼聚糖的混合溶液；其中，所述氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂的質(zhì)量比為1.1：0.2：0.2；調(diào)節(jié)上述殼聚糖與交聯(lián)劑的混合溶液的pH至4.5；將鰹魚肽與海藻酸鈉的混合溶液200mL通過微膠囊造粒儀滴加至300mL交聯(lián)劑與殼聚糖的混合溶液中(兩者體積比為2:3)，交聯(lián)10min，制得鰹魚肽微粒；其中，設(shè)置微膠囊造粒儀的震動頻率為800Hz，電壓為1000V，載氣壓力為450mbar，噴嘴孔徑為300μm；將上述鰹魚肽微粒冷凍干燥得到活性肽微粒粉末。本實施例所得到的鰹魚肽微粒的形狀圓整，大小均一，載藥量在20％左右。實施例5：制備本發(fā)明所述活性肽微粒制劑將海藻酸鈉(粘度300cp.s)加入pH＝9.0磷酸鹽緩沖液中，攪拌溶解，得到海藻酸鈉的磷酸鹽緩沖溶液；其中所述海藻酸鈉磷酸鹽緩沖溶液質(zhì)量濃度為30％；在海藻酸鈉磷酸鹽緩沖溶液中加入牡蠣多肽粉末，攪拌，得到牡蠣多肽與海藻酸鈉的混合溶液；其中，所述牡蠣多肽與海藻酸鈉的混合溶液中海藻酸鈉與牡蠣多肽的質(zhì)量比為5:1；將殼聚糖(分子量150kDa)加入1％質(zhì)量濃度的醋酸水溶液中，攪拌溶解，得到殼聚糖的醋酸水溶液；其中殼聚糖質(zhì)量濃度為1％；在上述殼聚糖的醋酸水溶液中加入氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂，攪拌，得到交聯(lián)劑與殼聚糖的混合溶液；其中，所述氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂的質(zhì)量比為1.2：0.2：0.1；調(diào)節(jié)上述殼聚糖與交聯(lián)劑的混合溶液的pH至4.5；將牡蠣多肽與海藻酸鈉的混合溶液200mL通過微膠囊造粒儀滴加至300mL交聯(lián)劑與殼聚糖的混合溶液中(兩者體積比為2:3)，交聯(lián)10min，制得牡蠣多肽微粒；其中，設(shè)置微膠囊造粒儀的震動頻率為800Hz，電壓為1000V，載氣壓力為450mbar，噴嘴孔徑為300μm；將上述牡蠣多肽微粒冷凍干燥得到活性肽微粒粉末。本實施例所得到的牡蠣多肽微粒的形狀圓整，大小均一，載藥量在20％左右。實施例6：制備本發(fā)明所述活性肽微粒制劑將海藻酸鈉(粘度300cp.s)加入pH＝9.0醋酸鹽緩沖液中，攪拌溶解，得到海藻酸鈉的醋酸鹽緩沖溶液；其中所述海藻酸鈉醋酸鹽緩沖溶液質(zhì)量濃度為30％；在海藻酸鈉醋酸鹽緩沖溶液中加入海參多肽粉末，攪拌，得到海參多肽與海藻酸鈉的混合溶液；其中，所述海參多肽與海藻酸鈉的混合溶液中海藻酸鈉與海參多肽的質(zhì)量比為5:1；將殼聚糖(分子量150kDa)加入1％質(zhì)量濃度的醋酸水溶液中，攪拌溶解，得到殼聚糖的醋酸水溶液；其中殼聚糖質(zhì)量濃度為1％；在上述殼聚糖的醋酸水溶液中加入氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂，攪拌，得到交聯(lián)劑與殼聚糖的混合溶液；其中，所述氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂的質(zhì)量比為1.2：0.1：0.2；調(diào)節(jié)上述殼聚糖與交聯(lián)劑的混合溶液的pH至4.5；將海參多肽與海藻酸鈉的混合溶液200mL通過微膠囊造粒儀滴加至300mL交聯(lián)劑與殼聚糖的混合溶液中(兩者體積比為2:3)，交聯(lián)10min，制得海參多肽微粒；其中，設(shè)置微膠囊造粒儀的震動頻率為800Hz，電壓為1000V，載氣壓力為450mbar，噴嘴孔徑為300μm；將上述海參多肽微粒冷凍干燥得到活性肽微粒粉末。本實施例所得到的海參多肽微粒的形狀圓整，大小均一，載藥量在20％左右。實施例7：制備本發(fā)明所述活性肽微粒制劑將海藻酸鈉(粘度300cp.s)加入pH＝2.0醋酸鹽緩沖液中，攪拌溶解，得到海藻酸鈉的醋酸鹽緩沖溶液；其中所述海藻酸鈉醋酸鹽緩沖溶液質(zhì)量濃度為15％；在海藻酸鈉醋酸鹽緩沖溶液中加入膠原蛋白肽粉末，攪拌，得到膠原蛋白肽與海藻酸鈉的混合溶液；其中，所述膠原蛋白肽與海藻酸鈉的混合溶液中海藻酸鈉與膠原蛋白肽的質(zhì)量比為5:1；將殼聚糖(分子量150kDa)加入1％質(zhì)量濃度的醋酸水溶液中，攪拌溶解，得到殼聚糖的醋酸水溶液；其中殼聚糖質(zhì)量濃度為1％；在上述殼聚糖的醋酸水溶液中加入氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂，攪拌，得到交聯(lián)劑與殼聚糖的混合溶液；其中，所述氯化鈣、氯化鋇和氯化鎂的質(zhì)量比為1.2：0.1：0.2；調(diào)節(jié)上述殼聚糖與交聯(lián)劑的混合溶液的pH至4.5；將膠原蛋白肽與海藻酸鈉的混合溶液200mL通過微膠囊造粒儀滴加至300mL交聯(lián)劑與殼聚糖的混合溶液中(兩者體積比為2:3)，交聯(lián)10min，制得膠原蛋白肽微粒；其中，設(shè)置微膠囊造粒儀的震動頻率為800Hz，電壓為1000V，載氣壓力為450mbar，噴嘴孔徑為300μm；將上述膠原蛋白肽微粒冷凍干燥得到活性肽微粒粉末。本實施例所得到的膠原蛋白肽微粒的形狀圓整，大小均一，載藥量在20％左右。實施例8：分散性和掩味對比試驗1、分組試驗組1-7：在實施例1-7對應(yīng)制備方案基礎(chǔ)上，統(tǒng)一采用鰹魚肽，制備成7組試驗活性肽微粒；對照組1-7：在實施例1-7對應(yīng)制備方案基礎(chǔ)上，統(tǒng)一采用鰹魚肽，同時按照表1中的交聯(lián)劑及其配比替換，制備成7組對照活性肽微粒；表1對照組11.5％氯化鈣對照組51.5％氯化鋇對照組21.2％氯化鈣+0.3％氯化鋇對照組61.5％氯化鎂對照組30.5％氯化鋇+1％氯化鎂對照組70.5％氯化鈣+0.6％氯化鋇+0.4％氯化鎂對照組41.2％氯化鈣+0.3％氯化鎂2、分散性和掩味試驗方法選擇能夠明確分辨異味的20名健康志愿者，用水漱口后，取上述各組微粒粉末25g，加入溫水(70℃)200ml沖泡成混懸液，將微?；鞈乙哼m量含在口中并保持30s，然后吐出并漱口，立即記錄口感。0分為無異味；1分為有輕微異味，口感可接受；2分為有明顯異味，口感較差；3分為較大異味，口感很差；4分為有強烈異味，無法忍受。同時對各組混懸液進(jìn)行分散性測定。分散性測定實驗：稱取樣品5g，溶于70℃,50mL去離子水中，在恒溫磁力攪拌器上以一定的轉(zhuǎn)速攪拌，記錄從攪拌開始到微粒粉全部分散所需時間；重復(fù)試驗3次，取其平均值，此值作為分散時間(s)。DT＝(t1+t2+t3)/3式中，ST-分散時間，s；t1-第一次分散時間，s；t2-第二次分散時間，s；t3-第三次分散時間，s。分散時間越短表明微粒粉在溫水中不易結(jié)團(tuán)，能夠快速的在水中均勻擴(kuò)散。結(jié)果見表2。表2由表2結(jié)果可以明顯看出，以特定交聯(lián)劑和配比制備出的本發(fā)明微粒制劑，在掩味效果和溫開水分散性方面明顯優(yōu)于其他交聯(lián)劑形式和配比。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3