發(fā)明簡述本發(fā)明涉及用于牛飼料的25-羥基維生素d(“25-ohd3”和/或“25-ohd2”)和抗氧化劑/抗炎劑(抗壞血酸，維生素e和類胡蘿卜素)的組合。該營養(yǎng)補(bǔ)充劑的組合能夠有助于卵巢健康和健康循環(huán)17-β雌二醇水平，從而延長奶牛的生產(chǎn)壽命。
背景技術(shù)：
：卵巢疾病的一種動物模型是家禽。家養(yǎng)產(chǎn)蛋母雞會出現(xiàn)具有高發(fā)病率的卵巢癌。參見johnson等人，2013nature13:432-436，和walzem等人，2014advancesinnutrition5:199-206。母雞卵巢癌的進(jìn)展以及轉(zhuǎn)移性生長的位置和腹水與在女性體內(nèi)觀察到的相似。一些家禽品種經(jīng)歷與攝食過量相關(guān)的肥胖癥。一般地，養(yǎng)殖場主將限制提供給群體的食物量，以防止肥胖的不良后果。然而，通常難以確定將確保群體的期望的生長的適當(dāng)飼料量，并且在限制性飼喂條件下，個體可能變得具攻擊性，不僅會傷害其他禽只，還會本身變得肥胖。在繁殖發(fā)育過程中過度飼喂的肉種雌雞不僅產(chǎn)生過多的大黃卵泡，而且還產(chǎn)生更大量的閉鎖黃卵泡，并且通常顯示不規(guī)律的產(chǎn)卵和缺陷卵綜合征(eodes)，eodes包括若干種生殖問題，諸如卵泡閉鎖、軟殼或膜狀蛋的產(chǎn)生、雙黃卵、卵黃性腹膜炎(腹腔中存在蛋黃)、多個產(chǎn)卵日(multipleeggdays)和產(chǎn)卵不按順序發(fā)生，從而導(dǎo)致增加的不可預(yù)料的雞蛋產(chǎn)生。對照研究報告，隨意采食(即，肉種母雞被飼喂至飽食)導(dǎo)致不良的產(chǎn)蛋量、高死亡率和異常的卵巢結(jié)構(gòu)(主要是卵巢等級卵泡閉鎖)。與限制性飼喂的母雞相比，隨意采食還會引起代謝失調(diào)，代謝失調(diào)包括增強(qiáng)的肥胖；肝三酰基甘油積聚；血漿葡萄糖、非酯化脂肪酸、極低密度脂蛋白、三?；视?、磷脂、神經(jīng)酰胺和鞘磷脂的濃度升高。此外，肝臟和循環(huán)神經(jīng)酰胺及鞘磷脂積累，以及肝臟和脂肪組織中促炎il-1β表達(dá)的上調(diào)系統(tǒng)性地顯示了飽飼(feed-satiated)母雞體內(nèi)的脂毒性發(fā)展。神經(jīng)酰胺是將某些營養(yǎng)物(即飽和脂肪)和炎性細(xì)胞因子(例如腫瘤壞死因子-α，tnfα)與細(xì)胞功能以及拮抗胰島素信號傳導(dǎo)和線粒體功能的調(diào)控關(guān)聯(lián)的關(guān)鍵中間物質(zhì)。此外，由于神經(jīng)酰胺對特別敏感細(xì)胞類型的毒性效應(yīng)，神經(jīng)酰胺具有破壞心臟、胰腺和脈管系統(tǒng)的能力。導(dǎo)致飽飼母雞的受損卵巢機(jī)能障礙(包括卵泡閉鎖、卵巢退化，以及循環(huán)雌二醇水平的下降)的脂毒性，更進(jìn)一步被等級卵泡內(nèi)的神經(jīng)酰胺積累以及il-1β、絲氨酸棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶和鞘磷脂酶的轉(zhuǎn)錄本豐度的上調(diào)，但是抑制蛋白激酶akt激活而示例。因此，體內(nèi)證據(jù)已經(jīng)描繪了神經(jīng)酰胺和il-1β在肉種母雞體內(nèi)介導(dǎo)過度飼喂誘發(fā)的卵泡閉鎖和卵巢退化進(jìn)展中的作用。盡管在商用肉種雞群中嚴(yán)格實(shí)施了限制性飼喂方案，但是由于商用肉種雞群固有的食欲過盛，仍然很容易過度飼喂母雞。此外，種雞場經(jīng)營者面臨何時以及如何在產(chǎn)蛋開始之前和產(chǎn)蛋產(chǎn)蛋開始期間以及在接近產(chǎn)蛋高峰時、產(chǎn)蛋高峰期間和產(chǎn)蛋高峰之后飼喂的問題。要提出的基本根本問題是，種雞場經(jīng)營者可以應(yīng)用和實(shí)施哪些管理和營養(yǎng)工具以及如何應(yīng)用和實(shí)施管理和營養(yǎng)工具，來改善與超重母雞肥胖相關(guān)的對繁殖率的不利和有害影響。(25-oh-d3的注冊商標(biāo)；可從dsmnutritionalproducts,瑞士商購獲得)已被用于促進(jìn)家禽、豬的骨骼健康，以及用于人的維生素d缺乏。wo2008/031602(dsmipassets,bv)描述了其用于奶牛乳熱癥的用途。25-ohd3和角黃素的組合也已經(jīng)用于家禽。wo2010/057811(dsmipassets，bv)描述了用于改善家禽的孵化率、生育力并降低胚胎死亡率的此組合。該組合可以商標(biāo)maxichick商購獲得。在該專利公布中既沒有提到抗壞血酸和高維生素e水平的內(nèi)含物，也沒有提到用于改善對攝食過量相關(guān)的肥胖的不利影響的用途。在家禽飲食中維生素c(抗壞血酸)通常不會作為補(bǔ)充劑被包括，這是因?yàn)殡u可以在正常飼養(yǎng)條件下產(chǎn)生足量的維生素c。然而，維生素c已經(jīng)在某些特定條件下使用，諸如在熱應(yīng)激情況下。維生素e一般添加到家禽飼料中。根據(jù)動物的年齡，家禽物種的推薦劑量趨于在約50至100iu/kg飼料的范圍。wo14/191153(dsmipassetsbv)教導(dǎo)了角黃素，維生素c、維生素e中的至少一種，硒，以及任選地百里酚、丁子香酚、香草醛和γ-萜品烯中的至少一種的組合可以改善免疫現(xiàn)狀、骨骼健康、骨骼發(fā)育和生長以及飼料轉(zhuǎn)化，特別是當(dāng)雞群經(jīng)受與疫苗接種相關(guān)的壓力時。wo14/202433(dsmipassetsb.v)教導(dǎo)了角黃素和25-ohd3的組合，該組合用于改善內(nèi)部蛋質(zhì)量，即增強(qiáng)包裹卵黃的卵黃膜的強(qiáng)度。既沒有教導(dǎo)添加抗壞血酸至該組合中，也沒有教導(dǎo)該組合在改善攝食過量相關(guān)的肥胖的不利影響方面的用途。需要預(yù)防或延遲牛卵巢疾病的發(fā)病，并延長牛的生殖年限。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，根據(jù)本發(fā)明，25-羥基維生素d(25-ohd3和/或25-ohd2)與抗氧化劑/抗炎劑的組合可以有益于卵巢健康，特別是家禽多囊卵巢綜合征。牛，特別是奶牛也患有類似的疾病，即卵巢囊腫疾病(cod)，因此本發(fā)明的一個方面是25-ohd和抗氧化劑/抗炎劑用于預(yù)防、治療和/或改善牛cod的用途。此外已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，25-ohd與抗氧化劑/抗炎劑的組合能夠保持17-β雌二醇的水平，并且這保持產(chǎn)蛋母雞的生殖壽命。由于17-β雌二醇也是牛生育能力的重要循環(huán)激素，所以本發(fā)明的另一方面是25-ohd和抗氧化劑/抗炎劑的組合用于保持牛，特別是奶牛和育種用牛體內(nèi)的17-β雌二醇的水平的用途。還已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，根據(jù)本發(fā)明，傳統(tǒng)上被認(rèn)為是抗氧化劑的生物活性物質(zhì)還具有有益于卵巢健康的抗炎活性。由于25-ohd2和25-ohd3可以在施用后以類似方式作用，所以設(shè)想，它們中的任一個可以分別與抗氧化劑/抗炎劑組合使用，或者可以將25-ohd3和25-ohd2兩者的混合物與抗氧化劑/抗炎劑組合使用。如果共同使用，25-ohd3:25-ohd2的比率不是本發(fā)明的關(guān)鍵部分。單獨(dú)使用25-ohd3是優(yōu)選的。本發(fā)明的抗氧化劑/抗炎劑包括抗壞血酸、維生素e和類胡蘿卜素的組合。類胡蘿卜素是選自由以下各項(xiàng)組成的組的至少一種：番茄紅素、蝦青素、隱黃質(zhì)、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)和角黃素。最優(yōu)選的是番茄紅素、蝦青素、葉黃素和玉米黃質(zhì)。因此，本發(fā)明的一個方面是25-ohd3、一種或更多種上述類胡蘿卜素、維生素e和抗壞血酸的組合。另一個實(shí)施方案是25-ohd2、一種或更多種上述類胡蘿卜素、維生素e和抗壞血酸的組合。另一個實(shí)施方案是25-ohd3、25-ohd2、一種或更多種上述維生素e和抗壞血酸的組合。組成本發(fā)明的另一方面是以下各項(xiàng)的組合：a)25-ohd，b)類胡蘿卜素，所述類胡蘿卜素選自由以下各項(xiàng)組成的組：番茄紅素、蝦青素、隱黃質(zhì)、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)和角黃素，c)維生素e，d)抗壞血酸，以及e)任選地還包含至少一種另外的生物活性成分，所述另外的生物活性成分選自由以下各項(xiàng)組成的組：維生素d、維生素b2、生物素、維生素b6、煙酸、鋅、銅、錳和硒。優(yōu)選地，25-ohd是25-ohd3，以加入牛飲食中來增強(qiáng)卵巢健康。優(yōu)選地，至少維生素d是另外的生物活性成分。有時，另外的生物活性成分至少包括維生素d和硒。在一些情況下，添加所有的另外的生物活性成分。另一方面是25-ohd、本發(fā)明的一種或更多種類胡蘿卜素、維生素e和抗壞血酸的組合，該組合任選地還包含至少一種另外的生物活性成分，所述另外的生物活性成分選自由以下各項(xiàng)組成的組：維生素d、維生素b2、維生素b6、煙酸、泛酸、葉酸、生物素、鋅、銅、錳、硒以及它們的組合，以加入牛飲食中來增強(qiáng)卵巢健康。優(yōu)選地，25-ohd是25-ohd3。有時，另外的生物活性成分包括生物素。有時，另外的生物活性成分包括維生素d和生物素。有時，另外的生物活性成分包括所有上述任選的生物活性成分。預(yù)混物本發(fā)明的另一方面是用于牛飼料的預(yù)混物，其包含25-ohd、維生素e、抗壞血酸和一種或更多種上述類胡蘿卜素的組合。優(yōu)選地，25-ohd是25-ohd3。預(yù)混物和隨后的營養(yǎng)制劑改進(jìn)/改善與卵巢相關(guān)的不利病癥，優(yōu)選為cod。在一些實(shí)施方案中，預(yù)混物或隨后的營養(yǎng)制劑還包含至少一種另外的生物活性成分，所述另外的生物活性成分選自由以下各項(xiàng)組成的組：維生素d、維生素b2、維生素b6、煙酸、鋅、銅、錳、硒，以及它們的組合。有時，另外的生物活性成分至少包括維生素d和硒。在一些情況下，添加所有另外的生物活性成分。本發(fā)明的另一方面是用于營養(yǎng)制劑的預(yù)混物，該預(yù)混物還包含至少一種另外的生物活性成分，所述另外的生物活性成分選自由以下各項(xiàng)組成的組：維生素d、維生素b2、維生素b6、煙酸、泛酸、葉酸、生物素、鋅、銅、錳、硒，以及它們的組合。有時，另外的生物活性成分包括生物素。有時，另外的生物活性成分包括維生素d和生物素。有時，另外的生物活性成分包括所有上述任選的生物活性成分。在另一方面，本發(fā)明的25-ohd和抗氧化劑/抗炎劑都用于被飼喂全面飲食因而不缺乏維生素/礦物質(zhì)的牛。因此，本發(fā)明的25-ohd和抗氧化劑/組合不能用于補(bǔ)救維生素或其他營養(yǎng)缺乏。其可以被認(rèn)為是超生理水平劑量。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的25-ohd和抗氧化劑/抗炎劑是基礎(chǔ)飲食的唯一添加成分。附圖說明圖1示出響應(yīng)與25-ohd3+抗氧化劑/抗炎劑組合的自由采食量的肉種母雞的葡萄糖清除率和胰島素分泌。飼喂3周后，通過翅靜脈向母雞注射單劑量葡萄糖(0.5g/kgbw)。在輸注葡萄糖后的指定時間點(diǎn)，通過翅靜脈插管收集血樣，其中n＝3。圖2示出響應(yīng)與25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑組合的自由采食量的肉種母雞的組織白介素-1β含量和血漿il-6水平。在飼喂試驗(yàn)10周后收集組織和血樣。具有不同上標(biāo)字母的均值明顯不同(p<0.05)，n＝3。圖3示出家禽腹部中看到的腹水和家禽卵巢畸形的照片。圖4是示出飲食補(bǔ)充25-oh-d3+抗氧化劑/抗炎劑對具有限制性采食量或自由采食量的肉種母雞的血漿il-6和il-1β濃度的影響的圖表。如在整個說明書和權(quán)利要求書中使用的，以下定義適用：“維生素d”是指維生素d2、維生素d3或組合。單獨(dú)使用維生素d3是優(yōu)選的。“抗壞血酸”和“維生素c”在整個說明書和權(quán)利要求書中可互換使用?！盎A(chǔ)飲食”意味著所使用的食物向動物供應(yīng)足夠的維生素和礦物質(zhì)，使牛具有充分供應(yīng)的維生素和礦物質(zhì)?！芭！笔侵改膛?，特別是在乳制品行業(yè)養(yǎng)殖或用于繁殖目的的那些。牛還包括用于其生殖能力的其他物種，諸如水牛、牦?；蝼昱！！?5-oh-d3+抗氧化劑/抗炎劑”是指25-ohd3、維生素e、類胡蘿卜素和抗壞血酸的組合，該組合以在本說明書中所敘述的劑量范圍在飼料中施用作為基礎(chǔ)飲食添加劑。任選地，并且優(yōu)選地，附加的生物活性成分選自由以下各項(xiàng)組成的組：維生素d、維生素b2、維生素b6、煙酸、泛酸、葉酸、生物素、鋅、銅、錳、硒以及它們的組合添加到25-ohd3、維生素e、類胡蘿卜素和抗壞血酸組合中。“25-ohd”是指25-羥基維生素d的任何形式(即25-ohd2或25-ohd3，或它們的混合物)。25-ohd3特別指代25-羥基維生素d3；25-ohd2特別指代25-羥基維生素d2?！氨景l(fā)明的類胡蘿卜素”是指以下各項(xiàng)中的至少一種：番茄紅素、蝦青素、隱黃質(zhì)、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)和角黃素。最優(yōu)選的是以下各項(xiàng)中的至少一種：番茄紅素、蝦青素、葉黃素和玉米黃質(zhì)。通常，葉黃素和玉米黃質(zhì)被一起施用。卵巢問題根據(jù)本發(fā)明已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，使用包含25-ohd3、維生素e、本發(fā)明的一種或更多種類胡蘿卜素和抗壞血酸的飼料可以特別有助于卵巢健康?；加新殉沧冃?、大卵泡閉鎖或腫瘤或其他異常形態(tài)如內(nèi)部排卵的母雞傾向于具有比它們的過去記錄中更低的產(chǎn)蛋率?；加蟹逝职Y和相關(guān)調(diào)節(jié)異常(諸如血漿脂質(zhì)和神經(jīng)酰胺或胰島素和瘦素水平或組織細(xì)胞因子和脂質(zhì)含量的調(diào)節(jié)異常)傾向于具有快速的卵巢變性和其他異常，從而產(chǎn)生可以容易地監(jiān)測到的較低產(chǎn)蛋率。人類的多囊卵巢綜合征包括諸如以下各項(xiàng)中的一種或更多種的癥狀：肥胖癥、胰島素抗性、高甘油三酯血癥、神經(jīng)酰胺和非酯化脂肪酸(nefa)的循環(huán)濃度增加，以及包括il-1β在內(nèi)的系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)。在奶牛中，與多囊卵巢綜合征相似的病癥稱為卵巢囊腫疾病(cod)，并且其被認(rèn)為是奶牛的最常見的卵巢功能異常以及因此導(dǎo)致不育癥。患有cod的奶牛往往具有延長的產(chǎn)犢間隔和每次懷孕的增加的輸精次數(shù)，并且被淘汰宰殺的風(fēng)險更大。傳統(tǒng)上，cod被定義為在卵巢的其中一個上存在直徑為2.5cm或更大的大卵泡樣結(jié)構(gòu)，持續(xù)至少10天。該疾病的發(fā)病機(jī)制尚不完全了解，但卵泡囊腫發(fā)育似乎涉及下丘腦對雌二醇的無反應(yīng)性。(參見hein等人，2015animalreproductionscience156:64-74)。因此，本發(fā)明的一個方面是25-ohd和抗氧化劑/抗炎劑用于改善牛cod的用途。改善17-β-雌二醇水平的降低已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，根據(jù)本發(fā)明，25-羥基維生素d(25-ohd3和/或25-ohd2)與抗氧化劑/抗炎劑的組合改善了17-β雌二醇水平的降低。因此，本發(fā)明的一個方面是25-ohd和抗氧化劑/抗炎劑用于改善牛的17-β雌二醇水平的降低，從而延長它們的生產(chǎn)壽命的用途；優(yōu)選地牛為奶?；蚍N牛(cowkeptasbreeders)。17-β雌二醇是奶牛中誘導(dǎo)發(fā)情行為的內(nèi)源激素。產(chǎn)犢后許多奶牛不易再進(jìn)入發(fā)情期，或發(fā)情期時長不足以確保受精。因此，25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑的組合可以幫助保持奶牛體內(nèi)更高水平的17-β雌二醇。3.劑量在本發(fā)明的一個方面，將本發(fā)明的25-ohd3與抗氧化劑/抗炎劑的組合施用于維生素充足而不是維生素缺乏的個體。維生素充足狀態(tài)優(yōu)選地是由于至少為本身提供最少量的維生素和礦物質(zhì)的均衡飲食。因此，除了基礎(chǔ)飲食之外，優(yōu)選使用本發(fā)明的組合。25-ohd3：25-ohd3以2500iu至40000iu，優(yōu)選約25000iu和30000iu的日劑量存在。維生素e：在日劑量中的量可以在500至4000mg/天的范圍，優(yōu)選1000至4000mg/天?？箟难幔嚎箟难岬牧靠梢栽?50至500mg/天的范圍。番茄紅素：番茄紅素的量可以在15至1250mg/天的范圍，優(yōu)選500至800mg/天。蝦青素：蝦青素的量可以在1至150mg/天的范圍；優(yōu)選2至50mg/天，更優(yōu)選5至20mg/天。β-隱黃質(zhì)β-隱黃質(zhì)的量可以在1至100mg/天的范圍；優(yōu)選2至30mg/天；并且更優(yōu)選5至15mg/天。β-胡蘿卜素β-胡蘿卜素的量可以在300至1000mg/天的范圍，優(yōu)選500至800mg/天。玉米黃質(zhì)：玉米黃質(zhì)的量可以在1至60mg/天的范圍；優(yōu)選2至20mg/天，并且更優(yōu)選3至10mg/天。葉黃素：葉黃素的量可以在1至200g/天的范圍，優(yōu)選50mg/天。角黃素：角黃素的量不應(yīng)超過20mg/天。代表性的每日配方#1：25-ohd3：2500-40000iu，優(yōu)選25000iu維生素e4000mg抗壞血酸：250-500mg，優(yōu)選500隱黃質(zhì)10mg代表性的每日配方#2：25-ohd3：2500-40000iu，優(yōu)選30000iu維生素e：1000mg抗壞血酸：250-500mg，優(yōu)選500葉黃素500-800mg(可選的)玉米黃質(zhì)：6mg代表性的每日配方#3：25-ohd3：2500-40000iu，優(yōu)選30000iu維生素e：1000-3000mg抗壞血酸：250至500mg番茄紅素：20mg代表性的每日配方#4：25-ohd3：2500-40000iu，優(yōu)選25000iu維生素e：200-600mg，優(yōu)選300-500mg抗壞血酸：250-500mg，優(yōu)選500蝦青素：20mg代表性的每日配方#5：25-ohd3：2500-40000iu，優(yōu)選30000iu維生素e：200-600mg，優(yōu)選300-500mg抗壞血酸：250-500mg，優(yōu)選500β胡蘿卜素：500-800mg優(yōu)選的比率包括以下各項(xiàng)任選的附加成分對于上面列出的每種營養(yǎng)制劑、食品補(bǔ)充劑或藥物組合物，可以添加至少一種附加成分。優(yōu)選加入至少一種，更優(yōu)選多于一種以下成分。在其他實(shí)施方案中，添加所有的以下成分：維生素d3——維生素d3的量可以在1至100μg/天的范圍；優(yōu)選1至50μg/天，并且更優(yōu)選5至25μg/天。維生素b2：維生素b2的量可以在0.5至300mg/天的范圍；優(yōu)選5至100mg/天，并且更優(yōu)選10至50mg/天。煙酸：煙酸的量可以在1至300mg/天的范圍；優(yōu)選5至100mg/天，并且更優(yōu)選10至50mg/天。泛酸：泛酸的量可以在1至300mg/天的范圍；優(yōu)選5至100mg/天，并且更優(yōu)選10至50mg/天。葉酸：葉酸的量可以在50至100μg/天的范圍；優(yōu)選400至800μg/天，并且更優(yōu)選400至600μg/天。生物素：生物素的量可以在5μg至10mg/天的范圍；優(yōu)選30μg至5mg/天，并且更優(yōu)選0.1至1mg/天。鋅：鋅的量可以在1至40mg/天的范圍；優(yōu)選5至40mg/天，并且更優(yōu)選10至20mg/天。銅：銅的量可以在0.4至10mg/天的范圍；優(yōu)選0.7至5mg/天，并且更優(yōu)選0.9至3mg/天。錳：錳的量可以在1至10mg/天的范圍；優(yōu)選1至5mg/天，并且更優(yōu)選1至3mg/天。硒：硒的量可以在20至400μg/天的范圍；優(yōu)選50至200μg/天，并且更優(yōu)選50至100μg/天?？梢灾苽漕A(yù)混合物以提供上述劑量和優(yōu)選的劑量。形成本發(fā)明的部分的一種預(yù)混物被配制成使得1克預(yù)混合物被添加到一千克營養(yǎng)制劑、食品補(bǔ)充劑或藥物組合物中，并且得到的營養(yǎng)制劑、食品補(bǔ)充劑或藥物組合物含有任何上述給定劑量中所述的劑量。當(dāng)然，各種成分的量可以變化為使得一千克預(yù)混料被加入到一公噸營養(yǎng)制劑、食品補(bǔ)充劑或藥物組合物中，并且所得飼料含有任何上述給定劑量中所述的劑量。下面的實(shí)施例中有具體的說明。提出以下非限制性實(shí)施例以更好地說明本發(fā)明。實(shí)施例實(shí)施例1從商用雞群獲得總共三十只45周齡的肉種母雞(ross308)以進(jìn)行研究。如表1所示配制基礎(chǔ)肉種雞日糧。所計(jì)算的營養(yǎng)組成如表2中所示。表1：基礎(chǔ)肉種雞日糧的成分組成。1所提供的礦物預(yù)混物(按照每kg用于治療組1、2和3的飲食計(jì))：cu18mg；碘1.1mg；fe80mg；mn150mg；zn125mg；以及se0.25mg。2關(guān)于進(jìn)一步細(xì)節(jié)請參考表2。表2.維生素預(yù)混組合物(每千克飲食所提供的)表3.基礎(chǔ)肉種雞日糧的計(jì)算營養(yǎng)組成(％)。組成％w/w粗蛋白16粗脂肪4.2鈣3.1鈉0.16總磷0.64總me2910kcal/kg飲食補(bǔ)充有69mcg/kg飲食與抗氧化劑/抗炎劑(維生素e、抗壞血酸、角黃素)和富集水平(enrichedlevel)的選定的維生素組合的25-ohd3，或不補(bǔ)充。根據(jù)如下飼喂方案(限制性和自由采食)將母雞隨機(jī)分配成3個治療組：基礎(chǔ)飲食——限制性飼喂(140克/天)基礎(chǔ)飲食——自由采食飼喂基礎(chǔ)飲食——自由采食飼喂+69mcg/kg飲食25-oh-d3+抗氧化劑/抗炎劑將它們分別容納在放置于受控室中的鋼絲籠中，該受控室具有14小時:10小時的光照:黑暗期和25±3℃的溫度。水是可自由采食的。實(shí)驗(yàn)期持續(xù)10周。飼喂試驗(yàn)三周后，將一些禽用于相關(guān)血漿參數(shù)分析。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時，將母雞安樂死并處死以進(jìn)行組織樣品收集以供進(jìn)一步研究。實(shí)施例2結(jié)果與討論25-羥基d3和抗氧化劑/抗炎劑降低了死亡率并改善了產(chǎn)蛋量、卵巢形態(tài)和血漿17β雌二醇水平雌二醇的分泌是成功排卵卵泡的標(biāo)志。除了觸發(fā)促性腺激素排卵前期峰的作用外，雌激素還是重要的卵巢內(nèi)生長、分化和生存因子。25-羥基d3和抗氧化劑/抗炎劑的內(nèi)含物降低了自由采食量的禽類中的卵巢變性和卵巢腫瘤樣形態(tài)，增加了產(chǎn)蛋量并且保持了血漿雌二醇水平。25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑改善了受損的葡萄糖清除率和胰島素敏感性飲食包含25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑可以改善胰島素抗性，如通過改善過度飼喂10周的母雞的空腹血漿葡萄糖和非酯化脂肪酸水平所證明(表4)。在葡萄糖清除試驗(yàn)中，瘦母雞在葡萄糖輸注后30至60分鐘之間表現(xiàn)出非常急劇的清除率，相反，肥胖母雞在30至90分鐘之間具有極低的清除率(圖1)。在胰島素分泌方面，與瘦母雞相比，肥胖母雞在空腹?fàn)顟B(tài)和葡萄糖輸注后表現(xiàn)出較高的血漿胰島素水平(圖1)。葡萄糖清除率和葡萄糖誘導(dǎo)的胰島素分泌兩者均通過在過度飼喂3周的母雞體內(nèi)引入25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑校正(圖1)。表4.25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑對自由采食飼喂的肉種母雞的血漿葡萄糖、非酯化脂肪酸(nefa)和胰島素的影響25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑改善血脂異常自由采食飼喂的母雞具有升高的血漿甘油三酯、神經(jīng)酰胺和鞘磷脂水平。然而，補(bǔ)充組合的25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑降低了自由采食飼喂母雞血漿中這些脂質(zhì)代謝物的水平(表5)。表5.25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑對自由采食飼喂的肉種母雞的血漿三?；视?、神經(jīng)酰胺和鞘磷脂的影響25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑減少了組織甘油三酯和神經(jīng)酰胺含量的積累相較于自由采食飼喂的那些母雞，飼喂補(bǔ)充的25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑的母雞的肝臟、心臟和腿部肌肉中具有更低的甘油三酯和神經(jīng)酰胺積累(表6)。表625-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑對自由采食飼喂的肉種母雞的組織三酰基甘油和神經(jīng)酰胺含量的影響25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑抑制過度飼喂的肉種母雞體內(nèi)組織促炎的il-1β產(chǎn)生和血漿il-6濃度肥胖相關(guān)的炎癥由膳食25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑補(bǔ)充劑改善，如通過抑制的脂肪組織、肝臟、腿部肌肉和胸肌以及心臟中的循環(huán)il-6水平和il-1β產(chǎn)生所證明(圖2)。25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑改善自由采食飼喂的肉種母雞的脂毒性肥胖的中心并發(fā)癥是胰島素抗性的發(fā)展，胰島素抗性的發(fā)展是在胰島素不能在其主要靶組織、骨骼肌和肝臟中引起餐后營養(yǎng)物儲存時發(fā)生的。不希望受理論束縛，看似兩種可能的機(jī)制可以解釋增加的脂肪儲存如何影響整個身體的整體胰島素敏感性，從而有助于下調(diào)外周組織中的胰島素信號傳導(dǎo)。首先，遞送到細(xì)胞或組織中的營養(yǎng)物超過了其儲存容量，從而這會導(dǎo)致抑制胰島素作用的代謝物的產(chǎn)生。特別重要的是，脂質(zhì)衍生物，諸如三?；视秃蜕窠?jīng)酰胺，已被證明抑制特異性胰島素信號傳導(dǎo)中間體，從而阻斷餐后葡萄糖攝取和/或糖原合成。在肉種雌雞自由采食飼喂的情況下，這些代謝物在外周組織中的持續(xù)積累可以有助于整個母雞體內(nèi)的胰島素抗性的持續(xù)狀態(tài)和脂毒性發(fā)展的持續(xù)狀態(tài)。其次，增加的肥胖誘導(dǎo)慢性炎癥狀態(tài)，慢性炎癥狀態(tài)的特征在于由脂肪細(xì)胞或由浸潤脂肪墊的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的促炎細(xì)胞因子循環(huán)水平的升高。這些炎癥介質(zhì)已經(jīng)表現(xiàn)為直接拮抗胰島素信號傳導(dǎo)，并且還誘導(dǎo)分解代謝過程，從而進(jìn)一步增加營養(yǎng)代謝物向胰島素反應(yīng)性器官的遞送?？傮w而言，導(dǎo)致在非脂肪組織中形成過量飽和脂肪酸以及因此脂質(zhì)積累的葡萄糖過量供應(yīng)提高了活性脂質(zhì)(鞘脂)的細(xì)胞水平，活性脂質(zhì)(鞘脂)抑制代謝調(diào)節(jié)所涉及的信號傳導(dǎo)通路以及激活的炎癥反應(yīng)和脂毒性發(fā)展。具體地，神經(jīng)酰胺是將過量營養(yǎng)物(即，飽和脂肪酸)和炎性細(xì)胞因子與胰島素抗性的誘導(dǎo)相關(guān)聯(lián)的推定中間體。此外，神經(jīng)酰胺在各種不同細(xì)胞類型中是有毒的，并且能夠損害心臟、胰腺和脈管系統(tǒng)。此外，25-羥基d3和抗氧化劑/抗炎劑有效改善由于在飽飼的肉種母雞中發(fā)生的增加肥胖而引起的代謝和內(nèi)分泌失調(diào)以及促炎性反應(yīng)的有害效應(yīng)。25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑改善過度飼喂的肉種母雞的心臟病發(fā)病、腹水和炎癥由于過量脂質(zhì)積累，心臟可能會變得具有功能障礙。自由采食飼喂促進(jìn)心臟中甘油三酯的積累，表明增加的心臟脂肪酸可用性被適應(yīng)性地酯化成甘油三酯。此外，由于自由采食飼喂，心臟的神經(jīng)酰胺含量也增加。神經(jīng)酰胺是脂毒性心肌病中的心臟毒素，其引起炎癥反應(yīng)，如通過免疫細(xì)胞的更多心臟浸潤所證明的。(表7)表7.25-ohd3和抗氧化劑/抗炎劑對自由采食飼喂的肉種母雞的心臟反應(yīng)的影響心臟肥大在臨床上代表對增加的心臟負(fù)擔(dān)的適應(yīng)性反應(yīng)。然而，心臟對神經(jīng)和激素因子的反應(yīng)也可以獨(dú)立于后負(fù)荷或血管阻力的增加而引起肥大變化。養(yǎng)料(fuel)過載誘導(dǎo)的心臟補(bǔ)償生長發(fā)生在肉種母雞體內(nèi)。心臟肥大可能變得適應(yīng)不良，并且最終發(fā)展成病理性病癥，從而導(dǎo)致心力衰竭。這些結(jié)果支持以下事實(shí)：即心臟中的脂毒性發(fā)展和肥厚生長傾向于引起炎癥反應(yīng)。圖4示出了飲食補(bǔ)充25-oh-d3+抗氧化劑/抗炎劑對具有限制性采食量或自由采食量的肉種母雞的血漿il-6(上部圖)和il-1β濃度(下部圖)的影響。結(jié)果以均值±sem(n＝6)表示。條形上方的不同字母的均值顯著不同(p＜0.05)根據(jù)圖4的結(jié)論和注釋：25-oh-d3+抗氧化劑/抗炎劑改善自由采食飼喂的母雞的慢性系統(tǒng)性炎癥。當(dāng)前第1頁12