本發(fā)明涉保健食品領(lǐng)域，尤其涉及一種增強(qiáng)人體免疫力和抗抑郁保健食品的制備方法。
背景技術(shù)：
人體的免疫功能是一道防線(xiàn)，護(hù)衛(wèi)著人體健康；又是一種祛病能力，在人患病之后可促進(jìn)康復(fù)，這就成為人體強(qiáng)身抗病的根本所在。然而，在日常生活中，有許多因素使人體免疫力下降或出現(xiàn)免疫紊亂。比如，膳食不合理，蛋白質(zhì)、維生素、微量元素?cái)z入不足；生活不規(guī)律，睡眠不足；缺少運(yùn)動(dòng)鍛煉，對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力較差；精神緊張，過(guò)度勞累；使用激素、抗生素等藥物的不良反應(yīng)，抑制了免疫力；患急性病時(shí)暫時(shí)降低了免疫力，患慢性病時(shí)則長(zhǎng)期處于免疫力低下?tīng)顟B(tài)等等。若長(zhǎng)時(shí)間免疫力低下，人體就會(huì)出現(xiàn)健康和疾病的中間狀態(tài)－亞健康狀態(tài)。而亞健康狀態(tài)是不斷變化發(fā)展的，如不能及時(shí)得到改善，很有可能向疾病狀態(tài)轉(zhuǎn)化。所以，提高人體自身免疫功能，是遠(yuǎn)離亞健康，走向健康的根本方法。
大量的研究已證實(shí)精神狀態(tài)和免疫系統(tǒng)之間存在相互作用，即精神活動(dòng)能調(diào)節(jié)免疫功能，而免疫系統(tǒng)的紊亂不僅能導(dǎo)致機(jī)體疾病，也與心理精神、行為、性格和衰老的變化有關(guān)。人體的免疫力低下與抑郁癥息息相關(guān)。抑郁癥能導(dǎo)致人體免疫力下降，免疫力下降又進(jìn)一步加重抑郁癥癥狀。然而目前安全、有效、適于長(zhǎng)期服用的增強(qiáng)人體免疫力又能抗抑郁的藥物仍然缺乏。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是：提供一種增強(qiáng)人體免疫力和抗抑郁保健食品的制備方法，本制備方法操作簡(jiǎn)單、安全有效，按照該方法制備的保健食品能有效提高機(jī)體免疫力，抗抑郁，安全有效。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：
一種增強(qiáng)人體免疫力和抗抑郁保健食品的制備方法，包括如下步驟：
步驟1、按重量份數(shù)準(zhǔn)備原料，所述原料及其重量配比為：靈芝2～10份、刺五加6～18份、三七4～12份、梔子1～6份；
步驟2、將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過(guò)，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，備用；
步驟3、將靈芝、三七粉碎，過(guò)篩，得細(xì)粉，備用；
步驟4、將步驟2所得清膏干燥得干浸膏；
步驟5、將步驟4所得干浸膏粉碎過(guò)篩，得干浸膏粉；
步驟6、將步驟3所得細(xì)粉與步驟5所得干浸膏粉混合均勻，加入適量85％乙醇為濕潤(rùn)劑制軟材；
步驟7、將步驟6所得軟材過(guò)篩制粒，得濕顆粒，濕顆粒干燥，整粒，裝膠囊，包裝，即得膠囊劑。
所述步驟1中，所述原料及其重量配比為：靈芝3～8份、刺五加7～15份、三七5～10份、梔子2～5份。
所述步驟1中，所述原料及其重量配比為：靈芝4份、刺五加12份、三七6份、梔子2份。
本發(fā)明中所提到的靈芝為為多孔菌科真菌赤芝ganodermalucidum(leyss.exfr.)karst.或紫芝ganodermasinensezhao，xuetzhang的干燥子實(shí)體。全年采收，除去雜質(zhì)，剪除附有朽木、泥沙或培養(yǎng)基質(zhì)的下端菌柄，陰干或在
本發(fā)明中所提到的刺五加為五加科植物刺五加acanthopanaxseuticosus(rupr.etmaxim.)harms的干燥根和根壟或蓮。春、秋二季采收，洗凈，干燥，即《中國(guó)藥典》(2015年版，一部)收載的刺五加。
本發(fā)明中所提到的三七為五加科植物三七parmxnotoginseng(burk.)f.h.chen的干燥根和根莖。秋季花開(kāi)前采挖，洗凈，分開(kāi)主根、支根及根莖，干燥。支根習(xí)稱(chēng)“筋條”，根莖習(xí)稱(chēng)“剪口”，即《中國(guó)藥典》(2015年版，一部)收載的三七。
本發(fā)明中所提到的梔子為為菌草科植物扼子ganiemaellis的干燥成熟果實(shí)。
本發(fā)明所提到的藥學(xué)上可接受的輔料，包括填充劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質(zhì)等。填充劑包括：淀粉、預(yù)膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括：淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉等；潤(rùn)滑劑包括：硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括：淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括：糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括：甜味劑及各種香精；防腐劑包括：尼泊金類(lèi)、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類(lèi)、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質(zhì)包括：peg6000，peg4000，蟲(chóng)蠟等。
靈芝味甘，性平，歸心、肺、肝、腎經(jīng)，具有補(bǔ)氣安神，止咳平喘的作用，用于心神不寧，失眠心悸，肺虛咳喘，虛勞短氣，不思飲食。
刺五加味辛、微苦，溫，歸脾、腎、心經(jīng)，具有益氣健脾，補(bǔ)腎安神的作用，用于脾肺氣虛，體虛乏力，食欲不振，肺腎兩虛，久咳虛喘，腎虛腰膝酸痛，心脾不足，失眠多夢(mèng)。
三七味甘、微苦，性溫，歸肝、胃經(jīng)。具有散瘀止血，消腫定痛的作用，用于咯血，吐血，鯉血，便血，崩漏，外傷出血，胸腹刺痛，跌撲腫痛。
梔子味苦，性寒，歸心、肺、三焦經(jīng)；具有瀉火除煩，清熱利濕，涼血解毒的作用，用于熱病心煩，濕熱黃疸，淋證澀痛”血熱吐衄，目赤腫痛，火毒瘡瘍；外治扭挫傷痛。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：
(1)本發(fā)明選用靈芝、刺五加、三七、梔子作為原料藥，通過(guò)科學(xué)組方、按一定的重量配比組成。經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)證明，具有增強(qiáng)免疫、抗抑郁的作用，本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，操作簡(jiǎn)便，原料來(lái)源價(jià)廉易得，最后所得成品率高，安全有效。
(2)本發(fā)明用藥精妙，配伍得當(dāng)，諸藥合藥，能有效增強(qiáng)免疫和抗抑郁。本發(fā)明原料中，靈芝歸心、肺、肝、腎經(jīng)，功能重在補(bǔ)氣安神；刺五加歸脾、腎、心經(jīng)，益氣健脾，補(bǔ)腎安神；三七歸肝、胃經(jīng)，散瘀止血，消腫定痛；梔子歸心、肺、三焦經(jīng)，瀉火除煩。本方以靈芝為君藥，取其補(bǔ)氣安神之功效，以刺五加為臣藥，共奏益氣、安神的功效，佐以三七、梔子，瀉火除煩、散瘀定痛。全方配方相輔相成，治療衛(wèi)氣失常所致的衛(wèi)氣虛損、肝郁化滯，從而起到增強(qiáng)免疫力和抗抑郁的作用。
(3)本發(fā)明的原料藥均為常用的傳統(tǒng)中藥，易于獲得道地藥材，原料來(lái)源穩(wěn)定，質(zhì)量易于控制。
(5)本發(fā)明中的靈芝和三七未經(jīng)提取，直接以全粉入藥，最大限度保留了有效成分，減少了用藥劑量，同時(shí)以粉末入藥，減少了輔料的用量。本發(fā)明采用科學(xué)、合理的制備方法，制備出安全有效的制劑，使得調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力的效果更加穩(wěn)定、可控。
(6)本發(fā)明采用了口服制劑，方便生產(chǎn)、儲(chǔ)存、運(yùn)輸、攜帶和服用。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，本發(fā)明的方式包括但不僅限于以下實(shí)施例。
一種增強(qiáng)人體免疫力和抗抑郁保健食品的制備方法，包括如下步驟：
步驟1、按重量份數(shù)準(zhǔn)備原料，所述原料及其重量配比為：靈芝2～10份、刺五加6～18份、三七4～12份、梔子1～6份；
步驟2、將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過(guò)，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，備用；
步驟3、將靈芝、三七粉碎，過(guò)篩，得細(xì)粉，備用；
步驟4、將步驟2所得清膏干燥得干浸膏；
步驟5、將步驟4所得干浸膏粉碎過(guò)篩，得干浸膏粉；
步驟6、將步驟3所得細(xì)粉與步驟5所得干浸膏粉混合均勻，加入適量85％乙醇為濕潤(rùn)劑制軟材；
步驟7、將步驟6所得軟材過(guò)篩制粒，得濕顆粒，濕顆粒干燥，整粒，裝膠囊，包裝，即得膠囊劑。
所述步驟1中，所述原料及其重量配比為：靈芝3～8份、刺五加7～15份、三七5～10份、梔子2～5份。
所述步驟1中，所述原料及其重量配比為：靈芝4份、刺五加12份、三七6份、梔子2份。
本發(fā)明在制備過(guò)程中，所述保健食品是以靈芝、刺五加、三七、梔子為原料藥，加入藥學(xué)上可接受的輔料按照常規(guī)方法制備而成的制劑；所述制劑由刺五加、梔子用常規(guī)方法提取制備成提取物，靈芝、三七制備成細(xì)粉制成；所述提取物為水煎物，所述制劑為口服制劑，所述口服制劑可以制成顆粒劑、片劑或膠囊劑中的任意一種。
為了使本技術(shù)領(lǐng)域技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明的精髓，特提供以下實(shí)施實(shí)例加以說(shuō)明。
實(shí)施例1
1.靈芝粉碎工藝考察
方法：稱(chēng)取靈芝凈藥材3份，各50g，于60℃低溫干燥后，粉碎成細(xì)粉，過(guò)100目篩，稱(chēng)量，計(jì)算出粉率，結(jié)果見(jiàn)表1。
表1藥材粉碎工藝考察結(jié)果
試驗(yàn)結(jié)果表明，靈芝粉碎的平均出粉率為96.28％。
2.三七粉碎工藝考察
方法：稱(chēng)取三七凈藥材3份，各50g，于60℃低溫干燥后，粉碎成細(xì)粉，過(guò)100目篩，稱(chēng)量，計(jì)算出粉率，結(jié)果見(jiàn)表1。
表1藥材粉碎工藝考察結(jié)果
試驗(yàn)結(jié)果表明，靈芝粉碎的平均出粉率為95.61％。
實(shí)施例2
組成：靈芝40g、刺五加120g、三七60g、梔子20g、硬脂酸鎂3g。
制備方法：按重量份數(shù)稱(chēng)取原料；將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過(guò)，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，干燥，得干浸膏；將靈芝、三七粉碎，過(guò)篩，得細(xì)粉，與干浸膏混合均勻，加入適量85％乙醇為濕潤(rùn)劑制軟材，過(guò)篩制粒，得濕顆粒，干燥，加入硬脂酸鎂，整粒，裝膠囊，包裝，即得膠囊劑。
實(shí)施例3
組成：靈芝10g、刺五加40g、三七20g、梔子20g、微晶纖維素10g、硬脂酸鎂2g。
制備方法：按重量份數(shù)稱(chēng)取原料；將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過(guò)，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，干燥，得干浸膏；將靈芝、三七粉碎，過(guò)篩，得細(xì)粉，與向晶纖維素、干浸膏混合均勻，加入適量85％乙醇為濕潤(rùn)劑制軟材，過(guò)篩制粒，得濕顆粒，干燥，加入硬脂酸鎂，整粒，壓片，包裝，即得片劑。
實(shí)施例4
組成：靈芝50g、刺五加100g、三七100g、梔子80g、硬脂酸鎂5g。
制備方法：按重量份數(shù)稱(chēng)取原料；將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過(guò)，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，干燥，得干浸膏；將靈芝、三七粉碎，過(guò)篩，得細(xì)粉，與干浸膏混合均勻，加入適量85％乙醇為濕潤(rùn)劑制軟材，過(guò)篩制粒，得濕顆粒，干燥，加入硬脂酸鎂，整粒，裝膠囊，包裝，即得膠囊劑。
實(shí)施例5
組成：靈芝60g、刺五加120g、三七150g、梔子10g、微晶纖維素15g、硬脂酸鎂3g。
制備方法：按重量份數(shù)稱(chēng)取原料；將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過(guò)，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，干燥，得干浸膏；將靈芝、三七粉碎，過(guò)篩，得細(xì)粉，與向晶纖維素、干浸膏混合均勻，加入適量85％乙醇為濕潤(rùn)劑制軟材，過(guò)篩制粒，得濕顆粒，干燥，加入硬脂酸鎂，整粒，壓片，包裝，即得片劑。
實(shí)施例6
組成：靈芝40g、刺五加50g、三七70g、梔子30g、硬脂酸鎂4g。
制備方法：按重量份數(shù)稱(chēng)取原料；將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過(guò)，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，干燥，得干浸膏；將靈芝、三七粉碎，過(guò)篩，得細(xì)粉，與干浸膏混合均勻，加入加入適量85％乙醇為濕潤(rùn)劑制軟材，過(guò)篩制粒，得濕顆粒，干燥，加入硬脂酸鎂，整粒，裝膠囊，包裝，即得膠囊劑。
實(shí)施例7
組成：靈芝30g、刺五加80g、三七40g、梔子60g、硬脂酸鎂2g。
制備方法：按重量份數(shù)稱(chēng)取原料；將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過(guò)，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，干燥，得干浸膏；將靈芝、三七粉碎，過(guò)篩，得細(xì)粉，與干浸膏混合均勻，加入加入適量85％乙醇為濕潤(rùn)劑制軟材，過(guò)篩制粒，得濕顆粒，干燥，加入硬脂酸鎂，整粒，裝膠囊，包裝，即得膠囊劑。
實(shí)施例8
增強(qiáng)免疫力試驗(yàn)
(一)受試藥
本發(fā)明制劑1：按實(shí)施例2制備得膠囊劑，加水制成混懸液。
本發(fā)明制劑2：按實(shí)施例2制備得片劑，加水制成混懸液。
陰性對(duì)照：蒸餾水。
(二)試驗(yàn)動(dòng)物：雌性icr小鼠，體重18-22g，由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供。
(三)試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用spss10.0forwindows軟件包處理。
(四)試驗(yàn)方法及結(jié)果
按照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)操作。
1、對(duì)小鼠細(xì)胞免疫功能的影響
1.1對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(dth)的影響
1.1.1試驗(yàn)方法：遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(dth)(耳腫脹法)
按照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)操作。灌胃30天后，給小鼠腹部皮膚脫毛，約3cm×3cm，用dnfb溶液50μl均勻涂抹致敏。5天后，用dnfb溶液10μl涂抹于小鼠右耳(兩面)進(jìn)行攻擊。攻擊后24小時(shí)處死小鼠，剪下左右耳殼，用打孔器取下直徑8mm的耳片，稱(chēng)重。
1.1.2試驗(yàn)結(jié)果下表。
表1對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(dth)的影響
由表1可見(jiàn)，連續(xù)灌胃30天后，本發(fā)明制劑中、高劑量組動(dòng)物的耳朵腫脹度與陰性對(duì)照組相比較均有顯著性差異(p<0.05)。
1.2對(duì)cona誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的影響
1.2.1試驗(yàn)方法：cona誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)(mtt法)
無(wú)菌取脾，置于盛有適量無(wú)菌hank's液的平皿中，制成細(xì)胞懸液，經(jīng)200目篩網(wǎng)過(guò)濾。用hank's液洗2次，每次離心l0min(1000r/min)。然后將細(xì)胞懸浮于1ml完全培養(yǎng)液中，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用rpmi1640培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為3*106個(gè)/ml.。再將細(xì)胞懸液分兩孔加入24孔培養(yǎng)板中，每孔1ml，在其中一孔加入75ulcona液(相當(dāng)于7.5ul/ml)，另一孔作為對(duì)照，置5％co2，37℃二氧化碳孵箱中培養(yǎng)72h。培養(yǎng)結(jié)束前4h輕輕吸去上清液0.7ml，加入0.7ml不含小牛血清的rpmi1640培養(yǎng)液，同時(shí)加入mtt(5mg/ml)50ul/孔，繼續(xù)培養(yǎng)4h。培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入1ml酸性異丙醇，吹打混勻，使紫色結(jié)晶完全溶解，然后分裝到96孔培養(yǎng)板中，每個(gè)孔作3個(gè)平行孔，用酶標(biāo)儀，以570nm波長(zhǎng)測(cè)定光密度值。淋巴細(xì)胞的增殖能力用加cona孔的光密度值減去不加cona孔的光密度值表示。
1.2.2試驗(yàn)結(jié)果下表。
表2對(duì)cona誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的影響
由表2可見(jiàn)，本發(fā)明制劑1、2的中高劑量組連續(xù)對(duì)小鼠灌胃30天后，小鼠的淋巴細(xì)胞增殖能力與陰性對(duì)照組相比較均有顯著性差異(p<0.05)。
1.3結(jié)論
由表1、表2的結(jié)果表明，本發(fā)明對(duì)小鼠的細(xì)胞免疫試驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性。
2對(duì)小鼠nk細(xì)胞活性的影響
2.1試驗(yàn)方法：nk細(xì)胞活性測(cè)定(乳酸脫氫酶ldh測(cè)定法)
頸椎脫臼處死動(dòng)物，取出脾臟，撕碎，過(guò)200目篩網(wǎng)后，用hank’s液洗3次，每次1000r/min離心10min，取細(xì)胞漿，滅菌水裂解紅細(xì)胞，臺(tái)酚蘭染色計(jì)數(shù)(應(yīng)在95％以上)，用完全1640培養(yǎng)液配成2x107個(gè)/ml細(xì)胞懸液。將各只小鼠的細(xì)胞懸液取300μl分置于96孔培養(yǎng)板中，每孔100μl，每孔加靶細(xì)胞(yac-1細(xì)胞，4x105個(gè)/m)100μl，同時(shí)做靶細(xì)胞自然釋放孔(靶細(xì)胞100μl，培養(yǎng)液100μl)及最大釋放孔(靶細(xì)胞100μ+2.5％triton100μl)各3孔，37℃5％co2培養(yǎng)4小時(shí)，取出1500r/min離心5min。將各孔上清液100μl置于另一培養(yǎng)板中，每孔加入100μl基質(zhì)，10分鐘后加1mol/lhcl30μl終止反應(yīng)，在490nm處測(cè)定od值，計(jì)算nk細(xì)胞活性率。
2.2試驗(yàn)結(jié)果，見(jiàn)表3。
表3對(duì)小鼠nk細(xì)胞活性的影響
由表3可見(jiàn)，本發(fā)明制劑1、2的中高劑量組連續(xù)對(duì)小鼠灌胃30天后，小鼠nk細(xì)胞活性與陰性對(duì)照組相比，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，均有顯著性差異(p<0.05)。
2.3結(jié)論
表3的結(jié)果表明，本發(fā)明對(duì)小鼠nk細(xì)胞活性試驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性。
綜上，本發(fā)明對(duì)小鼠細(xì)胞免疫試驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性、對(duì)小鼠nk細(xì)胞活性試驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性。本發(fā)明具有增強(qiáng)免疫力的作用。
實(shí)施例9
抗抑郁作用試驗(yàn)
(一)受試藥
本發(fā)明制劑1：按實(shí)施例2制備得膠囊劑，加水制成混懸液。
本發(fā)明制劑2：按實(shí)施例2制備得片劑，加水制成混懸液。
陰性對(duì)照：蒸餾水。
(二)試驗(yàn)動(dòng)物：雄性icr小鼠，體重20-24g，由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供。
(三)試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用spss10.0forwindows軟件包處理。
(四)試驗(yàn)方法及結(jié)果
1動(dòng)物及分組
健康雄性昆明種小鼠，體質(zhì)量20-24g，清潔級(jí)動(dòng)物。動(dòng)物經(jīng)3天適應(yīng)性喂養(yǎng)后，隨機(jī)分組，自由攝食和飲水，并維持室溫(22±2)℃，相對(duì)濕度(55±5)％，每籠5只。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)于在安靜溫暖的環(huán)境中，各實(shí)驗(yàn)組平行進(jìn)行。
2懸尾實(shí)驗(yàn)
取70只雄性小鼠，實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)3天后，進(jìn)行懸尾實(shí)驗(yàn)篩選，剔除不動(dòng)時(shí)間不足20s或超過(guò)160s的小鼠，選取50只，按不動(dòng)時(shí)間長(zhǎng)短隨機(jī)分為陰性對(duì)照組，試驗(yàn)組，每組10只；每天上午按時(shí)給藥，連續(xù)7天，每次給藥前1h禁食不禁水。第3次和第7次給藥后1h進(jìn)行懸尾實(shí)驗(yàn)。動(dòng)物為克服不正常體位而掙扎活動(dòng)，但活動(dòng)一段時(shí)間后，出現(xiàn)間斷性不動(dòng)，顯示失望狀態(tài)。觀(guān)察6min，記錄后5min內(nèi)的累計(jì)不動(dòng)時(shí)間。
試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。
表4小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)結(jié)果表
由表4可見(jiàn)，本發(fā)明制劑1、2的中高劑量組減少小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)中的不動(dòng)時(shí)間與陰性對(duì)照組相比，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，均有顯著性差異(p<0.05)。
3強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)
取70只雄性小鼠，實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)3天后，進(jìn)行懸尾實(shí)驗(yàn)篩選，剔除不動(dòng)時(shí)間不足20s或超過(guò)160s的小鼠，選取50只，按不動(dòng)時(shí)間長(zhǎng)短隨機(jī)分為陰性對(duì)照組，試驗(yàn)組，每組10只；第3次和第7次給藥后1h進(jìn)行強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)。將小鼠分別置于一透明玻璃容器中游泳6min，累計(jì)后4min內(nèi)小鼠在水中停止掙扎或者呈漂浮狀態(tài)，僅微小肢體運(yùn)動(dòng)以保持頭部浮在水面的持續(xù)時(shí)間(即不動(dòng)時(shí)間)。每只動(dòng)物更換一次水。
試驗(yàn)結(jié)果，見(jiàn)表5。
表5強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果表
由表5可見(jiàn)，本發(fā)明制劑1、2的低、中、高劑量組減少?gòu)?qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中的不動(dòng)時(shí)間與陰性對(duì)照組相比，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，均有顯著性差異(p<0.05)。
綜上，本發(fā)明能減少小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中的不動(dòng)時(shí)間。本發(fā)明具有抗抑郁的作用。
上述實(shí)施例僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式之一，不應(yīng)當(dāng)用于限制本發(fā)明的保護(hù)范圍，但凡在本發(fā)明的主體設(shè)計(jì)思想和精神上作出的毫無(wú)實(shí)質(zhì)意義的改動(dòng)或潤(rùn)色，其所解決的技術(shù)問(wèn)題仍然與本發(fā)明一致的，均應(yīng)當(dāng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。