本發(fā)明屬于功能食品技術領域，具體涉及一種用于提高免疫力的功能食品及其制備方法。

背景技術：

免疫力是指機體抵抗外來侵襲，維護體內環(huán)境穩(wěn)定的能力。機體免疫系統(tǒng)的一些特殊細胞，能吞噬和消滅入侵體內的細菌、病毒、體內已衰老死亡或突變的細胞、引起變態(tài)反應的物質，維持體內環(huán)境穩(wěn)定，保持機體健康。當人體免疫功能下降時，極易被細菌、病毒等感染，最直接的表現(xiàn)就是容易生病，機體消耗增加，從而出現(xiàn)體質虛弱、營養(yǎng)不良、疲乏無力、食欲下降、腹瀉、睡眠障礙等問題，而對于腫瘤術后人群來說，免疫功能低下最直接的表現(xiàn)則是傷口難愈合、易感染、腫瘤易復發(fā)等。

機體免疫力低下易引起腹瀉、胃腸功能紊亂及睡眠障礙等問題。而腸道菌群失衡，也會導致免疫力降低，引起多種疾病；良好的睡眠可使體內的兩種淋巴細胞數量明顯上升，也有研究證明，睡眠時人體會產生一種稱為胞壁酸的睡眠因子，促使白血球增多，巨噬細胞活躍，肝臟解毒功能增強，從而將侵入的細菌和病毒消滅，反之，睡眠不足或睡眠質量下降都會引起免疫力的下降。因此，機體的胃腸功能及睡眠質量與免疫功能之間是互相影響的，只有綜合解決免疫力低下的根源、表征及并發(fā)問題(如免疫細胞數量下降、nk細胞殺傷活性降低、胃腸道菌群失調、消化吸收障礙、睡眠障礙、腫瘤易復發(fā)等)，才能真正改善機體的免疫功能。

現(xiàn)有技術中對于提高免疫力的研究較多，主要有植物提取物、中藥材、復合維生素、礦物質等、活性肽、蜂膠等提高免疫力的研究；此外關于提高免疫力的發(fā)明專利也較多，主要包括中藥材、植物提取物、維生素、礦物質等復合制備的中藥制劑、口服液、保健藥品組件、保健品、保健酒、飲料等。目前常見的提高免疫力的保健品種類較多，主要包括有復合維生素類、蛋白粉、蜂蜜制品、靈芝孢子粉、西洋參類、益生菌粉、螺旋藻等以及多種成分混合制成的口服液、片劑、粉劑等產品。

綜上，目前所提供的免疫力功能食品，主要功能多單獨針對免疫力提高，或與抗衰老、抗皺、提高骨密度、抗腫瘤等結合，然而，與睡眠問題和胃腸道問題相結合的研究較少，而且具有增強免疫力、促進消化、潤腸通便、改善睡眠等功能的現(xiàn)有技術多為中藥制劑，原料種類繁多，成分復雜，制備繁瑣，且食用不便。本發(fā)明將提供一種主要功能為提高免疫力的功能食品，同時通過改善睡眠質量、改善胃腸功能的途徑綜合解決免疫力低下相關綜合癥狀，尤其適用老年人及腫瘤術后人群。本發(fā)明功能食品易吸收，效果明顯，無副作用，且食用方便、生產工藝簡單。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種具有提高免疫力作用的功能食品及其制備方法，該功能食品通過增強巨噬細胞吞噬能力、增強nk細胞活性、增加抗體生成數量等提高機體免疫力，同時與改善睡眠質量、改善胃腸功能相結合，綜合解決免疫力低下的系列問題，適用于免疫力低下及亞健康人群，尤其適用于免疫力低下的老年人及腫瘤術后人群，食用方便、易吸收、效果明顯。

為了實現(xiàn)這一目的，本發(fā)明提供一種提高免疫力的功能食品，其特征在于該功能食品包括以下重量配比的原料：魚膠原蛋白肽20-60份、蛹蟲草多肽0.2-10份、人參提取物5-15份、靈芝多糖5-50份、紅棗粉10-60份、菊粉30-150份、水蘇糖5-30份、γ-氨基丁酸1.5-25份、酸棗仁提取物5-30份。

本發(fā)明優(yōu)選的原料重量配比為：魚膠原蛋白肽30-50份、蛹蟲草多肽0.5-8份、人參提取物5-10份、靈芝多糖10-30份、紅棗粉10-50份、菊粉30-80份、水蘇糖8-20份、γ-氨基丁酸2-10份、酸棗仁提取物10-20份。

本發(fā)明最佳的原料重量配比為：魚膠原蛋白肽30份、蛹蟲草多肽0.5份、人參提取物5份、靈芝多糖10份、紅棗粉15份、菊粉30份、水蘇糖10份、γ-氨基丁酸3份、酸棗仁提取物12份。

本發(fā)明中所述的魚膠原蛋白肽和蛹蟲草多肽分子量均為3000da以下；所述的人參提取物為人參皂苷含量0.1％，靈芝多糖的多糖含量為30％；γ-氨基丁酸凈含量為20％；酸棗仁提取物為10:1提取物。

配方分析：

魚膠原蛋白肽：提升巨噬細胞的吞噬能力，提升淋巴球的力量，使其不斷分解，形成血漿細胞，從而產生更多的免疫球蛋白；增強nk細胞的殺傷力，提升機體免疫機能，增強人體抵抗力。此外膠原蛋白肽還具有增加皮膚彈性、抗氧化、延緩衰老、抑制腫瘤細胞增殖轉移等作用。

蛹蟲草多肽：促進骨髓增殖，拮抗造血功能損傷，激活單核巨噬細胞系統(tǒng)，增強其吞噬功能；增強nk細胞活性，從而提高其免疫功能。在微量及低濃度條件下即能發(fā)揮其生理作用。此外，蛹蟲草多肽還具有抗腫瘤的作用，其原理也主要是通過提高機體的免疫功能，促進脾淋巴細胞轉化，激活腹腔巨噬細胞的吞噬活性，顯著提高機體的非特異性免疫能力等。

人參提取物：富含人參皂苷、人參多糖等活性成分。能夠增強細胞免疫功能、增強巨噬細胞吞噬中性紅細胞的能力，促進腹腔巨噬細胞增殖，從而增強非特異性免疫功能，同時還具有修復免疫損傷的作用。

靈芝多糖：活化t淋巴細胞，增強巨噬細胞吞噬功能，促進一氧化氮、白細胞介素-1β(il-1β)、腫瘤壞死因子(tnf-α)等的產生和釋放，在體內外均具有免疫調節(jié)作用。靈芝多糖還可以通過增強宿主免疫功能，激活體內免疫應答，進而抑制腫瘤的發(fā)展過程。

紅棗粉：紅棗粉中的紅棗多糖具有明顯的補體活性和促進淋巴細胞增殖作用，可以提高機體免疫力。此外紅棗粉中的皂類物質還具有調節(jié)代謝、增強免疫、抗炎等作用。

菊粉、水蘇糖：調節(jié)腸道微生物菌群，增強胃腸蠕動，提高腸胃功能，防治便秘，提高免疫力，且兩種益生元有協(xié)同增效作用。

γ-氨基丁酸(gaba)：降低神經元活性，防止神經細胞過熱，能夠結合抗焦慮的腦受體并使之激活，然后與另外一些物質協(xié)同作用，阻止焦慮相關的信息抵達腦指示中樞；能夠增加gaba受體親和力，從而增加其與識別位點結合，抑制gaba的分解，提高其腦中的含量，增加慢波睡眠時間；此外gaba還可提高葡萄糖磷酸酯酶的活性，使腦細胞活動旺盛，促進腦組織的新陳代謝，改善神經機能。

酸棗仁提取物：含有多種皂苷類和黃酮類成分，酸棗仁總皂苷能夠增加總睡眠時間，酸棗仁總黃酮具有鎮(zhèn)靜催眠作用，酸棗仁多糖具有降低自主活動性的作用。

本發(fā)明還提供了該功能食品的制備方法，步驟如下：

a.原料準備及調配：將檢驗合格的原料按照配比進行調配。原料配比為：

魚膠原蛋白肽20-60份、蛹蟲草多肽2-10份、人參提取物5-15份、靈芝多

糖5-50份、紅棗粉5-60份、菊粉20-150份、水蘇糖5-30份、γ-氨基丁

酸1.5-25份、酸棗仁提取物5-30份；

b.混合：將調配好的原料投入v型混合機進行均勻混合，攪拌轉速為

12r/min，混合時間為20min；

c.超微粉碎：將原料混合物采用超微粉碎機進行超微粉碎，使混合原料顆

粒度達到300目以上；

d.干燥、滅菌：將超微粉碎后的原料采用微波干燥滅菌法進行低溫干燥及

滅菌，其中溫度為70℃，時間為4-8min。干燥后使水分含量控制在5％以下；

e.制備：將上述干燥滅菌后的超微細粉制成功能食品。

制備好的超微細粉可進一步制成各種劑型的功能食品，如顆粒、片劑、膠囊等，用于提高人體免疫力。

制備不同劑型功能食品時，可以加入其它輔料，如填充劑、粘合劑、增溶劑、崩解劑、甜味劑、香精、著色劑等。

有益效果

1、本發(fā)明功能食品通過改善胃腸功能(潤腸通便、調節(jié)腸道菌群)，改善睡眠質量以及提高免疫力三方面綜合改善免疫力低下及相關綜合癥狀。

2、本發(fā)明功能食品經動物試驗及人體試食試驗，證實其具有調節(jié)腸道菌群、改善胃腸功能、防治便秘、提高睡眠質量、防治睡眠障礙以及綜合提高免疫力的功能。

3、本發(fā)明功能食品適用于免疫力低下人群，尤其適用于具有頑固便秘、睡眠障礙及免疫力低下的老年人，此外對于腫瘤術后人群，不僅具有提高免疫力作用，還具有防止腫瘤復發(fā)的功能。

4、本發(fā)明功能食品易吸收，效果明顯，食用方便，無副作用，且生產工藝簡單，便于工業(yè)化生產。

具體實施方式

以下實施例為示例性，僅用于解釋本發(fā)明，而不能理解為對本發(fā)明的限制。

實施例1

原料配比：魚膠原蛋白肽30份、蛹蟲草多肽0.5份、人參提取物5份、靈芝多糖10份、紅棗粉15份、菊粉30份、水蘇糖10份、γ-氨基丁酸3份、酸棗仁提取物12份、甜味劑(ak糖：檸檬酸＝20:1)0.5份。

制備方法如下：

原料準備及調配：將檢驗合格的原料按照配比進行調配。

混合：將調配好的原料投入v型混合機進行均勻混合，攪拌轉速為12r/min，混合時間為20min。

超微粉碎：將原料混合物采用超微粉碎機進行超微粉碎，使混合原料顆粒度達到300目以上。

干燥、滅菌：將超微粉碎后的原料采用微波干燥滅菌法進行低溫干燥及滅菌，其中溫度為70℃，時間為4-8min，干燥后使水分含量控制在5％以下。

制備：將上述干燥滅菌后的超微細粉進行分裝，每袋12g，以復合膜分裝。

用法與用量：每日2次，每次12g，以200-300ml溫水沖服。

實施例2

原料配比：魚膠原蛋白肽30份、蛹蟲草多肽0.2份、人參提取物5份、靈芝多糖12份、紅棗粉13份、菊粉30份、水蘇糖10份、γ-氨基丁酸3份、酸棗仁提取物15份、甜味劑(ak糖：檸檬酸＝20:1)0.5份。

制備方法同實施例1。

用法與用量：每日2次，每次12g，以200-300ml溫水沖服。

實施例3

原料配比：魚膠原蛋白肽50份、蛹蟲草多肽1份、靈芝多糖14份、水蘇糖25份、γ-氨基丁酸10份。

制備方法如下：

原料準備及調配：將檢驗合格的原料按照配比進行調配。

混合：將調配好的原料投入v型混合機進行均勻混合，攪拌轉速為12r/min，混合時間為20min。

超微粉碎：將原料混合物采用超微粉碎機進行超微粉碎，使混合原料顆粒度達到300目以上。

干燥、滅菌：將超微粉碎后的原料采用微波干燥滅菌法進行低溫干燥及滅菌，其中溫度為70℃，時間為4-8min，干燥后使水分含量控制在5％以下。

制備膠囊：將上述干燥滅菌后的超微細粉用膠囊自動分裝機裝膠囊(膠囊為市售0號空心膠囊)，每粒膠囊含內容物0.5g，對裝填好的膠囊在拋光機上拋光，并篩選取出不合格產品。

用法與用量：每日兩次，每次2粒，吞服。

實施例4

主要原料配比：魚膠原蛋白肽17份、蛹蟲草多肽5份、靈芝多糖8份、水蘇糖15份、γ-氨基丁酸5份。

輔料：乳糖30份、檸檬酸9份、碳酸氫鈉8.5份、peg60002份、蛋白糖0.5份。

制備方法如下：

原料準備及調配：將主要原料及檸檬酸、碳酸氫鈉進行粉碎后，過40目篩，按照配比進行調配。

混合：將調配好的主要原料投入v型混合機進行均勻混合，攪拌轉速為12r/min，混合時間為20min。混合均勻后等分為兩份。

制粒：將上述等分的兩份混合原料，一份加入檸檬酸，另外一份加入碳酸氫鈉及蛋白糖，兩份均加入2％聚乙烯吡絡烷酮(pvp)乙醇溶液進行濕法制粒，分別制得酸性顆粒和堿性顆粒。將兩種顆粒重新進行混合，混合時間20min，待混合均勻以后，于60℃條件下干燥2h，使水分含量控制在2％-5％，制得泡騰顆粒。

壓片：將上述制得的泡騰顆粒送入壓片機進行壓片，制得泡騰片，每片凈含量4g。

用法與用量：每日2次，每次1片，100-150ml溫水浸泡服用。

實驗例1對免疫力抑制小鼠的免疫調節(jié)試驗

以實施例1所得樣品為受試樣品，取50只6-8周齡清潔級雌性balb/c小鼠，試驗前按標準飲食飼養(yǎng)一周。預飼一周后將50只小鼠隨機分為5組，每組10只，分組情況見表1?？瞻讓φ战M小鼠腹腔注射0.2ml生理鹽水，其它各組小鼠腹腔注射0.2ml環(huán)磷酰胺(80mg/kg)，每天1次，連續(xù)3天，制造小鼠免疫抑制模型。

從第4天開始，進入正式受試期。根據本發(fā)明樣品人體推薦用量為每次12g/60kg體重，每日兩次，折算小鼠劑量，受試樣品低、中、高劑量組的劑量分別為1.0、2.0、6.0g/kg體重，受試樣品每日灌胃兩次，給予28天?？瞻讓φ占澳Ｐ蛯φ战M小鼠每次灌服0.2ml滅菌生理鹽水。

表1.實驗分組

1、小鼠身體指數分析

每周定期稱量小鼠體重，記錄小鼠體重變化。灌胃四周后，頸椎脫臼處死小鼠之后，摘取胸腺和脾臟，將周圍結締組織剝除干凈后稱重，數據見表2。按以下公式計算免疫器官指數:

脾臟指數＝脾臟重量(mg)/體重(g)

胸腺指數＝胸腺重量(mg)/體重(g)

表2小鼠體重變化及胸腺指數、脾指數測定結果

注：“a”:與a空白對照組相比具有顯著差異，p＜0.05。

經統(tǒng)計學分析：空白對照組與其它組別相比，體重變化無顯著差異；模型對照組的胸腺指數、脾指數與空白對照組相比顯著降低(p＜0.05)，說明造模成功。不同劑量組與模型對照組相比無顯著差異。

2、血清溶血素含量分析

在給予受試物的第23天時，每只小鼠腹腔注射0.20ml滅菌生理鹽水配制的2％的綿羊紅細胞懸液進行免疫反應。

在停止給予受試物之后(即第29天)，小鼠眼球取血置于1.5ml離心管中，析出血清并稀釋至合適倍數。取稀釋血清1ml與0.5ml10％的綿羊紅細胞以及1ml10％的豚鼠血清混合，37℃恒溫水浴中保溫30min，冰浴終止反應，2000r/min離心10min。取上清液1ml，加入3ml都氏試劑，搖勻后放置10min，于540nm波長處測吸光度，結果見表3。以生理鹽水代替小鼠血清作為空白對照，取其上清液在比色時調零。

表3血清溶血素實驗結果

注：“a”:與a空白對照組相比具有顯著差異，“b”與b模型對照組相比有顯著差異，p＜0.05。

經統(tǒng)計學分析：b組模型對照組與a空白對照組相比抗體積數顯著下降；c組低劑量組與模型對照組無顯著差異；中劑量(2.00g/kg.d)及高劑量(6.0g/kg.d)組與模型對照組相比有顯著增加。

3、小鼠碳廓清試驗

在給予受試樣品第28天時，按體重向小鼠尾部靜脈注射稀釋的印度墨汁(100ml/kg)，待墨汁注入后2、10min，分別從內眥靜脈叢取血20μl，并立即加入到2ml0.1％na2co3溶液中。用分光光度計測定其在600nm處od值，以na2co3溶液作為空白對照。根據小鼠體重、肝臟及脾臟重計算吞噬指數，結果見表4。吞噬指數a計算公式如下：

表4碳廓清試驗結果

注：“a”:與a空白對照組相比具有顯著差異，“b”與b模型對照組相比有顯著差異，p＜0.05。

由表4可以看出，碳廓清試驗中，空白對照組與其它組別相比，均有顯著差異，中劑量和高劑量組與空白對照組及模型對照組相比均有顯著增加。

4、nk細胞活性測定

在給予受試樣品第28天，頸椎脫臼處死小鼠，常規(guī)制備單細胞懸液(效應細胞)，并用rpmi1640完全培養(yǎng)液調整細胞濃度為2*10⁷個/ml。

取傳代后24hyac-1細胞，用rpmi1640完全培養(yǎng)液調整至濃度為4*10⁵個/ml。取靶細胞和效應細胞各100μl，加入u型96孔培養(yǎng)板中：靶細胞自然釋放孔加靶細胞和培養(yǎng)液各100μl，靶細胞最大釋放孔加靶細胞和1％/np40各100μl，于37℃、5％co2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4小時后以1500r/min離心5min，每孔吸取上清液100μl置平底96孔培養(yǎng)板中，同時加入ldh基質液100μl，根據室溫反應3-10min，每孔加入1mol/l的hcl30μl，在酶標儀490nm處測od值，結果見表5。

按下式計算nk細胞活性：

表5nk細胞活性測定結果

注：“a”:與a空白對照組相比具有顯著差異，“b”與b模型對照組相比有顯著差異，p＜0.05。

由表5可以看出，模型對照組b與空白對照組a相比，nk細胞活性均有顯著差異，三種劑量組與模型對照組相比較，均有顯著提高。

結論：由動物實驗得出，中劑量組及高劑量組血清溶血素實驗、碳廓清試驗、nk細胞殺傷活性實驗三項均呈陽性，根據保健食品檢測與評價技術規(guī)范，本發(fā)明樣品具有增強免疫力的功能。

實驗例2改善睡眠質量動物試驗

以實施例1所得樣品為受試樣品，取40只6-8周齡清潔級雌性balb/c小鼠，試驗前按標準飲食飼養(yǎng)一周。預飼一周后將40只小鼠隨機分為4組，每組10只。根據本發(fā)明樣品人體推薦用量為每次12g/60kg體重，每日兩次，本實驗劑量設計分為高、中、低三種水平劑量組，分別為1.0、2.0、6.0g/kg體重，受試樣品每日灌胃兩次，給予28天。另設空白對照組。

將2.0g、4.0g、12.0g受試樣品(實施例1)分別加滅菌生理鹽水至20ml，即為不同劑量的供試液。空白對照小鼠每次灌服0.2ml滅菌生理鹽水。試驗在24-25℃安靜環(huán)境下進行。

1、每周定期稱量小鼠體重，記錄小鼠體重變化。

2、直接睡眠實驗

小鼠連續(xù)給樣28天，觀察受試組及對照組小鼠是否出現(xiàn)睡眠現(xiàn)象。睡眠以翻正反射消失為指標。當小鼠置于背臥位時，能立即翻正身位。如超過30-60秒不能翻正者，即認為翻正反射消失，進入睡眠。翻正反射恢復即為動物覺醒，翻正反射消失至恢復這段時間為動物睡眠時間，記錄空白對照組與受試樣品組入睡動物數及睡眠時間，結果見表6。

表6小鼠體重變化及直接睡眠觀察結果

不同劑量組的小鼠體重變化與對照組相比，無顯著差異，入睡動物數及入睡時間均為0，與對照組無顯著差異，表明受試物對于小鼠無直接睡眠作用。

3、延長戊巴比妥鈉催眠時間實驗

小鼠連續(xù)給樣28天，末次灌胃15min后，腹腔注射戊巴比妥鈉溶液(42mg/kg)，注射量為0.2ml/20g，以翻正反射消失為指標，觀察受試樣品能否延長戊巴比妥鈉睡眠時間，結果見表7。

表7受試樣對延長戊巴比妥鈉催眠時間的影響

注：“a”：與空白對照組相比較有顯著差異，p＜0.05。

由表7看出，中劑量和高劑量組與對照組相比，睡眠時間均顯著延長，表明受試樣有延長巴比妥鈉誘導睡眠時間的作用。

4、戊巴比妥鈉閾下劑量催眠實驗

小鼠連續(xù)給樣28天，末次灌胃15min后，腹腔注射戊巴比妥鈉最大閾下催眠劑量(24mg/kg)，注射量為0.2ml/20g，記錄30min入睡動物數(翻正反射消失達1min以上者)，結果見表8。

表8戊巴比妥鈉閾下劑量催眠實驗結果

注：“a”：與空白對照組相比較有顯著差異，p＜0.05。

由表8可以看出，中劑量及高劑量組均能增加小鼠的睡眠發(fā)生率。

5、巴比妥鈉睡眠潛伏期實驗

小鼠連續(xù)給樣28天，末次灌胃15min后，腹腔注射戊巴比妥鈉(260mg/kg)，注射量為0.2ml/20g，以翻正反射消失為指標，觀察受試樣品對巴比妥鈉睡眠潛伏期的影響，結果見表9。

表9戊巴比妥鈉睡眠潛伏期實驗結果

注：“a”：與空白對照組相比較有顯著差異，p＜0.05。

由表9可看出，高劑量組小鼠的睡眠潛伏期與空白對照組相比，顯著縮短，其它劑量組與對照組無顯著差異。

結論：受試樣品所有劑量組對于小鼠無直接催眠作用，中劑量組和高劑量組對于延長戊巴比妥鈉睡眠時間、戊巴比妥鈉閾下劑量催眠實驗兩項均呈陽性，高劑量組對于巴比妥鈉睡眠潛伏期實驗也呈現(xiàn)陽性，根據保健食品檢測與評價技術規(guī)范，本發(fā)明樣品具有改善睡眠質量的功能。

實驗例3改善胃腸功能(潤腸通便)人體試食試驗

選取100例患有不同程度便秘的志愿者，其中男性42人，女性58人，年齡分布25-70歲，其中25-40歲占15％，40-50歲占20％，50-70歲占65％。試食品為實施例1中制備方式所得粉劑功能食品，每日食用2次，每次1袋/12g，以200-300ml溫水沖服。食用周期為30天。服用后效果統(tǒng)計見表10：

表10人群試食效果人數統(tǒng)計

效果評定標準：

無效：癥狀未見任何改善。

好轉：癥狀減輕，排便逐漸規(guī)律，糞便性狀得到改善，氣色好轉。

顯著：癥狀顯著改善，每日排便，且糞便性狀明顯改善，氣色明顯改變。

結果表明，100例便秘志愿者服用本發(fā)明1個月后，83％的患者得到顯著改善，17％的患者情況有所好轉，無效率為0。有充足證據可表明，本發(fā)明所提供的功能食品，可顯著改善人體胃腸功能(潤腸通便)。