微波提取容器中，按按花生殼粉的重量:水的體積=1:4 (g/ml)的比例加入水，調(diào)節(jié)pH值至8.5，加入酶活為12000U/mg堿性纖維素酶和酶活為6000 U/mg酯酶混合而成的復配酶(堿性纖維素酶旨酶=3:2)，加入量為2500U/ml混合液，在微波功率600 W，32 °C條件下，微波輔助酶水解15 min，得到酶解混合液；按酶解混合液體積:乙醇體積=3:1 (ml/ml)比例在酶解混合液中加入乙醇，在微波功率800W，90 °C條件下，微波輔助醇水提取10 min，得到提取液；在真空度0.1 Mpa條件下，真空抽濾提取液，得到抽濾液，采用截留分子量為5 kDa的聚砜中空纖維超濾膜，以0.25 MPa壓力，進料液流速0.4 m/s，保留透過液，超濾濃縮液經(jīng)冷凍干燥得到花生殼黃酮粉。該條件下的黃酮提取率為4.89% ;濃度為10 mg/mL的花生殼總黃酮對自由基.0H的清除能力為90.91%，對DPPH.自由基的清除能力為94.33%。
[0015]實施例3
花生殼經(jīng)清洗，烘干，粉碎；花生殼粉置于微波提取容器中，按花生殼粉的重量:水的體積=1:3 (g/ml)的比例加入水，調(diào)節(jié)pH值至10.0，加入酶活為12000U/mg堿性纖維素酶和酶活為6000 U/mg酯酶混合而成的復配酶(堿性纖維素酶:酯酶=3:2)，加入量為3000 U/ml混合液，在微波功率400 W，40°C條件下，微波輔助酶水解16min，得到酶解混合液；按酶解混合液體積:乙醇體積=4:1 (ml/ml)比例在酶解混合液中加入乙醇，在微波功率lOOOw，80°C條件下，微波輔助醇水提取15min，得到提取液；在真空度0.1Mpa條件下，真空抽濾提取液，得到抽濾液，采用截留分子量為5 kDa的聚砜中空纖維超濾膜，以0.2MPa壓力，進料液流速0.4 m/s，保留透過液，超濾濃縮液經(jīng)冷凍干燥得到花生殼黃酮粉。該實施例條件下的黃酮提取率為5.36% ;濃度為10 mg/mL的花生殼總黃酮對自由基.0H的清除能力為
92.99%，對DPPH.自由基的清除能力為97.87%。
[0016]實施例4
花生殼經(jīng)清洗，烘干，粉碎；花生殼粉置于微波提取容器中，按花生殼粉的重量:水的體積=1:4 (g/ml)的比例加入水，調(diào)節(jié)pH值至9.0，加入酶活為12000U/mg堿性纖維素酶和酶活為6000 U/mg酯酶混合而成的復配酶(堿性纖維素酶:酯酶=3:2)，加入量為2000 U/ml混合液，在微波功率500 w，30°C條件下，微波輔助酶水解10 min，得到酶解混合液；按酶解混合液體積:乙醇體積=1:1 (ml/ml)比例在酶解混合液中加入乙醇，在微波功率400w，100°C條件下，微波輔助醇水提取5min，得到提取液；在真空度0.1 Mpa條件下，真空抽濾提取液，得到抽濾液，采用截留分子量為5 kDa的聚砜中空纖維超濾膜，以0.3 MPa壓力，進料液流速0.4 m/s，保留透過液，超濾濃縮液經(jīng)冷凍干燥得到花生殼黃酮粉。該實施例條件下的黃酮提取率為4.97% ;濃度為10 mg/mL的花生殼總黃酮對自由基.0H的清除能力為90.17%，對DPPH.自由基的清除能力為95.32%。
[0017]以上所述，僅為本發(fā)明的【具體實施方式】，并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到變化或替換，都應涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種水酶法輔助微波醇水提取花生殼黃酮類物質(zhì)的方法，包括以下步驟: (1)花生殼清洗，烘干，粉碎，加入水，調(diào)節(jié)PH值，加入纖維素酶與酯酶的復配酶，微波輔助酶解； (2)酶解混合液中加入乙醇，微波輔助提??； (3)真空抽濾，超濾膜分離濃縮提取液，冷凍干燥，得到有抗氧化作用的花生殼黃酮粉。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水酶法輔助微波醇水提取花生殼黃酮類物質(zhì)的方法，其特征在于，步驟(I)所述的粉碎的花生殼粉的重量與水的體積比為1:2 (g/ml) -1:4 (g/ml)，pH值調(diào)節(jié)至7.0-10.0，加入酶活為12000U/mg堿性纖維素酶和酶活為6000 U/mg酯酶混合而成的復配酶，堿性纖維素酶:酯酶=3:2，復配酶的加入量為2000-3000 U/ml混合液，微波輔助酶解的條件為溫度30-40°C，微波功率400-600?，時間10_16min。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水酶法輔助微波醇水提取花生殼黃酮類物質(zhì)的方法，其特征在于，步驟(2)所述的酶解混合液體積與乙醇體積比為4:1 (ml/ml)-1:1 (ml/ml)，微波輔助提取的條件為溫度80-100°C，微波功率300-1000w，時間5_15 min。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水酶法輔助微波醇水提取花生殼黃酮類物質(zhì)的方法，其特征在于，步驟(3)所述的真空抽濾的真空度為0.1 MPa，超濾膜分離濃縮條件為截留分子量為5 kDa的聚砜中空纖維超濾膜，以0.2-0.3 MPa壓力，進料液流速0.4 m/s，超濾濃縮液經(jīng)冷凍干燥得到花生殼黃酮粉。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種水酶法輔助微波醇水提取花生殼黃酮類物質(zhì)的方法，包括以下步驟：花生殼清洗，烘干，粉碎，加入水，調(diào)節(jié)pH值，加入復配酶，微波輔助酶解；酶解混合液中加入乙醇，微波輔助提??；真空抽濾，超濾膜分離濃縮，冷凍干燥，得到具有抗氧化作用的花生殼黃酮粉。本發(fā)明的方法與現(xiàn)有的醇水提法區(qū)別在于本發(fā)明首先利用酶解的方法去除黃酮類物質(zhì)與細胞壁的交聯(lián)或吸附作用，利于后續(xù)利用微波輔助醇水溶劑對黃酮類物質(zhì)的充分萃取，并利用超濾膜分離濃縮及冷凍干燥技術(shù)獲得高抗氧化活性的花生殼黃酮粉。本發(fā)明工藝簡單，縮短了提取時間，提高了提取率，抗氧化作用顯著，節(jié)能環(huán)保，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
【IPC分類】A61K36/48, A23L1/30, A23L1/36
【公開號】CN104886595
【申請?zhí)枴緾N201510327304
【發(fā)明人】齊宏濤
【申請人】青島博之源生物技術(shù)有限公司
【公開日】2015年9月9日
【申請日】2015年6月15日